Az ophthalmopathia autoimmun kórfolyamatára utaló tényezôk Bizonyított: A celluláris és humorális autoimmun folyamatok szerepe.

HTML
DOWNLOAD

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "Az ophthalmopathia autoimmun kórfolyamatára utaló tényezôk Bizonyított: A celluláris és humorális autoimmun folyamatok szerepe."

Katalin Mezei
9 évvel ezelőtt
Látták:

1 Az ophthalmopathia autoimmun kórfolyamatára utaló tényezôk Bizonyított: A celluláris és humorális autoimmun folyamatok szerepe. szemizom, retrobulbaris kötôszövet, könnymirigy elleni autoantitestek exophthalmogen immunglobulinok (pl.fibroblast stimuláló antitestek) thyreoglobulinnal és az acetylcholin- esterázzal keresztreagáló antitestek citotoxikus reakciók (ADCC, direkt) Kérdéses: A specifikus autoantigén kimutatása.

szemizom, retrobulbaris kötôszövet, könnymirigy elleni autoantitestek exophthalmogen immunglobulinok (pl.

2 A pajzsmirigy és az ophthalmopathia társulását alátámasztó tényezôk Kimutatott:az az anatómiai kapcsolat (retrograd nyirokáramlás) szerepe. Kérdéses: TSH, exophthalmogen TSH fragmentek jelentôsége TSH receptor struktúra a szemizom membránon közös antigén epitópok elôfordulása

3 Célkitûzések Az antitestválasz(ok) melyik, molekulasúly szerint pontosabban meghatározható antigén fehérje- rész(ek) ellen irányulnak? Kimutatható-e csak Graves-ophthalmopathiára jellemzô specifikus szemizom elleni autoantitest? Milyen a kapcsolat a szemizom elleni autoantitestek elôfordulása és az ophthalmopathia fennállása, szemtünetek aktivitása, a protrusio elôfordulása és a terápia között? Kimutathatók-e közös receptor struktúrák (pl. TSH receptor struktúra) ill. azonos antigénrészek a humán pajzsmirigy és a szemizom szövetek között?

Kimutatható-e csak Graves-ophthalmopathiára jellemzô specifikus szemizom elleni autoantitest?

4 Alkalmazott módszerek Antitestek kimutatására Indirekt ELISA meghatározás 125 I-Staphylococcus Protein A immun- adszorpció SDS-PAGE gélelektroforézis és western blotting vizsgálatok TSH receptor struktúrák vizsgálatára Autoradiographia 125 I-hTSH izotóppal Scatchard analizis

SDS-PAGE gélelektroforézis és western blotting vizsgálatok TSH

5 Antigénfrakciók elôállítása Humán pajzsmirigy szemizom vázizom homogenizálása szétválasztó centrifugálások I Frakció = üledék II Frakció = üledék 3 g 1 g III Frakció = üledék 1 g IV Frakció= szupernatans (citoszol)

centrifugálások I Frakció = üledék II Frakció =

6 A 87 Graves-kóros beteg fôbb klinikai paraméterei Klinikai paraméterek Esetszám Nemek megoszlása nô 7 férfi 17 Átlagéletkor 44 ± 14 év Ophthalmopathia társulása 6 fennállási ideje 4.5 ± 3.8 év aktív gyulladásos szemtünetek 27 osztályozása (NOSPECS) II. stádium 7 III.stádium 29 IV. stádium 21 V. stádium 2 VI. stádium 1 Pajzsmirigy funkció hyperthyreoid 47 euthyreoid 35 hypothyreoid 5 TSH receptor elleni antitest 46 elôfordulása (TRAK > 14 IU/ml)

8 év aktív gyulladásos szemtünetek 27 osztályozása (NOSPECS) II. stádium 7 III.stádium 29 IV. stádium 21 V.

