Biotermék technológia - 2

Méret: px
Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "Biotermék technológia - 2"

Átírás

1 Biotermék technológia - 2 Msc. Biomérnök hallgatók részére Rekombináns fehérjetermékek előállítása c. alfejezet 2. Rész Előadó: Ballagi András Richter Gedeon NyRt. BME 2015.nov.-dec. ballagi@richter.hu 1

2 Tartalom A rekombináns biotechnológia területei A gyógyszeripari biotechnológia sajátosságai Gazdaszervezetek Műveletek baktériumokkal Klónozás Sejtbankok Fehérjemolekulák előállítása Refolding Példa GCSF és Peg-GCSF előállító technológia Műveletek emlős sejtekkel Klónozás Sejtbankok Tenyésztések Tenyésztési módszerek Reaktorok (labor, ipari, egyszerhasználatos) 1. Rész

3 Tartalom folyt. Monoklonális antitestek Monoklonális antitestek gyártási technológiája Véralvadási fehérjék: alvadás gátlók és alvadási faktorok VIII faktor 2. Rész Biosimiláris gyógyszerek

4 Antitestek Az ellenanyag molekulák nagy része az úgynevezett immun-globulin (Ig) fehérjecsalád tagja. Magát a folyamatot az antigén (vírus, baktérium, rákos sejt, idegen test, parazita) megjelenése határozza meg. Feladatuk, hogy specifikusan az adott antigénhez kapcsolódva olyan folyamatokat indítsanak el ami az antigén hatástalanításához vezet: vírusinaktiválás baktériumok agglutinálása megjelölés fagocitózisra Az antigén felületén a kapcsolódási rész: epitóp 4

5 Az antitestek fiziológiás szerepe Az antitestek nagyon specifikusak, minden antitest egy specifikus antigént ismer fel. Az antitestek a B limfociták felületén keletkeznek és így kerülnek a vérbe. Amikor pl. egy baktérium bekerül a sebbe, a B limfociták kieresztik az antitesteket, amelyek hatástalanítják a baktériumokat és bejuttatják őket a faló sejtekbe. A természetes antitestek poliklonálisak, mert több fajta B sejtből származnak, több epitóp ellen. 5

6 Az antitestek szerkezete Fehérje 2 nehéz lánc 2 könnyű lánc Diszulfid hidak Variábilis régió Antigén felismerő Konstans régió Effektor funkciók Osztály és alosztály 6

7 Az antitestek szerkezetének ábrázolásai 7

8 Complementarity determining regions (CDR) Az antitestek működésének ereje a CDR régióknak köszönhetően. Mindegyik CDR hurok (loop) 5-7 AA hosszú. 8

9 Antitestek A szervezet ~ féle különböző antitest előállítására képes. Ennek alapja, hogy antitest doménjei sok változatban tárolódnak a génállományban, és a kiírás során ezek random módon kombinálódhatnak. 9

10 Antitestek A könnyű lánc kétféle izoformában létezik, ezek mindkét doménje is több változatban létezik, ami további kombinációkat tesz lehetővé: Lehetséges Lehetséges Lehetséges Domének Génváltozatok kombinációk kombinációk kombinációk Könnyű lánc Nehéz lánc Vκ 40 Jκ 5 Vλ 31 Jλ 4 V H 51 D H 25 J H féle κ lánc 124 féle λ lánc 324 féle könnyű lánc 7650 féle nehéz lánc 2.5 x 10 6 féle antitest 10

11 Az antitestek glikozilálása A nehéz láncokon egy-egy N-glikozilálási hely van (Asn-297). 11

12 Poliklonállis és monoklonális antitestek keletkezése

13 A Mab-ok előállítása hibridóma technikával A monoklonális antitestek egyformák, mert egyfajta immunsejtből keletkeztek, amely immunsejtek egyetlen sejttől származnak. A kívánt monoklonális antitestet termelő sejt egyetlen, a megfelelő antitestet termelő B sejtből és egy tumor sejtből (myeloma sejt) keletkezik fúzióval. Ezeket hybridómáknak nevezzük. A monoklonális antitestek azonos antigén kötő hellyel rendelkezik, így ugyanahhoz az epitóphoz kapcsolódnak, és ugyanahhoz az antitest osztályhoz tartoznak. 13

14 Monoklonális ellenanyag előállítás menete egér/patkány beoltása antigénnel (több lépcsőben) lép vagy nyirokcsomó eltávolítása, homogenizálása lépből származó plazmasejtek + egér tumorsejtek (plazmacitóma/mielóma sejtek) fúziója Az ellenanyag termelő klónok azonosítása, izolálása A termelő hibridómák folyamatosan szaporodnak és ellenanyagot termelnek, ami a tápoldatban feldúsul 14

15 Miért hibridóma? Az antitesteket termelő plazmasejtek nem képesek osztódni, nem lehet sejttenyészetben szaporítani és termeltetni. Csak a tumorsejtek képesek korlátlanul osztódni (immortality). E két tulajdonság egyesítésével kaphatunk olyan sejtvonalat, amely: - monoklonális antitestet termel - korlátlanul szaporítható 15

16 Monoklonális ellenanyagok - egyetlen B-limfocita klón termékei - homogének (antigénspecifitás, affinitás, izotípus) - kiszámítható hatás, kevés mellékhatás - előnye a poliklonális ellenanyaggal szemben, hogy a meghatározott specificitású és izotípusú ellenanyagok nagy mennyiségben és azonos minőségben ( pharmacology-grade ) állíthatók elő - jelentős a szerepük biokémia, a molekuláris genetika, és a gyógyászat területein 16

17 Hibridóma szelekció, a HAT Trick A fúzió után többféle sejt van jelen: fuzionálatlan plazmasejtek fuzionálatlan tumorsejtek hibridómák ezek közül kell izolálni a hibridómákat. A szelekció azon alapul, hogy a tumorsejtekbe még a fúzió előtt két anyagcsere markert építenek be (két enzim hiánya) HAT médiumon (hipoxantin, aminopterin, timidin) csak a fúzionált sejtek képesek szaporodni. 17

18 Hibridóma szelekció, a HAT Trick 18

19 Hibridóma szelekció, a HAT Trick DNS szintézis gátlás = sejthalál PRPP: phosphoribosylpyrophosphate, HGPRT: Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase, TK: timidine kinase 19

20 Hibridóma szelekció, a HAT Trick Kerülő út: hypoxantin és timidin adagolással = szaporodás PRPP: phosphoribosylpyrophosphate, HGPRT: Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase, TK: timidine kinase 20

21 Hibridóma szelekció, a HAT Trick HGPRT és TK hiányos mutánsok hiába kapnak segítséget = sejthalál Túlélés a mieloma sejtek számára csak a B sejttől kapott HGPRT és TK enzimekkel lehetséges PRPP: phosphoribosylpyrophosphate, HGPRT: Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase, TK: timidine kinase 21

22 Poliklonálok és monoklonálok összehasonlítása Poliklonálok Monoklonálok Előállítás Sokfajta B sejt Egyetlen B sejt Kötödés Antitest osztály Antigén kötő hely Az immunizálásban használt összes antigén minden v. majdnem minden epitópjához Különböző osztályok (izotípusok) keveréke Különböző antigén kötő helyekkel rendelkeznek Egyetlen antigén egyetlen epitópjához Mind ugyanabba az antitest osztályba tartozik Minden antitest ugyanazzal az antigén kötő hellyel rendelkezik 22

23 A monoklonális antitestek felhasználása Az antitestek több célra is felhasználhatók: 1. Nem terápiás antitestek: Biokémiai kutatások Immun-analitikai eljárások Feldolgozási műveletekben (pl. affinkromatográfia) 2. Humán (in vivo) felhasználású antitestek: Diagnosztikában (pl. Prostascint) Terápiában (elsősorban tumorok ellen) 23

24 A terápiás monoklonális antitestek hatásmechanizmusai 1.A: 1 B: A Célmolekulák blokkolása Receptorhoz kötődve megakadályozza az aktiválást Az aktiváló molekulához csatlakozva akadályozza meg az aktiválást A Mab jelző molekula. Az apoptózist és a sejtosztódást befolyásoló mediátorok kapcsolása az effektor csoportokhoz Csupasz Mab 2. A varázslatos lövedék (Magic Bullet) célra Konjugált Mab specifikus komponensek kapcsolása az effektor csoportokhoz. Toxinok, radioaktív anyagok, enzimek. 24

25 Monoklonális antitestek a tumor terápiában 1. Közvetlen Mab hatás pl: receptor blokkolás 2. Immun konjugátumok pl: Antitest irányított enzim prodrug terápia, v. Antitest függő, sejt mediált citotoxicitás 3. Több lépéses célzás 25

26 Antitest gyógyszer konjugátumok (2. csoport tagjai) Monoklonális antitestek biológiailag aktív gyógyszerekkel kapcsolva kapcsoló (linker) molekulákon keresztül. Csökkentik a mellékhatásokat és széles terápiás ablakot biztosít Pl. Doxorubicin, Duanomycin, Chlorambucil stb. lehet a kapcsolt molekula. 26

27 Antibody-directed enzyme prodrug therapy (ADEPT) (2. csoport) Az antitesthez enzimet kötnek, mely a később sziszté- másan bevitt, ártalmatlan prodrug vegyületet lokálisan alakítja a citotoxikus, hatékony metabolittá 27

28 Immuno-liposzómák (2. csoport) Az immuno-liposzómak antitest és liposzóma összekapcsolását jelenti. A liposzómák képesek gyógyszerek vagy terápiás nukleotidszármazékok szállítására, így a szerek célzottan hatnak a tumorsejtekre. Ez a technológia még gyerekcipőben jár, de már sikeresen alkalmazták in vivo körülmenyek között tumorsejt növekedés gátlásra. Agytumor és a mellrák kezelésére már használják. 28

29 Paul Erlich álma a Magic Bullet-ről megvalósult. A monoklonális antitestek jelenleg a legfontosabb, legígéretesebb és leggyorsabban fejlődő területe a rák elleni küzdelemnek. 29

30 Érvek a Mab-ok használatával kapcsolatban Ellene Szájon át nem adható Magas szükséges dózis Immunogenicitás Gyenge behatolás szilárd tumorokba Lehetséges keresztreakciók más szövetekkel COG Lehetséges vírus fertőzés Nehézségek a nagyléptékű termelésben Mellete Biztonságosság Magas szelektivitás Erős hatás A lehetséges célmolekulák széles választéka Egyéb gyógyszer hiánya, vagy meglévő gyógyszer gyenge hatása 30

