(11) Lajstromszám: E (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA

Átírás

1 !HU T2! (19) HU (11) Lajstromszám: E (13) T2 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (21) Magyar ügyszám: E (22) A bejelentés napja: (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 1904 A (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 1904 B (1) Int. Cl.: C07D 471/04 (06.01) A61P /00 (06.01) A61K 31/19 (06.01) (87) A nemzetközi közzétételi adatok: WO PCT/FR 06/00118 () Elsõbbségi adatok: FR (72) Feltalálók: CASELLAS, Pierre, F-390 Montpellier (FR); BOURRIE, Bernard, F Saint Gely du Fesc (FR); PERREAUT, Pierre, F Saint Clement de Riviere (FR); MUNEAUX, Claude, F Les Matelles (FR); JEGHAM, Samir, F Montperrier (FR) (73) Jogosult: Sanofi-Aventis, 7013 Paris (FR) (74) Képviselõ: Kmethy Boglárka, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest (4) Pirido[2,3-d]pirimidinszármazékok, elõállítási eljárásuk és terápiás alkalmazásuk (7) Kivonat A találmány pirido[2,3¹d]pirimidinszármazékokra, elõállítási eljárásukra és gyógyászati alkalmazásukra vonatkozik. Ezek a vegyületek potenciálisan hasznosak a sejtproliferáció zavarainak kezelésére. HU T2 A leírás terjedelme oldal Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 199. évi XXXIII. törvény 84/H. -a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.

2 A találmány pirido[2,3¹d]pirimidinszármazékokra, elõállítási eljárásukra és terápiás alkalmazásukra vonatkozik. A technika állása Pirido[2,3¹d]pirimidinszármazékokat ismertetnek a WO 01/147 és a WO 03/ számú szabadalmi bejelentésekben és az EP B és US számú szabadalmakban. Ezek a vegyületek potenciálisan hasznosak a sejtproliferáció zavarainak kezelésére. A WO 04/08436 dokumentumban nagy (A) általános képletû vegyületeket ismertetnek (A) amelyben R 1 jelentése CO NH amidkötés, nem pedig CO NH CO karbamidkötés. A WO 03/ dokumentumban (B) általános képletû vegyületeket ismertetnek: 1 2 (E) (F) amelyekben Ar és Ar jelentése az alábbi felsorolásból választott aril vagy heteroarilcsoport: fenil, imidazolil, pirrolil, piridil, pirimidil, benzimidazolil, benzotienil, benzofuranil, indolil, pirazinil, tazolil, oxazolil, izoxazolil, furanil, tienil, naftil. A benzotiadiazol csoport nincs megemlítve és utalás sincs rá. A J. Med. Chemistry 01, 44(12), cikkben pirido[2,3¹d]pirimidineket ismertetnek. A benzotiadiazolcsoport nincs megemlítve és utalás sincs rá. A J. Med. Chem. 0, 48(14), cikkben nem pirido[2,3¹d]pirimidineket ismertetnek. Találmány A találmány tárgya egyrészt (I) általános képletnek megfelelõ vegyület: (B) amelyben R B jelentése heteroarilcsoport, de nem benzotiadiazol csoport és R A,R B vagy R C csoportok közül legalább az egyik foszfortartalmú csoportot tartalmaz. A WO 09/70741 dokumentumban egy (C) általános képletû vegyületeket ismertetnek: (C) amelyek nem pirido[2,3¹d]pirimidinek. A WO 01/147 dokumentumban (D) általános képletû vegyületeket ismertetnek: 4 azzal jellemezve, hogy Ar 2 és R 1 jelentése rendre: 2,6- diklór-fenil és terc-butil; vagy 2¹bróm-6-klór-fenil és terc-butil; vagy 2,6-diklór-fenil és etil; vagy 2,6-dibrómfenil és terc-butil; vagy 2,6-dibróm-fenil és etil; vagy 2,6-diklór-fenil és fenil; vagy 3,-dimetoxi-fenil és tercbutil; vagy fenil és terc-butil; vagy 2,6-dimetil-fenil és terc-butil; vagy 2,6-difluor-fenil és terc-butil; vagy 2,6- diklór-fenil és izo-propil. Egy nagyon elõnyös találmány szerinti vegyület a következõ: (I) (D) amelyben R 6 nem arilcsoport és az NR 7 R 8 csoport nem karbamidkötés. Az EP B1 dokumentumban (E) vagy még közelebbrõl (F) általános képletû vegyületeket ismertetnek: 0 (N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-amino)-6¹(2,6-di- klór-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-n ¹(1,1-dimetil-etil)- karbamid) Egy találmány szerinti vegyület lehet: (i) nem királis vagy racém vagy egy sztereoizomerben dúsított vagy egy enantiomerben dúsított formában; (ii) adott esetben só formájában és (iii) adott esetben hidratált vagy szolvatált formában. Az (I) általános képletû vegyületek tartalmazhatnak egy vagy több aszimmetrikus szénato- 2

