Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén

Átírás

1 Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén Dr. Dallmann Klára

2 A molekuláris biológia célja az élőlények és sejtek működésének molekuláris szintű tanulmányozása. Ezt segíti a genetika sejtbiológia biokémia módszerei és eredményei.

3 Számos módszert fejlesztettek ki, ezek közé tartozik: a fehérjék kimutatására és mérésére szolgáló ELISA technika sejt örökítő anyagának, a DNS-nek a vizsgálatára alkalmas PCR technika

4 Molekuláris biológiai eljárás a fehérjék kimutatására ELISA teszt DNS fehérje Kimutatás alapja: a sejtekben lévő DNS által kódolt genetikai információ alapján képződött fehérje és specifikus antitest reakciója (ELISA teszt) sejt

5 ELISA ( Enzyme- Linked ImmunoSorbent Assay ) teszt Enzim-immun analitikai eljárás másodlagos antitest+enzim Antitest + szubsztrát Izolált fehérje minta szinreakció (látható, vagy műszeresen mérhető)

6 ELISA teszt Előny: gyors egyszerű, nem igényel komoly laboratóriumi hátteret DE (Reveal) Hátrány! A fehérje hőérzékeny, ez befolyásolja kimutatás érzékenységét és megbízhatóságát

7 Molekuláris biológiai eljárás specifikus DNS szekvenciák kimutatására DNS PCR reakció fehérje sejt Lehetővé teszi a DNS különböző szakaszainak felsokszorozását

8 Molekuláris biológiai eljárás a DNS kimutatására PCR reakció ciklikusan ismételt enzimreakció, specifikus primerek jelenlétében Fluoreszcens próba Real-Time PCR

9 PCR reakció termékének kimutatása Agaróz gélen Fluoreszcens jel megjelenése alapján Real Time PCR

10 PCR reakció előnye rendkívül érzékeny alkalmas mennyiségi meghatározásra is DNS stabil, a fehérjénél kevésbé hőérzékeny

11 Mikor szükséges molekuláris módszerek alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén? A fogyasztó alapvető joga, hogy tudja a megvásárolt termék miből készült, illetve milyen tulajdonságokkal rendelkezik. Választás lehetősége. Törvényi szabályozás - jelölési kötelezettség Más ( vizuális, fizikai, kémiai, biológiai) vizsgálati módszerek nem alkalmasak

12 GMO törvényi szabályozás EU és hazai törvényhozás szabályozta a GMO- k kereskedelmi forgalomba kerülését és jelölését EU rendelet 1829/ /2003 Magyarország XXVII Géntechnológiai tevékenységet szabályozó törvény

13 Genetikailag módosított szervezet (GMO): olyan szervezet, amelyben a génállományt molekuláris genetikai eszközökkel változtatták meg pl. idegen DNS-t építettek be a növény eredeti DNS-ébe Növényi DNS

14 GM növény felépítésének vázlata Beépített DNS Növényi DNS promóter Növényvédőszer / rovarrezisztencia terminátor növényi DNS

15 GMO tartalom laboratóriumi vizsgálatának általános menete Laboratóriumi minta DNS izolálás Fehérje izolálás Kvalitativ PCR ELISA test Real-time PCR

16 GMO vizsgálat menete Minta homogenizálása Kvalitatív GMO teszt negatív pozitív GM növény azonosítása nem engedélyezett engedélyezett mennyiségi meghatározás >0.9% <0.9%

17 Élelmiszerek jelölése - Törvényi szabályozás Törvények az élelmiszerlánc szabályozásában A fogyasztót segíti a jelölés, amely tájékoztat az élelmiszer fajtájáról, azonosságáról, jellemzőiről, összetételéről, mennyiségéről, eltarthatóságáról, származásáról vagy eredetéről előállítási vagy termelési módjáról

18 Élelmiszerhamisítás Amennyiben nem azok az összetevők szerepelnek a termékben, melyeket a vásárló a feltüntetett adatok alapján elvár, ekkor beszélhetünk élelmiszerhamisításról. Élelmiszerhamisítás kimutatása?

19 Élelmiszerek összetételének kimutatása PCR módszerrel különböző állat és növényfajok azonosítása lehetséges specifikus DNS szekvencia alapján, feldolgozott élelmiszerekből is. Pl.szarvasmarha, sertés, strucc, birka Pl. kukorica, szója, burgonya, cukorrépa, sárgabarack

20 Jövő molekuláris biológiai eljárása: chip technológia chip technológia- technikai miniatürizálás eredménye, Előny: egyszerre több DNS szekvencia azonosítása lehetséges egyetlen mintából

21 Összefoglalás A molekuláris biológiai eljárások felhasználhatók: Beszállítók ellenőrzésében Keresztszennyeződések kimutatására Etikus piaci magatartás betartására

22 Köszönöm a megtisztelő figyelmet