Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév
|
|
|
- Csenge Orsós
- 8 évvel ezelőtt
- Látták:
Átírás
1 Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév
2 Ellenanyaggal működő módszerek Analitikai felhasználás
3 Analitikai felhasználás Ellenanyag / antigén kapcsolódás Az Ab/Ag kapcsolat csak kapocs az analit és a jel között Az Ab/Ag kapcsolat önmagában egy jel megváltozása Heterogén (szilárd) fázisú rendszerek Homogén (folyadék) fázisú rendszerek
4 Ellenanyagokkal működő módszerek I. Szilárd fázisú assay-k Általános felépítés Hordozó felület (műanyag, üveg, ill. ezek biopolimer bevonata, specifikus kapcsolóelem ellenanyag, avidin) Minta / antigén kapcsolódik a hordozóhoz (vagy aspecifikus, kémiai kötéseken, vagy specifikus reakción alapuló kapcsolat) Detektáló ellenanyag (direkt vagy indirekt jelölt) kapcsolódik az antigénhez Jelet felfogjuk / mérjük Lépések között mosás, ezzel elkülönítjük a kötött és szabad reagenseket
5 Ellenanyagokkal működő módszerek I. Szilárd fázisú assay-k Detektáló műszer Detektáló ellenanyag Minta / Antigén Hordozó felület Érzékenység * ** *** Alacsony költségek *** ** * Alacsony háttér * ** ***
6 Ellenanyagokkal működő módszerek I. Szilárd fázisú assay-k Direkt jelölt Haptén jelölt Jelöletlen Detektáló és/vagy jelhordozó ellenanyag Minta / Antigén Hordozó felület Érzékenység * *** *** Alacsony költségek ***/** * **/*** Gyorsaság *** ** * Alacsony háttér *** ** *
7 Ellenanyagokkal működő módszerek I. Szilárd fázisú assay-k A felfogható jel Foton >> Elektron >> Egyéb Színintenzitás Fluoreszcencia Kemilumineszcencia γ-sugárzás Elektromos áram β-sugárzás Mechanikai jel Mágneses rezonancia
8 Ellenanyagokkal működő módszerek I. Szilárd fázisú assay-k Érzékenység Linearitás Stabilitás Költség Abszorbancia * * *** *** Fluoreszcencia ** *** ** ** Kemilumineszcencia *** ** * ** TRF *** *** *** * γ-sugár számlálás **** *** */*** *
9 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Homogén reakció: maga az Ag / ellenanyag kapcsolódás idéz elő mérhető jelet Nincs szükség a kötött / nem-kötött reagensek szétválasztására (mosás) Sok esetben közelebb áll a fiziológiás folyamatokhoz Hátrány: műszerigényes, drága, sok kémiai-biológia korlátja van, vagy nem elég érzékeny
10 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Immunprecipitáció / agglutináció
11 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Turbidimetria / nefelometria
12 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Turbidimetria / nefelometria Klinikai laboratóriumi tesztek Módszer CRP Turbidimetria uscrp Latex turbidimetria RF Latex turbidimetria Ferritin Latex turbidimetria Transferrin Turbidimetria IgE Latex turbidimetria IgA Turbidimetria IgM Turbidimetria IgG Turbidimetria A1-antitripszin Turbidimetria C3 Turbidimetria C4 Turbidimetria
13 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluoreszcencia rezonancia energia transzfer (FRET) Gerjesztett állapot (S 1 ) hν ex hν em Köztes állapot (S int ) Alapállapot (S 0 )
14 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluoreszcencia rezonancia energia transzfer (FRET) Donor Akceptor
15 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluoreszcencia rezonancia energia transzfer (FRET) Journal of Lipid Research, 2007, 48:19-29
16 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluorescence protection assay FRET elvén működik, de nem emittál az akceptor, csak elnyomja a donor fluoreszcenciáját Olcsóbb, egyszerűbb, de kevésbé érzékeny
17 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluoreszcencia polarizáció (FP)
18 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluoreszcencia polarizáció (FP) P=(I P -I A )/(I P +I A ) τ: fluoreszcens életidő
19 Ellenanyagokkal működő módszerek II. Folyadék fázisú assay-k Fluoreszcencia polarizáció (FP) FL_IgG-FITC FL_EVBlue-FITC r 2 = slope= r 2 = slope=277.8 FL intensity FL intensity M w =150 kd FITC (nm) IgG-FITC Ex:180 Em: 90/ FITC (nm) EVANS-BLUE-FITC Ex:180 Em: 90/180 M w =1,35 kd FP (mp) FITC (nm) FP (mp) FITC (nm)
20 Alpha-technology 680 nm O O O 200 nm 680 nm O O nm
21 Ellenanyaggal működő módszerek Preparatív felhasználás
22 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció
23 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció
24 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció
25 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció
26 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció
27 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció
28 Preparatív felhasználás Makromolekulák Affinitás kromatográfia / immunprecipitáció Kovalens kötés a mátrix és az ellenanyag között Ag /Ab kapcsolás fiziológiáshoz hasonló körülmények (alacsony ionerő, ph ~7) Elúció fiziológiástól erősen eltérő körülmények (magas ionerő, savas v. lúgos ph) Emiatt hamar denaturálódnak az ellenanyag molekulák egy oszlopot/ mátrixot csak néhányszor lehet használni!