3 mot. Létezhetnek tehát enantiomerek vagy diasztereomerek formájában. Ezek az enantiomerek, diasztereomerek, valamint ezek keverékei, ideértve a racém keverékeket is, a találmány részét képezik. Az (I) általános képletû vegyületek létezhetnek bázisok vagy savval képzett addíciós sók formájában. Ha az (I) általános képletû vegyületek szabad savfunkciókat tartalmaznak, például karbonsav, szulfonsav, foszforsav funkciókat, akkor ezek a savas funkciók sóvá lehetnek alakítva bázisokkal addíciós sókat képezve. Az ilyen addíciós sók a találmány részét képezik. A savakkal vagy bázisokkal képzett addíciós sókat elõnyösen rendre gyógyászatilag elfogadható savakkal, illetve bázisokkal készítjük, de más savak vagy bázisok sói, amelyek hasznosak például az (I) általános képletû vegyületek tisztítására vagy izolálására, szintén a találmány tárgyát képezik. Az (I) általános képletû vegyületek lehetnek hidrátok vagy szolvátok formájában is, vagyis egy vagy több víz vagy oldószer molekulával társított vagy kombinált formában. Az ilyen hidrátok és szolvátok szintén a találmány részét képezik. A találmány keretében az alábbi definíciókat használjuk: halogénatom: fluor, klór, bróm vagy jód; alkilcsoport: alifás, telített, lineáris vagy elágazó csoport. Példaként megemlíthetjük az alábbi csoportokat: metil, etil, n¹propil, n¹butil, n¹pentil, n¹hexil, n¹heptil, 1¹metil-etil, 1¹metil-propil, 2¹metil-propil, 1,1-dimetil-etil, 1¹metil-butil, 2¹metil-butil, 3¹metil-butil, 1,1-dimetil-propil, 1,2- dimetil-propil, 2,2-dimetil-propil, 1¹metil-pentil, 2¹metil-pentil, 3¹metil-pentil, 4¹metil-pentil, 1,1- dimetil-butil, 1,2-dimetil-butil, 1,3-dimetil-butil, 2,2-dimetil-butil, 2,3-dimetil-butil, 3,3-dimetilbutil, 1,1,2-trimetil-propil, 1,2,2-trimetil-propil, 1¹etil-1-metil-propil, 1¹etil-2-metil-propil, 1¹etilbutil, 2¹etil-butil, 1¹metil-hexil, 2¹metil-hexil, 3¹metil-hexil, 4¹metil-hexil, ¹metil-hexil. 1,1- dimetil-pentil, 1,2-dimetil-pentil, 1,3-dimetilpentil, 1,4-dimetil-pentil, 2,2-dimetil-pentil, 2,3- dimetilpentil, 2,4-dimetil-pentil, 3,3-dimetil-pentil, 3,4-dimetil-pentil, 4,4-dimetil-pentil, 1,1,2-trimetil-butil, 1,1,3-trimetil-butil, 1,2,2-trimetil-butil, 1,2,3-trimetil-butil, 1,3,3-trimetil-butil, 2,2,3- trimetil-butil, 2,3,3-trimetil-butil, 1,1,2,2-tetrametil-propil, 1¹etil-pentil, 2¹etil-pentil, 3¹etil-pentil, 1¹etil- 1¹metil-butil, 1¹etil-2-metil-butil, 1¹etil-3- metil-butil, 2¹etil-1-metil-butil, 2¹etil- 2¹metil-butil, 2¹etil-3-metil-butil, 1¹propil-butil, 1¹(1¹metil-etil)- butil, 1¹(1¹metil-etil), 2¹metil-propil. Az (I) általános képletû vegyületeket egy (II) általános képletû vegyület: (II) amelyben R 1 és Ar 2 jelentése az (I) általános képletnél megadott, és egy (III) képletû amin (III) reakciójával állítjuk elõ. A találmány szerint az (I) általános képletû vegyületeket elõállíthatjuk egy eljárással, amelyre jellemzõ, hogy reagáltatunk: (i) egy (Ilb) általános képletû vegyületet: (IIb) amelyben R jelentése távozó csoport, így például: (a) halogén, különösen Cl vagy Br, vagy (b) alkil- S(O) m ahol m=0, 1, vagy 2; R 11 jelentése NHC(O) NH R 1 ;és (ii) a (III) képletû amint (III) Ha R jelentése halogén vagy alkil-s(o) m ahol m=2, akkor a reakciót oldószerben, elõnyösen poláros oldószerben hajtjuk végre: (i) például tetrahidrofuránban, dimetil-szulfoxidban vagy etanolban, adott esetben nyomnyi mennyiségû sav például sósav jelenlétében; vagy (ii) dimetil-szulfoxidban erõs bázis, például tbuok jelenlétében; szobahõmérséklet és az oldószer visszafolyatása közötti hõmérsékleten. Ha R jelentése alkil-s(o) m ahol m=0 vagy 1, akkor a reakciót a (III) képletû aminnal végrehajthatjuk olvadt állapotban, elõnyösen 0 C körüli hõmérsékleten katalizátor nélkül. Adott esetben a (III) képletû vegyület aminfunkcióját elõzetesen sóvá alakítjuk vagy védjük. A (II) általános képletû vegyületeket a számú európai szabadalomban és az US számú szabadalomban ismertetett módot követve állítjuk elõ, ahogyan azt az alábbi 1. reakcióvázlaton bemutatjuk: 3

4 1. reakcióvázlat mcpba: meta-klórperbenzoesav (II) A találmány szerinti vegyületeket racém formában kapjuk, ezután elõállíthatjuk az optikailag tiszta izomereket a szakember számára ismert elválasztási eljárásokkal, mint például királis szerekkel való sóképzéssel történõ kristályosítással. A találmány szerinti vegyületeket elõállíthatjuk optikailag tiszta formában is, aszimmetrikus vagy sztereospecifikus szintéziseljárások alkalmazásával, királis fázist alkalmazó kromatográfiás technikák alkalmazásával. Egyébként a találmány szerinti termékeket szétválaszthatjuk diasztereomerek képzése, ezek elválasztása, majd a farmakológiailag hasznos diasztereomer