Vas anyagcsere és porfirinek laboratóriumi diagnosztikája. Hemoglobinopátiák laboratóriumi diagnosztikája

Átírás

1 Vas anyagcsere és porfirinek laboratóriumi diagnosztikája. Hemoglobinopátiák laboratóriumi diagnosztikája dr. Nagy Tamás PTE, Laboratóriumi Medicina Intézet

2 Hemoglobin

3 Az anémiák típusai 1. Csökkent termelés - Aplasticus anemia - Elégtelen EPO (veseelégtelenség) - Hem szintézis zavarai - B12 vit. hiány, folsav hiány (megaloblastos anemia) - Vashiány - Globin szintézis zavarai - Thalassemiák - Csonvelői térfoglaló/ vvt képzést gátló betegségek - Myelodysplasia, malignustumorok

4 Az anémiák típusai 2. Fokozott pusztulás - Örökletes vvt alaki elváltozások - Szferocitózis, elliptocitózis - Enzim deffektusok(piruvát-kináz, Glc-6-P dehydrogenáz) - Hemoglobinopátiák(sarlósejtes vérszegénység) - Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria(gpi-linker hiánya <- complement reakció) - Antitest mediálta lízis(autoimmun betegségek) - Meleg agglutinin(igg) ismeretlen okú, vagy plsle, CLL talaján kialakuló - Hideg agglutinin(igm) - Rh inkompatibilitás - Mechanikai károsodás - DIC - Hemolízis

5 Vérkép Kenet Retikulocita szám, % Retikulocita Hgb Szérum vas Transzferrin (CRP!) Transzferrin szaturáció Ferritin Szolubilis transzferrin receptor (stfr) stfr/log ferritin Haptoglobin Hgb elfo/kromatográfia Mentzer index Coombs test porfirin metabolitok Diagnosztikai markerek

6 Vérkép

7 Fehérvérsejt G/l Neutrofil % Limfocita % Monocita 0-12 % Eozinofil 0-7 % Bazofil % Vörösvértest T/l Hemoglobin g/l Hematokrit % MCV fl MCH pg MCHC g/l RDW %CV Trombocita G/l MPV 6-12 fl

8 MCV (Mean Cell Volume) = Htc / RBC A hematokrit és a vörösvérsejtszám hányadosa, az átlagos (vörösvér) sejttérfogatot adja. Mértékegysége: fl. 2. MCHC (Mean Cell Hemoglobin Concentration) = Hgb / Htc Átlagos celluláris hemoglobin koncentrációt jelent, értékét a hemoglobin koncentráció és a hematokrit hányadosa adja. Mértékegysége: g/l. MCH (Mean Cell Hemoglobin) = Hgb / RBC Az egy sejtre eső hemoglobin mennyiségét jelenti, a hemoglobin koncentráció és a vörösvérsejtszám hányadosa. Mértékegysége: pg. Az RDW(Red Cell Distribution Width) érték a vörösvérsejt-mcv szórása osztva az MCV átlagával, százalékban kifejezve, az esetleges poikilocytósis mérőszáma.

9

10 Eset 1. Fehérvérsejt 3,770! 4,000-10,000 Giga/l Neutrofil % 45,8 34,0-71,1 % Neutrofil (abs) 1,73 1,56-6,13 Giga/l Limfocita % 29,0 19,3-51,7 % Limfocita (abs) 1,09! 1,18-3,74 Giga/l Monocita % 15,1! 4,7-12,5 % Monocita (abs) 0,570 0,240-0,860 Giga/l Eozinofil % 2,6 0,0-5,8 % Eozinofil (abs) 0,100 0,000-0,360 Giga/l Bazofil % 0,5 0,0-1,2 % Bazofil (abs) 0,020 0,000-0,080 Giga/l Nem azonosíott FVS 6,800! <5,000 % Vörösvértest 2,21! 3,90-5,30 T/l Hemoglobin 79! g/l Hematokrit 23,0! 34,1-44,9 % MCV 103,7! 80,0-95,0 fl MCH 35,5! 26,0-33,0 pg MCHC g/l RDW 21,8! 11,6-14,4 %CV Trombocita 33,0! 140,0-440,0 Giga/l MPV 9,20! 9,40-12,40 fl

