A laboratóriumi riumi vizsgálatok szerepe a haematologiai kórképek diagnosztikájában Dr. Dávid D Marianna Pécs, 2009.
Haematológiai betegségek gek 1. Klinikai tünetekt diagnosztikája 2. Laboratóriumi riumi vizsgálatok 3. Pathológia - csontvelı aspirátum vagy biopszia - nyirokcsomó FTAB vagy rezekció 4. KépalkotK palkotó eljárások
Laboratóriumi riumi vizsgálatok a haematologiai diagnosztikában - Vérkép p (1 db EDTA csı), vérkenetv - Vörösvérsejt süllyeds llyedés - Serum protein elfo, Ig meghatároz rozások - Immunfixáci ció - Tumor markerek: : LDH, bétab ta-2- MG - Véralvadási vizsgálatok - Áramlási cytometria (FCM) - Genetika: kromoszóma ma (metaf( metafázis) FISH (interf( interfázis) molekuláris biológia (PCR)
Thrombocyta szám Normál l tartomány: 150-450 G/l Mikor: spontán n vérzv rzések: orrvérz rzés, nykh.. vérzv rzés erıs s menstruáci ció, metrorrhagia thromboemboliás kórképek Emelkedett: primaer: Essent. thrombocythaemia secundaer: Egyéb b CMPD: PRV, CML, OMF vashiányos anaemia gyulladás, RA, vérzv rzés malignitás,, OC szedés trauma, splenectomiát követı
Thrombocyta szám m 2. < 50 G/l: vérzések mőtét, m t, sérülés s s kapcsán < 20 G/l: spontán n vérzv rzések Csökken kkenés s okai: csontvelı elégtelens gtelenség infiltratív csontvelı betegségek gek (AL, CL, MM, fibrosis stb.) periféri riás s sejtszétes tesés s (ITP( ITP,, gyógyszer, gyszer, mőbillentyő,, infekció) felhasználódás: s: DIC vérzés, hypersplenia hígulás s (nagy mennyiségő vvt transzfúzi zió)
Thrombocyta szám m 3. Csökken kkenés s okai (folyt.): Gyógyszerek kemoterápi piás s szerek chloramphenicol, colchicin H2 blokkolók, k, indomethacin,, INH, chinidin, streptomycin, sulfonamid thiazid diuretikumok, HEPARIN Thrombotikus microangiopathiák (TTP/HUS) Anaemia perniciosa Velszületett letett kórképek macrothrombocytákkal (pl. Bernard-Soulier syndroma)
Thrombocyta számbeli anomáli liák Thrombocythaemia Thrombocytopenia
Pseudo-thrombocytopenia EDTA indukálta TCT aggregáció Citráttal TCT aggregáció NINCS TCT vesztés Normális TCT szám
Vörösvérsejt szám Normál l tartomány: férfi: 4.7-6.1 x 10 12 /L nı: 4.2-5.4 x 10 12 /L életkor elıre haladtával csökken a szám Mikor: vérkép p részekr szeként minden esetben haematologiai betegség gyanujával vérszegénység g gyanúja esetén magas vvt szám m gyanúja esetén
Vörösvérsejt szám m 2. Csökken kkenés: vérzés s (pl. GI, trauma) haemolysis diéta (vashi( vashiány, B12 vitamin hiány ny) genetikai eltérések (pl. thalassaemiák) csontvelı elégtelens gtelenség, g, fibrosis haematologiai malignomák tumor, sepsis veseelégtelens gtelenség,, terhesség gyógyszerek gyszerek (pl. kemoterápia)
Vörösvérsejt szám m 3. Emelkedés: Nagy magasságokban gokban Krónikus O 2 hiányban COPD, kongenitális szívhib vhibák, Cor pulmonale Folyadék k hiány (dehydr( dehydráció) Thalassaemia Polycythaemia rubra vera
Vörösvértest származtatott paraméterek 1. MCV (Mean Cell Volume) = Htc / RBC A hematokrit és a vörösvérsejtszám hányadosa, az átlagos (vörösvér) sejttérfogatot adja. Mértékegysége: fl. 2. MCH (Mean Cell Hemoglobin) = Hgb / RBC Az egy sejtre esı hemoglobin mennyiségét jelenti, a hemoglobin koncentráció és a vörösvérsejtszám hányadosa. Mértékegysége: pg. 3. MCHC (Mean Cell Hemoglobin Concentration) = Hgb / Htc Átlagos celluláris hemoglobin koncentrációt jelent, értékét a hemoglobin koncentráció és a hematokrit hányadosa adja. Mértékegysége: g/l. (femtoliter) (picogramm) Vvt mérete,térfogata Hgb mennyiség/ 1 Vvt Hgb concentráció/ vér volumen 4. RDW (Red Cell Distribution Width) érték a vörösvérsejt-csúcs magasságának 20 %-nál mért eloszlás-szélessége, az esetleges poikilocytósis mérıszáma. (anisocytosis)
