Helicobacter pylori caga, vaca genotípusának meghatározása real-time PCR módszerrel
|
|
- Ábel Péter
- 7 évvel ezelőtt
- Látták:
Átírás
1 DIAGNOSZTIKAI ELJÁRÁSOK Helicobacter pylori caga, vaca genotípusának meghatározása real-time PCR módszerrel Ruzsovics Ágnes dr., Molnár Béla dr., Unger Zsuzsa dr., Tulassay Zsolt dr. és Prónai László dr. Semmelweis Egyetem, Budapest, Általános Orvostudományi Kar, II. Belgyógyászati Klinika (intézetvezető: Tulassay Zsolt dr.) A Helicobacter pylori (H. pylori) caga génjének jelenléte fokozza a gyomornyálkahártya proliferációját és a baktérium virulenciájának mutatója,a vaca gén súlyos gyomornyálkahártya-gyulladást idéz elõ. E tanulmány célja a H. pylori caga,valamint vaca genotípusának meghatározása real-time PCR-technikával,a dupla szálú DNS (dsdns)-specifikus SYBR Green I. festéket alkalmazva. Az eredményeket két immunhisztokémiai módszerrel vetették össze. A szerzõk 43 beteg paraffinba ágyazott szövetmintáit vizsgálták szövettani,epidermális növekedési faktor-receptor (EGFR),proliferáló sejtmag antigén (PCNA) immunhisztokémiai módszerrel és real-time PCR olvadáspont-analízissel LightCycler TM készüléken. A PCR és a szövettani diagnózis eredményei caga esetében 57%-ban, vaca esetében 58%-ban egyeztek. Statisztikailag szignifikáns különbséget találtak a gyomornyálkahártya gyulladása és a fokozott sejtproliferáció között (p = 0,02). A szövettani diagnózis és a baktérium genotípusa közötti kapcsolat vizsgálatakor caga jelenlétében a gastritis csoportban (p = 0,003), vaca jelenlétében az intestinalis metaplasia csoportban találtak szignifikáns különbséget az ép epithelhez viszonyítva (p = 0,045). Intestinalis metaplasia esetében a caga jelenléte és az EGFR expressziója szignifikáns kapcsolatot mutatott (p = 0,0418). Eredményeik is alátámasztják,azt a megfigyelést,mely arra utal,hogy caga-pozitív H. pylori törzzsel történõ fertõzés fokozott sejtproliferációt vált ki és növeli az intestinalis metaplasia kialakulásának esélyét. A vaca-pozitív H. pylori fertõzés gátolja az EGFR szignáltranszdukciós folyamatait,amelyek befolyásolják a mucosa regenerációját. Intestinalis metaplasia és gyomorrák esetében az EGFR és a H. pylori szerepe nem teljesen tisztázott. A szerzõk módszere alkalmasnak látszik a H. pylori genotípusának meghatározására. Kulcsszavak: Helicobacter pylori,genotípus,real-time PCR,immunhisztokémia Determination of caga, vaca genotypes of Helicobacter pylori with real-time PCR method. Presence of caga gene of Helicobacter pylori (H. pylori) increases proliferation of stomach mucosa and it is an index of raised virulence of the bacteria. The vaca gene of H. pylori induces a serious inflammation of stomach. The purpose of this study was to determine caga and vaca genotypes of H. pylori using real-time polymerase chain reaction (PCR) method with the double strain DNA- (dsdna) binding SYBR Green I. dye. Results were compared with those of two immunohistochemical methods. 