Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-1 04/2007:0661 CLOXACILLINUM NATRICUM Kloxacillin-nátrium C 19 H 17 ClN 3 NaO 5 S.H 2 O M r 475,9 DEFINÍCIÓ Nátrium-[(2S,5R,6R)-6-[[[3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4-il]karbonil]amino]- 3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2-karboxilát] monohidrát. Fermentációs termékből előállított félszintetikus származék. Tartalom: 95,0 102,0% (vízmentes anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér kristályos, nedvszívó por. Oldékonyság: vízben és metanolban bőségesen oldódik; etanolban (96%) oldódik. AZONOSÍTÁS Első azonosítás: A, D. Második azonosítás: B, C, D. A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Mintakészítés: pasztilla.
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-2 Összehasonlítás: CRS kloxacillin-nátriummal. B. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. 25 mg vizsgálandó anyagot 5 ml R vízben oldunk. Összehasonlító oldat (a). 25 mg CRS kloxacillin-nátriumot 5 ml R vízben oldunk. Összehasonlító oldat (b). 25 25 mg CRS kloxacillin-nátriumot, CRS dikloxacillin-nátriumot és CRS flukloxacillin-nátriumot 5 ml R vízben oldunk. Lemez: R VRK szilanizált szilikagél lemez. Kifejlesztőszer: R aceton (30 térfogatrész) és R ammónium-acetát 154 g/l töménységű oldatának (70 térfogatrész) elegye. Az elegy ph-ját R tömény ecetsavval 5,0-re állítjuk be. Felvitel: 1 μl. Kifejlesztés: 15 cm fronttávolságig. Szárítás: levegőn. Előhívás: a lemezt a foltok megjelenéséig jód gőztérbe helyezzük, majd nappali fényben vizsgáljuk. Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat: a kromatogramon 3 jól elkülönülő folt látható. Értékelés: A vizsgálati oldat kromatogramjának főfoltja helyét, színét és méretét tekintve egyezzék meg az a) összehasonlító oldat kromatogramjának főfoltjával. C. Kb. 2 mg anyagot egy 150 15 mm-es kémcsőben 0,05 ml R vízzel megnedvesítünk. 2 ml R kénsav formaldehid reagens hozzáadása és a kémcső tartalmának összekeverése után halvány zöldessárga színeződés észlelhető. A kémcsövet 1 percig vízfürdőben melegítve, az oldat színe sárgára változik. D. A nátriumion a) pont szerinti azonossági reakcióját elvégezve (2.3.1) az előírt változás észlelhető.
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-3 VIZSGÁLATOK S oldat. 2,50 g anyagot R szén-dioxid-mentes vízzel 25,0 ml-re oldunk. Az oldat külleme. Az S oldat tiszta legyen (2.2.1). Az S oldat 430 nm-en mért abszorbanciája (2.2.25) legfeljebb 0,04 lehet. ph (2.2.3): 5,0 7,0. Az S oldatot vizsgáljuk. Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): +160 és +169 között (vízmentes anyagra). 0,250 g anyagot R vízzel 25,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Vizsgálati oldat (a). 50,0 mg vizsgálandó anyagot a mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Vizsgálati oldat (b). Az a) vizsgálati oldat 5,0 ml-ét a mozgófázissal 50,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (a). 50,0 mg CRS kloxacillin-nátriumot a mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Az oldat 5,0 ml-ét a mozgófázissal 50,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). A b) vizsgálati oldat 5,0 ml-ét a mozgófázissal 50,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). 5 mg CRS flukloxacillin-nátriumot és 5 mg CRS kloxacillin-nátriumot a mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Oszlop: méretei: l = 0,25 m; Ø = 4 mm, állófázis: R kromatográfiás célra szánt oktadecilszililezett szilikagél (5 μm), Mozgófázis: R acetonitril (25 térfogatrész) és R kálium-dihidrogén-foszfát 2,7 g/l töménységű, előzetesen R hígított nátrium-hidroxid oldattal ph 5,0-re beállított oldatának (75 térfogatrész) elegye. Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 225 nm-en.
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-4 Injektálás: 20 μl az a) vizsgálati oldatból, valamint a b) és c) összehasonlító oldatokból. Kromatografálási idő: a kloxacillin-nátrium retenciós idejének ötszöröse. Rendszeralkalmasság: c) összehasonlító oldat: csúcsfelbontás: legalább 2,5, a kloxacillin (első csúcs) és a flukloxacillin (második csúcs) között. Követelmények: szennyezők egyenként: csúcsterületük nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján megjelenő főcsúcs területe (1,0%); szennyezők összesen: csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján megjelenő főcsúcs területének ötszöröse (5,0%); elhanyagolási határ: a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,05-szorosa (0,05%). N,N-Dimetilanilin (2.4.26, B módszer): legfeljebb 20 ppm. 2-Etilhexánsav (2.4.28): legfeljebb 0,8 %m/m. Víztartalom (2.5.12): 3,0 4,5%. Az anyag 0,300 g-ját vizsgáljuk. Bakteriális endotoxinok (2.6.14): kevesebb, mint 0,20 NE/mg. A parenterális gyógyszerkészítmények előállítására szánt anyag abban az esetben, ha a készítmény előállítása során nem alkalmaznak a bakteriális endotoxinok eltávolítására alkalmas eljárást feleljen meg e vizsgálat követelményének is. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékromatográfia (2.2.29), a Rokon vegyületek pontban leírtak szerint, a következő módosításokkal: Injektálás: b) vizsgálati oldat és a) összehasonlító oldat. Rendszeralkalmasság: ismételhetőség: legfeljebb 1,0% relatív szórás; az a) összehasonlító oldatot 6-szor injektáljuk.
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-5 A százalékos C 19 H 17 ClN 3 NaO 5 S-tartalmat a CRS kloxacillin-nátrium deklarált tartalma alapján számítjuk ki. ELTARTÁS Légmentesen záró tartályban, 25 C-ot meg nem haladó hőmérsékleten. Ha az anyag steril, akkor steril, légmentesen záró, garanciazáras tartályban. SZENNYEZŐK A. R = CO 2 H: (4S)-2-[karboxi-[[[3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4- il]karbonil]amino]metil]-5,5-dimetiltiazolidin-4-karbonsav (kloxacillinpenicillosav), B. R = H: (2RS,4S)-2-[[[[3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4- il]karbonil]amino]metil]-5,5-dimetiltiazolidin-4-karbonsav (kloxacillinpenillosav), C. (2S,5R,6R)-6-amino-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2- karbonsav (6-aminopenicillánsav),
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-6 D. 3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4-karbonsav, E. (2S,5R,6R)-6-[[(2S,5R,6R)-6-[[[3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4- il]karbonil]amino]-3,3,-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2- karbonil]amino]-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2- karbonsav (6-APA-kloxacillin-amid).