AMIKACINUM. Amikacin

Átírás

1 07/2012:1289 AMIKACINUM Amikacin C 22 H 43 N 5 O 13 M r 585,6 [ ] DEFINÍCIÓ 6-O-(3-Amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-4-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1-N-[(2S)-4- amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-d-sztreptamin. Kanamicin-A-ból előállított antibiotikum. Fermentációs termék félszintetikus származéka. Tartalom: 96,5 102,0% (vízmentes anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér por. Oldékonyság: vízben mérsékelten oldódik; metanolban kevéssé oldódik; acetonban és etanolban (96%) gyakorlatilag nem oldódik. AZONOSÍTÁS A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS amikacinnal. B. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. 25 mg vizsgálandó anyagot R vízzel 10 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (a). 25 mg CRS amikacint R vízzel 10 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (b). 5 mg CRS kanamicin-monoszulfátot a vizsgálati oldat 1 ml-ében oldunk, és az oldatot R vízzel 10 ml-re hígítjuk. Lemez: R VRK szilikagél lemez. Kifejlesztőszer: R diklórmetán R ammónia oldat R metanol ( V/V). Felvitel: 5 µl.

2 Kifejlesztés: a lemezmagasság háromnegyedéig. Szárítás: levegőn. Előhívás: a lemezt R1 ninhidrin oldattal bepermetezzük, majd 5 percig 110 C-on melegítjük. Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat: a kromatogramon két, egymástól jól elkülönülő folt látható. Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramjának főfoltja helyét, színét és méretét tekintve egyezzék meg az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főfolttal. VIZSGÁLATOK ph (2.2.3): 9,5 11,5. A vizsgálathoz 0,1 g anyagot R szén-dioxid-mentes vízzel 10 ml-re oldunk. Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): +97 és +105 között (vízmentes anyagra). A vizsgálathoz 0,50 g anyagot R vízzel 25,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Vizsgálati oldat. 25 mg vizsgálandó anyagot az A-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (a). 1,0 ml vizsgálati oldatot az A-mozgófázissal 100,0 ml-re hígítunk. Összehasonlító oldat (b). 1,0 ml a) összehasonlító oldatot az A-mozgófázissal 10,0 ml-re hígítunk. Összehasonlító oldat (c). 5 mg CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt amikacint (amely A-, B-, F- és H-szennyezőt is tartalmaz) az A-mozgófázissal 10 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (d). 5,0 mg CRS amikacin-i-szennyezőt az A-mozgófázissal 20,0 ml-re oldunk. Az oldat 1,0 ml-ét az A-mozgófázissal 100,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: méretei: l = 0,25 m; = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt oktadecilszililezett szilikagél (5 µm); hőmérséklet: 40 C. Mozgófázis: A-mozgófázis: R szén-dioxid-mentes vízzel készült, gázmentesített elegy, amely 1,8 g/l R nátriumoktánszulfonátot, 20 g/l R1 vízmentes nátrium-szulfátot, 1,4 %V/V R tetrahidrofuránt és R hígított foszforsavval ph 3,0-ra beállított, 5 %V/V R 0,2 M kálium-dihidrogén-foszfát oldatot tartalmaz; B-mozgófázis: R szén-dioxid-mentes vízzel készült, gázmentesített elegy, amely 1,8 g/l R nátriumoktánszulfonátot, 28 g/l R1 vízmentes nátrium-szulfátot, 1,4 %V/V R tetrahidrofuránt és R hígított foszforsavval ph 3,0-ra beállított, 5 %V/V R 0,2 M kálium-dihidrogén-foszfát oldatot tartalmaz; Idő (perc) A-mozgófázis (%V/V) B-mozgófázis (%V/V) , ,0-38, ,