29 Preparatív felhasználás Sejtszeparálás Mechanikus, fluoreszcens és mágneses válogatás (Cell sorting)
30 Preparatív felhasználás Sejtszeparálás Mechanikus válogatás
31 Preparatív felhasználás Sejtszeparálás Fluoreszcens válogatás Fluoreszcensen jelölt sejtek Detektor Lézer + -
32 Preparatív felhasználás Sejtszeparálás Mágneses válogatás
33 Ellenanyaggal működő módszerek Funkcionális felhasználás
34 Funkcionális felhasználás Makromolekulák kölcsönhatásának gátlása Vírus neutralizáció Toxin neutralizáció Adhézió gátlás Citokin neutralizáció Sejt aktiváció / depléció Sejthalál indukció Receptor mediált aktiváció Vakcináció Ellenanyag terápia / RIT
35 Funkcionális felhasználás Receptor szignalizáció modellezése CD3 migm /IgD FcεRI EGFR CD95L
36 Ellenanyaggal működő módszerek Analitikai felhasználás Szilárdfázisú assay-k
37 Szilárd fázisú tesztrendszerek ELISA / RIA / FLIA Bead-array Fehérje micro-array Western-blot NanoPro EMSA-Supershift Immun-mikroszkópia Áramlási citometria ELISPOT
38 ELISA Enzime-linked immunosorbent assay Szilárd fázis mosás Enzimatikus erősítés Mikrolemez formátum (96-, 384-, 1526-lyuk/lemez) automatizálás, nagy áteresztőképesség, kedvező kontroll/minta arány Standardizált infrastruktúra (lemezek, pipetták, robotok, mosók, mérőműszerek) Olcsó, egyszerű
39 ELISA Ellenanyag teszt Antigén teszt (szendvics) Kompetitív tesztek Jel Jel Analit koncentráció Analit koncentráció
40 ELISA Szendvics teszt Kompetitív teszt
41 Bead-array 40 szérumminta 1 szérum biomarker 40 szérumminta szérum biomarker
42 Bead-array α-il1 α-il6 α-il8 α-mcp-1 α-tnfα α-ifnγ α-tgfβ α-il10
43 Bead-array FL2 FL3 Gyöngyszám FL1
44 Fehérje micro-array Üveg vagy membrán felület Antigén chip vagy ellenanyag chip Szendvics elrendezés FLIA
45 Western-blot - + Molekulatömeg szerinti szétválasztás utáni mérés Aspecifikus reakcióra érzékeny (membrán egységesen alapreakciót ad) Keresztreakcióra / polireaktivitásra kevésbé érzékeny, mint az ELISA /array típusú módszerek, mert a molekulatömeg segít
46 Western-blot
47 NanoPro
48 EMSA-Supershift - Nem fiziológiás körülmények között kell működniük Monospecificitás nagyon fontos +
49 Immun-mikroszkópia Immunhisztokémia /Immuncitokémia Enzim jelölés, színes kicsapódó szubsztrát Immunfluoreszcens mikroszkópia Fluoreszcens jelölés Immun-elektromikroszkópia Arany-kolloid jelölés
50 Immun-mikroszkópia
51 Immun-mikroszkópia
52 Áramlási citometria (FACS) Lézer Fluoreszcensen jelölt sejtek Detektor + -
53 ELISPOT Szendvics módszer Sejtek produktumait méri, de nem kvantitatív módon, hanem a termelő/nem-termelő sejtek arányában Ritka események is jól mérhetőek Speciális membrán aljú steril 96-lyukú mikrotiter lemez Standardizálás műszerigényes
54 ELISPOT
55 ELISPOT
56 ELISPOT n= p=46 f=4,6*10-5
57 Jövő heti program Dr. Nagy György: Ellenanyag terápia
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 8. előadás Immunszerológia, immunkémia Az immunoassay-k érzékenysége A fő szérumfehérje frakciók és az ahhoz tartozó fehérjék Az Ig valencia és aviditás viszonya
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek 1 Fogalmak
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok Immunaffinitás, ellenanyagok. Western blot, ELISA, FACS, immuncitokémia, mikroszkópok (fény, EM, fluoreszcens, konfokális) 6. Fehérjék kimuatásának
Géntechnikák. Immunoassays. Ágnes
Géntechnikák Immunoassays Készítette: MészM száros Ágnes Biokémiai tesztek melyekben az antigén antitest kölcsönhatásait használj lják k fel Antigén: n: kis szerves molekula, nagy szerves makromolekula
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok Immunaffinitás, ellenanyagok. Western-blot, ELISA, FACS, immuncitokémia, mikroszkópok (fény, EM, fluoreszcens, konfokális) 6. Fehérjék kimutatásának
Bajtay Zsuzsa
Immunológia II GY 2018.03.09. Bajtay Zsuzsa 4. Antigén-ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló jelöléses módszerek ELISA, ELISPOT, Western blot, Immunhisztokémia Antigén-ellenanyag kapcsolódáson alapuló
Modern mikroszkópiai módszerek 2 2011 2012
FLUORESZCENCIA MIKROSZKÓPIA A mintának a megvilágító fény által kiváltott fluoreszcencia emisszióját képezzük le. 1 Bugyi Beáta - PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2 FLUOROFÓROK BELSŐ (INTRINSIC) FLUORESZCENCIA
Ellenanyagok kimutatása diagnosztikai/prognosztikai célból
Ellenanyagok kimutatása diagnosztikai/prognosztikai célból Dr. Prohászka Zoltán Az MTA doktora Semmelweis Egyetem III. Sz. Belgyógyászati Klinika 2012-03-27 prohoz@kut.sote.hu Mennyiség Előfordulás (szekréció)
