1 OMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 60 Omega-3-sav-etilészterek 60 01/2009:2063 DEFINÍCIÓ Az alfa-linolénsav (C18:3 n-3), a moroktsav (sztearidonsav; C18:4 n-3), az ejkozatetraénsav (C20:4 n-3), a timnodonsav (ejkozapentaénsav) (C20:5 n-3; EPS), a henejkozapentaénsav (C21:5 n-3), a klupanodonsav (C22:5 n-3) és a cervonsav (dokozahexaénsav) (C22:6 n-3; DHS) etilésztereinek elegye. Az omega-3-savetilésztereket az Engraulidae, Carangidae, Clupeidae, Osmeridae, Salmonidae és Scombridae családokból származó halfajták olajának átészterezésével, majd ezt követő, vízgőzdesztillációt is magában foglaló fizikai-kémiai tisztító eljárásokkal állítják elő. Az anyag omega-3-sav-etilésztereket, ezen belül EPS- és DHSetilésztereket legalább a 2063.-1. táblázatban feltüntetett mennyiségben tartalmazzon. Összes omega-3- sav-etilészter EPS- és DHS- etilészter 2063.-1. táblázat EPS- etilészter Legkisebb tartalom (%) DHS- etilészter 65 50 25 20 60 50 40 55 50 40 Engedélyezett antioxidánsokat az illetékes hatóság által megállapított szintet meg nem haladó koncentrációban tartalmazhat. SAJÁTSÁGOK Küllem: világossárga folyadék. Enyhén halszagú.
2 Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; acetonban, etanolban (96%), heptánban és metanolban nagyon bőségesen oldódik. AZONOSÍTÁS A. Az EPS- és DHS-etilészter tartalmi meghatározása során kapott kromatogramokat értékeljük. Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramján az ejkozapentaénsav-etilészternek és a dokozahexaénsav-etilészternek megfelelő csúcsok retenciós ideje egyezzen meg az összehasonlító oldat kromatogramján látható megfelelő csúcsokéval. B. A vizsgálandó anyag feleljen meg az összes omega-3-sav-etilészter-tartalomra előírt követelménynek. VIZSGÁLATOK Abszorbancia (2.2.25): legfeljebb 0,60, 233 nm-en. A vizsgálandó anyag 0,300 g-ját R trimetilpentánnal 50,0 ml-re hígítjuk. Az így készített oldat 2,0 ml-ét R trimetilpentánnal 50,0 ml-re tovább hígítjuk. Savszám (2.5.1): legfeljebb 2,0. A vizsgálathoz az anyag 10 g-ját az előírt oldószerelegy 50 ml-ében oldjuk. Anizidin-érték (2.5.36): legfeljebb 20,0. Peroxidszám (2.5.5/A): legfeljebb 10,0. Oligomerek és részleges gliceridek. Méretkizárásos kromatográfia (2.2.30). Vizsgálati oldat. 50,0 mg vizsgálandó anyagot R tetrahidrofuránnal 10,0 ml-re hígítunk. Összehasonlító oldat. 100 ml-es mérőlombikban 50 mg R monodokozahexaenoint, 30 mg R didokozahexaenoint és 20 mg R tridokozahexaenoint R tetrahidrofuránnal 100,0 ml-re oldunk. 1. oszlop: méretei: l = 0,3 m, Ø = 7,8 mm, állófázis: R sztirol divinilbenzol-kopolimer (7 µm), pórusméret 10 nm. 2. és 3. oszlop (az injektorhoz legközelebb):
3 méretei: l = 0,3 m, Ø = 7,8 mm, állófázis: R sztirol divinilbenzol-kopolimer (7 µm), pórusméret 50 nm. Mozgófázis: R tetrahidrofurán. Áramlási sebesség: 0,8 ml/perc. Detektálás: differenciál-refraktométerrel. Injektálás: 40 µl. Rendszeralkalmasság: összehasonlító oldat: elúciós sorrend: tridokozahexaenoin, didokozahexaenoin és monodokozahexaenoin; csúcsfelbontás: a monodokozahexaenoin és a didokozahexaenoin között legalább 2,0; a didokozahexaenoin és a tridokozahexaenoin között legalább 1,0. Az oligomerek és a részleges gliceridek együttes százalékos arányát az alábbi kifejezés segítségével számítjuk ki: ahol B 100, A A = a kromatogramon látható összes csúcs területének összege, B = az etilészter-csúcsokénál kisebb retenciós idejű csúcsok területének összege. Az etilészter-csúcsok, amelyek egy szét nem vált kettős csúcs alakjában is megjelenhetnek, a kromatogramon látható legnagyobb csúcsok (2063.-1. ábra). Követelmény: oligomerek és részleges gliceridek együttesen: legfeljebb 7,0%.
4 az x-tengely felirata: idő[perc] 1. oligomerek 2. monogliceridek 3. zsírsav-etilészterek 2063.-1. ábra Kromatogram az omega-3-sav-etilészterek 60 Oligomerek és részleges gliceridek vizsgálatához
5 az x-tengely felirata: idő[perc] 1. C16:0 5. C18:2 n-6 9. C20:1 n-9 12. C20:4 n-6 16. C21:5 n-3 2. C18:0 6. C18:3 n-3 9a. C20:1 n-11 13. EPS 17. C22:5 n-6 3. C18:1 n-9 7. C18:4 n-3 10. C20:1 n-7 14. C22:1 n-11 18. C22:5 n-3 4. C18:1 n-7 8. C20:0 11. C20:4 n-3 15. C22:1 n-9 19. DHS 2063.-2. ábra A tartalmi meghatározás során kapott kromatogram TARTALMI MEGHATÁROZÁS EPS- és DHS-etilészter (2.4.29). A csúcsok azonosításához lásd a 2063.-2. ábrát. Összes omega-3-sav-etilészter (2.4.29). Lásd a 2063.-2. ábrát. ELTARTÁS Inert gáztérben, légmentesen záró tartályban, fénytől védve.
6 FELIRAT A feliraton fel kell tüntetni: az összes omega-3-sav-etilészter tartalmat, az EPS- és DHS-etilészter-tartalmat.