enantiomer szempontjából tiszta termékké történõ lebontása útján. Enzimatikus technikákat is alkalmazhatunk. Alkalmazhatjuk az ismert kiegészítõ elválasztási technikákat is. Ezek közé tartoznak az alábbi helyen ismertetettek: Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons, New York (1981). Az alábbi példák bizonyos köztitermékek és találmány szerinti vegyületek elõállítását ismertetik. A példákban az alábbi rövidítéseket használjuk: Boc: terc-butoxi-karbonil BOP: benzotriazol-1-iloxitrisz(dimetil-amino)-foszfónium-hexafluorfoszfát THF: tetrahidrofurán SZH: szobahõmérséklet TFA: trifluor-ecetsav DCM: diklór-metán DMSO: dimetil-szulfoxid DMF: dimetil-formamid MeOH: metanol DCCI: diciklohexil-karbodiimid DIPEA:diizopropil-etil-amin KHSO 4 /K 2 SO 4 : %¹os KHSO 4 /K 2 SO 4 oldat. A proton mágneses magrezonancia (NMR) spektrumokat 0 vagy MHz¹en vettük fel DMSO-d 6 -ban, hacsak másképp nem jelezzük. A DMSO-d 6 jel 2, ppm-nél van, és ez szolgál referenciául. A spektrumok értelmezéséhez az alábbi rövidítéseket használjuk: s: szingulett, d: dublett, t: triplett, m:nem szétváló, mp: multiplett, se: széles szingulett, dd: a dublett dublettje, qd: kvadruplett, qt: kvintuplett. Op: olvadáspont ( C-ban) Büchi B4 berendezéssel mérve 1 C/perc hõmérséklet-grandienssel. MH + : Tömegspektrum. A vegyületeket HPLC UV MS (folyadékkromatográfia UV¹detektálás tömegspektrometria) kapcsolással elemezzük. Az alkalmazott készülék, amelyet az Agilent forgalmaz egy Agilent diódasoros detektorral és egy MSD Quad kvadrupól tömegspektrométerrel felszerelt HP10 kromatográfból áll. Az elemzés körülményei az alábbiak: Oszlop: Symmetry C18 (0 2,1 mm; 3, m) A Eluens: H 2 O + 0,00% TFA, ph=3,1; B Eluens: CH 3 CN + 0,00% TFA Gradiens: Idõ (perc) % B Az oszlop hõmérséklete: C; Áramlási sebesség: 0,4 ml/perc; Detektálás: =2 nm; tr: retenciós idõ; v: térfogat. (II) általános képletû vegyület elõállítása 1. referenciapélda: N¹(t-Butil)-N -[6¹(2,6-diklór- fenil)-2-(metil-szulfonil)-pirido[2,3¹d]pirimidin- 7¹il]karbamid 4

5 1.1 Etil-[4¹amino-2-(metil-tio)-pirimidin--karboxilát] 0,7 g etil-[4¹klór-2-(metil-tio)-pirimidin--karboxilát] 0 ml etanollal készült szuszpenziójához perc alatt és a hõmérsékletet C körül tartva hozzáadunk 1 ml %¹os NH 4 OH oldatot. Szobahõmérsékleten órán át tartó keverés után a reakcióelegyet vákuum alatt majdnem szárazra pároljuk, majd a maradékot 0 ml vízben felvesszük, percig keverjük, szûrjük, háromszor ml vízzel mossuk, majd vákuum alatt P 2 O jelenlétében szárítjuk. Egy fehér szilárd anyagot kapunk. Op.=134 1 C, m=39,9 g. 1.2 [4¹Amino-2-(metil-tio)-pirimidin-¹il]-metanol 1 liter THF-ben oldott 39,68 g elõzõ lépésben kapott észterhez 4 perc alatt hozzáadunk 2 ml, THF-fel készült 1 M LiAlH 4 oldatot, a hõmérsékletet C alatt tartva. Még egy órán át keverjük, majd a hõmérsékletet C¹ra csökkentjük és egymás után cseppenként hozzáadunk 9 ml vizet, 6, ml N nátrium-hidroxid-oldatot, majd 32 ml vizet. perc keverés után a szilárd anyagot szûrjük, majd THF¹el öblítjük. A szûrletet vákuum alatt szárazra pároljuk, majd a maradékot 0 ml forrásban lévõ toluolban újraoldjuk, melegen gyorsan szûrjük a kevés oldhatatlan anyag eltávolítása céljából, és a szûrletet egy éjszakán át hûlni hagyjuk. A kapott fehér kristályokat szûrjük, egy kevés toluollal, majd éterrel mossuk és szárítjuk. Op.= C, m=23,9 g ¹Amino-2-(metil-tio)-pirimidin--karbaldehid 23,8 g elõzõ lépésben kapott alkohol ml kloroformmal készült szuszpenziójához 2 perc alatt hozzáadunk 79, g aktív MnO 2 ¹t és egy éjszakán át szobahõmérsékleten keverjük: a szilárd anyagot szûrjük, háromszor 7 ml CHCl 3 -mal mossuk és a szûrletet vákuum alatt szárazra pároljuk; a fehér szilárd maradékot éterben felvesszük, szûrjük, szárítjuk. Op.= C, m=21,0 g ¹(2,6-Diklór-fenil)-2-(metil-tio)- pirido[2,3¹d]pirimidin-7-amin 21 g elõzõ lépésben kapott, 2 ml DMF-ben oldott és C¹ra hûtött aldehidhez perc alatt hozzáadunk,47 g %¹os NaH¹t, majd perc alatt kis részletekben ,0 g 2,6-diklór-fenil-aceto-nitrilt. A keverést percig folytatjuk C¹on, majd egy éjszakán át szobahõmérsékleten. A reakcióelegyet C¹ra hûtjük és hozzáadunk 6 ml telített NH 4 Cl oldatot, majd 00 ml víz/jég elegyet; piros csapadék képzõdik, amelyet szûrünk, vízzel kétszer mosunk, a lehetõ legjobban lecsöpögtetünk, éterrel, 0 ml kloroformmal, majd újra éterrel mosunk; szárítás után bézs színû szilárd anyagot kapunk. Op.