31 A Mab-ok fejlődése 100% egér 60-70% humán 90-95% humán 100% humán Rágcsáló eredetű Mab humán felhasználását korlátozó tényezők Rövid féléletidő a vérben A rágcsáló IgG sajátként való felismerése (elismerése) korlátozott HAMA v. HACA válasz (de van HAHA válasz is!) Alacsony fokú hatásosság 31

32 A Mab-okkal kapcsolatos Nobel-díjak 32

33 Humán és humanized Mab-ok létrehozásának módszerei 33

34 Monoklonális antitestek elnevezésének rendszere Előtag cél forrás utótag varies -o(s)- bone -u- human -mab -vi(r)- viral -o- mouse -ba(c)- bacterial -a- rat -li(m)- immune -e- hamster -le(s)- infectious lesions -i- primate -ci(r)- cardiovascular -xi- chimeric -mu(l)- musculoskeletal -zu- humanized -ki(n)- interleukin as target -axo- rat/murine hybrid -co(l)- -me(l)- -ma(r)- -go(t)- -go(v)- -pr(o)- -tu(m)- -neu(r)- -tox(a)- -fu(ng)- colonic tumor melanoma mammary tumor testicular tumor ovarian tumor prostate tumor miscellaneous tumor nervous system toxin as target fungal Abciximab megakadályozza a vörös vértestek aggregátumainak kialakulását. A szó felbontható: ab- + -ci(r)- + -xi- + -mab. Amiből látható, hogy egy olyan kiméráról van szó, amely érrendszeri kezelést tesz lehetővé. 34

35 Monoklonális antitestek nevezéktana Az előtag nem hordoz semmiféle imformációt, csak egyedinek kell lennie, általaban utalás a gyógyszer nevére A második tag utalás a gyógyszer célpontjára (pl -ci(r)- keringési rendszerre ható) A következő tag a forrásról, illetve az antitest típusáról nyújt információt Végül pedig a -mab utótag következik = monoclonal antibody) Ellenőrző kérdés: Melyik gyógyszerről lehet szó, és mit lehet tudni róla? tras- + -tu(m)- + -zu- + -mab.??? 35

36 FDA által jóváhagyott Mab-ok 36

37 Mab-ok a jövőben 37

38 Érdekes alternatívák: Mab fragmentumok Kis antitest fragmentumok (Fv vagy Fab) szintén alkalmasak citokinek blokkolására Előnyük: jobban behatolnak a szövetekbe Antitest fragmentumok összekapcsolása dimerekké v. tetramerekké. Előnyük: megnövekedett hatás Mesterséges Diabodies (bispecifikus Mabok) Két különböző antigén specifitású antitest kapcsolása (egyik a célfehérjét, a másik az effektort kapcsolja) Összekapcsol effektor sejteket

39 Érdekes alternatívák: Nanobody A Nanobaody kb. 110 aminosavból álló polipeptid lánc egy nehézláncú variábilis doménnel Raymond Hamers fedezte fel teve vérben. A könnyű lánc hiányzik, de ugyanaz az antigén kötődés, mint a normál Mabnál. A szerkezet ellenállóvá teszi hővel és alacsony ph-val szemben. => Fejlesztések nanobody orális készítmények irányába. Bélbetegségek, pl. malacok E.coli okozta hasmenése ellen már van. Egyéb fertőzések, bélrák ellen fejlesztés. 39

40 A Mab-okkal kapcsolatos mellékhatások Allergén reakciók, pl. viszketés Influenza szerű szimptómák: levertség, láz, izomfájdalom, rossz közérzet Hasmenés Hányinger Kiütések Súlyos esetben anafilaxiás sokk 40

41 Tartalom folyt. Monoklonális antitestek Monoklonális antitestek gyártási technológiája Véralvadási fehérjék: alvadás gátlók és alvadási faktorok VIII faktor 2. Rész Biosimiláris gyógyszerek

42 A termék minőségi tulajdonságai (Quality Attributes) Identity Process related impurities Amino acid sequence Disulfide-bridges (SH-bonds) Higher order structure Thiols Cell substrate-derived impurities HCDNA HCP Cell culture derived impurities (media components) Insulin Pluronic F-68 Antifoam agent Downstream-derived impurities Protein A Purification buffer components Viral purity Excipients Endotoxins, microbial purity 42

43 A termék minőségi tulajdonságai (Quality Attributes) Product related impurities and variants Charge heterogeneity C-terminal Lys-heterogeneity N-terminal Glutamine Deamidation (and pe formation) Oxidation Glycosylation Galactosylation Afucosylation Sialylation High mannose content Non-glycosylated heavy chain α-gal epitope Aggregation Glycation Fragmentation 43

44 A termék minőségi tulajdonságai (Quality Attributes) Biological activity Characterization and physical tests of the RGB-03 solution CD20 binding assay Binding to relevant Fcγ receptors (CD16a, CD32a, CD64) Binding to FcRn Binding to complement (C1q) ADCC CDC Cytokine release assay Induction of apoptosis Colour Clarity/opalescence Osmolality ph Concentration, drug content 44

45 A fejlesztési folyamat Aminosav szekvencia (meghatározva, vagy irodalmi), Analitikai arzenál kialakítása A könnyű és nehéz lánc optimálása számításokkal (Genart) A könnyű és nehéz lánc DNS-ének szintézise és ideigl. plazmidba helyezése A klónozó plazmid konstrukciója és transzfekciója CHO sejtekbe elektroporációval Minipoolok és később egyedi klónok kiválasztása a növekedési képesség, a termelési képesség és a molekula minőség alapján (HTS módszerek előnyös alkalmazása) A termelő klón és egy követő klón kiválasztása) RCB létrehozása Upstream technológia fejlesztés és optimalizálás Downstream fejlesztés és optimalizálás Analitikai módszerek továbbfejlesztése, MCB, WCB létrehozása Léptéknövelés és termelési próbák, dokumentációk elkészítése, Preklinikai és F1 anyagok elkészítése, Technológiai transzfer a termelő helyre

46 Kodon optimalizáció és génszintézis A primer szerkezet pontos meghatározása után egy CRO meghatározhatja az optimális kódokat az egyes aminosavakhoz, amelyek a leggyorsabb fehérjeszintézist biztosítják. GeneOptimizer Software (Geneart),. Pl. a következő főbb megfontolásokat kell figyelembe venni: A CHO kódhasználata statisztikai alapon A G/C arány úgy legyen beállítva, hogy a m-rna féléletideje minél hosszabb legyen: a (túl magas (>80%) és túl alacsony (<30%) G/C arányok kerülendők. Az expressziót lassító szekvenciák kerülése pl. RNS másodlagos szerkezetet okozó szekvenciák Az optimális szekvencia alapján szintetikus úton készül el a könnyű és a nehéz lánc DNSe, ami plazmidba tehető. 46

47 A géneket tartalmazó vektorok szerkezete Dicisztronos vektor a CMV és a SV40 vírus gén promotere által szabályozott. és tartalmazza a hph szelekciós gént (hygromycin phosphotranspherase) Ezen kívül szoktak gének lenni az E.coliban való manipulációhoz (ori, amp), és esetleg olyan elemek, amelyek a DNS vektor kromoszómába történő stabil beültetését és a későbbi reprodukálható termelést szabályozzák (lsd. a korábbi ábrát erről. ) 47

48 A Mab glikozilációja 48

49 A Mab glikozilációja Classification of N-linked oligosaccharides. Panels A, B and C present a high-mannose, a hybrid and a complex tetra-antennary oligosaccharide, respectively. Highlighted by a box is the Man3GlcNAc2 core structure present in all N-linked glycans Panel D shows the most common glycans observed on the Fc of mabs 49

50 Glikozilációs mintázat optimálása a tápoldat összetételével 50

51 Milyen hibás termékek keletkezhetnek? ProteomeLab TM SDS-Gel Resolving Power IgG Purity and Heterogeneity Assay by CE

52 Mab termelő eljárás emlős sejttel tenyésztési sor Media Prep HEAT COOL Media Pasteurizer Vial Thaw / Inoculum Expansion 50-Liter 500-Liter 5000-Liter 20,000-Liter 52

53 Mab termelő eljárás emlős sejttel Downstream 1. From the culture Virus Inactivation rprotein A Dia: 1 meter CV: 236 L Bed: 30cm Depth Filter 75m 2 Disc-Stack Centrifuge A potenciálisan előforduló burkos vírusok eltávolítása A Mab molekulák befogása affinitás elven, a HCP, a HCDNA és más szennyezők eltávolítása, és a Mab bekoncentrálása Sejttörmelék eltávolítása Sejtek eltávolítása 53

54 Mab termelő Mab termelő eljárás emlős eljárás sejttel Downstream Downstream Cation Exchange Dia: 1.6m CV: 600L Bed: 30cm Intermediate Storage Anion Exchange Dia: 1.6m CV: 600L Bed:30cm Intermediate Storage Viral Filtration 20m 2 Savas töltésű variánsok és HCP eltávolítása Aggregátumok, vírusok, HCP és HCDNA eltávolítása További (gyakorlatilag az összes) potenciális vírusok eltávolítása 54

55 Mab termelő Mab termelő eljárás emlős eljárás sejttel Downstream Downstream I.B.I CryoPreservation System Hosszú idejű tárolás Bulk Filtration (BDS) 3m 2 A potenciálisan előforduló mikrobiális szennyezők eltávolítása, 0,2 µm szűrő (low bioburden) UF/DF Step 80m 2 Puffercsere a végleges tároló pufferre és a Mab koncentráció beállítása Intermediate Storage Hydrophobic Interaction Dia: 1.6m CV: 600L Bed: 30cm További aggregátumok és HCP eltávolítása 55

56 Kromatográfiás oszlopok léptéknövelése

57 Protein A kromatográfia - Az eluens ph-ja és a terhelés jelentősen befolyásolja a HCP mennyiségét. - A terhelés, áramlási sebesség és a frakciószedés vége jelentősen befolyásolja a kihozatalt - Az aggregátum képződést és a deamidációt egyik vizsgált paraméter sem befolyásolta - A terhelés és frakciószedés vége kritériumának kombinálásával a frakciók Mab koncentrációja 2-20 g/l között változott, ami jóval alacsonyabb, mint a vírusinaktiválás során vizsgált legnagyobb koncentráció (35g/l).