43 patients paraffin embedded biopsy tissue samples were examined by histology,epidermal growth factor receptor (EGFR),proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunohistochemistry and melting curve analysis of real-time PCR using LightCycler instrument. Results of histology and real-time PCR from gastric biopsies correlated in 57% of cag acases and in 58% of vac cases. Significant difference was detected between normal and gastritis cases in the presence of caga gene (p = 0.003) and between normal epithel and intestinal metaplasia cases in the presence of vaca gene (p = 0.045) by investigation of association of histology and genotype of bacterium. Statisticaly significant difference (p = 0.02) was found between increased cell proliferation and the presence of gastritis. Significant correlation was found between the presence of caga gene and EGFR expression in intestinal metaplasia cases (p = ). Results underlie the statistics that infection with caga positive H. pylori strain increases the cell proliferation on the stomach mucosa and raises the chance of development of intestinal metaplasia. Infection with vaca positive H. pylori inhibits the signal-transduction pathway of EGFR, which influences mechanisms of mucosa repair. The role of EGFR and H. pylori infection is yet unclear in intestinal metaplasia and cancer. The authors method seem to be suitable for determination of genotypes of H. pylori. Key words: Helicobacter pylori,genotype,real-time PCR,immunohistochemistry A H. pylori jelenléte nem jelenti törvényszerűen azt, hogy H. pylori-val asszociált betegségek is kialakulnak. Ennek több oka közül a gazdaszervezet heterogén genetikai tényezői, a betegek eltérő szociális helyzete és a különböző H. pylori genotípus jelenléte a legfontosabbak. A H. pylori különböző genotípusai napjainkban a vizsgálatok előterébe kerültek a gyomornyálkahártya-epithelsejt károsodásában betöltött fontos szerepük miatt. Számos vizsgálat mutatta, hogy a caga gén (cytotoxin associated gene) jelenléte a növekvő virulencia mutatója és egyben stimulálja a mucosa sejtproliferációját, amely a malignus transzformáció kialakulásának kedvez (13). A vaca gén (vakuolizáló citotoxin) súlyos gyomornyálkahártya-gyulladást okoz (13, 18). A baktérium fekélyképződést elősegítő és a fekély gyógyulását gátló hatásának mechanizmusa azonban még nem teljesen ismert. A gyomornyálkahártya védekező mechanizmusa és a folyamatos sejtmegújulás és proliferáció felelős a mucosa integritásának fenn- Orvosi Hetilap 2001, 142 (10),
2 tartásáért és a gyulladás, valamint a fekély gyógyulásáért. E mechanizmus legfontosabb tényezője az epidermális növekedési faktor (epidermal growth factor; EGF) és receptora (EGFR). A nyálkahártya-sérülés helyén az EGFR eloszlása megváltozik, a helyileg felszaporodó EGF fokozott EGFR-expressziót vált ki (3). Az 1980-as évek eleje óta a molekuláris biológiai eljárások robbanásszerűen fejlődtek. A nukleinsav-kimutatási módszerekben hatalmas előrelépést jelentett a szenzitív polimeráz láncreakció (polymerase chain reaction; PCR) kidolgozása. A reakciótermékek specifikus detektálásán kívül napjainkban azonban felmerült a gyorsaság, egyszerűség, biztonság, kvantitativitás és reprodukálhatóság igénye is. A real-time PCR, vagy Light- Cycler TM, amely a leggyorsabb thermocycler, megfelel ezeknek az elvárásoknak. A legfontosabb jellemzője ezen új, a fluoreszcencia elvén működő technológiának, hogy egyazon reakciókapillárisban történik az amplifikáció és a kiértékelés folyamata. A PCR folyamán a reakcióelegyhez adott fluoreszcens festék gerjesztővé válik és a keletkező fluoreszcens jeleket a készülékbe beépített Rodenstock fotométer real-time detektálja. A műszer által létrehozott kinetikus görbe kvantitatív értékelésre is alkalmas, egy előzetesen felvett kalibráció és a beépített