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok Immunaffinitás, ellenanyagok. Western-blot, ELISA, FACS, immuncitokémia, mikroszkópok (fény, EM, fluoreszcens, konfokális) 6. Fehérjék kimutatásának
Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév
Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév Ellenanyagok előállítása, tisztítása, jelölése, fragmentálása Monoklonális vs. poliklonális ellenanyagok Ellenanyagok előállítása
Az ellenanyag mint eszköz, diagnosztikum, gyógyszer. Vizler Csaba 2010
Azellenanyagminteszköz, diagnosztikum,gyógyszer VizlerCsaba2010 Azellenanyag kötésesetében helyesebblenneaviditásrólbeszélni, deinkábbaffinitásthasználunk AzismétlődőimmunizálásokegyretöbbspecifikusIgG
Abszorpció, emlékeztetõ
Hogyan készültek ezek a képek? PÉCI TUDMÁNYEGYETEM ÁLTALÁN RVTUDMÁNYI KAR Fluoreszcencia spektroszkópia (Nyitrai Miklós; február.) Lumineszcencia - elemi lépések Abszorpció, emlékeztetõ Energia elnyelése
Ellenanyag reagensek előállítása II Sándor Noémi
Ellenanyag reagensek előállítása II 2019.03.04. Sándor Noémi noemi.sandor@ttk.elte.hu Ellenanyagok módosítása 1. Kémiai módosítás Részleges redukció láncok közötti diszulfid hidak megszűnnek, szabad SH
Lumineszcencia alapjelenségek
Lumineszcencia alapjelenségek (Nyitrai Miklós; 211 február 7.) Lumineszcencia Definíció: Egyes anyagok spontán fénykibocsátása, a termikus fényemissziótól függetlenül, elektrongerjesztést követően. Lumineszcens
Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén
Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén Dr. Dallmann Klára A molekuláris biológia célja az élőlények és sejtek működésének molekuláris szintű
Antigén ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló
Antigén ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló analitikai módszerek ELISA, ELISPOT, Western blot, immunhisztokémia 2019.03.18. Józsi Mihály mihaly.jozsi@ttk.elte.hu (köszönet Sándor Noéminek) 4. Az
2011.11.25. Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2011.11.03. Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek. Áramlási citometria (flow cytometry)
Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2011.11.03. Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek Áramlási citometria (flow cytometry) Eljárás vagy mérési módszer, amellyel folyadékáramban lévő önálló részecskék,
Antigén szervezetbe bejutó mindazon corpuscularis vagy solubilis idegen struktúra, amely immunreakciót vált ki Antitest az antigénekkel szemben az
Antigén szervezetbe bejutó mindazon corpuscularis vagy solubilis idegen struktúra, amely immunreakciót vált ki Antitest az antigénekkel szemben az immunválasz során termelődött fehérjék (immunglobulinok)
Áramlási citometria 2011. / 4. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK
Áramlási citometria 2011. / 4 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára alkalmas
Ragyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól
Ragyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól Kele Péter egyetemi adjunktus Lumineszcencia jelenségek Biolumineszcencia (biológiai folyamat, pl. luciferin-luciferáz) Kemilumineszcencia
Immunkémiai vizsgálatok - hibalehetőségek, ezek megelőzése Dr. Imreh Éva
Immunkémiai vizsgálatok - hibalehetőségek, ezek megelőzése Dr. Imreh Éva Semmelweis Egyetem Laboratóriumi Medicina Intézet Központi Laboratórium Buda Fogalmak I Immunesszé két ligandum (Ag vagy haptén
Speciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek
Speciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek Fluoreszcencia kioltás Fluoreszcencia Rezonancia Energia Transzfer (FRET), Lumineszcencia A molekuláknak azt a fényemisszióját, melyet a valamilyen módon
PÉCSI TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNYI KAR Áramlási citometria, sejtszeparálás ÁRAMLÁSI CITOMETRIA, SEJTSZEPARÁLÁS BIOFIZIKA 2. 2015. március 3. Dr. Bugyi Beáta Biofizikai Intézet ÁRAMLÁSI folyadékáramban
Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE
Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 7. előadás Immunizálás. Poliklonális és monoklonális ellenanyag előállítása, tisztítása, alkalmazása Az antigén (haptén + hordozó) sokféle specificitású ellenanyag
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL Az egyes biomolekulák izolálása kulcsfontosságú a biológiai szerepük tisztázásához. Az affinitás kromatográfia egyszerűsége, reprodukálhatósága