= 23 C, m=29,92 g. A mosásból származó éteres és kloroformos fázisokat szárazra pároljuk, egy kevés kloroformban felvesszük, amelyhez étert adunk: egy második, 3,1 g¹os adagot kapunk, össztömeg=33,07 g. 1. N¹(t¹Butil)-N -[6¹(2,6-dikló-rfenil)-2-(metil-tio)- pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-karbamid 29,9 g fentiek szerint kapott amin 0 ml DMF-fel készült oldatához perc alatt és a hõmérsékletet 2 C alatt tartva hozzáadunk 4,6 g %¹os NaH¹t; még percig keverjük, majd perc alatt hozzáadunk 12,2 ml terc-butil-izocianátot, majd egy éjszakán át keverjük. A reakcióelegyet lassan 800 ml víz/jég + 0 ml 6 N HCl elegyre öntjük; a képzõdött csapadékot szûrjük, vízzel mossuk, lecsöpögtetjük, majd 1 órán át 0 ml éterben keverjük, majd szûrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Bézs színû szilárd anyagot kapunk. Op.= C (bomlás), m=28, g. 1.6 N¹(t¹Butil)-N -[6¹(2,6-diklór-fenil)-2-(metilszulfonil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-karbamid 21,9 g fentiekben kapott karbamid 0 ml kloroformmal készült oldatához 2 perc alatt és a hõmérsékletet 2 C alatt tartva, hozzáadunk 27 g metaklórperbenzoesavat (77%). Csapadék képzõdik. 2 óra elteltével a reakcióelegyet 1 l diklór-metánnal hígítjuk és nátriumszulfátot, majd 14 g kalcium-hidroxidot adunk hozzá. perc keverés után a szilárd anyagot szûrjük, diklórmetánnal mossuk, majd a szûrletet szárazra pároljuk. A maradékot 80 ml meleg éterben eldörzsöljük; hagyjuk lehûlni, majd a fehér szilárd anyagot szûrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Op=138 1 C, m=, g. Az 1. referenciapéldánál ismertetett vegyületre leírt eljárással megegyezõ módon az alábbi (II) általános képletû vegyületeket állíthatjuk elõ: 1. táblázat Ref. Ar 2 R 1 NMR 1. 2,6-diklór-fenil terc-butil 1,: s: 9H; 3,0: s: 3H; 7,0 7,70: m: 3H; 8,: s: 1H; 9,: s: 1H; 9,: s: 1H; 9,9 s: 1H 2. 2,6-diklór-fenil fenil 3,0 ppm: s: 3H; 7, ppm: t: 1H; 7, ppm: t: 2H; 7, 7,7 ppm: m: H; 8, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,80 ppm: s: 1H; 11,90 ppm: s: 1H. 3. 3,-dimetoxi-fenil terc-butil 1, ppm: s: 9H; 3,0 ppm: s: 3H; 3,80 ppm: s: 6H; 6,6 6,80 ppm: mt: 3H; 7,7 ppm; s: 1H; 8,4 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,80 ppm: s: 1H. 4. 2,6-diklór-fenil etil 1, ppm: t: 3H; 3, ppm: qd: 2H: 3,0 ppm: s: 3H; 7,0 ppm 7,7 ppm: m: 3H; 8, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,70 ppm: s: 1H.

6 1. táblázat (folytatás) Ref. Ar 2 R 1 NMR 6. fenil terc-butil 1, ppm: s: 9H; 3,0 ppm: s: 3H; 7, ppm: se; 6H; 8,4 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,80 ppm: s: 1H. 8. 2,6-dibróm-fenil terc-butil 1, ppm: s: 9H; 3,0 ppm: s: 3H; 7, ppm: t: 1H; 7,8 ppm: d: 2H: 8,0 ppm: s: 1H; 9,00 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H:,00 ppm: s: 1H bróm-6-klór-fenil terc-butil 1, ppm: s: 9H; 3,4 ppm: s: 3H; 7,0 ppm: t: 1H; 7,6 ppm: d: 1H; 7,80 ppm: d: 1H; 8,0 ppm: s: 1H; 9,00 ppm: s: 1H; 9,0 ppm: s: 1H; 9,90 ppm: s: 1H.. 2,6-dibróm-fenil etil 1,1 ppm: t: 3H: 3, ppm: qd: 2H (DOH-val maszkírozva); 3,0 ppm: s: 3H: 7, ppm: t: 1H; 7,8 ppm: d: 2H; 8,0 ppm: s: 1H; 9,2 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,70 ppm: s: 1H ,6-dimetil-fenil terc-butil 1, ppm: s: 9H; 2,00 ppm: s: 6H; 3,0 ppm: s: 3H; 7, ppm: s: 1H; 7,2 7,4: m: 3H; 8,4 ppm: s.: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,80 ppm: s: 1H,, 1. 2,6-difluor-fenil terc-butil 1, ppm: s: 9H; 3,0 ppm: s: 3H; 7,2 7,: mt: 2H; 7, 7,70 ppm: mt: 1H; 8,6 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,7 ppm: s: 1H ,6-diklór-fenil izo-propil 1, ppm: d: 6H; 3,0 ppm: s: 3H; 3,8 4,00 ppm: mt: 1H; 7,0 7,70 ppm: m: 3H; 8,0 ppm: s: 1H; 9,2 ppm: s: 1H; 9,6 ppm: s: 1H; 9,7 ppm: se: 1H. Az amin kereskedelmi forgalomban kapható termék. A példa szerinti vegyületek számai az alábbi 3. táblázatban szereplõ számoknak felelnek meg, mely táblázat egyes találmány szerinti vegyületek kémiai szerkezetét és fizikai tulajdonságát szemlélteti. Ha aszimmetrikus szénatomot tartalmaznak, akkor ezeket a vegyületeket racém formában kapjuk. 1. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-amino)- 6¹(2,6-diklór-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]- N ¹(1,1-dimetil-etil)-karbamid 3,32 g ( mmol) 4 0 aminhoz 4 ml DMSO-ban hozzáadunk 3,21 g (28,6 mmol) t¹buok¹t 1 perc alatt, majd perc alatt hozzáadunk 7,71 g (16, mmol) 1. táblázatban szereplõ 1. referenciapélda szerinti karbamidot. 