A B sejtek érése, aktivációja, az immunglobulin osztályok kialakulása Uher Ferenc, PhD, DSc Délpesti Centrumkórház Országos Hematológiai és Infektológiai Intézet, Budapest
Az immunglobulinok szerkezete Fab V L V H C L C H 1 C H 1
Az egér immunglobulin géncsaládok szerveződése Hlánc lokusz (12. kromoszóma) (14) Cµ1 Cµ2 Cµ3 Cµ4 TM TM 5' L1 VH1 (n = 250 1000) Ln VHn DH (1 12) JH Cµ C // //? C 3 C 1 C 2b C 2a C C 3' lánc lokusz (6. kromoszóma) (2) L1 V 1 Ln V n J C // // (n = 250) * lánc lokusz (16. kromoszóma) (22) L2 V 2 J 2 C 2 L1 V 1 J 3 C 3 J 1 C 1 // * * // //
A nehézlánc génátrendeződés, transzkripció és transzláció Csíravonal DNS L1 V1 Ln Vn D1 12 J14 Cµ C // 5' // 3' L1 V1 Ln Vn D1 D2 J1 J24 Cµ C 5' // // 3' D J rekombináció Átrendeződött DNS Primér mrns Érett mrns Polipeptidlánc L1 V1 D2 J1 J24 Cµ C 5' 3' 5' L1 V1 D2 J1 J24 Cµ C L1 V1 D2 J1 Cµ L V D J C AAA V D J rekombináció 3' Transzkripció RNS feldolgozás Transzláció Érett µlánc fehérje V D J C Feldolgozás, glikoziláció
Az ellenanyagrepertoár kialakulása Az ellenanyag diverzitást fokozó mechanizmusok Véletlenszerű génátrendeződések (szabad VDJ rekombináció) Szabad láncrekombináció (H + L láncok) A harmadik hipervariábilis régióban: N nukleotidok Deléciók Dszegmensek fúziója Dgén inverzió Génkonverzió Szomatikus mutációk A pszeudokönnyűlánc feltételezett szerkezete Azellenanyag diverzitást korlátozó mechanizmusok COOH NH 2 NH 2 5 VpreB Korlátozott méretű Vgén készlet Preferenciális génátrendeződések Nem véletlenszerű Vgén asszociációk Klónkiesés (deléció) Receptor szerkesztés (editing) COOH
A B sejtek fejlődése SEJT GÉNÁTRENDEZŐDÉS sig PROB PREBI H G H DJ L G L G PREBII + H VDJ L G "sigm" ÉRETLEN B + H VDJ L VJ sigm ÉRETT B sigm, sigd
Pozitív és negatív szelekció a fejlődő B sejt repertoárban Elkötelezettség és differenciálódás Pozitív és negatív szelekció Interleukinek és stroma sejtek Saját struktúrák Nem saját struktúrák "sigm" sigm sigm sigd ProB PreBI PreBII Éretlen B Érett B Csontvelő Nyirokszervek
A fejlődő B sejt repertoárban érvényesülő pozitív és negatív szelekció a ligand (antigén)sűrűség, Elkötelezettség és illetve az antigénfelismerő receptor(ok) differenciálódás affinitásának Interleukinek függvényében stroma és sejtek Pozitív és negatív szelekció Saját struktúrák Nem saját struktúrák Az antigénfelismerő receptor (sig) affinitása ProB PreBI PreBII Pozitív szelekció Negatív szelekció Szelekción kívül Csontvelő Ligand (antigén) sűrűség "sigm" sigm sigm sigd Éretlen B Érett B Nyirokszervek
Human Bcell differentiation subsets in the bone marrow (BM), peripheral blood (PB), secondary lymphoid tissues and mucosaassociated lymphoid tissues (MALT) classified according to their phenotypic characteristics and IgH isotype
Summary of the cellular and metabolic properties associated with antibody secreting cell (ASC) maturation Attributes of na ıve B cells and the three populations of ASCs (plasmablasts, shortlived plasma cells and longlived plasma cells) are shown with indicating a lack of the component/process and +, ++, +++, ++++ indicating the level of expression/activity). Ab, antibody; BM, bone marrow; LP, lamina propria; SLO, secondary lymphoid organ; UPR, unfolded protein response.