MCV: mean corpuscular volume Macrocytaer anaemia Kemoterápia Anaemia perniciosa, B12 vitamin és fólsav hiány MDS, alkohol toxicitás Myeloid leukaemiák Pajzsmirigy és s máj m j mőködési m zavar Microcytaer anaemia Vashiányos anaemia,, vérzv rzés Krónikus betegségekhez gekhez társult rsuló anaemia Thalassaemia Ólom mérgezm rgezés Veseelégtelens gtelenség
MCH: mean corpuscular HGB Hypochrom anaemiák: Ólom mérgezm rgezés Haemoglobinopathiák Vashiány Normochrom anaemiák: AA, MDS, myeloid leukaemiák Alkohol toxicitás, pajzsmirigy betegség Kemoterápia, B12 vitamin és fólsav hiány Vese betegség, g, szerzett haemolysisek
Fehérv rvérsejt rsejt szám Emelkedés s (>( 10 G/l): fertızés, chronicus gyulladás szövet necrosis leukaemia stressz, trauma, terhesség Csökken kkenés s (<( 4 G/l): csontvelı elégtelens gtelenségekgek leukaemia,, infekció,, diéta hiba autoimmun betegségek gek kemo- és s radioterápia (ANC< 1 G/l)
Pancytopenia diagnózisa Csökkent csontvelı mőködés AA (veleszületett letett és s szerzett) AL, MM, OMF Lymphomák, solid tumorok Tuberculosis,, PNH Megaloblastos anaemia Normális csontvelı cellularitás: MDS Fokozott periféri riás s destrukció Splenomegalia
Periféri riás s vérkenetv May Grünwald Giemsa festés Egyik leginformatívabb haematologiai teszt Mindhárom sejtvonal rendellenességei Vvt: : méret, m alak, chromia, intracellularis strukturák FVS: számbeli eltérések, differenciálts ltsági fokok TCT szám, méret m és s alak
Vörösvértest alaki eltérések hidegagglutinin könnycsepp sejtek echynocyták buzogány vvt AIHA OMF Égés Daganat acanthocyták fragmentocyták fragmentocyták Máj Vese Lipid TTP HUS
Vvt inklúziók DNS maradvány Denaturált RNS Supravitalis festıdés oxidált Hgb
Periféri riás s vérkenet v 2. Neutrophil: 55-70% Lymphocyta: 20-40% Monocyta: 2-8% Eosinophil: 1-4% Basophil: 0.5-1%
Balratolt vérkép Neutrophilia egyéb okai stressz, trauma gyulladások: reumás láz immunbetegségek: RA metabolikus: köszvény, ketoacidosis Éretlen granulocyt ulocyták Oka: zajló heveny bakteriális fertızés 4
eo
Mononucleosis korai B-sejtes B fázis Lymphocytosis okai: Vírus infekciók Chr. bakteriális infekció Lymphocytás leukaemia Myeloma, Besugárzás Hepatitis fertızés Kappa Lambda Polyclonalis B sejt proliferáció
Periféri riás s vérkenet v eltérései Monocytosis: Chronicus gyulladások Vírusfertızés, s, Tuberculosis Colitis ulcerosa,, Paraziták k (pl. malaria) Basophilia: CMPD, Leukaemiák Uraemia
Anaemiák
Vashiányos vérszegénység Perifériás vérkép vizsgálata vashiányos anaemiában Laboratóriumi vizsgálatok: vérkép, perifériás vérkenet serum ferritin serum vas transferrin szint transferrin telítettség csontvelı vizsgálat nem indokolt Perifáriás vérkenet vashiányos anaemiában
Vashiányos vérszegv rszegénység MCV = 61.1 fl; M/H hányados = 0.63 A vashiány diagnózisa bizonyított M/H < 0.9 : vashiány jelenlétére utal