58 Protein A kromatográfia

59 Protein A kromatográfia Gyanta élettartam: Protein A kromatográfia Élettartam: legalább 250 ciklus Kismértékű kitermelés csökkenés, de a minőségi paraméterek nem változtak.

60 Vírus inaktiválás - ph beállítása 3,5-re ecetsavval perc állás szobahőmérsékleten - ph beállítása 5,0-re - szűrés

61 Vírus inaktiválás A maximális időt a kationcserés kromatográfia aggregátum eltávolító képessége határozza meg (180 perc, +3σ felső határ 3,1%). Ezt a CEX képes 1%-ra csökkenteni.

62 Vírus inaktiválás Vírus inaktiválás

63 Vírus inaktiválás Következtetés: ph 3,2 4,0 között, 60 perc alatt a logaritmikus redukciós faktor 6,6- nél nagyobb. Alacsonyabb hőmérsékleten és magasabb ph-n az inaktiválódás lassabban játszódott le. A fehérjekoncentráció alig befolyásolta az inaktiválódás sebességét. A folyamatnak nem volt hatása a termék minőségi jellemzőire.

64 Kationcserés kromatográfia Cél: MaB megkötése, elválasztása a DNS-től, HCP-ktől, a leszakadt Protein A-tól és az aggregátumoktól. A glikozilációt és a deamidálódást nem befolyásolja. A víruseltávolításhoz viszont hozzájárul. 5,0 ± 0,2 ph-jú acetát pufferres oldat kerül a 20 ± 3 cm magasságú oszlopra szobahőmérsékleten. Az elúció fokozatosan növekvő koncentrációjú és ph-jú acetát pufferrel történik.

65 Kationcserés kromatográfia Kationcserés kromatográfia

66 Kationcserés kromatográfia Kationcserés kromatográfia

67 Anioncserés kromatográfia Anioncserés kromatográfia - Átfolyó üzemmódban a szennyezések (HCP, DNA, endotoxins) megkötése - Hozzájárulhat a vírusmentesítéshez - Oszlopmagasság: 20 cm - Kromatografálás előtt ph és vezetőképesség beállítás - Equilibration, loading, washing with equiblibration buffer

68 Anioncserés kromatográfia Anioncserés kromatográfia

69 A Mab termék jellemzése Tests Acceptance criteria Methods Physical tests Characters Clear or slightly opaque, colourless or yellowish solution. Visual Results R1A0161 clear, colourless solution ph 6.5 ± 0.2 In-house 6.5 Osmolality 360 ± 30 mosm/kg Ph. Eur. Identifications Chip electrophoresis (non-reducing) RP-HPLC Isoelectric focusing Peptide map The bands in the electropherogram obtained with the test solution are similar in position to the bands in the electropherogram obtained with the reference solution (±10%). Retention time of the main peak in the test solution should correspond to that of the reference solution. Isoelectric point of the test solution is similar to that of the reference solution (± 0.1 pi). Chromatogram of the test solution prepared from the digested sample should correspond to that obtained with the reference solution prepared from the digested reference material. Chip electrophoresis (non-reducing)/ In-house RP-HPLC/ In-house Capillary IEF/ In-house RP-HPLC/ In-house mosm/kg identical identical identical identical 69

70 Tests Acceptance criteria Methods Tests for purity Glycan pattern Impurities with molecular masses differing from that of the product Mab Mab charge variants and impurities Bacterial endotoxins A Mab termék jellemzése Results R1A0161 G corrected area% 55.8%* G corrected area% CE-LIF/ 29.5% G corrected area% In-house 9.7% G corrected area% 5.0% Main peak: at least 99% SEC-HPLC/ In-house 99.6% Chip Heavy chain + light chain electrophoresis at least 97% altogether (reducing)/ 99.7% In-house Main peak: at least 45% 56.1% Sum of (acidic) impurities n.m.t. 15% before the main peak: Ion-exchange 8.2% Peak pertaining to the first n.m.t. 40% HPLC/ 31.0% lysine variant: Sum of other (basic) impurities: 3.0 EU/ml In-house n.m.t. 8% 4.7% Kinetic turbidimetry (harmonized Ph. Eur./USP) <0.04 EU/ml 70

71 A Mab termék jellemzése Tests Acceptance criteria Methods Results R1A0161 Tests for purity CHO Host cell Not more than 4 ng/mg protein. protein CHO Host cell < 1000 pg / 1000 mg protein DNA impurity 10 Total aerobic microbial count (TAMC): CFU/ml 10 Microbiological Total combined yeasts/moulds count (TYMC): CFU/ml purity Absence of bile-tolerant Gram-negative bacteria (1 ml). Absence of Staphylococcus aureus (1 ml). Absence of Pseudomonas aeruginosa (1 ml). ELISA/ In-house qrt-pcr/ In-house Harmonized Ph.Eur./USP 0.9 ng / mg protein 28.5 pg / 1000 mg protein conforms 71

72 A Mab termék jellemzése Tests Acceptance criteria Methods Results R1A0161 Contents Active substance Active substance Biological activity Sialic acid 10 mg/ml ± 1 mg/ml Between 80% and 125% of the reference material (Mabthera ) N-Acetylneuraminic acid (NANA): K D : M N-Glycolylneuraminic acid (NGNA): n.m.t. 0.4 µg/mg protein n..m.t. 0.01µg/mg protein RP-HPLC/ In-house CDC assay/ In-house CD16a assay/ In-house RP-HPLC-FL/ In-house 10.4 mg/ml 103.9% M µg/mg protein µg/mg protein 72

73 Tartalom folyt. Monoklonális antitestek Monoklonális antitestek gyártási technológiája Véralvadási fehérjék: alvadás gátlók és alvadási faktorok VIII faktor 2. Rész Biosimiláris gyógyszerek

74 Véralvadási fehérjék előállítása Gyógyszerként előállított fehérjék: Alvadási oldal: Faktor VIII, Faktor IX Gátló oldal: szöveti plazminogén aktivátor (tpa), antitrombin, hirudin, urokináz (upa), (heparin, sztreptokináz) 74

75 Antihemofíliás faktor = Faktor VIll Véralvadási faktor, hiánya vérzékenységet okoz. Génje az X kromoszómán helyezkedik el a nemhez kötött recesszív öröklődés iskolapéldája ( Habsburgok). A veleszületett vérzékenységet 80%-ban a F-VIII hiánya okozza. Pótlásával (hetente 1-2x) a véralvadás normalizálható. Proteolítikus enzim, Ser proteáz. A F-IX-el, trombinnal, foszfolipiddel (PL) és Ca 2+ -nal együtt (= tenáz komplex) a F-X-et aktiválja. Önmagában nincs enzimaktivitása. A F-VIII-at proteázok aktiválják, de a vérben az egyéb proteolítikus enzimek gyorsan (~1 óra) el is bontják. Védelem: von Wille-brand faktorhoz kötődik. 75

76 A Faktor-VIll szerkezete Eredetileg egyetlen hatalmas glikoprotein láncként szintetizálódik (300 kda, 2332 aminosav), amely háromféle doménből áll össze: Érése során két proteolítikus hasítás révén a B domén jelentős része leválik, és két eltérő alegységből álló heterodimer keletkezik: A 1 -A 2 -B nehéz lánc, 92 kda és A 3 -C 1 -C 2 könnyű lánc, 73 kda A vérben ez az inaktív (zimogén) forma kering a von Willebrandt faktorhoz kötött állapotban. 76

77 A véralvadási faktorok homológ szerkezete 77

78 A Faktor-VIll aktiválása A F-VIII aktiválását Arg mellett hasító Ser proteázok végzik, amelyek kiszabadítják az A doméneket (hasítás: Arg372, Arg740 Arg1689). Három fragmensből álló komplex jön létre, amit kétértékű fémion (pl. Mg 2+ ) tart össze. A B doménnek nincs további szerepe. 78

79 A Faktor-VIll módosításai 1. Az A2 és A3 fragmens közti laza kapcsolatot egy diszulfid híd beépítésével (Cys664 - Cys1826) erősítették meg. Az aktív molekula élettartama jelentősen növekedett. 2. Az emlős sejtekben kifejezett F-VIII lassan termelődik (túl nagy mrns instabil, chaperon igény, ER Golgi transzport). Méret csökkentés: a B-domén kihagyása. Az aktivitást nem befolyásolta, de a hiányzó glikozilek miatt még lassabban érlelődött. Megoldás: a hosszú B lánc helyett egy rövid összekötő szakaszt építettek be, rajta egy N-glikozilálási hellyel (Asn) szörös növekedés. 79

80 A Faktor-VIll gyártása Transzformált CHO sejtekkel (szuszpenziós, szérummentes tápoldat, inzulin van benne, de az is rekombináns, ~60 jól definiált komponens). 500 l reaktor, folytonos fermentáció, hígítási sebesség ~1 /nap Affinkromatográfia (pl. szelektív kötődése a vw faktorhoz affinkromatográfiás tisztítást tesz lehetővé, de lehet a TN8.2 szintetikus peptiddel is.) Vírus inaktiválás (szolvent-detergens módszerrel) Formulázás HSA, vagy egyéb állati fehérje nélkül. Az állati fehérje mentesség megszünteti a vírus-, vagy prion átvitel veszélyét. Nyomnyi hörcsög-fehérjét azért tartalmaz. 80

81 A Faktor VIll affinkromatográfiás izolálása A F-VIII szelektív kötődése a vw faktorhoz affinkromatográfiás tisztítást tesz lehetővé: 81

82 A rekombináns Faktor-VIll fejlesztése 82

83 Rekombináns faktor VIII-at termelő fermentorok 83

84 Tartalom folyt. Monoklonális antitestek Monoklonális antitestek gyártási technológiája Véralvadási fehérjék: alvadás gátlók és alvadási faktorok VIII faktor 2. Rész Biosimiláris gyógyszerek

85 Az egészségügyi költségvetések növekvő terhei Egészségügyi kiadások vásárlóerő paritáson normalizálva három angol nyelvű ország esetében Egészségügyi biztosítók kifizetéseinek és a tagok befizetéseinek növekedése az infláció és az alkalmazottak fizetésének tükrében az USAban. Data from the Kaiser HRET Survay of Employer-Sponsored Health. 85