software segítségével (1, 5). A készülék olvadáspont-analízisre is lehetőséget ad, azáltal, hogy a hőmérséklet lassú, denaturációig történő emelésének hatására a fluoreszcens emisszió hirtelen lecsökken annál a hőmérsékletnél (olvadási hőmérséklet; Tm), ahol a festék ledisszociál a templátról. Ezen változás negatív deriváltját ábrázolja a készülék olvadási görbeként (melting curve [12]). Tanulmányunkban a real-time PCR olvadáspont-analízis módszerét alkalmaztuk H. pylori különböző genotípusának meghatározására paraffinba ágyazott biopsziás szövetmintából. A fluoreszcens protokollhoz dupla szálú DNS (dsdns)-specifikus festéket (SYBR Green I) használtunk, amely a PCR során képződő DNS-kettősszálhoz kötődve válik gerjesztővé (7). Eredményeinket összevetettük az endoszkópos és szövettani diagnózissal, valamint az EGFR és az epithelsejtek proliferációs képességét bemutató proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunhisztokémiai festés eredményével. Anyagok és módszerek 43 beteg (21 férfi, 22 nő, átlagéletkor: 62,2 [25 89] év) gasztroszkópos biopsziás mintáit vizsgáltuk. A paraffinba ágyazott szövetmintákat a szövettani diagnózis alapján csoportosítottuk a következőképpen: ép gyomorepithel (n = 3), krónikus gastritis (n = 12), krónikus gastritis intestinalis metaplasiával (n = 3), H. pylori-asszociált gastritis (n = 17), H. pylori-asszociált gastritis intestinalis metaplasiával (n = 6) és gyomorcarcinoma (n = 2). A H. pylori meghatározását ureáz gyorsteszttel, valamint módosított Giemsa-festéssel történő szövettani értékeléssel végeztük. Real-time PCR protokoll A paraffinblokkokból három, egyenként 10 µm vastagságú metszetet vágtunk és helyeztünk Eppendorf csőbe. A deparaffinálás a hagyományos xilol és abszolút alkohol segítségével történt. A nukleinsav izolálását a biopsziás mintákból a High Pure PCR Template Preparation Kittel (Roche Molecular Biochemicals, Germany) végeztük, a gyártó ajánlása alapján. Az izolálás során a bakteriális DNS feltárására lizozim enzimet (Sigma- Aldrich Chemie GmbH., Germany) használtunk. Így 200 µl izolált genom DNS-t nyertünk, amelyből 2 µl aliquotot adtunk a PCR-hez. A templát DNS koncentrációját 260 nm-en spektrofotometriás módszerrel határoztuk meg. A korábban már közölt primereket alaptisztítással és sómentesítve szintetizáltattuk (Amersham Pharmacia Biotech, Germany) (4, 13). A szenz 5 -ATA ATG CTA AAT TAG ACA ACT TGA GCGA-3 és az anti-szenz 5 -TTA GAA TAA TCA ACA AAC ATC ACG CCAT-3 1. ábra: caga (297 bp) és vaca (259 bp) génszakasz kimutatása, gélelektroforézis 1: DNA Molecular Weight Marker VIII. (0,019 1,11 kbp), 2 5: caga kimutatása (2: negatív kontroll, 3: caga+ szövetminta, 4: H. pylori, 5: TK 1054 H. pylori), 6 9: vaca kimutatása (6: negatív kontroll, 7: vaca- szövetminta, 8: H. pylori, 9: TK 1054 H. pylori) primer a 297bp molekulasúlyú lcaga génszekvencia kimutatására alkalmas, amely a caga gén középső régiójának jelenlétét reprezentálja. A 259bp molekulasúlyú vaca gén kimutatására a vaca szenz primer: 5 -ATG GAA ATA CAA CAA ACA CAC-3 és az anti-szenz 5 -CTG CTT GAA TGC GCC AAAC-3 primert használtuk. Pozitív kontrollként a és a TK 1054 caga+, vaca+ H. pylori törzs baktérium/ml (0,5 McFarland), 8,02 µg/ml DNS koncentrációjú oldatát alkalmaztuk. A negatív kontrollban a templát DNS-t PCR-vízzel helyettesítettük. A kontrollok és a primerek alkalmazhatóságát gélelektroforézissel