Cystás fibrózisos betegek légúti mikrobiótái a MALDI "érában" Kristóf Katalin, Juhász Emese, Pongrácz Júlia, Iván Miklós Semmelweis Egyetem, Laboratóriumi Medicina Intézet Klinikai Mikrobiológiai Diagnosztikai Laboratórium
CF és légúti patogének A légúti fertőzések időbeli kezelése nagyban befolyásolja a CF-s betegek életkilátásait Az un. nem-fermentáló baktériumok klasszikus identifikálása alacsony specificitású Automata rendszerek alkalmazása nem megbízható - CF-s betegek P. aeruginosa azonosítási találata: 57%-non-mukoid; 40%- mukoid (téves identifikálás: P.fluorescens/P. putida, Alcaligenes spp.) Molekuláris módszerek - 16S és 23S rrns PCR genus szinten vagy group szinten; RFLP analízis 16S rrns vagy reca gén - Genomovariánsok azonosítására még specifikusabb próbák szükségesek MALDI-TOF - Rutinban alkalmazható, gyors eredményt adó módszer Jövő: komplex, mikróba-közösségek vizsgálata (szekvenálásos technikák)
Vizsgálati eredményeink 2013-2014 Ábra: CF betegek hány %-a fertőződött/kolonizálódott a jelzett patogénekkel a légúti mintáik vizsgálatai alapján (tisztított adatok)
Achromobacter xylosoxidans (Alcaligenes xylosoxidans) Növekvő prevalencia (3-8%) Gyakori ko-fertőzésekben Leírások keresztfertőzésekről - Nemfermentáló, oxidáz-pozitív - Lassan növő (EM: laktóz negatív) - Kataláz pozitív, indol negatív, H2S negatív, ureáz:negatív - Biofilmképző - Tüdőgyulladás/károsítás~ PA
Achromobacter xylosoxidans antibiotikum rezisztencia Béta-laktamázok: - intrinsic OXA 114, OXA 243, OXA 2 - Cefalosporinázok, bla ampc - Szerzett karbapenemázok (bla IMP ) Efflux mechanizmus (AxyABM, AxyXY-OprZ): - VELESZÜLETETT AMINOGLIKOZID REZISZTENCIA - cefepim, karbapenem, fluorokinolon, (tetracyclin, erythromycin) rezisztencia Enzimtermelés: - Aminoglikozidokat bontó enzimek (AAC(6 )-Ib és aada1) EUCAST Rezisztens:ertapenem, ceftriaxon Egyéb ajánlások - Rezisztens: amoxycillin/klavulánsav, cefepim, ciprofloxacin, AG, fosfomycin
Achromobacter xylosoxidans terápiás lehetőségek Irodalmi in vitro érzékenységi eredmények : Piperacillin/tazobactam: 40-100% Meropenem: 52-100% Sulphametoxazole/trimethoprim: 0-92% növekvő R tendencia Ceftazidim: 45-85% (többi CS R) Minocyclin/Tigecyclin 44-51% TIG MIC 4ug/ml! Colistin: 28-70 % Chloramphenicol: 22-82% Fluorokinolonok: LEV/MXF alacsonyabb MIC Elsőként választandó: piperacillin/tazobactam Meropenem Sulphametoxazole/trimethoprim Esetleg: Ceftazidim Minocyclin Colistin Chloramphenicol Kombináció: MEM+CIP/LEV+/-colistin inhaláció Általában javasolt a kombináció
Pseudomonas genus - Taxonómiai változások! Baktérium Klinikum/izolátum forrása P. fluorescens CF-s beteg légúti mintája, transzfúziós szövődményként szepszis, pseudobakterémia nozokomiális szepszis, pneumónia, ÚTI; (CF, idős kor, immundeficiencia - fontos P. putida alapbetegség) P. veronii gasztrointesztinális gyulladásos pseudotumor P. monteilii bizonytalan klinikum - széklet, epe, placenta, bronchusváladék, pleurális folyadék, vizelet P. mosseilii bizonytalan klinikum - számos különböző klinikai minta P. stutzeri P. mendocina endocarditis CF-s beteg légúti mintája, alkohol-abúzus