86 A gyógyszerek piacának növekedése Cumulative Annual Growth Rate 86

87 Originális biotech blockbusterek 87

88 A rák előfordulása a társadalomban és jövőbeni kilátások Néhány adat: A rák előfordulása a társadalomban 10x akkora 65 éves kor után, mint 65 éves kor alatti populációban. A demográfiai folyamatok miatt (a társadalmak öregedése) 2010-re a rák a legtöbb országban a fő halálokká vált és 2032 közötti 20 évben 14 mill.-ról 25 mill. ra nő (80% növekedés) az évi új esetek száma (WHO adat). Adat / egyén 88

89 Autoimmun betegségek előfordulása a társadalomban 1715 Autoimmun betegség / lakos 89

90 Kismolekulás és biotechnológiai gyógyszeres kezelések összehasonlítása költségek szempontjából Due to the high cost of infliximab, the mean total drug cost was higher in the infliximab than the conventional treatment group 4710; Ann Rheum Dis doi: /annrheumdis Delta: > USD Delta: > EUR 90

91 A növekvő költségek a páciensek kezelésekhez való hozzáférését veszélyeztetik 91

92 Bioszimiláris gyógyszerek mik azok a bioszimilárisok? 2012-ben az EMA megadta a bioszimiláris definicióját egy eljárási útmutatóban (procedural guide): A hasonló biológiai orvosi készítmény, ismert nevén bioszimiláris, egy gyógyszer, amely hasonló egy már engedélyezett biológiai készítményhez, a referencia gyógyszerkészítményhez. A bioszimiláris gyógyszer hatóanyaga már ismert mint biológiailag aktív hatóanyag, és hasonló a referencia gyógyszerkészítmény hatóanyagához. Elvárt dolog, hogy a bioszimiláris gyógyszerkészítmény és a referencia gyógyszerkészítmény hatásossága és biztonsága azonos és általában ugyanolyan állapot kezelésére szolgáljon. 92

93 Bioszimiláris gyógyszerek mik azok a bioszimilárisok? (folyt.) Az összehasonlítás az originális és a bioszimiláris molekula között egy átfogó program eredménye, amelyben fontos tulajdonságok hasonlósága kerül bizonyításra, mint fiziko-kémiai paraméterek, bioaktivitás, PK, PD, hatásosság, biztonság. Ugyanakkor az ilyen molekulák hatalmas mérete és élő szervezetekben történő előállítása miatt nem lehet követelmény a teljes kémiai és szerkezeti azonosság, mint a szintetikus molekulák esetében. Éppen ezért nem nevezhetjük őket biogenerikus -nak, mert megtévesztő lenne. 93

94 Bioszimiláris gyógyszerek összehasonlítás kis molekulás termékekkel Termék jellemzői Kis molekula, Általában stabil, Egyszerű bevitel Generikus Bioszimiláris Nagy összetett molekula, Stabilitás csak speciális szabályok mellett, Általában injekciós bevitel Termelés Kémiai szintézis Élő organizmusokkal készül, Speciális termelő üzemben, Érzékeny a techn. változtatásokra, Magas COG Fejlesztés Kevés klinikai vizsgálat, Jelentős K+F költség, (gyakran F1, PK/PD vizsgálat) Kiterjedt klin. vizsg., F1, F3 Szabályozás Marketing Rövidített törzskönyvezés Európában és USA-ban Korlátozott részletezés az orvosok felé, Gyógyszerész által eldönthető helyettesíthetőség, Nagy árcsökkenés az originálishoz képest. Törzskönyvezési eljárás Európában megvan, Hiányzik az USA-ban A részletek megadása fontos az orvosok felé, Speciális elosztó lánc kell, Általában klinikai alkalmazás, Az ár az originális ár 50-70%-a

95 A bioszimilárisok egy külön szektort képeznek a gyógyszeriparon belül

96 Mit nyerünk a bioszimilárisokkal? Jelenleg a páciensek több ezer $- t fizetnek havonta az MS, a vérszegénység, vagy neutropénia kezelésére Hozzáférés nő Originátor gyógyszergyárak monopol helyzetben vannak Versenyhelyzet nő Várható spórolás 20 év alatt 378 milliárd $ Árcsökkentő, pénzügyi hatás 2009 és 2019 között 21 biotechnológiai blockbuster patentja jár le 50 Mrd $ éves forgalmi értéket képviselve. A legtöbb ilyen készítményt az onkológia, a gyulladásos betegségek és az érrendszeri betegségek területén alkalmazzák.

97 Bioszimiláris gyógyszerek vita az elnevezésről A fehérjemolekulák összetettsége és változékonysága miatt, nem valószínű, hogy a legtöbb fehérje esetében a bioszimiláris gyártója bizonyítani tudja, hogy a terméke azonos (identical) egy már engedélyezett termékkel.

98 Bioszimiláris gyógyszerek: Piacot befolyásoló körülmények Piac-segítő körülmények - Páciensek számának bővülése POZ. - E.ü. kiadások csökkentésének kényszere -További molekulák szabadalmának lejárata - Bővülő tudományos-technikai ismeretek Piac-fékező körülmények - Időigényes törzskönyvezési eljárások NEG. lassítják a piacra kerülést - Elégtelen tudás a termelő eljárásról befolyásolja a hosszú távú termékminőséget - Bizonytalan, vonakodó kezelőorvosi hozzáállás a bioszimilárisokhoz

99 Bioszimiláris gyógyszerek: Termelőket befolyásoló körülmények - A cégek hozzáférnek a modern termelő technológiákhoz. POZ. alacsonyabb COG stabilabb technológia alacsonyabb ingatlan beruházási költségek - Az originátorok technológia-változtatási lehetőségei korlátozottak - A jövőbeni versenykörülmények bizonytalanok, NEG. - A világ egészségügyi hatóságainak és klinikusainak korlátozott tapasztalatai vannak a bioszimiláris termékekről, - A bioszimilárisok törzskönyvezésének szabályozása az USA-ban nem áll rendelkezésre, - Nagyon komplikált a gyógyszeripar szabadalmi helyzete, - A cégeknek korlátozott tudása és tapasztalata van a bioszimilárisok piaci bevezetéséről,

100 Bioszimiláris gyógyszerek: Mit jelentenek ezek egy gyógyszergyárnak? - A tudományos háttér kritikus a piacra kerülésben, - A fejlesztési és termelési stratégiáknak flexibiliseknek kell lenniük: - A termelő eljárást és az épületet úgy kell megtervezni, hogy könnyen lépték növelhető legyen mindkét irányba - Képesség a törzskönyvezés utáni technikai változtatásokra kompetitív előnyt jelent. (Ehhez QbD, PAT és megalapozott Design Space kell.) - A bioszimilárisok fejlesztése 7-8 évig is eltart és M EUR kerülhet, (szemben a generikusok 2-3 év hosszú és 1,6 2,4 M EUR költségű fejlesztésével.

101 Bioszimiláris gyógyszerek: Kicserélhetőség (Interchangebility) Európában: A bioszimilárisok különleges kémiai és biológiai tulajdonságaik miatt nem automatikusan cserélhetők ki (interchangebility) egymással és az originátorral. A kicserélhetőség elemzése nem része az EMA által végzett tudományos elemzésnek. Vagyis egy EMA által megadott forgalomba hozatali engedély (MA) nem jelent kicserélhetőséget vagy automatikus helyettesíthetőséget. Az USA-ban: Az FDA-nek viszont joga van kinevezni (designate) az adott bioszimilárist kicserélhetőnek (interchangable), ami azt jelenti, hogy a gyógyszerész kiadhat bioszimilárist az originátor helyett anélkül, hogy az orvost értesítenie kellene. (The Biologics Price Competition and Innovation Act)

102 Kicserélhetőség (Interchangebility) folyt. Interchangeability An application (or a supplement to an application) submitted under this subsection may include information demonstrating that the biological product meets the standards described in paragraph (4). (A)the biological product (i)is biosimilar to the reference product; and (ii)can be expected to produce the same clinical result as the reference product in any given patient;

103 A bioszimilárisok fejlesztésének lépései Proving biosimilarity with comparability to reference product at all stages Design specification Validation Clinical Trials PK/PD Preclinical Biological characterization Physicochemical characterization Process development Leading biosimilars companies have developed the technology to achieve an excellent match Differences are not inherently more relevant than after m anufacturing changes Analytics Target range Drug product development Purification process development Reference product Quality can not be tested into a product, it has to be built in by design ; International Guideline ICH Q8 Bioprocess development Recombinant cell line development

104 A bioszimilárisok fejlesztésének lépései Végső koncentrációk (hatóanyag, adalékanyagok), állásidők, stabilitásvizsgálatok, SOP-k, GMP dok. Kromatográfiás lépések, sebességek, ciklusok száma, mosások száma, erőssége, állásidők, stabilitásvizsgálatok DoE. SOP-k, GMP dok. Inokulum sor optimálás, fermentáció fejl. (ph, ToC, idők, média komp., stb. - DoE), léptéknövelés legalább preklinikai anyag gyártáshoz. Sejtelválasztás optimálás, centrifugálás, szűrések. SOP-k, GMP dok. Analitika, (fizikokémiai, bioassay) Gén kiválasztás, szekvencia megállapítás, génbevitel, elsődleges és másodlagos szelekció, RCB, MCB, WCB készítése, Genetikai stabilitás tesztelése ( gen.) Biosafety tesztelése (vírusmentes, prionmentes, stb.)

105 A bioszimilaritás bizonyítása A hasonlóság bizonyítása a technológiai fejlesztés során (CMC chemical-manufactuing-contol) - A termelés során jelentkező szennyezések és bomlástermékek meghatározása (process related impurities & degradation products) - A referencia termék sarzsonkénti változásainak ismerete (batch-tobatch variability) - A molekulaszerkezet és a minőséget befolyásoló tulajdonságok összehasonlítása (Critical Quality Attributes) - Az esetleges kismértékű eltérések hatásának ismerete a hatásosságra és a biztonságra (efficacy & safety) - Annak bizonyítása, hogy szisztematikus fejlesztés történt a hasonlósági követelmények teljesítésére (pl. ferm. idők és tápoldatkomponensek a megfelelő cukormintázat érdekében.)