ellenőriztük (1. ábra). A 20 µl PCR reakcióelegy a LightCycler DNA Master SYBR Green I. Kit (Roche Molecular Biochemicals, Germany) leírásának megfelelően 2 2 µl primert (0,5 µm végkoncentrációjú), 2 µl genom DNS-t, 2,4 µl 4mM koncentrációjú MgCl 2 -oldatot és 2 µl SYBR Green I festékoldatot tartalmazott. A kit festékoldata magában foglalta a nukleotidokat, Taq DNA polimerázt és a reakciópuffert. A reakcióelegy 5 µl-ét üvegkapillárisba pipettáztuk (Idaho Technology, Idaho Falls, USA), majd rövid centrifugálás után a LightCycler LC 24 készülékbe helyeztük (Idaho Technology, Idaho Falls, USA). CagA-kimutatás esetén az amplifikáció 94 C, 2 s denaturációs (46 C, 4 s) közelítés és (72 C, 12 s) extenziós lépésből, vaca esetén 94 C, 0 s denaturációs (45,5 C, 3 s) közelítés és (72 C, 10 s) extenziós lépésből állt 40 cikluson keresztül. A fluoreszcens jelet minden ciklus extenziólépésének végén detektáltuk az F1/1 szűrőt használva. Az amplifikációt olvadáspont-analízis követte a hőmérséklet lassú (0,1 C/s) emelésével, caga esetén 56-tól 94 C-ig, vaca esetében 55-től 94 C-ig. A fluoreszcenciát folyamatosan detektáltuk (6, 8, 11). A teljes vizsgálati idő mintegy 1,5 órát vett igénybe. Immunhisztokémia A paraffinba ágyazott biopsziás szövetmintából 4 µm vastagságú metszetek kerültek tárgylemezre. Az immunhisztokémiai festést megelőzően a metszeteket deparaffináltuk a hagyományos xilol és rehidráló alkoholsor segítségével. EGFR Deparaffinálás után az endogén peroxidáz blokkolására 30%-os hidrogén-peroxid-metanolos kezelés történt 30 percig. Foszfátpufferes (phosphat-buffer saline; PBS) lemosást követően a mintákat kétszer 7 percig citrát-pufferbe (Antigen Retrieval Citrate, Biogenex) helyeztük. Ismételt PBS-es lemosás után a mintákat kecskeszérummal 20 percig, szobahőmérsékleten inkubáltuk, majd ezt az elsődleges antitest 1:100 arányú hígításával másnapig szobahőmérsékleten folytattuk (Kirkegaard & Perry Laboratories, Inc., USA). PBS-sel történő lemosás után 60 percig a másodlagos antitesttel inkubáltuk. A minták lemosása után 45 percig streptavidin peroxidázzal inkubáltuk (LSAB2 Kit Peroxidase, DAKO). Végső PBS-es lemosás után az EGFR antigéneket DAB-oldattal tettük láthatóvá, valamint hematoxylinnel háttérfestést végeztünk. Pozitív kontroll egy ismert EGFRpozitív pancreastumoros szövetminta volt, negatív kontroll- 510
3 ként ugyanazt az EGFR-pozitív pancreas-tumorszövetet használtuk, azonban elsődleges antitest helyett PBS-ben inkubáltuk. A minták kiértékelését a korábban már leírt módon, a mucosa 6 különböző részén 500, egymást követő sejt számlálásával végeztük, a pozitív sejtek számának százalékos aránya alapján. A kiértékelést két, egymástól független vizsgáló végezte a szövettani diagnózisok ismerete nélkül (3, 15). PCNA A deparaffinálást követően 30%-os hidrogén-peroxid-metanol 1:100 arányú hígításával blokkoltuk az endogén peroxidáz hatását, majd a mintákat citrát-pufferben (ph 6,0) mikrohullámon inkubáltuk (750 Watt; 5 percig). PBS-es lemosás után a nem specifikus antitestek lekötését 20 percig 1%-os bovin szérumalbuminnal végeztük. Ezután a metszeteket 1:80 arányban, normál szérumban hígított anti-pcna antitesttel (Monoclonal Mouse Anti-PCNA Clone PC 10, DAKO) 90 percig 37 C-on inkubáltuk. A minták biotinizált másodlagos antitesttel (antinyúl és anti-egér IgG) 30 percig, majd PBS-es lemosás után streptavidin konjugált peroxidázzal 25 