2 óra után ismét hozzáadunk 1 g t¹buok¹t, majd 1 g t¹buok¹t újra hozzáadunk 2 óra elteltével. 6 órán át tartó reagálás után a reakcióelegyet jeges vízzel hígítjuk, majd etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázist vízzel kétszer, egyszer telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk, csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A nyersterméket dietil-éter/heptán elegyben eldörzsöljük, a csapadékot szûrjük, majd szilikagélen kromatografáljuk, eluens CHCl 3 /AcOEt 88/12 (v/v). g várt terméket kapunk. MH + = vegyületek A vegyületeket ugyanolyan módon állítjuk elõ, mind az 1. vegyületet az aminból és az 1. táblázatban szereplõ referenciapéldák szerinti (II) általános képletû termékek közül választott megfelelõ karbamidból kiindulva. 12. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6-(2¹bróm-6-klór-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]- N ¹(1,1-dimetil-etil)-karbamid. 13. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-amino)-6¹(2,6-diklórfenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-N -etilkarbamid. 14. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6¹(2,6-dibróm-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]- N ¹(1,1-dimetil-etil)-karbamid. 1. vegyület: N¹(2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6¹(2,6-dibróm-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-n - etil-karbamid. 16. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-amino)-6¹(2,6-diklór-fenil)-pirido[2,3¹d)-pirimidin-7¹il]-N -fenil-karbamid 6

7 17. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6¹(3,-dimetoxi-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]- N ¹(1,1-dimetil-etil)-karbamid. 18. vegyület: N¹(2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-amino)-6-fenil-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-N ¹(1,1-dimetiletil)-karbamid. 19. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6¹(2,6-dimetil-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]- N ¹(1,1-dimetil-etil)-karbamid.. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6¹(2,6-difluor-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]- N ¹(1,1-dimetil-etil)-karbamid. 21. vegyület: N¹[2¹(2,1,3-benzotiadiazol--il-ami- no)-6¹(2,6-diklór-fenil)-pirido[2,3¹d]pirimidin-7¹il]-n - (1¹metil-etil)-karbamid. Az alábbi, 3. táblázatban bizonyos találmány szerinti vegyületek kémiai szerkezetét és fizikai tulajdonságait szemléltetjük. (I) 3. táblázat Vegyület R1 Ar2 NMR jellemzés 1. terc-butil 2,6-diklór-fenil 1,0 ppm: s: 9H; 7,0 7,70 ppm: m: 3H; 7,9 ppm: dd: 2H; 8,1 ppm; s; 1H; 8, ppm; s; 1H; 9, ppm: s; 1H; 9, ppm: s: 1H;,6 ppm: s: 1H;,7 ppm: s: 1H. 12. terc-butil 2-bróm-6-klór-fenil 1,0 ppm: s: 9H; 7,4 ppm: t: 1H; 7,6 ppm: d: 1H; 7,80 ppm: d: 1H; 8,00 ppm: dd: 2H; 8,1 ppm: s: 1H; 8,2 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;,7 ppm: s: 1H;,8 ppm: s: 1H. 13. etil 2,6-diklór-fenil (DMSO+deuterált TFA) 1,1 ppm: t: 3H: 3, ppm: qd: 2H; 7,0 7,70 ppm: m: 3H: 8,00 ppm: dd: 2H; 8,4 ppm: s: 1H; 9,00 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H. 14. terc-butil 2,6-dibróm-fenil 1,0 ppm: s: 9H; 7, ppm: t: 1H; 7,80 ppm: d: 2H; 8,00 ppm: dd: 2H; 8, 1 ppm: s: 2H; 9, 1 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;,7 ppm: s: 1H;,8 ppm: s: 1H. 1. etil 2,6-dibróm-fenil 1, ppm: t: 3H; 3, ppm: qd: 2H; 7, ppm: t: 1H; 7,80 ppm: d: 2H; 8,00 ppm: dd: 2H: 8,1 ppm: s: 1H; 8,0 ppm: s: 1H; 9,1 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;, ppm: s: 1H;,70 ppm: s: 1H. 16. fenil 2,6-diklór-fenil 7,1 ppm: t: 1H; 7,0 7,70 ppm: mt: H; 7,7 8, ppm: mt: 4H; 8, ppm: s: 1H; 9,2 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9,0 ppm: s: 1H;,8 ppm: s: 1H; 13, ppm: s: 1H. 17. terc-butil 3,-dimetoxi-fenil 1,0 ppm: s: 9H; 3,70 ppm: s: 6H; 6,6 ppm: s: 3H; 7, ppm: s: 1H; 8,00 ppm: dd: 2H; 8, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;,0 ppm: s: 1H;,70 ppm: s: 1H. 18. terc-butil fenil 1,0 ppm: s: 9H; 7,2 ppm: s: 1H; 7,4 7,6 ppm: m: H; 8,00 ppm: dd: 2H; 8, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;,0 ppm: s: 1H;,7 ppm: s; 1H. 19. terc-butil 2,6-dimetil-fenil 1,4 ppm: s: 9H; 2,00 ppm: s: 6H; 6, ppm: s: 1H; 7, 7,: m: 3H; 7,9 ppm: dd: 2H; 8, ppm: s: 1H; 9,1 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;,4 ppm: s: 1H;,6 ppm: s: 1H.. terc-butil 2,6-difluor-fenil 1,4 ppm: s: 9H; 7; 1 7:: mt: 2H; 7,0 7,70 ppm: mt: 1H; 7,9 ppm: dd: 2H; 8,2 ppm: s: 1H; 8,4 ppm: s: 1H; 9,1 ppm: s: 1H; 9, ppm: s: 1H;,0 ppm: s: 1H;,70 ppm: s: 1H. 21. izo-propil 2,6-diklór-fenil 1, ppm: d: 6H; 3,80 4,00 ppm: mt: 1H; 7, 7, ppm: mt: 1H; 7, 7,6 ppm: mt: 2H; 7,9 ppm: dd: 2H; 8,1 ppm: s: 1H; 8, ppm: s: 1H; 9,1 ppm: s: 1H; 9,2 ppm: s: 1H;,4 ppm: d: 1H;,7 ppm: s: 1H. 7