Immunszerológia I. Agglutináció, Precipitáció. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE-KK
Immunszerológia I. Agglutináció, Precipitáció Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE-KK Antigén Antitest Alapok Antigén: vvt,, baktérium, latex gyöngy felszínén (µm( m nagyságú partikulum) Antitest:
Western blot technika
Western blot technika Immunoblot vagy Western blot - fehérjék vizsgálatára fejlesztették ki - módszer során az elektroforetikusan szétválasztott komponenseket szilárd hordozóra viszik - érzékenység vetekszik
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 3. előadás Az immunrendszer molekuláris elemei: antigén, ellenanyag, Ig osztályok Az antigén meghatározása Detre László: antitest generátor - Régi meghatározás:
Daganat immunterápia molekuláris markereinek tanulmányozása biofizikai módszerekkel. Áramlási és képalkotó citometria
Daganat immunterápia molekuláris markereinek tanulmányozása biofizikai módszerekkel. Áramlási és képalkotó citometria Szöllősi János, Vereb György Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet Orvos- és Egészségtudományi
Immunológia alapjai előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B-sejt receptorok:
Immunológia alapjai 3 4. előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B-sejt receptorok: molekuláris szerkezet, funkciók, alcsoportok Az antigén meghatározása
-Két fő korlát: - asztrogliák rendkívüli morfológiája -Ca szignálok értelmezési nehézségei
Nature reviewes 2015 - ellentmondás: az asztrociták relatív lassú és térben elkent Ca 2+ hullámokkal kommunikálnak a gyors és pontos neuronális körökkel - minőségi ugrás kell a kísérleti és analitikai
Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Modern Biofizikai Kutatási Módszerek
Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2012. 11. 08. Fotonok és molekulák ütközése Fény (foton) ütközése a molekulákkal fényszóródás abszorpció E=hν
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Diagnosztikai és terápiás módszerek biofizikai alapjai Tóth Mónika Ágnes PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2010.04.19. Az
Tóth Mónika Ágnes PTE ÁOK Biofizikai Intézet Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Biofizika szeminárium Tóth Mónika Ágnes PTE ÁOK Biofizikai
Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET)
Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Biofizika szeminárium PTE ÁOK Biofizikai Intézet Huber Tamás 2014. 02. 11-13. A gerjesztett állapotú elektron lecsengési lehetőségei Gerjesztés Fluoreszcencia
Mozgékony molekulák vizsgálata modern mikroszkópiával
Dr. Vámosi György Mozgékony molekulák vizsgálata modern mikroszkópiával Debreceni Egyetem ÁOK Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet Debrecen, 2015. nov. 25. www.meetthescientist.hu 1 26 Fulbright ösztöndíj
Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői.
Immunológia alapjai 3 4. előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői. Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B- sejt receptorok: molekuláris szerkezet, funkciók, alcsoportok Az antigén meghatározása
IMMUNOASSAY. Immunoassay típusok AZ IMMUNASSAY-K TÍPUSAI. Homogén - Heterogén. Direkt - Indirekt. Kompetitív - Nem kompetitív 3/22/16
Az immunassay-k jelentősége Az analitikai biokémia hátaslova IMMUNOASSAY Alkalmazás Gyógyszerszint meghatározás Részesedé s Analit típusa Koncentráció tartomány 26% Kis molekulák 10 nm-mm Fertőző betegségek
Immunológia alapjai. 10. előadás. Komplement rendszer
Immunológia alapjai 10. előadás Komplement rendszer A gyulladás molekuláris mediátorai: Miért fontos a komplement rendszer? A veleszületett (nem-specifikus) immunválasz része Azonnali válaszreakció A veleszületett
Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői
Immunológia alapjai 3 4. előadás Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői Az antigén fogalma. Antitestek, T- és B- sejt receptorok: molekuláris szerkezet, funkciók, alcsoportok Az antigén meghatározása
Lumineszcencia Fényforrások
Kiegészítés: színkeverés Lumineszcencia Fényforrások Alapszinek additív keverése Alapszinek kiegészítő szineinek keverése: Szubtraktív keverés Fidy udit Egyetemi tanár 2015, November 5 Emlékeztető.. Abszorpciós
Alapfogalmak I. Elsősorban fehérjék és ezek szénhidrátokkal és lipidekkel alkotott molekulái lokalizációjának meghatározásának eszköze.