3 Áramlási sebesség: 1,0 ml/min. Oszlop utáni oldat: 1 térfogatrész R karbonátmentes nátrium-hidroxid oldat és 24 térfogatrész előzetesen gázmentesített R szén-dioxid-mentes víz elegye, amelyet 375 μl-es polimer keverő-hurok alkalmazásával pulzálásmentesen adagolunk az oszlopon áthaladó eluenshez. Oszlop utáni oldat áramlási sebessége: 0,3 ml/perc. Detektálás: pulzáló amperometriás detektorral, vagy ezzel egyenértékű arany indikátor-elektród és ezüst/ezüst-klorid összehasonlító elektród alkalmazásával, a cellatestet képező rozsdamentes acél segédelektróddal, az alkalmazott potenciálprogram: + 0,05 V mérő, + 0,75 V oxidációs és 0,15 V redukciós potenciál, az alkalmazott műszernek megfelelő pulzus-időtartammal. Injektálás: 20 µl. Szennyezők azonosítása: az A-, a B-, az F- és a H-szennyező azonosításához a CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt amikacinhoz mellékelt kromatogramot és a c) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; az I-szennyező azonosításához a d) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók az amikacinra (retenciós ideje kb. 28 perc) vonatkoztatva: I-szennyező kb. 0,13; F- szennyező kb. 0,92; B-szennyező kb. 0,95; A-szennyező kb. 1,62; H-szennyező kb. 1,95. Rendszeralkalmasság: c) összehasonlító oldat: hegy-völgy arány: legalább 5, ahol H p = a B-szennyezőnek megfelelő csúcs alapvonaltól mért magassága és H v = a B-szennyező csúcsát az amikacin csúcsától elválasztó görbeszakasz minimumának az alapvonaltól mért távolsága; szükség esetén módosítjuk a mozgófázisban a tetrahidrofurán mennyiségét. Követelmények: A-, B-, F- és H-szennyező: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5-szerese (0,5%); I-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a d) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,5%); egyéb szennyezők: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5-szerese (0,5%); összes szennyező: csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 1,5-szerese (1,5%); elhanyagolási határ: a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,1%). Víztartalom (2.5.12): legfeljebb 8,5%. 0,200 g anyagot vizsgálunk. Szulfáthamu (2.4.14): legfeljebb 0,5%. 1,0 g anyagot vizsgálunk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (2.2.29). Vizsgálati oldat. 50,0 mg vizsgálandó anyagot a mozgófázissal 10,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat. 50,0 mg CRS amikacint amozgófázissal 10,0 ml-re oldunk. Oszlop: méretei: l = 0,25 m; = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt oktadecilszililezett szilikagél (5 µm);

4 hőmérséklet: 40 C. Mozgófázis: R szén-dioxid-mentes vízzel készült, gázmentesített elegy, amely 1,8 g/l R nátriumoktánszulfonátot, 20 g/l R1 vízmentes nátrium-szulfátot, 5,8 %V/V R1 acetonitrilt és R hígított foszforsavval ph 3,0-ra beállított, 5 %V/V R 0,2 M kálium-dihidrogén-foszfát oldatot tartalmaz. Áramlási sebesség: 1,0 ml/min. Detektálás: spektrofotométerrel, 200 nm-en. Injektálás: 20 μl. Kromatografálási idő: az amikacin retenciós idejének 1,3-szerese. Retenciós idő: amikacin kb. 30 perc. Rendszeralkalmasság: összehasonlító oldat: szimmetriafaktor: legfeljebb 1,5, az amikacin csúcsára számolva; szükség esetén módosítjuk az R1 acetonitril mennyiségét a mozgófázisban; ha a retenciós idő túl rövid, csúcshasadás fordulhat elő; ismételhetőség: 6 injektálás után a szórás legfeljebb 1,5%. A százalékos C 22 H 43 N 5 O 13 -tartalmat a CRS amikacin deklarált tartalmának figyelembe vételével számítjuk ki. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: A, B, F, H, I. Egyéb kimutatható szennyezők (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10.) című általános fejezetet): C, D, E, G. A. 4-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-6-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1-N- [(2S)-4-amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-L-sztreptamin,

5 B. 4-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-6-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1,3-N,Nbisz[(2S)-4-amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-L-sztreptamin, C. 4-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-6-O-[3-[[(2S)-4-amino-2-hidroxibutanoil]amino]-3- dezoxi-α-d-glükopiranozil]-2-dezoxi-d-sztreptamin, D. 6-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-4-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-2- dezoxi-d-sztreptamin (kanamicin), E. 4-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-6-O-[6-[[(2S)-4-amino-2-hidroxibutanoil]amino]-6- dezoxi-α-d-glükopiranozil]-2-dezoxi-l-sztreptamin, F. 6-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-4-O-[6-[(2S)-4-amino-2-hidroxibutanoil]amino-6- dezoxi-α-d-glükopiranozil]-1-n-[(2s)-4-amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-d-sztreptamin,

6 G. 6-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-4-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1-N- [(2R)-4-amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-D-sztreptamin, H. 6-O-(3-amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1-N-[(2S)-4-amino-2-hidroxibutanoil]-4-O-(2,6- diamino-2,6-didezoxi-α-d-glükopiranozil)-2-dezoxi-d-sztreptamin, I. (2S)-4-amino-2-hidroxibutánsav.