7 antitestpozitív betegszám Szemizom citoszol elleni antitestek és a terápia kapcsolata a 6 Graves-ophthalmopathiás betegnél Terápia Corticosteroid, Imuran,Cyclosporin-A N=15 N=45 N=35 N=25 nem igen nem igen terápiát kapott Radiojód Antitestek Series IgM 1 Series IgA 2 Series IgG 3

Terápia Corticosteroid, Imuran,Cyclosporin-A N=15 N=45 N=35 N=25 nem

8 Szemizom citoszol frakció elleni IgG, IgA és IgM típusú antitestek elôfordulása a 87 Graves-kóros betegnél antitestpozitív beteszám * P<.1 ** P<.2 * ** * * *,** IgG IgA IgM antitestek Betegcsoportok Kontroll (IgG N=25, Kontroll IgA N=17,IgM N=2) Graves-kór(-) ophthalmopathia N=27 Graves-kór (-ophth.path) Graves-ophthalmopathia Graves-ophthalmopathia N=6

2 * ** * * *,** IgG IgA IgM antitestek Betegcsoportok Kontroll (IgG N=25, Kontroll IgA

9 Pajzsmirigy, szemizom és vázizom citoszol elleni IgA típusú antitestek 87 Graves-kóros betegnél antitestpozitív betegszám pajzsmirigy szemizom vázizom antigének Betegcsoportok Kontroll N=17 Graves-kór(-)ophthalmopathia N=27 Graves-ophthalmopathia N=6 Series 1 Series 2 Series 3

pajzsmirigy szemizom vázizom antigének Betegcsoportok Kontroll N=17

10 Triton X 1-al szolubilizált szemizom citoszol elleni antitestek kimutathatósága Graves-ophthalmopathiában antitestpozitív betegszám IgG antitestek IgA Betegcsoportok Kontroll N=21 Series 1 Graves-ophthalmopathia N=25 Series 2

antitestpozitív betegszám 6 4 2 IgG antitestek IgA

11 Szemizom II és IV frakciók elleni IgG típusú autoantitestek Graves-ophthalmopathiában és progresszív szisztémás sclerosisban antitestpozitív betegszám II IV szemizom frakciók Betegcsoportok Progresszív sziszté- más sclerosis N=43 Graves-ophthalmopathia N=5 Series 1 Series 2

antitestpozitív betegszám 2 15 1 5 II IV szemizom frakciók

12 Szemizom II és IV frakciók elleni IgG típusú autoantitestek Graves-kórban antitestpozitív betegszám II IV szemizom frakciók Betegcsoportok Kontroll Kontroll N=25 Graves-kór(-)ophthalmopathia N=25 Graves-kór (-ophth.path) Graves-ophthalmopathia Graves-ophthalmo-pat hia N=5

frakciók Betegcsoportok Kontroll Kontroll N=25

13 Szemizom citoszol elleni antitestek és a TSH receptor elleni antitestek kapcsolata 6 Graves-ophthalmopathiás betegnél antitestpozitív betegszám N=32 N=28 * P<.5 * * TRAK + TRAK - TSH receptor elleni antitestek Antitestek Series IgM IgM 1 Series IgA 2 Series IgG 3

antitestpozitív betegszám 2 15 1 5 N=32 N=28 * P<.

14 Szemizom citoszol elleni antitestek és a pajzsmirigy funkció kapcsolata 6 Graves-ophthalmopathiás betegnél antitestpozitív betegszám N=22 N=33 N= Antitestek Series IgM 1 8 Series IgA 2 Series IgG 3 4 Hyperthyreosis Euthyreosis Hypothyreosis pajzsmirigy funkció

betegszám N=22 N=33 N=5 16 12 Antitestek Series IgM 1 8 Series IgA

15 Szemizom citoszol elleni antitestek és az ophthalmopathia fennállási idejének kapcsolata antitestpozitív betegszám N=13 N=18 N= fennállási idô (év) Antitestek Series IgM 1 Series IgA 2 Series IgG 3

antitestpozitív betegszám 12 8 4 N=13 N=18 N=18-1 1.