106 A bioszimilaritás bizonyítása (folyt.) - Biológiai aktivitás in-vitro tesztekben (bioassay, kötési tesztek) - Pre-klinika és toxikológia: állati és in-vitro tesztek - PK, PD: hasonlóság (hatásosság és biztonság hasonlósága) - Klinika: : hasonlóság Terápiás azonosság (hatásosság és biztonság hasonlósága) Statisztikai analízis Immunogenicitás 106

107 Lehetséges variációk egy molekulán belül

108 Az originátorok támadása 108

109 A bioszimiláris gyártók ellentámadása, az originátorok változtatásainak felhasználásával 109

110 Mab technológia léptéknövelhetősége

111 Összefoglaló megállapítások 1. Szerkezeti bonyolultság miatt nincs generikus lehetőség, A fejlesztés nehéz és fejlett tudományos és technológiai felkészültséget kíván A fejlesztés idő és forrásigényesebb, mint a generikusoknál, Mivel az azonosság nem megállapítható, hasonlóságot kell definiálni, a törzskönyvező hatóság felé, Ennek szabályozásában az EU vezető szereppel bír, de továbbra is elég bizonytalan a későbbi megítélése a jelölt molekulának, Azok a cégek lesznek sikeresek, akik ezeket a bizonytalanságokat jól tudják kezelni tudományosan, technikailag, és kereskedelmileg, Fiziko-kémiai hasonlóság, biztonságossági hasonlóság, és terápiás ekvivalencia kell a referencia termékhez viszonyítva, Fázis I. és III. vizsgálatok kellenek, 111

112 Összefoglaló megállapítások 2. Időtáv: NBE és bioszimiláris között (4-6 év), Költsége: NBE és bioszimiláris között (200M-800M EUR), Árkülönbség a piacon: NBE és generikus között (10%-50%), Nem szabad hatékonyabbnak lennie => ha hatékonyabb akkor stand alone fejlesztés szerint kell eljárni, és eltérő piaci magatartás is szükséges Minél több, az originátortól származó sarzs kimerítő jellemzése elengedhetetlen a bioszimilaritás bizonyításához. A piacra lépés után is kell folytatni a technológia fejlesztést, a minél jobb és olcsóbb előállítás érdekében, de figyelembe kell venni a változtatásokkal járó technikai és hatósági kockázatokat, A klinikai vizsgálatok komplikáltak és változatos eredményt szolgáltathatnak A piacra lépés után alapos piackövetésre van szükség 112

113 Köszönöm a figyelmet! 113

SOTE Gyógyszerésztudományi Kar. 2. rész

SOTE Gyógyszerésztudományi Kar. 2. rész A Gyógyszeripari Biotechnológia Alapjai SOTE Gyógyszerésztudományi Kar 2. rész Ballagi András Richter Gedeon NyRt. 2013. İszi félév 1 Tartalom 1. rész - A biotechnológiáról általában - A gyógyszeripari

Részletesebben

Biotechnológiai gyógyszergyártás

Biotechnológiai gyógyszergyártás Biotechnológiai gyógyszergyártás Dr. Greiner István 2013. november 6. Biotechnológiai gyógyszergyártás Biotechnológiai gyógyszerek Előállításuk és analitikájuk Richter és a biotechnológia Debrecen A jövő

Részletesebben

Natív antigének felismerése. B sejt receptorok, immunglobulinok

Natív antigének felismerése. B sejt receptorok, immunglobulinok Natív antigének felismerése B sejt receptorok, immunglobulinok B és T sejt receptorok A B és T sejt receptorok is az immunglobulin fehérje család tagjai A TCR nem ismeri fel az antigéneket, kizárólag az

Részletesebben

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 7. előadás Immunizálás. Poliklonális és monoklonális ellenanyag előállítása, tisztítása, alkalmazása Az antigén (haptén + hordozó) sokféle specificitású ellenanyag

Részletesebben

A T sejt receptor (TCR) heterodimer

A T sejt receptor (TCR) heterodimer Immunbiológia - II A T sejt receptor (TCR) heterodimer 1 kötőhely lánc lánc 14. kromoszóma 7. kromoszóma V V C C EXTRACELLULÁRIS TÉR SEJTMEMBRÁN CITOSZÓL lánc: VJ régió lánc: VDJ régió Nincs szomatikus

Részletesebben

(1) A T sejtek aktiválása (2) Az ön reaktív T sejtek toleranciája. α lánc. β lánc. V α. V β. C β. C α.

(1) A T sejtek aktiválása (2) Az ön reaktív T sejtek toleranciája. α lánc. β lánc. V α. V β. C β. C α. Immunbiológia II A T sejt receptor () heterodimer α lánc kötőhely β lánc 14. kromoszóma 7. kromoszóma 1 V α V β C α C β EXTRACELLULÁRIS TÉR SEJTMEMBRÁN CITOSZÓL αlánc: VJ régió β lánc: VDJ régió Nincs

Részletesebben

Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői.

Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Immunológia alapjai 3 4. előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B- sejt receptorok: molekuláris szerkezet, funkciók, alcsoportok Az antigén meghatározása

Részletesebben

Az ellenanyagok szerkezete és funkciója. Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE

Az ellenanyagok szerkezete és funkciója. Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE Az ellenanyagok szerkezete és funkciója Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE Bev. 1. ábra Immunhomeosztázis A veleszületett és az adaptív immunrendszer szorosan együttműködik az immunhomeosztázis fenntartásáért

Részletesebben

Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői

Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői Immunológia alapjai 3 4. előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B- sejt receptorok: molekuláris szerkezet, funkciók, alcsoportok Az antigén meghatározása

Részletesebben

Immunológia alapjai előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B-sejt receptorok:

Immunológia alapjai előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B-sejt receptorok: Immunológia alapjai 3 4. előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B-sejt receptorok: molekuláris szerkezet, funkciók, alcsoportok Az antigén meghatározása

Részletesebben

Fehérje gyógyszerek fejlesztése és gyártása

Fehérje gyógyszerek fejlesztése és gyártása Fehérje gyógyszerek fejlesztése és gyártása Dr. Greiner István, kutatási igazgató, Richter Gedeon Nyrt. 2014. október 4. Biotechnológiai gyógyszergyártás Biotechnológiai gyógyszerek Előállításuk Richter

Részletesebben

Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén

Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén Dr. Dallmann Klára A molekuláris biológia célja az élőlények és sejtek működésének molekuláris szintű

Részletesebben

Immunológia alapjai. 10. előadás. Komplement rendszer

Immunológia alapjai. 10. előadás. Komplement rendszer Immunológia alapjai 10. előadás Komplement rendszer A gyulladás molekuláris mediátorai: Miért fontos a komplement rendszer? A veleszületett (nem-specifikus) immunválasz része Azonnali válaszreakció A veleszületett

Részletesebben

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 3. előadás Az immunrendszer molekuláris elemei: antigén, ellenanyag, Ig osztályok Az antigén meghatározása Detre László: antitest generátor - Régi meghatározás:

Részletesebben

Immunológia alapjai. 16. előadás. Komplement rendszer

Immunológia alapjai. 16. előadás. Komplement rendszer Immunológia alapjai 16. előadás Komplement rendszer A gyulladás molekuláris mediátorai: Plazma enzim mediátorok: - Kinin rendszer - Véralvadási rendszer Lipid mediátorok Kemoattraktánsok: - Chemokinek:

Részletesebben

Immunológia 4. A BCR diverzitás kialakulása

Immunológia 4. A BCR diverzitás kialakulása Immunológia 4. A BCR diverzitás kialakulása 2017. október 4. Bajtay Zsuzsa A klónszelekciós elmélet sarokpontjai: Monospecifictás: 1 sejt 1-féle specificitású receptor Az antigén receptorhoz kötődése aktiválja

Részletesebben

Immunológia I. 2. előadás. Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu)

Immunológia I. 2. előadás. Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu) Immunológia I. 2. előadás Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu) Az immunválasz kialakulása A veleszületett és az adaptív immunválasz összefonódása A veleszületett immunválasz mechanizmusai A veleszületett

Részletesebben

Monoklonális antitestek előállítása, jellemzői

Monoklonális antitestek előállítása, jellemzői Monoklonális antitestek előállítása, jellemzői 2011. / 3 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Antitestek szerkezete IgG Monoklonális ellenanyag előállítás: Hybridoma technika Lehetővé teszi kezdetben

Részletesebben

Ellenanyag reagensek előállítása II Sándor Noémi

Ellenanyag reagensek előállítása II Sándor Noémi Ellenanyag reagensek előállítása II 2019.03.04. Sándor Noémi noemi.sandor@ttk.elte.hu Ellenanyagok módosítása 1. Kémiai módosítás Részleges redukció láncok közötti diszulfid hidak megszűnnek, szabad SH

Részletesebben

Immunológia I. 4. előadás. Kacskovics Imre

Immunológia I. 4. előadás. Kacskovics Imre Immunológia I. 4. előadás Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu) 3.1. ábra A vérsejtek képződésének helyszínei az élet folyamán 3.2. ábra A hemopoetikus őssejt aszimmetrikus osztódása 3.3. ábra

Részletesebben

Fehérje expressziós rendszerek. Gyógyszerészi Biotechnológia

Fehérje expressziós rendszerek. Gyógyszerészi Biotechnológia Fehérje expressziós rendszerek Gyógyszerészi Biotechnológia Expressziós rendszerek Cél: rekombináns fehérjék előállítása nagy tisztaságban és nagy mennyiségben kísérleti ill. gyakorlati (therapia) felhasználásokra

Részletesebben

4. A humorális immunválasz október 12.

4. A humorális immunválasz október 12. 4. A humorális immunválasz 2016. október 12. A klónszelekciós elmélet sarokpontjai: Monospecifictás: 1 sejt 1-féle specificitású receptor Az antigén receptorhoz kötődése aktiválja a limfocitát A keletkező

Részletesebben

BIOLÓGIA és BIOTECHNOLÓGIA 6. rész

BIOLÓGIA és BIOTECHNOLÓGIA 6. rész BIOLÓGIA és BIOTECHNOLÓGIA 6. rész Előadó: Ballagi András, c. egyetemi tanár Richter Gedeon NyRt. - BME Írásos segédanyag található a: http://oktatas.ch.bme.hu /oktatas /konyvek /mezgaz /Biol-biotech-vegyész-MSc

Részletesebben

Biológiai egyenértékűség és vizsgálata. Dr. Lakner Géza. members.iif.hu/lakner

Biológiai egyenértékűség és vizsgálata. Dr. Lakner Géza. members.iif.hu/lakner Biológiai egyenértékűség és vizsgálata Dr. Lakner Géza members.iif.hu/lakner Originalitás, generikum Originalitás, innovatív gyógyszerkészítmény = első ízben kifejlesztett, új hatóanyagból előállított