percig inkubáltuk (LSAB2 Kit Peroxidase, DAKO). Végső PBS-es lemosás után a metszeteket 15 percre aminoetilkarbazol (AEC)-ba helyeztük, háttérfestésnek hematoxylint használtunk. Pozitív kontroll egy ismert PCNA-pozitív metszett volt, negatív kontrollként az elsődleges antitest helyett a PBS-ben inkubált metszet szolgált. A proliferáció kiértékeléshez használt PCNA LI (labeling index) értékét a pozitív sejtek %-os aránya adta (3, 17). Statisztikai értékelés Az eredmények kiértékeléséhez a CSS Statistica software program ANOVA módszerét, a kétmintás t-próbát, korrelációanalízist és a χ 2 -próbát használtuk. A nullhipotézistap<0,05 eredmény esetén vetettük el. További értékeléshez az LSD (least squares deviation)-tesztet alkalmaztuk. Eredmények 2. ábra: H. pylori caga genotípusának meghatározása real-time PCR olvadáspont-analízis módszerével Felsõ grafikon a fluoreszcenciát ábrázolja a hõmérséklet függvényében, az alsó grafikon ennek negatív deriváltját mutatja, amely az amplikonra jellegzetes olvadási görbét adja C tartományban a nem specifikus termékek széles olvadási görbéje látható. H. pylori caga és vaca genotípusának meghatározását végeztük fluoreszcens monitorozással a real-time PCR DNS amplifikációs és olvadáspont-analízis módszerével, dupla szálú DNS-specifikus SYBR Green I. festéket alkalmazva. Az amplifikáció 40 ciklusát kísértük figyelemmel, a minták genom DNS-ét templátmentes kontrollt használva. A fluoreszcens jelet az amplifikáció minden egyes ciklusának extenziós fázisa végén mértük, amely exponenciálisan növekedett azon ciklusnál, amelynél a keresett termék felhalmozódott (16). A fluoreszcencia caga esetében a 28. ciklusnál, míg vaca meghatározásánál a ciklusnál mutatott növekvő tendenciát, amint a SYBR Green I. kötődött a dupla szálú amplikonokhoz. Ez a fluoreszcencia-növekedés a DNS-mentes kontrollnál elmaradt. Az amplifikált termék olvadási hőmérsékletének meghatározása közvetlenül követte a PCR utolsó ciklusát. A minta lassú melegítésének hatására a fluoreszcencia gyorsan csökkent, amint a festék levált a szétváló dsdns szálakról. Az olvadási hőmérsékletnél a fluoreszcencia kinetikája hirtelen megváltozott. E markáns változás amplikon-függő, általában a C-os tartományba esik. A detektált fluoreszcens jel negatív deriváltját a készülék software olvadási görbeként ábrázolja. Az olvadási hőmérséklet vizsgálata alapján elkülöníthetők a specifikus és nem specifikus reakciótermékek. A nem specifikus termékek olvadási görbéje széles, hiányzik a határozott fluoreszcenciaátmenet és az alacsonyabb hőmérsékleti tartományba esik. Ezzel szemben a specifikus PCR-termékek olvadási görbéje a Tm-nél éles átmenetet mutat és a fluoreszcencia hirtelen a háttérszintre esik (10, 12). A caga olvadási hőmérsékletét 80,2 C-nak, vaca Tm-jét 87,1 C-nak találtuk. A negatív kontroll minden esetben széles olvadási csúcsot mutatott az alacsonyabb hőmérsékleti tartományban (2. és 3. ábra). CagA és vaca primereket használva PCR amplifikációs termék csak a H. pylori templát DNS esetén volt kimutatható, más baktériumok (E. coli, Campylobacter coli, Campylobacter jejuni, Streptococcus A és Streptococcus B) nem adtak pozitív eredményt (4. ábra). A minták genotípusának meghatározása a real-time készüléket használva, 1,5 óra alatt teljesül, szemben a hagyományos PCR 6 órás protokolljával. Hisztológia, real-time PCR és immunhisztokémiai festés