Staphylococcus haemolyticus törzsek antibiotikum rezisztenciájának. nak lis megoszlása. sa alapján. Kardos Szilvia,

HTML
DOWNLOAD

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "Staphylococcus haemolyticus törzsek antibiotikum rezisztenciájának. nak lis megoszlása. sa alapján. Kardos Szilvia,"

Tivadar Németh
8 évvel ezelőtt
Látták:

Staphylococcus haemolyticus törzsek antibiotikum rezisztenciájának nak klonális lis megoszlása sa pulzáló gélelektroforézis alapján Kardos Szilvia, Volter Imréné,, Pesti Józsefné, Ghidán Ágoston,

1 Staphylococcus haemolyticus törzsek antibiotikum rezisztenciájának nak klonális lis megoszlása sa pulzáló gélelektroforézis alapján Kardos Szilvia, Volter Imréné,, Pesti Józsefné, Ghidán Ágoston, Kristóf f Katalin, Rozgonyi Ferenc, Nagy KárolyK Semmelweis Egyetem, Orvosi Mikrobiológiai Intézet Magyar Orvosi Laboratóriumi riumi Szakdolgozók k Egyesülete (MOLSZE) X. (jubileumi) Nagygyőlése Budapest, augusztus 30 szeptember 01.

2 Bevezetés Staphylococcus haemolyticus Fiziológiás körülmények között Intenzív centrumok Az emberi bır normál baktérium flórájának tagjai Antibiotikum rezisztencia magas Gyakran polirezisztens Az ép bırön és nyálkahártyákon fertızést nem okoz A kolonizációt és fertızést okozó baktériumok eredete nem egyértelmően tisztázott?

A törzsek t azonosítása: sa: Anyagok és s módszerekm kataláz, koaguláz,, telepmorfológia API ID 32 Staph (BioMérieux) Az antibakteriális érzékenységi vizsgálatok korongdiffúzi ziós és mikrodilúci

3 A törzsek t azonosítása: sa: Anyagok és s módszerekm kataláz, koaguláz,, telepmorfológia API ID 32 Staph (BioMérieux) Az antibakteriális érzékenységi vizsgálatok korongdiffúzi ziós és mikrodilúci ciós módszerrel (NCCLS/CLSI) Fenotípusos oxacillin rezisztencia verifikálása meca gén n kimutatásával PCR módszerrel m A sejtek adhézi ziójáért (biofilm( biofilm-képzés) ) felelıs s gének g jelenlétének nek kimutatása icaa, icab. icac, icad,icar, fbna, fbnb A törzsek t epidemiológiai vizsgálata rezisztencia fenotípus meghatároz rozásával genotipizálással pulzáló gélelektroforézis PFGE (Sma( SmaI)

2001-2005 2005 között k a Semmelweis Egyetem intenzív v centrumaiban ápolt szeptikus állapotú betegekbıl l kitenyészett Staphylococcus haemolyticus törzsek gyakorisága ga 70 60

4 között k a Semmelweis Egyetem intenzív v centrumaiban ápolt szeptikus állapotú betegekbıl l kitenyészett Staphylococcus haemolyticus törzsek gyakorisága ga gyakoriság (%) S.haemolyticus összes Gram-pozitív összes Gram-negatív 163 összesen 2417 izolátum átlagosan évente ~7 7 %

5 98 hemokultúrából kitenyészett S. haemolyticus törzs MIC érték meghatározása antibiotikum oxacillin vancomycin teicoplanin amikacin gentamicin clindamycin ciprofloxacin clarithromycin telithromycin levofloxacin moxifloxacin rezisztens % MIC (µg/ml)

A sejtek adhézi ziójáért felelıs s gének g jelenlétének nek kimutatása PCR módszerrel m (n=149) Tapadási faktorok vizsgálata icaa icab Pozitív 2 Nincs pozitív 1,4 % 784 bp icac