Részletesebben

ELLENANYAGOK ÉS SZÁRMAZÉKAIK

ELLENANYAGOK ÉS SZÁRMAZÉKAIK Az élettudományi-klinikai felsőoktatás gyakorlatorientált és hallgatóbarát korszerűsítése a vidéki képzőhelyek nemzetközi versenyképességének erősítésére TÁMOP-4.1.1.C-13/1/KONV-2014-0001 ELLENANYAGOK

Részletesebben

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011 Az orvosi

Részletesebben

A preventív vakcináció lényege :

A preventív vakcináció lényege : Vakcináció Célja: antigénspecifkus immunválasz kiváltása a szervezetben A vakcina egy olyan készítmény, amely fokozza az immunitást egy adott betegséggel szemben (aktiválja az immunrendszert). A preventív

Részletesebben

KOAGULÁCIÓS FAKTOROK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA

KOAGULÁCIÓS FAKTOROK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA Az élettudományi-klinikai felsőoktatás gyakorlatorientált és hallgatóbarát korszerűsítése a vidéki képzőhelyek nemzetközi versenyképességének erősítésére TÁMOP-4.1.1.C-13/1/KONV-2014-0001 KOAGULÁCIÓS FAKTOROK

Részletesebben

Szervezetünk védelmének alapja: az immunológiai felismerés

Szervezetünk védelmének alapja: az immunológiai felismerés Szervezetünk védelmének alapja: az immunológiai felismerés Erdei Anna ELTE, TTK, Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék ELTE, Pázmány-nap, 2012. Az immunrendszer fő feladata a gazdaszervezet védelme a

Részletesebben

A PET szerepe a gyógyszerfejlesztésben. Berecz Roland DE KK Pszichiátriai Tanszék

A PET szerepe a gyógyszerfejlesztésben. Berecz Roland DE KK Pszichiátriai Tanszék A PET szerepe a gyógyszerfejlesztésben Berecz Roland DE KK Pszichiátriai Tanszék Gyógyszerfejlesztés Felfedezés gyógyszertár : 10-15 év Kb. 1 millárd USD/gyógyszer (beleszámolva a sikertelen fejlesztéseket)

Részletesebben

A keringı tumor markerek klinikai alkalmazásának aktuális kérdései és irányelvei

A keringı tumor markerek klinikai alkalmazásának aktuális kérdései és irányelvei A keringı tumor markerek klinikai alkalmazásának aktuális kérdései és irányelvei A TM vizsgálatok alapkérdései A vizsgálatok célja, információértéke? Az alkalmazás területei? Hogyan válasszuk ki az alkalmazott

Részletesebben

Immunológia alapjai. Az immunválasz szupressziója Előadás. A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek

Immunológia alapjai. Az immunválasz szupressziója Előadás. A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek Immunológia alapjai 19 20. Előadás Az immunválasz szupressziója A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek Mi a szupresszió? Általános biológiai szabályzó funkció. Az immunszupresszió az

Részletesebben

TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL

TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL Az egyes biomolekulák izolálása kulcsfontosságú a biológiai szerepük tisztázásához. Az affinitás kromatográfia egyszerűsége, reprodukálhatósága

Részletesebben

Antigén, Antigén prezentáció

Antigén, Antigén prezentáció Antigén, Antigén prezentáció Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék Bajtay Zsuzsa ELTE, TTK Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék ORFI Klinikai immunológia tanfolyam, 2019. február. 26 Bev. 2. ábra Az

Részletesebben

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011 Az orvosi

Részletesebben

BIOTERMÉK TECHNOLÓGIA-2

BIOTERMÉK TECHNOLÓGIA-2 BIOTERMÉK TECHNOLÓGIA-2 MSc Biomérnök hallgatók számára Előadó: 3 + 0 + 0 óra, 4 kredit szóbeli vizsga Pécs Miklós, Ballagi András Elérhetőség: F épület, FE lépcsőház földszint 1 (463-) 40-31 pecs@eik.bme.hu

Részletesebben

Biomassza alapú bioalkohol előállítási technológia fejlesztése metagenomikai eljárással

Biomassza alapú bioalkohol előállítási technológia fejlesztése metagenomikai eljárással Biomassza alapú bioalkohol előállítási technológia fejlesztése metagenomikai eljárással Kovács Zoltán ügyvezető DEKUT Debreceni Kutatásfejlesztési Közhasznú Nonprofit Kft. Problémadefiníció Első generációs

Részletesebben

Immunológia alapjai előadás MHC. szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás.

Immunológia alapjai előadás MHC. szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás. Immunológia alapjai 5-6. előadás MHC szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás. Antigén felismerés Az ellenanyagok és a B sejt receptorok natív formában

Részletesebben

Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév

Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév Ellenanyagok előállítása, tisztítása, jelölése, fragmentálása Monoklonális vs. poliklonális ellenanyagok Ellenanyagok előállítása

Részletesebben

REUMATOLÓGIA MINDENKINEK

REUMATOLÓGIA MINDENKINEK Tartalom X I. é v f o l y a m 3. s z á m 2 0 1 5. d e c e m b e r Kedves Olvasóink! Mit kell tudni az ízületi gyulladások biológiailag hasonló betegségmódosító gyógyszereiről? Tóth Gábor 2 Biológiailag

Részletesebben

FEHÉRJE VAKCINÁK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA III.

FEHÉRJE VAKCINÁK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA III. Az élettudományi-klinikai felsőoktatás gyakorlatorientált és hallgatóbarát korszerűsítése a vidéki képzőhelyek nemzetközi versenyképességének erősítésére FEHÉRJE VAKCINÁK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA III.

Részletesebben

Intelligens molekulákkal a rák ellen

Intelligens molekulákkal a rák ellen Intelligens molekulákkal a rák ellen Kotschy András Servier Kutatóintézet Rákkutatási kémiai osztály A rákos sejt Miben más Hogyan él túl Áttekintés Rákos sejtek célzott támadása sejtmérgekkel Fehérjék

Részletesebben

Az immunrendszer működésében résztvevő sejtek Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE

Az immunrendszer működésében résztvevő sejtek Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE Az immunrendszer működésében résztvevő sejtek Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE Tanárszakosok, 2017. Bev. 2. ábra Az immunválasz kialakulása 3.1. ábra A vérsejtek képződésének helyszínei az élet folyamán

Részletesebben

B-sejtek szerepe az RA patológiás folyamataiban

B-sejtek szerepe az RA patológiás folyamataiban B-sejtek szerepe az RA patológiás folyamataiban Erdei Anna Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék Eötvös Loránd Tudományegyetem Immunológiai Tanszék ORFI, Helia, 2015 április 17. RA kialakulása Gary S.

Részletesebben

INTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK

INTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK INTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK Bácsi Attila, PhD, DSc etele@med.unideb.hu Debreceni Egyetem, ÁOK Immunológiai Intézet INTRACELLULÁRIS BAKTÉRIUMOK ELLENI IMMUNVÁLASZ Példák intracelluláris baktériumokra Intracelluláris

Részletesebben

Új könnyűlánc diagnosztika. Dr. Németh Julianna Országos Gyógyintézeti Központ Immundiagnosztikai Osztály MLDT-MIT Továbbképzés 2006

Új könnyűlánc diagnosztika. Dr. Németh Julianna Országos Gyógyintézeti Központ Immundiagnosztikai Osztály MLDT-MIT Továbbképzés 2006 Új könnyűlánc diagnosztika Dr. Németh Julianna Országos Gyógyintézeti Központ Immundiagnosztikai Osztály MLDT-MIT Továbbképzés 2006 1845 Bence Jones Protein vizelet fehérje 1922 BJP I-II típus 1956 BJP

Részletesebben

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 3 4

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 3 4 Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 3 4 Antigén Immunizálás x B sejt 1 2 3 4 1 2 3 4 Milstein (1980) Scientific American, Oct. p.58 m m m m + Myeloma Lépsejtek Sejtfúzió Katona Éva Antiszérum

Részletesebben

POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK: GLIKOZILÁLÁSOK

POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK: GLIKOZILÁLÁSOK POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK: GLIKOZILÁLÁSOK Dr. Pécs Miklós Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudomány Tanszék 1 Glikozilálás A rekombináns fehérjék

Részletesebben

Immunológia Világnapja

Immunológia Világnapja a Magyar Tudományos Akadémia Biológiai Osztály, Immunológiai Bizottsága és a Magyar Immunológiai Társaság Immunológia Világnapja - 2016 Tumorbiológia Dr. Tóvári József, Országos Onkológiai Intézet Mágikus

Részletesebben

Alapfogalmak I. Elsősorban fehérjék és ezek szénhidrátokkal és lipidekkel alkotott molekulái lokalizációjának meghatározásának eszköze.

Alapfogalmak I. Elsősorban fehérjék és ezek szénhidrátokkal és lipidekkel alkotott molekulái lokalizációjának meghatározásának eszköze. Alapfogalmak I. Immunhisztokémia: Az immunhisztokémia módszerével szöveti antigének, vagy félantigének (haptének) detektálhatók in situ, specifikus antigén-antitest kötés alapján. Elsősorban fehérjék és

Részletesebben

5.2.5. ÁLLATGYÓGYÁSZATI IMMUNOLÓGIAI GYÓGYSZEREK ELŐÁLLÍTÁSÁRA SZÁNT ÁLLATI EREDETŰ ANYAGOK

5.2.5. ÁLLATGYÓGYÁSZATI IMMUNOLÓGIAI GYÓGYSZEREK ELŐÁLLÍTÁSÁRA SZÁNT ÁLLATI EREDETŰ ANYAGOK 1 5.2.5. ÁLLATGYÓGYÁSZATI IMMUNOLÓGIAI GYÓGYSZEREK ELŐÁLLÍTÁSÁRA SZÁNT ÁLLATI EREDETŰ ANYAGOK 07/2009:50205 javított 6.5 1. ALKALMAZÁSI TERÜLET Az állatgyógyászati célra szánt immunológiai gyógyszerek

Részletesebben

Immunitás és evolúció

Immunitás és evolúció Immunitás és evolúció (r)evolúció az immunrendszerben Az immunrendszer evolúciója Müller Viktor ELTE Növényrendszertani, Ökológiai és Elméleti Biológiai Tanszék http://ramet.elte.hu/~viktor Az immunitás