Alapfogalmak I. Immunhisztokémia: Az immunhisztokémia módszerével szöveti antigének, vagy félantigének (haptének) detektálhatók in situ, specifikus antigén-antitest kötés alapján. Elsősorban fehérjék és
Biológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására
Szalma Katalin Biológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására Témavezető: Dr. Turai István, OSSKI Budapest, 2010. október 4. Az ionizáló sugárzás sejt kölcsönhatása Antone
Biomolekuláris szerkezeti dinamika
Kísérletek, mérések célja Biomolekuláris szerkezeti dinamika Kellermayer Miklós Biomolekuláris szerkezet és működés pontosabb megismerése (folyamatok, állapotok, átmenetek, kölcsönhatások, stb.) Rádióspektroszkópiák
A lézer-szkenning citometria lehetőségei. Laser-scanning cytometer (LSC) Pásztázó citométer. Az áramlási citometria fő korlátai
Az áramlási citométer bevezetésének fontosabb állomásai A lézer-szkenning citometria lehetőségei Bacsó Zsolt Coulter, 1949 Coulter számláló szabadalmaztatása Crosland-Taylor, 1953 sejtek hidrodinamikai
Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 5-6. Katona Éva. Scatchard egyenlet K= Ábrázoljuk az r/c hányadost az r függvényében
Affinitás Az az erő, mellyel egy antitest megfog egy epitópot. Nem kovalens kötések, melyek hozzájárulnak: ionos kölcsönhatások, hidrogén kötések, hidrofób kölcsönhatások. Immunológiai módszerek a klinikai
11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban
11. Dr. House. Biokémiai és sejtbiológiai módszerek alkalmazása az orvoslásban HIV fertőzés kimutatása (fiktív) esettanulmány 35 éves nő, HIV fertőzöttség gyanúja. Két partner az elmúlt időszakban. Fertőzött-e
Elválasztástechnikai és bioinformatikai kutatások. Dr. Harangi János DE, TTK, Biokémiai Tanszék
Elválasztástechnikai és bioinformatikai kutatások Dr. Harangi János DE, TTK, Biokémiai Tanszék Fő kutatási területek Enzimek vizsgálata mannozidáz amiláz OGT Analitikai kutatások Élelmiszer analitika Magas
Abszorpciós fotometria
A fény Abszorpciós fotometria Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai ntézet 2011. szeptember 15. E B x x Transzverzális hullám A fény elektromos térerősségvektor hullámhossz Az elektromos a mágneses térerősség
Sejt. Aktin működés, dinamika plus / barbed end pozitív / szakállas vég 1. nukleáció 2. elongáció (hosszabbodás) 3. dinamikus egyensúly
Biofizikai módszerek a citoszkeleton vizsgálatára I: Kinetikai és steady-state spektroszkópiai módszerek Sejt Citoszkeletális rendszerek Orbán József, 2014 április Institute of Biophysics Citoszkeleton:
Extracelluláris vezikulák
Extracelluláris vezikulák izolálása és detektálási módszerei Dr. Kovács Árpád Ferenc 2016. 10. 5 Ōsumi Yoshinori japán tudós ÁTTEKINTÉS (1) György et al 2011 ÁTTEKINTÉS (2) I. Izolálási módszerek 1. Differenciál
Gyors-kinetikai módszerek
Gyors-kinetikai módszerek Biofizika szemináriumok Futó Kinga Gyorskinetika - mozgástan Reakciókinetika: reakciók időbeli leírása reakciómechanizmusok reakciódinamika (molekuláris szintű történés) reakciósebesség:
Rövid és hosszútávú sejtkultúrák, funkcionális tesztek. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet Pécsi Tudományegyetem
Rövid és hosszútávú sejtkultúrák, funkcionális tesztek Immunológiai és Biotechnológiai Intézet Pécsi Tudományegyetem Bevezetés Definíció: az élő szervezeten kívül (in( vitro) ) tartunk élő sejteket Cél:
Módszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére
Módszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére Az ASEA-ban található reaktív molekulák egy komplex szabadalmaztatott elektrokémiai folyamat, mely csökkenti és oxidálja az alap sóoldatot,
A módszerek jelentősége. Gyors-kinetika módszerek. A módszerek közös tulajdonsága. Milyen módszerekről tanulunk?
Gyors-kinetika módszerek módszerek jelentősége 2010. március 9. Nyitrai Miklós biológiai mechanizmusok megértése; iológiai folyamatok időskálája; Vándorló melanocita (Victor SMLL). ms skálán való mérések.