melleti pneumónia, immunkomprimált beteg bakterémiája, meningitise, pneumóniája, osteomyelitis, iatrogén endphtalmitis, pseudobakterémia; bizonytalan klinikum - intubált beteg légúti mintája, vizelet, sebváladék P. alcaligenes endocarditis (BMT) meningitis; köpet izolátum - bizonytalan klinikum;sebváladék - társfertőzőként - bizonytalan P. pseudoalcaligenes klinikum P. luteola bakterémia, cellulitis, osteomyeltis, peritonitis, endocarditis, műtét utáni meningitis centrális vénás kanül eredetű bakterémia immunkomprimált betegben, peritonitis P. oryzihabitans peritoneális dialízis után, cellulitis, tályog, sebfertőzés, műtét utáni meningitis - Általában érzékenyek az antipseudomonas szerekre - EUCAST P.aeruginosa-ra vonatkozó ajánlás alkalmazható Pseudomonas monteilli Pseudomonas putida Pseudomonas fluorescens Pseudomonas stutzeri Pseudomonas mosselii Felnőttek pseudomonas sp.-nek faji megoszlása (2013-14: 14 beteg) Gyermekek: 3 beteg P. monteilii 1 beteg P. stutzeri
Egyéb nem fermentáló baktériumok Ochrobactrum antropi Paracoccus yeeii Sphingobacterium multivorum Pandorea sputorum Chryseobacterium gleum gyermek felnőtt Delftia acidovorans Rhizobium radiobacter 0 1 2 3 4 5 6 Ábra: kolonizált/fertőzött betegek száma 2013-14
Pandoraea sputorum Pandoraea : 2000-ben a korábbi Pseudomonas rrna group II.ből leválasztott nemzetség Jelenleg 9 faj (mindegyik CF-s betegből izolált) Burkholderia vagy Ralstonia fajoknak azonosíthatjuk biokémiai tesztekkel (filogenetikai hasonlóság) Általában érzékeny: piperacillin-tazobactam, imipenem, trimethoprim-sulfamethoxazol Általában rezisztens: aminoglikozidok, cefotaxim/ceftriaxon, ceftazidim, ciprofloxacin amoxicillin-klavulánsav, meropenem, Egyedi pontos vizsgálat! Lassan növő, oxidáz-pozitív, nem fermentáló baktérium Nyákos telepek (biofilmképzés) Colistin rezisztens!
Ochrobactrum anthropi (Achromobacter sp.) Korábban Achromobacter A, C, D (előtte CDC Vd-1, Vd-2)- (Név eredete: ochro: pale yellow) Rezisztencia tulajdonságok: AmpC típusú β-laktamáz Általános β-laktám R Imipenem terápia hatástalansága Érzékeny: SXT, fluorokinolonok Mérsékelt/variábilis érzékenység: Aminoglikozidok, tetracyclinek - Lassan növő, nyákos telepek - Oxidáz pozitív, EM: laktóz negatív, nem-fermentáló - Biofilmképzés! Colistin rezisztens!
Rhizobium radiobacter (Agrobacterium radiobacter) Jól ismert növénypatogén Katéter/kanülasszociált fertőzések okozója főleg Alacsony virulencia Variábilis atb. érzékenység Általában érzékenyek: Cefepim, harmadik generációs CS, piperacillin-tazobactam, karbapenemek, ciprofloxacin, sulfamethoxazole/trimethoprim re! Indukálható cefalosporináz termelő Lassan növő, nyákos, oxidázpozitív, EM: laktóz negatív telepek
És a többiek Delftia acidovorans (Comamonas acidovorans, Pseudomonas acidovorans) Paracoccus yeeii Chryseobacterium gleum (Flavobacterium IIb)
Összefoglalás Egyéb nem-fermentálók jelentősége nő Lehetőségeink szerint pontos identifikálás (előtte izolálás!) => természetes rezisztencia => beteg nyomonkövetése Filogenetikai diagramja egy CF-s köpetmintának: 169 OUT Plos One 2012; 7(9)
Köszönöm a figyelmet!