11 Kenet morfológiai elváltozások 1. Normál vvt 2. Macrocyta 3. Megalocyta 4. Hypersegmentált granulocyta

12 Név : Születési idõ : Nem: Férfi TAJ/belsõ AZ : Rendelés sorszáma: XXXXXXXX Minta : EDTA-s vér/plazma,jod_ver,se Beérkezés : :21 Leletkészítés : Beküldõ : B1F4 I.Belkl. Kardiológia+ito Beküldõ címe : Osztály tel. : Beküldõ orvos : Dr. Iránydiagnózis: I48H0 Pitvari fibrillatio és flutter Rendelõ megj. : Lelet közlésének módja: Vizsgálat Eredmény Referencia tart. Mértékegység Fehérvérsejt 12,500! 4,000-10,000 Giga/l Neutrofil % 59,1 34,0-67,9 % Neutrofil (abs) 7,36! 1,78-5,38 Giga/l Limfocita % 18,2! 21,8-53,1 % Limfocita (abs) 2,26 1,32-3,57 Giga/l Monocita % 7,4 5,3-12,2 % Monocita (abs) 0,925! 0,300-0,820 Giga/l Eozinofil % 13,7! 0,0-7,0 % Eozinofil (abs) 1,700! 0,000-0,540 Giga/l Bazofil % 1,6! 0,0-1,2 % Bazofil (abs) 0,205! 0,000-0,080 Giga/l Vörösvértest 4,53 4,50-6,00 T/l Hemoglobin 101! g/l Hematokrit 31,7! 40,1-51,0 % MCV 70,1! 80,0-95,0 fl MCH 22,4! 26,0-33,0 pg MCHC g/l RDW 19,4! 11,6-14,4 %CV Trombocita 202,0 140,0-440,0 Giga/l MPV 10,30 9,40-12,40 fl

13 Kenet morfológiai elváltozások Vashiányos anémia 1. Gyűrű alakú vvt 2. microcyta 3. Target sejt (alig látható) 4. limfocyta 5. Normál vvt

14 Vashiányos anémiák A vas megoszlása a szervezetben

15 Hepcidin -egyetlen ismert hormon a vas-anyagcserében -Hepatic bacteriocidal protein - Inaktiválja a ferroportint a bélhámsejtekben és a RES sejtjeiben -Diagnosztikai értéke: jelenleg nem tisztázott

16 Szérum vas Több mint 95% transzferrinhez kötve Vasat szállít a test különböző részeihez (pl. bél, máj, csontvelő, makrofágok) A szérum vas meghatározás rutin laboratóriumi teszt umol/l Alacsony vas szint : Vashiány Akut vagy krónikus gyulladás; menstruáció Magas vas szint: Vas túlterhelés Fogamzásgátló tabletta, terhesség, közvetlenül vasbevitel után (< ph2.0) 1. Transzferrin-Iron apotransferrin + Fe 3+ Ascorbate 2. Fe 3+ Fe Fe 2+ + FerroZine Colorcomplex

17 Transzferrin 77 kda molsúlyú fehérje A májban termelődik Minden transzferrin molekula két Fe 3+ (oxidált) iont köt meg A szérum vas 95%-át szállítja. Általában 30%-ban telitett vassal g/l Magas szérum transzferrin szint: Alacsony vasraktár Alacsony szérum transzferrin szint: Magas vasraktár Más állapotokban Emelkedett szint : magas ösztrogén szint (terhesség,orális kontraceptívum) Csökkent szint: malnutrició, krónikus májbetegség,krónikus betegségek (pl. tumor), fehérjevesztéses állapotok, veleszületett hiány,újszülöttek, akut fázis fehérje (negatív hatás). Mérés: Immuno-turbidimetriás teszt (immunesszé)

18 Transzferrin szaturáció Megadja %-os formában, hogy a transzferrin kötőhelyei hány százalékban telitettek vassal (TIBC,TVK) A szenzitivitás növelése érdekében két mérési paraméter eredményeit kombinálja normál érték 15-45% A legjobb szérum marker az emelkedett vasháztartás kimutatására Használható a vas túlterhelés szűrésére