A Flowcytometriás. en. Sinkovichné Bak Erzsébet,
A Flowcytometriás keresztpróba jelentısége élıdonoros veseátültet ltetést megelızıen. en. Sinkovichné Bak Erzsébet, Schmidt Lászlóné Mikor végezhetv gezhetı el a veseátültet ltetés? Veseátültetés s akkor
Fluoreszcencia 2. (Kioltás, Anizotrópia, FRET)
Fluoreszcencia 2. (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Gerjesztés A gerjesztett állapotú elektron lecsengési lehetőségei Fluoreszcencia 10-9 s k f Foszforeszcencia 10-3 s k ph 10-15 s Fizika-Biofizika 2. Huber
Szerológiai reakciók
Szerológiai reakciók Készítette: Dr. Szereday László 2015 Tartalomjegyzék 1. Alapfogalmak 2. Az immunrendszer felépítése 3. Szerológiai reakció 4. Friss fertőzés diagnózisa 5. Affinitás és aviditás 6.
Biomolekuláris kölcsönhatások vizsgálata felületi plazmonrezonancia elvén működő Biacore keszülékkel
Biomolekuláris kölcsönhatások vizsgálata felületi plazmonrezonancia elvén működő Biacore keszülékkel Biomolekuláris interakciók Fehérje-fehérje Fehérje-ligand Fehérje-DNS/RNS fehérje/ligand-lipid Alegység-kölcsönhatások,
Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben. Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga
Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga Labmagister Kft aktivitásai HumanCell SynLab Diagnosztika MensMentis LabMagister
Részletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025)
Részletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025) A pályázat megvalósítása során célunk volt egyrészt a molekulák asszociációjának tanulmányozására
a NAT-1-1678/2012 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz
Nemzeti Akkreditáló Testület RÉSZLETEZÕ OKIRAT a NAT-1-1678/2012 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz Az Országos Epidemiológiai Központ Bakteriológiai Mikológiai Parazitológiai és Tipizáló fõosztály
Immunológia alapjai. 16. előadás. Komplement rendszer
Immunológia alapjai 16. előadás Komplement rendszer A gyulladás molekuláris mediátorai: Plazma enzim mediátorok: - Kinin rendszer - Véralvadási rendszer Lipid mediátorok Kemoattraktánsok: - Chemokinek:
V-700 UV/VIS/NIR spektrofotométerek. Széles küvettatartó- és opcióválaszték. P-2000 polariméterek Biokémiai spektrométerek. FP-8000 Fluoriméterek
Laboratóriumi műszerek és berendezések 2015 2016 ABL&E-JASCO Magyarország Kft. Spektroszkópia V-700 UV/VIS/NIR spektrofotométerek Széles küvettatartó- és opcióválaszték P-2000 polariméterek Biokémiai spektrométerek
Immunhisztokémiai módszerek
Immunhisztokémiai módszerek Fixálás I. Fixálás I. A szövet eredeti szerkezetének megőrzéséhez, az enzimatikus lebontó folyamatok gátlásához: fixálószerek! kompromisszumkeresés - alkoholok: vízelvonók!!!
Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév
Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév A kurzus célja Az ellenanyagok széleskörű (diagnosztika, terápia, kutatás) felhasználhatóságának bemutatása, mindennapos orvos-biológiai
Környezetvédelmi analitika II. (BMEVESAM108) Immunanalitika, Lab-on-a-chip
Környezetvédelmi analitika II. (BMEVESAM108) Immunanalitika, Lab-on-a-chip Helyszín: Ch 1.emelet 106. Gyakorlatvezetők: Hajas Lívia és Török Kitti Email: ktorok@mail.bme.hu Lab-on-a-chip (LOC) technika
Az Oxidatív stressz hatása a PIBF receptor alegységek összeszerelődésére.