8 A találmány szerinti vegyületeket farmakológiai vizsgálatoknak vetettük alá, amelyek lehetõvé tették a rákellenes aktivitásuk meghatározását. A találmány szerinti (I) általános képletû vegyületeket in vitro vizsgáltuk az alábbi helyekrõl származó humán eredetû daganatos sejtvonalpanelen: mellrák: MDA-MB231 (American Type culture collection, Rockville, Maryland, USA, ATCC HTB26), MDA A1 vagy MDA ADR [úgynevezett multidrog rezisztens MDR sejtvonal, ismertették E. Collomb és munkatársai, a Cytometry, 12(1): 1 2, 1991 szakirodalmi helyen], és MCF7 (ATCC HTB22), prosztatarák: DU14 (ATCC HTB81) és PC3 (ATCC CRL14), vastagbélrák: HCT116 (ATCC CCL247) és HCT1 (ATCC CCL22), tüdõrák: H4 (ismertette Carmichael a Cancer Research 47 (4): , 1987 szakirodalmi helyen és rendelkezésre bocsátotta a National Cancer Institute, Frederick Cancer Research and Development Center, Frederick, Maryland, USA), glioblasztóma: SF268 (ismertette Westphal a Biochemical & Biophysical Research Communications 132 (1): , 198 szakirodalmi helyen és rendelkezésünkre bocsátotta National Cancer Institute, Frederick Cancer Research and Development Center, Frederick, Maryland, USA), leukémia: CMLT1 (ismertették Kuriyama és munkatársai a Blood, 74: 1989, , szakirodalmi helyen, Soda és munkatársai a British Journal of Haematology, 9: 198, szakirodalmi helyen és Drexler, a Leukemia Research, 18: 1994, szakirodalmi helyen és rendelkezésünkre bocsátotta a DSMZ cég (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH) Mascheroder Weg 1b, Braunschweig, Germany), K¹62 (ismertették Lozzio és munkatársai, J. Natl Cancer Inst 0: (1973), Lozzio és munkatársai, Blood 4: 321 (197), és rendelkezésünkre bocsátotta a DSMZ n ACC ), KG¹1 a (ismertették Koeffler és munkatársai, Blood 6: 26 (1980), és rendelkezésünkre bocsátotta DSMZ n ACC 421), és Kasumi¹1 [ismertették Asou és munkatársai, Blood 77: 31 (1991), és rendelkezésünkre bocsátotta a DSMZ n ACC 2]. A sejtproliferációt és életképességet egy 3¹(4,- dimetil-tiazol-2¹il)--(3¹karboxi-metoxi-fenil)-2-(4¹szulfofenil)-2h¹tetrazóliumot (MTS) alkalmazó vizsgálattal határoztuk meg a Fujishita T. és munkatársai, Oncology 03, 64 (4), szerint. Ebben a vizsgálatban az élõsejteknek azt a mitokondriális kapacitását mérjük, amellyel képesek az MTS¹t egy színes vegyületté alakítani egy találmány szerinti (I) általános képletû vegyülettel történõ 72 órás inkubáció után. A találmány szerinti vegyületnek az a koncentrációja, amely a sejtproliferáció és életképesség 0%¹os csökkenéséhez vezet (IC 0 ) 1 nmol és mol közötti, a vizsgált sejtvonaltól és vegyülettõl függõen Például az 1. számú vegyület IC 0 értéke nm a K¹62 sejtvonalon, az IC 0 értéke 0 nm a KG¹1a sejtvonalon és az IC 0 értéke nm a Kasumi¹1 sejtvonalon. A K¹62 sejtvonalon, a 13. számú vegyület IC 0 értéke 74 nm. Így a találmány szerint úgy tûnik, hogy az (I) általános képletû vegyületek a daganatsejtek proliferációjának és életképességének csökkenését okozzák. Úgy tûnik tehát, hogy a találmány szerinti vegyületeknek rákellenes aktivitásuk van, valamint aktivitásuk van más proliferatív betegségek kezelésében is, mint amilyenek például az övsömör, a resztenózis, az aterosclerosis, az AIDS, valamint az ér simaizomzatának sejtproliferációja által okozott betegségekben és reumatoid artritiszben is. Így a találmány tárgyát képezik olyan gyógyszerek is, amelyek egy (I) általános képletû vegyületet vagy ennek egy gyógyászatilag elfogadható savval képzett addíciós sóját vagy pedig az (I) általános képletû vegyület hidrátját vagy szolvátját tartalmazzák. Ezek a gyógyszerek terápiásan alkalmazhatók, különösen sejtek és különösen daganatos sejtek proliferációja által okozott vagy súlyosbított betegségek kezelésében vagy megelõzésében. Egy találmány szerinti termék használható egy kóros állapot, különösen rák kezelésére hasznos gyógyszer elõállítására. Daganatos sejtek proliferációjának inhibitoraiként ezek a vegyületek hasznosak az alábbi betegségek megelõzésében és kezelésében: leukémiák, elsõdleges és