A m és láncok koexpressziójának molekuláris mechanizmusa L V D J Cµ AAA µlánc RNS feldolgozás Primér mrns 5' L V D J Cµ C 3' L V D J C AAA RNS feldolgozás lánc
A TI1es és TI2es antigénekkel stimulált B sejtek aktivációja, proliferációja és differenciálódása AKTIVÁLÓDÁS OSZTÓDÁS DIFFERENCIÁLÓDÁS Osztódó Bsejt Nyugvó Bsejt Aktivált Bsejt Differenciálódó Bsejt Plazmasejt Y Y TI1es antigének TI2es antigének IL4 IL5 IL6
A primer és a szekunder humorális immunválasz Ellenanyag titer Primer válasz Szekunder válasz IgG IgM lag Első antigén stimulus Második antigén stimulus Idő
A T H sejtek és az aktivált Bsejtek között kialakuló párbeszéd lényege Bsejt Tsejt Osztódás Osztályváltás CD40 CD40L (CD154) MHC II TCR/CD3 B7 (CD80) CD28 Osztódás IL termelés
A humorális (Tsejt függő) immunválasz Antigén Aktivált Bsejt DC Immunológiai szinapszis II. Bsejt Aktivált T H sejt Immunológiai szinapszis I. Aktivált DC T H sejt Az aktivált T H sejtek osztódása
B sejt Egy immunológiai szinapszis DC A humorális (Tsejt függő) immunválasz CD11a/18 CD40 CD19 CD79b CD79a sigm CD22 CD72 MHC II CD58 CD59 CD80(B71) CD86(B72) Aktivált DC Antigén? Immunológiai szinapszis I. CD54 CD40L CD45 CD6 CD5 CD4 Aktivált Bsejt Immunológiai szinapszis sejt II. CD3/TCR CD2 CD28 CTLA4 T Bsejt Aktivált T H sejt CD20 CD54 CD106 (VCAM) CD43 CD11a/18 (LFA1) T H sejt CD49d/29 Az aktivált T H sejtek (VLA4) osztódása
A centrum germinatívum szerkezete és működése PALS (periarterioláris lymphocyta hüvelyek) Memória B sejtek Y Y Ellenanyagok Köpeny zóna Apikális világos zóna FDC Szelekció Hosszú életű plazmasejtek 25 aktivált Bsejt Bazális világos zóna Apoptózis Primer Primer folliculus folliculus Centrocyták (sig + ) Sötét zóna Centroblastok (sig )
Az osztályváltás molekuláris mechanizmusa Átrendeződött DNS egy IgM termelő sejtben L VDJ Cµ C C Cgének kiesése // Átrendeződött DNS egy IgA termelő sejtben Primér mrns L VDJ C L VDJ C Transzkripció RNS feldolgozás Érett mrns L VDJ C AAA Polipeptidlánc nehézlánc Transzláció
Az osztályváltás szabályozása IL6 IL2 IL4 IL5 IL4 IL2 IL6 IFN IL5 TGFb IL4 IL13 Sm S 3 S 1 S 1 S 2 S 4 S S 2 5' 3' VDJ Cm C C 3 C 1 C 1 C 2 C 4 C C 2
A B1es és B2es B sejtfejlődési vonalak B1 Önfenntartás Foetális máj és csontvelő Érett B1es sejt Természetes ellenanyagok Aktivált Bsejt Memória Bsejt B2 Folyamatos megújulás Csontvelő Éretlen B2es sejt Érett B2es sejt Antigén Rövid életű plazmasejt Extrafollicularis Bsejt válasz Plazmasejt GC Bsejt Hosszú életű plazmasejt Centrum germinatívum reakció
Bsejt szubpopulációk B1a B1b MZ Bsejt Follicularis Bsejt Regulátor Bsejt Gyakoriságuk a lépben 2% <1% 15% >70% Ellenanyagok Affinitás Polispecifikus, autoreaktív, IgM > IgA >> IgG Alacsony Monospecifikus, immun, IgG > IgA >> IgM Magas? V H gén felhasználás N nukleotidok Preferenciális, germline Véletlenszerű IL10 Szomatikus mutációk Markerek CD5 +, CD23 CD5, CD23 CD5, CD23 CD5, CD23 + CD5 +/, CD23 +/ IgM high, IgD low IgM high, IgD low IgM high, IgD low IgM low, IgD high IgM high, IgD low
Regulatory B cells Besides antigen presenting and antibody production, B cells also play a role in immune regulation and tolerance induction through IL10 dependent and independent mechanisms. A variety of Bcell subsets have been documented as regulatory B cells (Bregs), but no inclusive or specific marker has been found. Bregs are usually induced and maintained in response to inflammation, and multiple pathways are involved in different settings. PanBcell depletion is not always beneficial for kidney transplantation. It depends on the timing of this approach.
Phenotypes of human Breg subsets
Through cell contact and antiinflammatory cytokines, including IL10, TGFβ, and IL35, Bregs suppress CD4+ Tcell proliferation, induce Foxp3+ Tregs and Tr1 cells, and suppress Th1/17 differentiation and CD8+ effector T cells
IL10 and TGFβ secreted by Bregs hamper the antigenpresenting function and cytokine secretion of dendritic cells and M1 macrophages, and they possibly induce M2 macrophages. They also negatively regulate neutrophils and NK cells
PDL1 and FasL expressed on the surface of Bregs induce Tcell apoptosis through binding to PD1 and Fas, respectively, together with cytokines IL10 and IL4
A Bsejtek szerepe az autoimmun betegségek patogenezisében Lymphoid neoorganogenezis Antigénbemutatás Immunkomplexek Autoantitest termelés Rheumatoid arthritis Sjögrensyndroma Sclerosis multiplex Systemás lupus erythematosus Rheumatoid arthritis Systemás lupus erythematosus Rheumatoid arthritis Graves betegség Myasthenia gravis Autoimmun haemolyticus anaemia
Emberi immunoglobulin izotípusok funkciója Effektor funkció IgM IgD IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgA IgE Neutralizáció Opszonizáció NKsejtes citotoxicitás Hízósejtek aktivációja Komplement aktiválás + ++++ ++ +++ ++ ++ ++ + ++ ++ ++ ++ ++ + + ++ + + + ++++ Diffúzió a vérből Átjutás a placentán Epitheliális transzport +/ + +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ +++ ++ IgM IgG3 IgG1 IgG4 IgA IgG2
Köszönöm a figyelmet!