19 Ferritin Vasraktár (főként máj) 460,000Da, apoferritin, 22 fehérje alegységből épül fel, molekulánként atom vasat képes megkötni. Kis része a keringésben is megtalálható (a szérum vas kevesebb mint 1%- át tartalmazza). Ellenőrzött formában raktározza és szabadítja fel a vasat a sejtekből. Normál érték szérumban: ug/l Alacsony szérum szint vashiányra utal Mérés: "ECLIA" (electrochemiluminescent immunoassay)

20 Transzferrinreceptor A transzferrinrőlátveszi és a sejtbe juttatja a vasat Felismeri és megköti a transzferrint A szolubilisasejtfelszíni receptor csonka formája a keringésben Magas szérum szint: vashiányban Alacsony szérum szint: vas túlterhelésben A vashiány diagnózisának felállításában, gyulladásos állapotokban van információs értéke

21 stfr/log ferritin, Retikulocita Hgb: Vashiány és krónikus betegséget követő anémia differenciáldiagnózisa 1. Ret-Hbnormál, stfr/log Ferritin alacsony: normál vasanyagcsere, krónikus anémia 2. Ret-Hbnormál, stfr/log Ferritin emelkedett: Látens vashiány 3. Ret-Hbalacsony, stfr/log Ferritin normál: Funkcionális vashiány krónikus betegségben 4. Ret-Hbalacsony, stfr/log Ferritin emelkedett: Vashiány

22 Porfíriák Ritka betegségcsoport, oka a hem bioszintézis enzimeinek működési zavara (enzim gyengeség). A porphyriák egy része autoszomális domináns módon öröklődik A maradék enzimaktivitás elégséges hem szintézist biztosít, de: Az érintett egyénekben a hem prekurzorok szaporodnak fel, melyek magas koncentrációban toxikusak. A betegség tüneteit súlyosbíthatják: gyógyszerek, kémiai anyagok, táplálékok és a napfény.

23

24

25 Kenet morfológiai elváltozások Sideroblastos anémia (hem szintézis zavara, öröklött (x-hez kötött) vagy szerzett, a vas a mitokondriumokban halmozódik fel)

26 Akut Porfíria Pl. akut intermittens porfíria idegrendszeri tünetek: - hasi fájdalom - tachycardia - izomgyengeség - görcsök - kóma krónikus porfíria Pl.: Porfíria cutanea tarda bőr tünetek: fotoszenzitivitás bőrpír, gyulladás bullózus dermatitis Számos gyógyszer és toxikus anyag kiválthatja Labor-diagnosztika: Minta: Vér, Vizelet, 24órás gyűjtött vizelet Mérés: direkt fotometrálás (uro- coproporphyrin) fotometria Ehrlich reakció után (DALA, PBG)

27 Hemoglobinopátiák Thalassemia major 1. erythroblast 2. Target sejtek 3. Polychromáziás vvt 4. Howell-Jolly testek 5. Limfocyta 6. granulocyta

28 Hemoglobin elektroforézis Hemoglobin A: 2 alfa és 2 béta Hemoglobin A2: 2 alfa és 2 delta Hemoglobin F: 2 alfa és 2 gamma

29 Normal Hgb

30 Sarlósejtes betegség

31 Alfa Thalassemia - 4 allél/ beteg a súlyosság az érintett allélok számától függ - béta globinfeleslegben van: HgbH (4 béta globinbólálló Hgb) - sárgaság, fáradékonyság, anémia, splenomegalia

32 Béta Thalassemia - sárgaság, fáradékonyság, mikrociter anémia, splenomegalia - minor (1 allélt érint, a mutáció nem okoz súlyos funkcióromlást), intermedier és major forma (homozigóta, mindkét allélt érinti, a mutáció súlyosabb funkcióromlással jár) - Hbg A2 emelkedett

33 A hemoglobin szintézis és lebomlás további kiegészítő vizsgálati lehetőségei Genetikai vizsgálatok az örökletes betegségek; hemoglobinopátiák, enzimdeffektusok felderítésére Vesefunkció monitorizálása Gyulladásos markerek (CRP, süllyedés, interleukinok, stb.) Bilirubin, májfunció haptoglobin

34 Kapcsolódó vizsgakérdések: 19. Az anémiák vizsgálati lehetőségei a klinikai laboratóriumban. 20. A hemoglobinopátiák. Porfirin anyagcsere zavarok és vizsgálati lehetőségei. 21. A vas metabolizmus zavarai.