áttétes szolid daganatok, karcinómák és rákok és különösen: mellrák; tüdõrák; vékonybélrák, vastagés végbélrák; a légutak, az oropharynx, hipopharynx daganatai; nyelõcsõrák; májrák, gyomorrák, epeúti rák, epehólyagrák, hasnyálmirigyrák; a húgyutak ideértve a vesét, az urotéliumot és a húgyhólyagot rákjai; a nõi nemi traktus rákjai, ideértve a méh, a méhnyak, a petefészkek rákjait, a kloriokarcinómákat és a trofoblasztómákat; a férfi nemi szervek rákjait, ideértve a prosztata, az ondóhólygok, a herék rákjait, a csírasejtek daganatait; az endokrin mirigyek rákjai, ideértve a pajzsmirigy, a hipofízis, a mellékvese rákjait; a bõrrákok, ideértve a hemangiomákat, a melanómákat, a szarkómákat, ideértve a Kaposi-szarkómát; agydaganatok, idegdaganatok, szemdaganatok, agyhártyadaganatok, ideértve az asztrocitómákat, a gliómákat, a glioblasztómákat, a retinoblasztómákat, a neurinómákat, a neuroblasztómákat, a schwannómákat, a meningiómákat; a vérképzõ rendszer rosszindulatú dagantai; leukémiák [akut limfocitás leukémia (ALL), akut mieloid leukémia (AML), krónikus mieloid leukémia (CML), krónikus limfocitás leukémia (CLL)], chloromák, plazmocitómák, a T¹ vagy B¹sejtek leukémiái, nem Hodgkin vagy Hodgkin limfómák, mielómák, különféle rosszindulatú hemopátiák. A találmány továbbá olyan gyógyászati készítményekre vonatkozik, amelyek hatóanyagként egy találmány szerinti vegyületet tartalmaznak. Ezek a gyógyászati készítmények hatásos mennyiségben, legalább egy találmány szerinti vegyületet vagy ennek a vegyületnek egy gyógyászatilag elfogadható sóját, hidrátját 8

9 vagy szolvátját és legalább egy gyógyászatilag elfogadható segédanyagot tartalmaznak. Egy gyógyászati készítmény ezenkívül tartalmazhat más rákellenes hatóanyagot is. A segédanyagokat a kívánt gyógyszerformától és a beadási módtól függõen a szakember számára ismert szokásos segédanyagok közül választjuk. A találmány szerinti orális, szublingvális, szubkután, intramuszkuláris, intravénás, topikális, lokális, intratracheális, intranazális, transzdermális vagy rektális beadásra szánt gyógyászati készítményekben a fenti (I) általános képletû hatóanyagot vagy adott esetben sóját, szolvátját vagy hidrátját beadhatjuk egységes beadási formában, szokásos gyógyászati segédanyagokkal elkeverve, állatoknak és embereknek a fent említett zavarok vagy betegségek megelõzésére vagy kezelésére. A megfelelõ egységes beadási formák közé tartoznak az orális formák, mint például a tabletták, a lágy¹ vagy keményzselatin-kapszulák, a porok, a granulátumok és az orális oldatok vagy szuszpenziók, szublingvális, bukkális, intratracheális, intraokuláris és intranazális beadási formák, inhaláció útján beadandó formák, topikális, transzdermális, szubkután, intramuszkuláris vagy intravénás beadási formák, rektális beadási formák és implantátumok. Topikális alkalmazáshoz a találmány szerinti vegyületeket használhatjuk krémek, gélek, kenõcsök, lotionok formájában. Példaként egy találmány szerinti vegyület egy egységes beadási formája tabletta alakjában az alábbi összetevõket tartalmazhatja: Találmány szerinti vegyület Mannit Kroszkarmellóz-nátrium Kukoricakeményítõ Hidroxi-propil-metil-cellulóz Magnézium-sztearát 0,0 mg 223,7 mg 6,0 mg 1,0 mg 2,2 mg 3,0 mg A fenti (I) általános képletû vegyületeket a kezelendõ emlõs testtömegének 1 kg¹jára vonatkoztatva 0, mg napi dózisokban használhatjuk, elõnyösen 0,1 0 mg/kg napi dózisban. Embernél a dózis elõnyösen 0, mg/nap, még elõnyösebben 1 00 mg között változhat a kezelendõ beteg életkorától vagy a kezelés típusától (megelõzõ vagy gyógyító) függõen. Lehetnek olyan különleges esetek, amikor nagyobb vagy kisebb dózisok a megfelelõek; az ilyen adagolások sincsenek a találmány keretén kívül. A szokásos gyakorlat szerint a megfelelõ dózist minden betegnél az orvos határozza meg a beadás módjától, a beteg testtömegétõl és válaszától függõen. A találmány szerint az (I) általános képletû vegyületeket beadhatjuk egy vagy több rákellenes hatóanyaggal társítva, különösen olyan daganatellenes vegyületekkel társítva, mint például: alkilezõszerek, mint például alkil-szulfonátok (buszulfán), dakarbazid, prokarbazin, nitrogénmustárok (klórmetin, melfalán, klorambucil), ciklofoszfamid, ifoszfamid; nitrozokarbamidok, mint például karmusztin, lomusztin, szemusztin, sztreptozocin; antineopláziás alkaloidok, mint például vinkrisztin, vinblasztin; taxánok, mint