Anti-CCP mérése során szerzett tapasztalataink Geider Viola,Piros Alfrédn dné Baranya Megyei KórhK rház z Klinikai és Mikrobiológiai Laboratórium rium MOLSZE Kongresszus Pécs 2009
Bevezetı A rheumatoid arthritis (RA) korai felismerése se döntd ntı jelentıss sségő a betegség g prognózisa szempontjából. Korábban a reumatoid faktort (RF),, ma az anti- citrullinált lt peptideket tekintjük k a betegség g legjobb laboratóriumi riumi indikátorainak. Míg g a citrullinált lt fehérj rjék k számos gyulladásos betegségben gben megjelenhetnek, az anti-ccp (anti- ciklikus citrullinált lt peptid) antitestek szinte kizárólag a rheumatoid arthritisben mutathatók k ki. Szérumszintje összefüggést mutat a betegség aktivitásával, val, és s rendkívül l nagy specifitású a rheumatoid arthritisre.
Tartalom Rheumatoid arthritis (RA) Diagnosztika Anti-CCP Módszer, teszt Eredmények Következtetések
A rheumatoid arthritis Sokizületi gyulladás Izület nehéz mozgathatóságával, fájdalommal járj Jellemzıen en a felnıttkor (35-50) 50) megbetegedése, de van fiatalkori is Népesség g kb.1 %-t% érinti Nıknél l 2-32 3 x gyakoribb
Hét t kritérium rium (1987) a RA diagnosztikájában (klinikum, laboratórium, képalkotó) Legalább 3 izület érintettsége Szimmetrikus izületi érintettség Kézizületi érintettség Szubkután (reumás) csomó RF pozitivitás Rtg: malignitás és/vagy sávos s porózis Reggeli izületi merevség g >1 óra
Laboratóriumi diagnosztika Antitestek: Rheumatoid faktor (RF): a 7 RA kritérium egyike Anti-CCP Gyulladásos aktivitást jelzı markerek: We, CRP Vérkép: leukocytosis, thrombocytosis normokróm krónikus vashiányos anaemia se Fe: extrém, ferritin:, transzferrin-szaturáció:
Anti-ciklikus ciklikus-citrullináltlt peptid (anti-ccp) Kémiailag: citrullin tartalmú peptidek ellen képzıdı antitestek. Ide tartozó antitestek (szinonimák): -Anti-Sa: a vimentin citrullinált formája -anti-fillaggrin antitestek (AFA) -anti-perinukleáris faktor (APF) -anti-keratin (AKA) -Anti-CCP
Citrullin keletkezése Argininból jön n létre l PAD (peptidil( peptidil-arginin- deimináz) ) enzim segíts tségével Egy nitrogén n tartalmú csoport leválásával val CP=citrullin tartalmú lineáris peptidek CCP=CP ciklikus változása
Pathomechanizmus
Módszer: AxSYM Anti-CCP Kétlépéses, chemiluminescent microparticle immunoassay (CMIA) IgG típusú,, ciklikus citrullinált lt peptid ellenes auto-at kimutatása Szemikvantitatív teszt Standard (6 pontos) kalibráci ció Teszt dinamikus range: : 0,5-200 U/mL ml,, automata higítási módban: 2000 u/ml Javasolt cutoff: : 5 U/mL Analitikai szenzitivitás: s: 1U/mL
Páciens minták Egy év v távlatt vlatában, reumatológiai szakrendeléseken seken megjelent betegek mintáit it vizsgáltuk A betegek reumás s panaszokkal fordultak orvoshoz, és a szokványos orvosi ellátásban részesr szesültek A páciensek p többst bbségénél l 3-53 5 mintavétel tel is törtt rtént a megfigyelés s periódus dusában Mintatípus: szérum, feldolgozásig -20 o C-on tárolvat
Mérések 63 beteg mintáib iból összesen 151 mérést m végeztünk 14 férfi f és s 49 nın Férfiak 33-78 évesek Nık k 18-77 évesek A betegek harmadánál l ismételt mintavétel tel történt
Teszt precizitás s I. (Irodalmi adatok) 5 U/mL (cutoff) értékő kalibrátor adatai (n=80) intra-run CV% = 6,9 total CV% = 9,3 Pozitív v kontroll (Mean( Mean: : 25,6 U/mL ml) ) n=80 intra-run CV% = 6,6 total CV% = 8,3 Magas minta (Mean( Mean: : 149,7 u/ml) n=80 intra-run CV% = 7,1 total CV% = 8,5
Teszt precizitás (saját t adatok) Negatív v kontroll ( 3,0 U/mL ml) n = 26 Min: 0,0 Max: 0,4 Mean: 0,2 SD: 0,1 Pozitív v kontroll (14,0 34,0 U/mL ml, Mean: : 24,0) n = 26 Min: 21,1 Max: 25,5 Mean: 23,1 SD: 1,2 CV% = 5,19
Eredmények Cutoff érték k alatt: 26 beteg Cutoff érték k felett: 36 beteg Cutoff érték körül :: 1 beteg Mérési tartományon kívül k l (higított minták): 13 beteg Változatlan értékek: 10 beteg (többs bbségük k 5 U/mL alatt) Csökken kkenı értékek: 1 beteg Növekvı értékek: 5 beteg Változó értékek: 10 beteg (zömmel 200 U/mL feletti tartományban higított minták!) Két t fiatal nıbeteg n (18 és s 21 éves) 3-33 3 mintájában jelentısen emelkedı értékeket mértm rtünk
Következtetések A 2. generáci ciós s ABBOTT anti-ccp teszt megbízhat zható, pontos, jól j l reprodukálhat lható,, kiváló QC eredményekkel Preanalitika: : szokásos sos mintakezelési eljárás Higított minták értékelésénél l figyelembe kell venni, hogy egyes minták k nem hígulnak h lineárisan az autoantitestek élettani-kémiai tulajdonságainak heterogenitása következtk vetkeztében. Általában az immunoassayknél kényes kérdk rdés s a mintahígítás!
A teszt diagnosztikai jelentısége A 2. generációs anti-ccp módszereket tartják jelenleg a legspecifikusabb tesztnek a korai RA kimutatására Specificitásuk 95-99% között van Szenzitivitásuk a korai RA-ban 60%, a már diagnosztizált RA-ban 77% Egyes szerzık szerint az anti-ccp kimutatható évekkel az RA klinikai manifesztációja elıtt (magas prediktiv érték) Anti-CCP szint enyhe emelkedése egyéb klinikai jel nélkül nem bizonyitja az RA-t! Nemzetközi standard még nem áll rendelkezésre, ezért az eredmények interpretálása, más módszerekkel történı összevetése kellı óvatossággal történhet
Köszönöm m a figyelmet!