összehasonlítását végeztük el biopsziás mintákból. LightCycler-rel végzett vizsgálattal 23 minta volt cagapozitív és 9 minta vaca-pozitív, 4 esetben mindkét gén kimutatható volt. A hisztológia és a real-time PCR eredménye egyezett a caga meghatározásánál az esetek 57%- ában (14 pozitív és 11 negatív), vaca vizsgálatakor az esetek 58%-ában (7 pozitív, 18 negatív). Mindkét gén kimutatásánál 18 esetben adódott eltérés a PCR eredménye és a baktérium szövettani kimutatása között (1. táblázat). Szignifikáns összefüggést a baktérium genotípusa és a hisztológiai baktérium kimutatása között sem caga (p = 0,90), sem vaca (p = 0,10) esetében nem találtunk. A szövettani diagnózis és a baktérium genotípusa közötti kapcsolat vizsgálatakor caga jelenlétében a gastritis-csoportban (p = 0,003), vaca jelenlétében az intestinalis metaplasiás 511
4 3. ábra: H. pylori vaca genotípusának meghatározása real-time PCR olvadáspont-analízis módszerével Felsõ grafikon: fluoreszcencia a hõmérséklet függvényében, alsó grafikon: ennek negatív deriváltja. gastritis esetén találtunk szignifikáns különbséget az ép epithelhez viszonyítva (p = 0,045) (2. táblázat). A fokozott sejtproliferáció és a nyálkahártya-gyulladás jelenléte között szignifikáns kapcsolatot találtunk (p = 0,02), caga jelenlétében a kapcsolat p = 0,05-nek adódott. A vaca jelenléte és az EGFR expressziója között szoros, de nem szignifikáns negatív korrelációt találtunk (p = -0,06). Intestinalis metaplasiás minták esetében a caga jelenléte és az EGFR expressziója között szignifikáns különbség volt kimutatható (p = 0,0418) (3. táblázat). Megbeszélés A H. pylori-fertőzés késlelteti a fekély gyógyulását és lehetőséget teremt a fekély kiújulására. Számos vizsgálat fokozott sejtproliferációt igazolt H. pylori-asszociált gastritisben, azonban ez inkább a gazdaszervezet következményes válasza a sejtkárosodásra, mintsem a baktérium közvetlen hatása (17). A baktérium toxikus hatása közvetlenül gátolja az epithelsejtek proliferációs képességét, ezzel kedvez a fekélyképződésnek és késlelteti annak gyógyulását (15, 17). A fertőzött gyomornyálkahártyán fokozódik az EGFR-expresszió, ez azonban nem tudja ellensúlyozni a H. pylori hatását, mivel a baktérium csökkenti a gyomorepithel EGF-stimulálta sejtproliferációját, az EGF specifikus kötődését a receptorához, valamint gátolja az EGF szabályozta szignáltranszdukciós reakció-utat. Ezeket a hatásokat különösen a vaca genotípushoz tartozó H. pylori törzsek esetén mutatták ki (18). A H. pylori szerepe a fekélybetegség kialakulásában további kérdéseket is 4. ábra: caga és vaca gén kimutatása különbözõ baktériumokból real-time PCR olvadáspont-analízis módszerével Felsõ grafikonok: vaca-kimutatás, alsó grafikonok: caga-kimutatás. (1. H. pylori, 2. H. pylori, 3. E. coli, 4. Campylobacter coli, 5. Campylobacter jejuni, 6. Streptococcus A, 7. Streptococcus B) felvet, mivel a fekélyképződés folyamatát a nem szteroid gyulladásgátlók (NSAID) szedése is jelentősen befolyásolja (4). Mivel a baktérium fekélyképződésben betöltött 512