Újabban világossá vált, hogy a Progesterone-induced blocking factor (PIBF) amely a progesteron számos immunológiai hatását közvetíti, nem csupán a lymphocytákban és terhességgel asszociált szövetekben,
HLA-B27 pozitivitás vizsgálati lehetőségei
HLA-B27 pozitivitás vizsgálati lehetőségei Pálinkás László, Uherkovichné Paál Mária, Berki Timea Pécsi Tudományegyetem Klinikai Központ Immunológiai és Biotechnológiai Intézet HLA-B27 Humán Leukocita Antigén
Áramlási citométerek klinikai alkalmazása
Vásárhelyi Barna Semmelweis Egyetem Laboratóriumi Medicina Intézet Áramlási citométerek klinikai alkalmazása Előadás tartalma Áramlási citométer részei, működési elve Vizsgálható paraméterek Technikai
Áramlási citometria elve
Áramlási citometria elve Olyan műszer, amely szuszpendált egyedi sejtek fluoreszcens és fényszórási paramétereit méri nagy sebességgel (akár több ezer sejt/sec) Áramlási citometria Fluoreszcens mikroszkópia
RÉSZLETES BESZÁMOLÓ Az OTKA által támogatott konzorcium működésében az Uzsoki utcai Kórház feladata a szövetminták gyűjtése, előzetes feldolgozása, ill. a betegek utánkövetése, valamint az utánkövétésre
Immunológia alapjai előadás. A humorális immunválasz formái és lefolyása: extrafollikuláris reakció és
Immunológia alapjai 15-16. előadás A humorális immunválasz formái és lefolyása: extrafollikuláris reakció és csíracentrum reakció, affinitás-érés és izotípusváltás. A B-sejt fejlődés szakaszai HSC Primer
Abszorpciós fotometria
abszorpció Abszorpciós fotometria Spektroszkópia - Színképvizsgálat Spektro-: görög; jelente kép/szín -szkópia: görög; néz/látás/vizsgálat Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2012. február Vizsgálatok
Komplex egyszerű Aktin alapú mikrofilamentum rsz. Hogyan vizsgálhatunk folyamatokat? Komplex egyszerű S E J T
Biofizikai módszerek a citoszkeleton vizsgálatára I. Kinetikai, steady-state módszerek, spektroszkópiai vizsgálatok Komplex egyszerű S E J T A citoszkeletális rendszer Orbán József, 213 Április Aktin citoszkeleton
Fény kölcsönhatása az anyaggal:
Fény kölcsönhatása az Fény kölcsönhatása az : szórás, abszorpció, emisszió Kellermayer Miklós Fényszórás A fényszórás mérése, orvosi alkalmazásai Lord Rayleigh (1842-1919) J 0 Light Fényforrás source Rayleigh
A fluoreszcencia orvosibiológiai. alkalmazásai. Fluoreszcencia forrása I. Fluoreszcencia alkalmazások. Kellermayer Miklós
A fluoresczencia orvosbiológiai alkalmazásai Kellermayer Miklós A fluoreszcencia orvosibiológiai alkalmazásai Fluoreszcencia mikroszkópia DNS szekvenálás (lánc terminációs módszer) DNS festés (EtBr) DNS
Monoklonális antitestek előállítása, jellemzői
Monoklonális antitestek előállítása, jellemzői 2011. / 3 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Antitestek szerkezete IgG Monoklonális ellenanyag előállítás: Hybridoma technika Lehetővé teszi kezdetben
Immunológia alapjai. Az immunválasz szupressziója Előadás. A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek
Immunológia alapjai 19 20. Előadás Az immunválasz szupressziója A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek Mi a szupresszió? Általános biológiai szabályzó funkció. Az immunszupresszió az
Műszeres analitika. Abrankó László. Molekulaspektroszkópia. Kémiai élelmiszervizsgálati módszerek csoportosítása
Abrankó László Műszeres analitika Molekulaspektroszkópia Minőségi elemzés Kvalitatív Cél: Meghatározni, hogy egy adott mintában jelen vannak-e bizonyos ismert komponensek. Vagy ismeretlen komponensek azonosítása
Antigén, Antigén prezentáció
Antigén, Antigén prezentáció Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék Bajtay Zsuzsa ELTE, TTK Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék ORFI Klinikai immunológia tanfolyam, 2019. február. 26 Bev. 2. ábra Az
A fény. Abszorpciós fotometria Fluoreszcencia spektroszkópia. A fény. A spektrumok megjelenési formái. A fény kettıs természete: Huber Tamás
A fény Abszorpciós fotometria Fluoreszcencia spektroszkópia. 2010. október 19. Huber Tamás PTE ÁOK Biofizikai Intézet E A fény elektromos térerısségvektor hullámhossz A fény kettıs természete: Hullám (terjedéskor)
FEHÉRJE VAKCINÁK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA III.
Az élettudományi-klinikai felsőoktatás gyakorlatorientált és hallgatóbarát korszerűsítése a vidéki képzőhelyek nemzetközi versenyképességének erősítésére FEHÉRJE VAKCINÁK BIOTECHNOLÓGIAI ELŐÁLLÍTÁSA III.
Immunológiai Gyakorlatok II. 2016. április 20-26.
Immunológiai Gyakorlatok II. 2016. április 20-26. T- és B-limfociták szeparálása (dúsítása) egér lépsejt-szuszpenzióból; neutrofil extracelluláris csapda (NET) vizsgálata Anyagok: steril fülke, olló, csipesz,
Mézerek és lézerek. Berta Miklós SZE, Fizika és Kémia Tsz. 2006. november 19.