16 A protrusio és a szemizom citoszol elleni antitestek kapcsolata a 6 Graves-ophthalmopathiás betegnél antitestpozitív betegszám *N=29 N=21 * P<.2 * III.stádium IV.stádium az ophthalmopathia osztályozása Antitestek Series IgM 1 Series IgA 2 Series IgG 3

15 1 5 *N=29 N=21 * P<.2 * III.stádium IV.

17 Új tudományos eredmények A humán szemizom elleni IgG, IgA és IgM típusú antitestek elôfordulása nem specifikus a Graves-ophthalmopathiára. Kimutathatósága függ az antigén elôállí- tási módjától és különbség észlelhetô a vázizom elleni antitestekhez képest.

18 Új tudományos eredmények 2. Az IgG, IgA és IgM típusú szemizom citoszol elleni antitestek megjelenése eltérô diagnosztikai jelentôséggel bír: a. IgG : a gyulladásos szemtünetekkel adott szoros összefüggést (P<.1). b. IgA : kulcsszerepe lehet a Graves-kórban a pajzsmirigy betegség és az ophthalmopathia társulásában (P<.1, azonos molekulasúly tartományokban kb.8, kda). c. IgM : elôfordulása megelôzheti az ophthalmopathia megjelenését.

bír: a. IgG : a gyulladásos szemtünetekkel adott szoros összefüggést (P<.1). b.

19 Új tudományos eredmények 3. TSH receptor struktúra mutatható ki a szemizom membrán és citoszol frakciókban ( 66 kda-nál, a TSH receptor alfa-alegységének meg- felelôen 125 I-hTSH kötôdés gátlása ).

20 A 87 Graves-kóros beteg esetében alkalmazott terápia Gyógyszeres Pajzsmirigy mûtét Radiojód kezelés Methothyrin 61 Corticosteroidok 59 Lithium carbonat 36 Imuran 8 Cyclosporin-A 2 Parlodel 6 Thyranon szubsztitució

Methothyrin 61 Corticosteroidok 59 Lithium carbonat 36

21 Szemizom membrán ( frakció I ) elleni antitestek kimutatása 125-I-Staphylococcus Protein A módszerrel és a szemtünetek aktivitása Graves-ophthalmopathiában SMEA index* - Aktivitással Aktivitás nélkül 6o P< o 3 o o Series 3 o o N=21 o N=19 2 o o 1 o o o o o o o o oooo o oo oo betegcsoportok * SMEA index:(c.p.m. beteg-vak)/(c.p.m.kontroll-vak), antitestpozitivítás,ha értéke > 1.17 (kontroll x+2sd)

22 Humán szemizom és pajzsmirigy citoszol elleni IgA típusú antitestek közötti korreláció a 6 Graves-ophthalmopathiás betegnél pajzsmirigy citoszol elleni antitestek Y= *X r=.7333 P<.1,6 1 1,4 1,8 2,2 2,6 Szemizom citoszol elleni antitestek

23 TSH receptor struktúra Scatchard analizise humán szemizom citoszol frakció esetében kötött / szabad I aktivitás 125 1,8,6,4,2 Szemizom citoszol TSH x pmol Jelzett TSH kötött I aktivitása Pajzsmirigy citoszol - 3

24 TSH receptor struktúra Scatchard analizis eredményei humán szemizom és pajzsmirigy citoszol frakciók esetében Humán szemizom citoszol frakció - 3 A kötôdés szenzitivítása : x 1 pmol TSH ( 2.28 miu / ml ) 99-1 Affinitási konstans : 146 x 1 M Humán pajzsmirigy citoszol frakció - 3 A kötôdés szenzitivítása : 1.73 x 1 pmol TSH (.9 miu / ml ) 99-1 Affinitási konstans : 11 x 1 M

Hasonló dokumentumok

Újabb ismeretek a Graves-ophthalmopathia kórisméjében

Újabb ismeretek a Graves-ophthalmopathia kórisméjében Dr. Molnár Ildikó 2004 Tézisek Az utóbbi 11 évben végzett tudományos munkám új eredményei 1. Graves-kórhoz társult infiltratív ophthalmopathia kialakulásában