Részletesebben

Katasztrófális antifoszfolipid szindróma

Katasztrófális antifoszfolipid szindróma Katasztrófális antifoszfolipid szindróma Gadó Klára Semmelweis Egyetem, I.sz. Belgyógyászati Klinika Antifoszfolipid szindróma Artériás és vénás thrombosis Habituális vetélés apl antitest jelenléte Mi

Részletesebben

avagy az ipari alkalmazhatóság kérdése biotechnológiai tárgyú szabadalmi bejelentéseknél Dr. Győrffy Béla, Egis Nyrt., Budapest

avagy az ipari alkalmazhatóság kérdése biotechnológiai tárgyú szabadalmi bejelentéseknél Dr. Győrffy Béla, Egis Nyrt., Budapest Iparilag alkalmazható szekvenciák, avagy az ipari alkalmazhatóság kérdése biotechnológiai tárgyú szabadalmi bejelentéseknél Dr. Győrffy Béla, Egis Nyrt., Budapest Neutrokin α - jelentős kereskedelmi érdekek

Részletesebben

A tumor-markerek alkalmazásának irányelvei BOKOR KÁROLY klinikai biokémikus Dr. Romics László Egészségügyi Intézmény

A tumor-markerek alkalmazásának irányelvei BOKOR KÁROLY klinikai biokémikus Dr. Romics László Egészségügyi Intézmény A tumor-markerek alkalmazásának irányelvei BOKOR KÁROLY klinikai biokémikus Dr. Romics László Egészségügyi Intézmény 2016.10.17. 1 2016.10.17. 2 2016.10.17. 3 A TUMORMARKEREK TÖRTÉNETE I. ÉV FELFEDEZŐ

Részletesebben

Elválasztástechnikai és bioinformatikai kutatások. Dr. Harangi János DE, TTK, Biokémiai Tanszék

Elválasztástechnikai és bioinformatikai kutatások. Dr. Harangi János DE, TTK, Biokémiai Tanszék Elválasztástechnikai és bioinformatikai kutatások Dr. Harangi János DE, TTK, Biokémiai Tanszék Fő kutatási területek Enzimek vizsgálata mannozidáz amiláz OGT Analitikai kutatások Élelmiszer analitika Magas

Részletesebben

Az adaptív immunválasz kialakulása. Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE

Az adaptív immunválasz kialakulása. Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE Az adaptív immunválasz kialakulása Erdei Anna Immunológiai Tanszék ELTE NK sejt T Bev. 1. ábra Immunhomeosztázis A veleszületett immunrendszer elemei nélkül nem alakulhat ki az adaptív immunválasz A veleszületett

Részletesebben

Biohasonló Gyógyszerek Fejlesztési Kihívásai

Biohasonló Gyógyszerek Fejlesztési Kihívásai Biohasonló Gyógyszerek Fejlesztési Kihívásai MEDinPROT Április 9, 2016 Dr. Bogsch Erik Főosztályvezető, Biotechnológiai Főosztály Richter Gedeon Nyrt. Tíz legnagyobb forgalmú gyógyszer a világon - 2014

Részletesebben

Klónozás: tökéletesen egyforma szervezetek csoportjának előállítása, vagyis több genetikailag azonos egyed létrehozása.

Klónozás: tökéletesen egyforma szervezetek csoportjának előállítása, vagyis több genetikailag azonos egyed létrehozása. Növények klónozása Klónozás Klónozás: tökéletesen egyforma szervezetek csoportjának előállítása, vagyis több genetikailag azonos egyed létrehozása. Görög szó: klon, jelentése: gally, hajtás, vessző. Ami

Részletesebben

Sejt - kölcsönhatások az idegrendszerben

Sejt - kölcsönhatások az idegrendszerben Sejt - kölcsönhatások az idegrendszerben dendrit Sejttest Axon sejtmag Axon domb Schwann sejt Ranvier mielinhüvely csomó (befűződés) terminális Sejt - kölcsönhatások az idegrendszerben Szinapszis típusok

Részletesebben

Hogyan lesznek új gyógyszereink? Bevezetés a gyógyszerkutatásba

Hogyan lesznek új gyógyszereink? Bevezetés a gyógyszerkutatásba Hogyan lesznek új gyógyszereink? Bevezetés a gyógyszerkutatásba Keserű György Miklós, PhD, DSc Magyar Tudományos Akadémia Természettudományi Kutatóközpont A gyógyszerkutatás folyamata Megalapozó kutatások

Részletesebben

Bakteriális identifikáció 16S rrns gén szekvencia alapján

Bakteriális identifikáció 16S rrns gén szekvencia alapján Bakteriális identifikáció 16S rrns gén szekvencia alapján MOHR ANITA SIPOS RITA, SZÁNTÓ-EGÉSZ RÉKA, MICSINAI ADRIENN 2100 Gödöllő, Szent-Györgyi Albert út 4. info@biomi.hu, www.biomi.hu TÖRZS AZONOSÍTÁS

Részletesebben

A géntechnikák alkalmazási területei leltár. Géntechnika 3. Dr. Gruiz Katalin

A géntechnikák alkalmazási területei leltár. Géntechnika 3. Dr. Gruiz Katalin A géntechnikák alkalmazási területei leltár Géntechnika 3 Dr. Gruiz Katalin Kutatás Genetikai: genomok feltérképezése: HUGO, mikroorganizmusoké, ujjlenyomatok készítése, jellegzetes szekvenciák keresése

Részletesebben

Léptéknövelt Fehérje Expresszió Protein Expression Scale-up Servive (PRESS projekt)

Léptéknövelt Fehérje Expresszió Protein Expression Scale-up Servive (PRESS projekt) Léptéknövelt Fehérje Expresszió Protein Expression Scale-up Servive (PRESS projekt) Németh Áron, Ivanics Balázs, Ballagi András BME Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudományi Tanszék F-épületi Fermentációs

Részletesebben

Immunológia alapjai 5-6. előadás MHC szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás.

Immunológia alapjai 5-6. előadás MHC szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás. Immunológia alapjai 5-6. előadás MHC szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás. Az immunrendszer felépítése Veleszületett immunitás (komplement, antibakteriális

Részletesebben

Rekombináns gyógyszerek fejlesztése c. előadás írásos változata

Rekombináns gyógyszerek fejlesztése c. előadás írásos változata Rekombináns gyógyszerek fejlesztése c. előadás írásos változata Készítette: Ballagi András, Biotechnológia osztályvezető, Richter Gedeon NyRt. Készült az Innovatív Gyógyszerek Kutatására Irányuló Nemzeti

Részletesebben

Új terápiás lehetőségek. Dr. Szökő Éva Gyógyszerhatástani Intézet

Új terápiás lehetőségek. Dr. Szökő Éva Gyógyszerhatástani Intézet Új terápiás lehetőségek Dr. Szökő Éva Gyógyszerhatástani Intézet Biológiai gyógyszerek Biológiai gyógyszer minden olyan termék, melynek hatóanyaga biológiai anyag. Biológiai anyag az az anyag, mely biológiai

Részletesebben

Az ophthalmopathia autoimmun kórfolyamatára utaló tényezôk Bizonyított: A celluláris és humorális autoimmun folyamatok szerepe.

Az ophthalmopathia autoimmun kórfolyamatára utaló tényezôk Bizonyított: A celluláris és humorális autoimmun folyamatok szerepe. Az ophthalmopathia autoimmun kórfolyamatára utaló tényezôk Bizonyított: A celluláris és humorális autoimmun folyamatok szerepe. szemizom, retrobulbaris kötôszövet, könnymirigy elleni autoantitestek exophthalmogen

Részletesebben

Vakcinák 2011. / 9. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK

Vakcinák 2011. / 9. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Vakcinák 2011. / 9 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Bevezetés Fertőzéses megbetegedések elleni küzdelem Himlő, diphteria, tetanus, poliomyelitis, kanyaró, szamárköhögés, mumpsz, rubeola A

Részletesebben

11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban

11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban 11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban HIV fertőzés kimutatása - (fiktív) esettanulmány 35 éves nő, HIV fertőzöttség gyanúja. Két partner az elmúlt időszakban. Fertőzött-e

Részletesebben

11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban

11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban 11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban HIV fertőzés kimutatása (fiktív) esettanulmány 35 éves nő, HIV fertőzöttség gyanúja. Két partner az elmúlt időszakban. Fertőzött-e

Részletesebben

Hús és hústermék, mint funkcionális élelmiszer

Hús és hústermék, mint funkcionális élelmiszer Hús és hústermék, mint funkcionális élelmiszer Szilvássy Z., Jávor A., Czeglédi L., Csiki Z., Csernus B. Debreceni Egyetem Funkcionális élelmiszer Első használat: 1984, Japán speciális összetevő feldúsítása

Részletesebben

Telepspecifikus vakcinák engedélyezésének jogi és szakmai háttere

Telepspecifikus vakcinák engedélyezésének jogi és szakmai háttere Telepspecifikus vakcinák engedélyezésének jogi és szakmai háttere Dr. Kulcsár Gábor Nemzeti Élelmiszerlánc-biztonsági Hivatal, Állatgyógyászati Termékek Igazgatósága 2016. június 2. Tartalom Mik azok a

Részletesebben

Vércsoportszerológiai alapfogalmak. Dr. Csépány Norbert Transzfúziós tanfolyam Debrecen

Vércsoportszerológiai alapfogalmak. Dr. Csépány Norbert Transzfúziós tanfolyam Debrecen Vércsoportszerológiai alapfogalmak Dr. Csépány Norbert Transzfúziós tanfolyam Debrecen 1 Vércsoportszerológia Az immunológia tudományának speciális ága, mely a vörösvérsejtek felületi antigénjeivel, és

Részletesebben

és biztonságoss Prof. Dr. János J CHMP member Hungary

és biztonságoss Prof. Dr. János J CHMP member Hungary Gyógyszerek hatásoss sossága és biztonságoss gosságaga Prof. Dr. János J Borvendég CHMP member Hungary A ma gyógyszerkutat gyszerkutatásának legfontosabb célbetegségei: gei: malignus betegségek gek cardiovascularis

Részletesebben

HUMANCORP LABORATÓRIUMI TISZTÍTOTT VÍZ ELÕÁLLÍTÁS. rendszerek A ZENEER POWER

HUMANCORP LABORATÓRIUMI TISZTÍTOTT VÍZ ELÕÁLLÍTÁS. rendszerek A ZENEER POWER LABORATÓRIUMI TISZTÍTOTT VÍZ ELÕÁLLÍTÁS A ZENEER POWER kompakt víztisztító berendezés család egy kombinált kétfokozatú rendszer olyan laboratóriumok részére, ahol a napi tisztavíz felhasználás 10-150 liter

Részletesebben

A Telomerase-specific Doxorubicin-releasing Molecular Beacon for Cancer Theranostics

A Telomerase-specific Doxorubicin-releasing Molecular Beacon for Cancer Theranostics A Telomerase-specific Doxorubicin-releasing Molecular Beacon for Cancer Theranostics Yi Ma, Zhaohui Wang, Min Zhang, Zhihao Han, Dan Chen, Qiuyun Zhu, Weidong Gao, Zhiyu Qian, and Yueqing Gu Angew. Chem.