6 A sejtek adhézi ziójáért felelıs s gének g jelenlétének nek kimutatása PCR módszerrel m (n=149) Tapadási faktorok vizsgálata icaa icab Pozitív 2 Nincs pozitív 1,4 % 784 bp icac Pozitív % icad Pozitív 3 2 % icar fbna Pozitív 1 Nincs pozitív 0,6 % icar gén pozitív fbnb Nincs pozitív Denaturáci ció Primerek DNS lánchosszabbl nchosszabbítás hibridizáci ciója

7 között k a Semmelweis Egyetem intenzív v centrumaiban ápolt betegekbıl l kitenyészett S. haemolyticus törzsek (n=163) rezisztencia pattern típus meghatároz rozása korondiffúzi ziós módszerrel pattern típus rezisztencia pattern % 3a 3b 4a 4b 4d 4e 5a 5b 5c 5d 6a 6b 6c 6d összesen OX, E, GE OX, E, CIP OX, E, CIP, SXT OX, E, CIP, GE OX, E, GE, SXT OX, E, GE, CL OX, E, GE, CIP, SXT OX, E, GE, CIP, CL OX, E, CIP, CL, T OX, E, CL, T, GE OX, CL, E, T, GE, CIP OX, CL, E, GE, CIP, SXT OX, CL, E, CIP, SXT, T OX, CL, E, SXT, T, GE Jelmagyarázat: E=erythromycin, SXT=sulphamethoxasole/trimethoprim, T=tetracycline OX=oxacillin, CL=clindamycin, E=erythromycin CIP=ciprofloxacin, GE=gentamicin T=tetracycline,

8 Hemokultúrából kitenyészett 98 S. haemolyticus törzs klonalitás vizsgálata pulzáló gélelektroforézis módszerrel 5 µl PIV puffer Lizozim koncentráció 550 µg/ml M Proteináz K koncentráció 800 µg/ml M Lysostaphin koncentráció 1.: 40 µg/ml 2.: 80 µg/ml 3.: 120 µg/ml 3 óra SmaI etidium-bromid 24 óra

9 46 Dice (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%] Szeptikus állapotú betegek hemokultúrájából kitenyészett S. haemolyticus törzsek epidemiológiai vizsgálata PFGE módszerrelm SmaI I. sz. perinatális intenzív centrum M M M

10 A négy n leggyakoribb rezisztencia pattern csoportba tartozó 120 S. haemolyticus törzs genotípusos megoszlása sa 6b a 5 6b 6c 7a 7c 8a 8c 8d 8e PFGE típusok 8f 8g 8h 8i 5b j 8k 9a 9b 10a 10b 10c 10d 5a e 11a 11b 11c 11d 11e 11f 11h 4b i 11j 12 18b 22a 23a 23b Rezisztencia pattern típus

11 Összefoglalás 2001 és s 2005 között k átlagosan évente 7 %-ban% tenyészett ki az intenzív v osztályon ápolt betegekbıl S. haemolyticus Ezek az izolátumok polirezisztensek voltak Csak vancomycin- nel kezelhetık k a betegek MIC meghatároz rozás s javasolt Az azonos antibiotikum rezisztencia kép k p a S. haemolyticus esetében nem járvj rványtani marker,, mert genotípusosan a vizsgált törzsek különbk nböznek Eredményeink szerint a törzsek t nagyobb valósz színőséggel random módon válogatv logatódnak ki a betegek saját t flórájából l vagy mikro és s makro környezetk rnyezetébıl

12 Köszönöm m a figyelmet! "Kis lépés l s egy embernek, de hatalmas lépés l s az emberiségnek gnek (Neil A. Armstrong)

Hasonló dokumentumok

Tipizálási módszerek alkalmazása methicillin-rezisztens Staphylococcus aureus (MRSA) törzsek molekuláris epidemiológiai vizsgálatai során

Tipizálási módszerek alkalmazása methicillin-rezisztens Staphylococcus aureus (MRSA) törzsek molekuláris epidemiológiai vizsgálatai során Ungvári Erika, Tóth Ákos Magyar Infektológiai és Klinikai Mikrobiológiai