például paklitaxel vagy taxoter; antineopláziás antibiotikumok, mint például az aktinomicin; interkalációs szerek, antineopláziás antimetabolitok, folát antagonisták, metotrexát; a purinszintézis inhibitorai, purin analógok, mint például merkaptopurin, 6¹tioguanin; a pirimidinszintézis inhibitorai; aromatáz inhibitorok, kapecitabin, pirimidin analógok, mint például fluoruracil, gemcitabin, citarabin és citozin arabinozid; brekvinar; topoizomeráz inhibitorok, mint például kamptotecin vagy etopozid; rákellenes hormon agonisták és antagonisták, többek között tamoxifén; kináz inhibitorok, imatnib, növekedési faktor inhibitorok, gyulladás elleni szerek, mint például pentozán, poliszulfát, kortikoszteroidok, prednizon, dexametazon; antitopoizomerázok, mint például etopozid, antraciklinek, többek között doxorubicin, bleomicin, mitomicin és metramicin; rákellenes fémkomplexek, platina komplexek, ciszplatin, karboplatin, oxaliplatin; alfa-interferon, trifenil-tiofoszforamid, altretamin; antiangiogén szerek, talidomid, immunterápiás adjuvánsok, vakcinák. A találmány szerint az (I) általános képletû vegyületeket beadhatjuk egy vagy több olyan hatóanyaggal társítva, amely hasznos a fent említett betegségek kezelésére, például antiemetikummal, fájdalomcsillapítóval, gyulladáscsökkentõvel, cachexia elleni szerrel. A találmány szerinti vegyületeket lehet társítani sugárterápiával is. Ezeket a kezeléseket beadhatjuk egyidejûleg, külön-külön vagy egymás után. A kezelést az orvos határozza meg a kezelendõ betegtõl függõen. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. (I) általános képletû vegyület: azzal jellemezve, hogy Ar 2 és R 1 jelentése rendre: 2,6-diklór-fenil és terc-butil; vagy 2¹bróm-6-klór-fenil és terc-butil; vagy 2,6-diklór-fenil és etil; vagy 2,6-dibróm-fenil és terc-butil; vagy 2,6-dibróm-fenil és etil; vagy 2,6-diklór-fenil és fenil; vagy 3,-dimetoxi-fenil és terc-butil; vagy fenil és terc-butil; vagy 2,6-dimetil-fenil és terc-butil; vagy 2,6-difluor-fenil és terc-butil; vagy 2,6-diklór-fenil és izo-propil. 2. Az alábbi képletû vegyület: (I) 9

10 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy: királis vagy racém vagy egy sztereoizomerben dúsított vagy egy enantiomerben dúsított formában van; hogy adott esetben sóvá van alakítva; és hogy adott esetben hidratált vagy szolvatált. 4. Gyógyászati készítmény, azzal jellemezve, hogy egy 1 3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet, valamint legalább egy gyógyászatilag elfogadható segédanyagot tartalmaz.. A 4. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, azzal jellemezve, hogy legalább egy további rákellenes hatóanyagot tartalmaz. 6. Gyógyszer, azzal jellemezve, hogy egy 1 3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy egy ilyen vegyület gyógyászatilag elfogadható savval képzett addíciós sóját vagy egy ilyen vegyület hidrátját vagy szolvátját tartalmazza. 7. Az 1 3. igénypontok bármelyike szerinti vegyület rákellenes hatóanyagként. 8. Az 1 3. igénypontok bármelyike szerinti vegyület alkalmazása sejtek proliferációja által okozott vagy súlyosbított betegségek kezelésére vagy megelõzésére szánt gyógyszer elõállítására. 9. A 8. igénypont szerinti alkalmazás leukémiák, elsõdleges és áttétes szolid daganatok, karcinómák és rákok megelõzésére és kezelésére.. Eljárás egy 1. igénypont szerinti vegyület elõállítására, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletû vegyületet Eljárás egy 1. igénypont szerinti vegyület elõállítására, azzal jellemezve, hogy reagáltatunk (i) egy (Ilb) általános képletû vegyületet (IIb) amelyben: R jelentése távozó csoport, mint például (a) halogén, különösen Cl vagy Br vagy (b) alkil- S(O)m, amelyben m=0, 1, vagy 2; R 11 jelentése NHC(O) NH R1; (ii) és az alábbi képletû amint ahol: (a) ha R jelentése halogén vagy alkil-s(o)m, ahol m=2, akkor a reakciót oldószerben, elõnyösen poláros oldószerben hajtjuk végre szobahõmérséklet és az oldószer visszafolyatása közötti hõmérsékleten; (b) ha R jelentése alkil-s(o)m, ahol m=0 vagy 1, akkor a reakciót a (II) képletû aminnal olvadt állapotban hajtjuk végre, ahol a amelyben R 1 és Ar 2 jelentése az 1. igénypontban definiált, egy alábbi képletû aminnal reagáltatunk: képletû vegyület aminfunkcióját elõzetesen sóvá alakítjuk vagy védjük. Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Törõcsik Zsuzsanna Windor Bt., Budapest