Részletesebben

ÖSSZ-TARTALOM 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás

ÖSSZ-TARTALOM 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás Jelutak ÖSSZ-TARTALOM 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás 4. Idegi- és hormonális kommunikáció 3. előadás Jelutak 1. a sejtkommunikáció alapjai 1. Bevezetés

Részletesebben

BD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei

BD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei BD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei Andrea Süle, PhD Termékspecialista BD Diagnostics, Preanalytical Systems MOLSZE XI. Nagygyőlés, Pécs, 2009 augusztus 27-29. BD A BD egy orvostechnológiai

Részletesebben

Integrált-flow technológia Innovatív gyógyszerek

Integrált-flow technológia Innovatív gyógyszerek Integrált-flow technológia Innovatív gyógyszerek Marosi György Mottó: Az én vezérem bensőmből vezérel József Attila 1 Flow szárnyaló kreativitás sodrásban 2 Kreatív alapok Gyógyszerek BME kutatók részvételével:

Részletesebben

Jelutak ÖSSZ TARTALOM. Jelutak. 1. a sejtkommunikáció alapjai

Jelutak ÖSSZ TARTALOM. Jelutak. 1. a sejtkommunikáció alapjai Jelutak ÖSSZ TARTALOM 1. Az alapok 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás 4. Idegi és hormonális kommunikáció 3. előadás Jelutak 1. a sejtkommunikáció alapjai 1. Bevezetés

Részletesebben

Allergia immunológiája 2012.

Allergia immunológiája 2012. Allergia immunológiája 2012. AZ IMMUNVÁLASZ SZEREPLŐI BIOLÓGIAI MEGKÖZELÍTÉS Az immunrendszer A fő ellenfelek /ellenségek/ Limfociták, makrofágok antitestek, stb külső és belső élősködők (fertőzés, daganat)

Részletesebben

Immunológia Alapjai. 13. előadás. Elsődleges T sejt érés és differenciálódás

Immunológia Alapjai. 13. előadás. Elsődleges T sejt érés és differenciálódás Immunológia Alapjai 13. előadás Elsődleges T sejt érés és differenciálódás A T és B sejt receptor eltérő szerkezetű A T sejt receptor komplex felépítése + DOMÉNES SZERKEZET αβ ΤcR SP(CD4+ vagy CD8+) γδ

Részletesebben

Új terápiás lehetőségek helyzete. Dr. Varga Norbert Heim Pál Gyermekkórház Toxikológia és Anyagcsere Osztály

Új terápiás lehetőségek helyzete. Dr. Varga Norbert Heim Pál Gyermekkórház Toxikológia és Anyagcsere Osztály Új terápiás lehetőségek helyzete Dr. Varga Norbert Heim Pál Gyermekkórház Toxikológia és Anyagcsere Osztály Mucopolysaccharidosisok MPS I (Hurler-Scheie) Jelenleg elérhető oki terápiák Enzimpótló kezelés

Részletesebben

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 8. előadás Immunszerológia, immunkémia Az immunoassay-k érzékenysége A fő szérumfehérje frakciók és az ahhoz tartozó fehérjék Az Ig valencia és aviditás viszonya

Részletesebben

In Situ Hibridizáció a pathologiai diagnosztikában és ami mögötte van.

In Situ Hibridizáció a pathologiai diagnosztikában és ami mögötte van. In Situ Hibridizáció a pathologiai diagnosztikában és ami mögötte van. Kneif Józsefné PTE KK Pathologiai Intézet Budapest 2017. 05. 26 Kromoszóma rendellenesség kimutatás PCR technika: izolált nukleinsavak

Részletesebben

A véralvadás zavarai I

A véralvadás zavarai I A véralvadás zavarai I Rácz Olivér Miskolci Egyetem Egészségügyi kar 27.9.2009 koagmisks1.ppt Oliver Rácz 1 A haemostasis (véralvadás) rendszere Biztosítja a vérrög (véralvadék, trombus) helyi keletkezését

Részletesebben

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 6. előadás Humorális és celluláris immunválasz A humorális (B sejtes) immunválasz lépései Antigén felismerés B sejt aktiváció: proliferáció, differenciálódás

Részletesebben

Receptorok és szignalizációs mechanizmusok

Receptorok és szignalizációs mechanizmusok Molekuláris sejtbiológia: Receptorok és szignalizációs mechanizmusok Dr. habil Kőhidai László Semmelweis Egyetem Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet Sejtek szignalizációs kapcsolatai Sejtek szignalizációs

Részletesebben

A biotechnológia alapjai A biotechnológia régen és ma. Pomázi Andrea

A biotechnológia alapjai A biotechnológia régen és ma. Pomázi Andrea A biotechnológia alapjai A biotechnológia régen és ma Pomázi Andrea A biotechnológia fogalma Alkalmazott biológia A fogalom állandó változásban van A biológia és a biotechnológia közötti különbség a méretekben

Részletesebben

A BIOLÓGIAI GYÓGY- SZEREK FEJLESZTÉSÉNEK FINANSZÍROZÁSA ÉS TERÁPIÁS CÉLTERÜLETEI

A BIOLÓGIAI GYÓGY- SZEREK FEJLESZTÉSÉNEK FINANSZÍROZÁSA ÉS TERÁPIÁS CÉLTERÜLETEI Az élettudományi-klinikai felsőoktatás gyakorlatorientált és hallgatóbarát korszerűsítése a vidéki képzőhelyek nemzetközi versenyképességének erősítésére A BIOLÓGIAI GYÓGY- SZEREK FEJLESZTÉSÉNEK FINANSZÍROZÁSA

Részletesebben

Biomolekuláris nanotechnológia. Vonderviszt Ferenc PE MÜKKI Bio-Nanorendszerek Laboratórium

Biomolekuláris nanotechnológia. Vonderviszt Ferenc PE MÜKKI Bio-Nanorendszerek Laboratórium Biomolekuláris nanotechnológia Vonderviszt Ferenc PE MÜKKI Bio-Nanorendszerek Laboratórium Az élő szervezetek példája azt mutatja, hogy a fehérjék és nukleinsavak kiválóan alkalmasak önszerveződő molekuláris

Részletesebben

Genetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére

Genetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére Genetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére Dr. Czeglédi Levente Dr. Béri Béla Kutatás-fejlesztés támogatása a megújuló energiaforrások és agrár

Részletesebben

Transzgénikus állatok előállítása

Transzgénikus állatok előállítása Transzgénikus állatok előállítása A biotechnológia alapjai Pomázi Andrea Mezőgazdasági biotechnológia A gazdasági állatok és növények nemesítése új biotechnológiai eljárások felhasználásával. Cél: jobb

Részletesebben

4.4 BIOPESZTICIDEK. A biopeszticidekről. Pécs Miklós: A biotechnológia természettudományi alapjai

4.4 BIOPESZTICIDEK. A biopeszticidekről. Pécs Miklós: A biotechnológia természettudományi alapjai 4.4 BIOPESZTICIDEK A mezőgazdasági termelésnél a kártevők irtásával, távoltartásával növelik a hozamokat. Erre kémiai szereket alkalmaztak, a környezeti hatásokkal nem törődve. pl. DDT (diklór-difenil-triklór-etán)

Részletesebben

Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév

Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév Ellenanyaggal működő módszerek Analitikai felhasználás Analitikai felhasználás Ellenanyag / antigén kapcsolódás Az Ab/Ag kapcsolat

Részletesebben

Norvég Finanszírozási Mechanizmus által támogatott projekt HU-0115/NA/2008-3/ÖP-9 ÚJ TERÁPIÁS CÉLPONTOK AZONOSÍTÁSA GENOMIKAI MÓDSZEREKKEL

Norvég Finanszírozási Mechanizmus által támogatott projekt HU-0115/NA/2008-3/ÖP-9 ÚJ TERÁPIÁS CÉLPONTOK AZONOSÍTÁSA GENOMIKAI MÓDSZEREKKEL Norvég Finanszírozási Mechanizmus által támogatott projekt HU-0115/NA/2008-3/ÖP-9 ÚJ TERÁPIÁS CÉLPONTOK AZONOSÍTÁSA GENOMIKAI MÓDSZEREKKEL KÖZÖS STRATÉGIA KIFEJLESZTÉSE MOLEKULÁRIS MÓDSZEREK ALKALMAZÁSÁVAL

Részletesebben

Pozitron emittáló izotópok. [18F]FDG előállítása. Általunk használt izotópok. Magreakció: Dual Beam 18F. Felezési idő (min) 109,7

Pozitron emittáló izotópok. [18F]FDG előállítása. Általunk használt izotópok. Magreakció: Dual Beam 18F. Felezési idő (min) 109,7 Pozitron emittáló izotópok [F]FDG előállítása Nuklid Felezési idő (min) 109,7 20,4 10 2,05 F 11C 13 N 15 2 Általunk használt izotópok Izotóp Molekula Mit mutat ki Fontosabb klinikai jelentősége F dezoxiglükóz

Részletesebben

A növény inváziójában szerepet játszó bakteriális gének

A növény inváziójában szerepet játszó bakteriális gének A növény inváziójában szerepet játszó bakteriális gének merisztéma korai szimbiotikus zóna késői szimbiotikus zóna öregedési zóna gyökér keresztmetszet NODULÁCIÓ növényi jel Rhizobium meliloti rhizobium

Részletesebben

Tüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a PD-L1 és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása

Tüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a PD-L1 és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása Tüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása Téglási Vanda, MoldvayJudit, Fábián Katalin, Csala Irén, PipekOrsolya, Bagó Attila,

Részletesebben