Új könnyűlánc diagnosztika Dr. Németh Julianna Országos Gyógyintézeti Központ Immundiagnosztikai Osztály MLDT-MIT Továbbképzés 2006
1845 Bence Jones Protein vizelet fehérje 1922 BJP I-II típus 1956 BJP kappa és lambda... 2001 FLC immunassay szérum és vizelet
Könnyűláncok sajátosságai plazmasejtek 5-féle nehézláncot és 2-féle könnyűláncot termelnek (intakt immunglobulin) termelés helye: csontvelő és nyirokcsomó 40%-kal több könnyűlánc termelődik, mint ami nehézlánchoz kapcsolódik szabad könnyűlánc napi termelés kb. 500 mg intakt immunglobulinok felezési ideje: IgG: 20-25 nap IgM: 7 nap IgA: 6 nap IgD: 3 nap IgE: 2 nap szérum szabad könnyűlánc: 2-6 óra kappa lánc monomer, lambda lánc dimer, polimer
Könnyűlánc metabolizmusa a vesében monomer szabad κ könnyűlánc a glomerulusban filtrálódik (2-4 óra alatt 40%) dimer szabad λ könnyűlánc a glomerulusban lassabban filtrálódik (3-6 óra alatt 20%, polimerek még lassabban) beszűkült vesefunkció mellett ugyanez 2-3 nap is lehet a tubulusokban a filtrált szabad könnyűlánc abszorbeálodik ( napi 10-30 g) és lebomlik, extrém mennyiségnél lerakódik fiziológiás körülmények között a vizeletben 1-10 mg/nap jelenik meg életkorral a szérum szint nő (vesefunkció)
Könnyűlánc metodikák választéka VIZELET fehérje elektroforézis: kimutathatóság határa: 30 mg/l agaróz elfo koncentrált vizelet nem kvantitatív vizelet IFE : 5-30 mg/l koncentrált vizelet nem kvantitatív vizelet κ, λ koncentráció lézer nefelometriás mérése: 500mg/l SZÉRUM fehérje elektroforézis 500-2000 mg/l kapilláris elfo: 400 mg/l szérum IFE : 150 mg/l szérum κ, λ koncentráció lézer nefelometriás mérése: 1000 mg/l
Új metodikai lehetőség: immunassay monoklonális, latex szemcsére felvitt ellenanyag lézer nefelometriás, turbidimetriás mérés metodika jellemzői: szenzitivitás: 98% specificitása: 95%-97% elvárás: ne legyen keresztreakció az intakt immunglobulin könnyűláncával PPV: 78% NPV: 100% FLC metodikák összehasonlítása: IFE (szérum): 69% IFE ( vizelet): 83% FLC nefelometria: 91% IFE+FLC: 99%
1 2 3 4 5 6 7 MG csontvelő szupresszióval 8 9 Kappa Lambda K/L arány Interpretáció normál szérum csontvelő szupresszió, MG nélkül csontvelő szupresszió, MG-val normál szérum / csontvelő szupresszió normál szérum / csontvelő szupresszió 10 11 MG csontvelő szupresszióval 12 13 poliklonális Ig vagy vesefunkciós zavar MG csontvelő szupresszió nélkül 14 15 16 17 MG csontvelő szupresszióval MG csontvelő szupresszió nélkül poliklonális Ig vagy vesefunkciós zavar 18 19 MG vesefunkciós zavarral
Kvantitatív szérum szabad könnyűlánc mérés szerepe a betegségek diagnosztikájában és a therápia követésben Nem szekretoros myeloma egyetlen pozitív biokémiai fehérje marker dimer, polimer formák miatt multiantigén target immunprecipitációs tesztben felülmérés dimereknél:1.5x, polimereknél: 1.5-3.5x a betegség követésére alkalmas csontvelő biopszia helyett csont scan helyett relapszust ill. terápiás választ korábban jelzi.
Kvantitatív szérum szabad könnyűlánc mérés szerepe a betegségek diagnosztikájában és a therápia követésben könnyűlánc myeloma kvantitatívvá teszi az IFE kvalitatív eredményét szérum FLC mindig emelkedett, a betegség aktivitásával párhuzamosan monitorizálásra alkalmas paraméter feleslegessé teszi a vizelet könnyűlánc mérést jobb indikátora a reziduális betegségnek, mint a vizelet könnyűlánc koncentráció mérése
Kvantitatív szabad könnyűlánc mérés szerepe a betegségek diagnosztikájában és a therápia követésben myeloma multiplex a betegek 96%-ban emelkedett FLC terápiás válasz gyorsabban követhető, mint intakt immunglobulinnal betegség progressziójának első megjelenése, az FLC koncentráció növekedése reziduális betegség kimutatása (oligoszekretoros betegek) használható a csontfájdalmak / törések ill. ismeretlen etiológiájú vesebetegségek differenciálásában
Kezelt myelomás betegek követése
Kvantitatív szabad könnyűlánc mérés szerepe a betegségek diagnosztikájában és a therápia követésben Transzplantált betegek követése IgG és Free κ változása a transzplantáció után IgG-total (g/l) IgG-paraprotein (g/l) Free k (mg/l) 60 120 50 Free κ 100 IgG (g/l) 40 30 20 IgG-total IgG-paraprotein 80 60 40 Free κ (mg/l) 10 20 0 0 4 11 18 25 33 40 47 61 68 idő (nap) 0
Kvantitatív szabad könnyűlánc mérés szerepe a betegségek diagnosztikájában és a therápia követésben MGUS (monoclonal gammopathy undetermined significance) FLC mérésnek prognosztikai szerepe lehet MGUS emelkedett FLC-vel progrediálhat könnyűlánc myelomába, AL amyloidosisba vagy más plazma sejt dyscrasiába
MGUS progresszió rizikója (Mayo Klinika 2002, 1148 beteg) rizikó tényező betegszám progresszió rizikója 20. évben alacsony kockázat M komp.<15g/l 449 2% Ig típusa FLC ratio: 0.26-1.65 alacsony / közepes kockázat 1 tényező kóros 420 10% közepes kockázat 2 tényező kóros 226 18% magas kockázat 3 tényező kóros 53 27%
Kvantitatív szabad könnyűlánc mérés szerepe a betegségek diagnosztikájában és a therápia követésben primer szisztémás amyloidosis a betegek 95%-ban emelkedett FLC magas FLC érték a betegség többszervi manifesztációját jelenti a therápiára adott korai válasz markere PBSCT monitorizálásának lehetősége normális vesefunkció mellett (szervi válasz / komplett remisszió) diagnózis felállítása, therápia követése