és lézerek Berta Miklós SZE, Fizika és Kémia Tsz. 2006. november 19. Fény és anyag kölcsönhatása 2 / 19 Fény és anyag kölcsönhatása Fény és anyag kölcsönhatása E 2 (1) (2) (3) E 1 (1) gerjesztés (2) spontán
Adatgyőjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb mőszerei
GazdálkodásimodulGazdaságtudományismeretekI.Közgazdaságtan KÖRNYEZETGAZDÁLKODÁSIMÉRNÖKIMScTERMÉSZETVÉDELMIMÉRNÖKIMSc Tudományos kutatásmódszertani, elemzési és közlési ismeretek modul Adatgyőjtés, mérési
BD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei
BD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei Andrea Süle, PhD Termékspecialista BD Diagnostics, Preanalytical Systems MOLSZE XI. Nagygyőlés, Pécs, 2009 augusztus 27-29. BD A BD egy orvostechnológiai
VÉRCSOPORTOK Vércsoport-szerológiai kompatibilitás Dr. Nemes Nagy Zsuzsa Vércsoportszerológia kezdetei Karl Landsteiner Vörösvérsejt antigének Vércsoport antigének Örökletes tulajdonságok Genetikusan allélrendszerek
Rövid ismertető. Modern mikroszkópiai módszerek. A mikroszkóp. A mikroszkóp. Az optikai mikroszkópia áttekintése
Rövid ismertető Modern mikroszkópiai módszerek Nyitrai Miklós 2010. március 16. A mikroszkópok csoportosítása Alapok, ismeretek A működési elvek Speciális módszerek A mikroszkópia története ld. Pdf. Minél
Tartalomjegyzék. Emlékeztetõ. Emlékeztetõ. Spektroszkópia. Fényelnyelés híg oldatokban 4/11/2016. A fény; Abszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék PÉCS TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNY KAR A fény; Abszorpciós spektroszkópia Elektromágneses hullám kölcsönhatása anyaggal; (Nyitrai Miklós; 2016 március 1.) Az abszorpció mérése;
Kromatográfiás módszerek
Kromatográfiás módszerek Mi a kromatográfia? Kromatográfia ugyanazon az elven működik, mint az extrakció, csak az egyik fázis rögzített ( állófázis ) és a másik elhalad mellette ( mozgófázis ). Az elválasztást
AZ IMMUNOLÓGIAI LABORATÓRIUM DIAGNOSZTIKAI LEHETİSÉGEI. http://rimm.dote.hu
AZ IMMUNOLÓGIAI LABORATÓRIUM DIAGNOSZTIKAI LEHETİSÉGEI http://rimm.dote.hu Az Immunológiai Laboratórium feladata: A, Egy beteg immunrendszerének komplex vizsgálatával adatokat szolgáltatni egy immunológiai
ATOMEMISSZIÓS SPEKTROSZKÓPIA
ATOMEMISSZIÓS SPEKTROSZKÓPIA Elvi jellemzők, amelyek meghatározzák a készülék felépítését magas hőmérsékletű fényforrás (elsősorban plazma, szikra, stb.) kis méretű sugárforrás (az önabszorpció csökkentése
Mikrohullámú abszorbensek vizsgálata
Óbudai Egyetem Anyagtudományok és Technológiák Doktori Iskola Mikrohullámú abszorbensek vizsgálata Balla Andrea Témavezetők: Dr. Klébert Szilvia, Dr. Károly Zoltán MTA Természettudományi Kutatóközpont
Szerves kémiai analízis TANTÁRGYI KOMMUNIKÁCIÓS DOSSZIÉ
BSC ANYAGMÉRNÖK SZAK VEGYIPARI TECHNOLÓGIAI SZÁMÁRA KÖTELEZŐ TANTÁRGYI KOMMUNIKÁCIÓS DOSSZIÉ MISKOLCI EGYETEM MŰSZAKI ANYAGTUDOMÁNYI KAR KÉMIAI INTÉZET Miskolc, 2016 1 Tartalomjegyzék 1. Tantárgyleírás,
Nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia (HPLC)
Nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia (HPLC) Kromatográfiás módszerek osztályba sorolása 2 Elúciós technika A mintabevitel ún. dugószerűen történik A mozgófázis a kromatogram kifejlesztése alatt folyamatosan
AZ ELVÁLASZTÁSTECHNIKA KORSZERŰ MÓDSZEREI
AZ ELVÁLASZTÁSTECHNIKA KORSZERŰ MÓDSZEREI A BIOANALITIKAI LABORGYAKORLAT ELMÉLETI HÁTTERE Készítette az A3 csoport: Kiss Bálint Mezei Pál Dániel Szkiba Ivett Szűcs Rózsa Varga Dániel 2010/2011 TAVASZI
Hagyományos HPLC. Powerpoint Templates Page 1
Hagyományos HPLC Page 1 Elválasztás sík és térbeli ábrázolása Page 2 Elválasztás elvi megoldásai 3 kromatográfiás technika: frontális kiszorításos elúciós Page 3 Kiszorításos technika minta diszkrét mennyisége
Reakciókinetika. Általános Kémia, kinetika Dia: 1 /53
Reakciókinetika 9-1 A reakciók sebessége 9-2 A reakciósebesség mérése 9-3 A koncentráció hatása: a sebességtörvény 9-4 Nulladrendű reakció 9-5 Elsőrendű reakció 9-6 Másodrendű reakció 9-7 A reakciókinetika