Anaemia perniciosa Perifériás vérkép vizsgálata anaemia perniciosában Laboratóriumi vizsgálatok: vérkép, perifériás vérkenet LDH, sebi, RTC B12 vitamin és fólsav szintek PC és IF ellenes antitestek csontvelı: megaloblastos vérképzés Perifériás vérkenet anaemia perniciosában (Hypersegmentált neutrophil granulocyta)
Extra-és intravaszkuláris ris haemolysis RES: lép Haptoglobin
Laboratóriumi riumi eredmények extravaszkuláris ris haemolysisben Fokozott vvt szétes tesés nem-conjug conjugált sebi szint emelkedik vizelet ubg emelkedik széklet stercobilinogen emelkedik haptoglobin jelentısen csökken Fokozott vvt termelés RTC emelkedik CSV M : E = 1 : 1 (N: 4 : 1) Károsodott vvt-k RBC élettartam csökken, morphologia
LEUKAEMIÁK
A leukaemiák diagnózisa FLOW CYTOMETRIA PCR
Acut myeloid leukaemia Preanalitika 3 db EDTA-s csı vér (FCM + genetika) + csontvelı vizsgálat Fúzionált lysosomák
Akut myeloid leukemiák Immunfenotípus meghatározás CD34 HLA-DR MPO CD13 CD14 CD15 CD33 Gly CD41 M0 + +/- +/- +/- - - +/- - - M1 + +/- + +/- - +/- + - - M2 + +/- + +/- - +/- + - - M3 - - + + - + + - - M4 - + + + + +/- + - - M5 - + +/- +/- + +/- + - - M6 - - - - - - - + - M7 - - - - - - - - + Visszatérı genetikai eltéréssel M1 ETO M3 M5 M4eo AML1/ETO AML1 AML1/ETO RARα PML PML/RARα t(8;21)(q22;q22) (AML1/ETO) t(15;17)(q22;q12) (PML/RARa) t(v;11)(v;q23) (v/mll) t(16;16)(p13;q22) (CBFβ/MYH11)
Acut lymphoblastos leukaemia Vérkép ALL-ben Perifériás vérkenet ALL-ben Rossz prognózis: magas FVS szám, érett B sejtes, Ph +, felnıtt kor, >4 hét remisszió elérése, KIR érintettség, 3-6 hónapnál MRD +
Akut lymphoblastos leukemia diagnózis meghatározása (immunfenotípus) TdT CD34 HLA-DR CD19 CD10 cigm sigm Pro-B + + + + - - - Common-B + +/- + + + - - Pre-B +/- - + + +/- + - Érett-B - - + + +/- - + BURKITT ( érett-b fentípus) t(8;14) (c-myc/igh) t(2;8) (kappa/c-myc) t(8;22) (c-myc/lambda) c-myc
CML diagnózisa Periféri riás s vér: v Vérkép, periféri riás s vérkenetv RT- PCR: BCR-ABL fúzif ziós transcriptek BCR-ABL/ABL hányados h (<0.1%)( CCyR után n 3 havonta Csontvelı vizsgálat: Morphologia Cytogenetikai vizsgálat (Ph +) FISH vizsgálat CCyR-ig félévente, majd évente
CML diagnózisa 2.
Chronicus lymphocytás laeukaemia Perifériás vérkép CLL-ben Immunfenotípus meghatározás: CD5,19 és CD23 koexpresszió Genetikai prognosztikai tényezık: CD38, del 11q, del 17p Gumprecht rög: sejtmag Csontvelı vizsgálat nem szükséges! Perifériás vérkenet CLL-ben
Monoklonális lis gammopáti tiák
MGUS MGUS: monoclonal gammopathy of undetermined significance M komponens: monoklonális lis fehérje SPEP: gamma globulin frakció klonális lis plazmasejtek termelik 1 nehézl zlánc, egyféle könnyk nnyőláncnc > 25 év v : 1% > 70 év v : 3% > 90 év v : 14 %
M komponens SPEP képek
Csontvelıi i plazmasejtek Myeloma multiplexben
A Myeloma multiplex diagnosztikája 1. Vér: Vérkép,, CN, se creatinin (50%), We,, HUS, se Ca,, LDH, összfehérje,, se albumin, CRP SPEP, immunglobulinok, immunfixáci ció Teljes vér v és s plazma viszkozitás, s, PTR/INR, APTI, vérzv rzési idı, β-2-mikroglobulin (MHC I. osztály Ag könnyő lánca) 2. Vizelet: proteinuria,, Bence- Jones protein, Vizelet elfo, immunelfo
Rouleaux-képz pzıdés MM-ben Magas plasma fehérje tartalom következményei, magas We-t okoznak
Komplett immunglobulin és szabad könnyk nnyőlánc nc (elfo- immunfixáci ció) szl IgA lambda monoclonalitás Szabad lambda könnyőlánc