5 1. táblázat: Szövettani vizsgálattal megállapított H. pylori-status és PCR caga-,vaca-meghatározás eredményeinek összehasonlítása 2. táblázat: A H. pylori genotípusai és a szövettani csoportok közötti kapcsolat, χ 2 -próba Szövettan pozitív 3. táblázat: Intestinalis metaplasiás és gastritises minták H.pylori-genotípusa és az immunhisztokémiai festések átlag- és szórásértékei PCNA átlag és szórás EGFR átlag és szórás Intestinalis metaplasia caga-negatív 49,33 ± 27,54 27,80 ± 31,60* caga-pozitív 50,84 ± 12,22 56,33 ± 26,65* vaca-negatív 46,86 ± 21,68 43,85 ± 29,81 vaca-pozitív 7,115 ± 0,0 1,0 ± 0,0 Gastritis caga-negatív 52,74 ± 22,01 41,60 ± 24,08 caga-pozitív 52,37 ± 21,19 45,88 ± 19,79 vaca-negatív 46,80 ± 19,29 44,32 ± 21,84 vaca-pozitív 62,77 ± 20,81 44,40 ± 20,59 *szignifikáns különbség: p<0,05 H. pylori Szövettan negatív CagA 1. ép epithel összesen PCR vaca pozitív vaca negatív Összesen PCR caga-pozitív caga-negatív Összesen VacA 1. ép epithel 1. ép epithel 2. gastritis p = 0,0036 N.S. p = 0,1824 N.S. 3. gastritis intestinalis p = 0,6831 N.S. p = 0,0455 metaplasiával 4. carcinoma P = 0,6717 N.S. p = 0,4795 N.S. szignifikáns különbség: <0,05 N.S.=nem szignifikáns szerepe részleteiben még nem ismert, a figyelem a H. pylori különböző genotípusainak megismerése felé terelődött. A számos vizsgálómódszer mellett a real-time PCR a vizsgálatok új távlatait nyitotta meg. Munkánkban a H. pylori caga és vaca genotípusának meghatározását végeztük, LightCycler készülék olvadáspont-kimutatás módszerével, amely egyszerű termék-megkülönböztetési protokollt kínál. A kapott eredményeknek a hisztológiával és az immunhisztokémiai módszerek eredményeivel való összevetése szignifikáns negatív korrelációt mutatott az EGFR expressziója és a vaca gén jelenléte esetén. Intestinalis metaplasiás minták vizsgálatakor a caga jelenléte és az EGFR expressziója között szignifikáns különbséget találtunk. Szoros kapcsolat volt kimutatható a caga gén jelenléte és a fokozott sejtproliferáció között, amely szignifikáns emelkedést mutatott gyomornyálkahártya-gyulladás esetén. Szignifikáns különbséget találtunk gastritis és peptikus fekélybetegség kialakulása között vaca jelenlétében. Eredményeink egyeznek azzal a megfigyeléssel, amely szerint a caga-pozitív H. pylori törzzsel történő fertőzés fokozottabb sejtproliferációt okoz egyéb, olyan károsító tényezőkkel társulva, mint a fokozott szöveti szabadgyök-termelés vagy a csökkent intragasztrikus aszkorbinsav-szint (13). A caga fehérje legfontosabb tulajdonsága az IL-8 epithelialis kiválasztását fokozó képessége, amely súlyos epithelkárosodáshoz vezet (14). Ismeretes, hogy a H. pylori-fertőzés szerepet játszhat az intestinalis metaplasia kialakulásában, annak ellenére, hogy a baktérium ritkán mutatható ki a metaplasticus gyomornyálkahártyában. Az intestinalis metaplasia területén a megváltozott milliő, a szekretoros IgA felszaporodása, valamint a csökkent aciditás magyarázhatja a H. pylori kolonizációjának csökkenését. A szekretoros IgA felszaporodása a gyomornedvben fontos lehet a baktérium epithelfelszínhez történő adhéziójának gátlásában, a csökkent aciditás pedig gátolja a proliferációt. A H. pylori-szeropozitivitás (anti-h. pylori IgG) azonban igen gyakori intestinalis metaplasiás betegekben, holott az organizmus hisztológiai módszerrel nem mutatható ki a gyomornyálkahártyából (9). Ismert a dysplasia és/vagy intestinalis metaplasia és a fokozott EGF-expresszió szoros kapcsolata, valamint az EGFR sejtproliferációt stimuláló hatása, amely leginkább a protoonkogén c-fos és c-myc indukcióján keresztül valósul meg. Intestinalis metaplasia és gyomorrák esetében az EGFR és a H. pylori-fertőzés szerepe és kapcsolata nem teljesen ismert, feltételezhetően a károsodott, metaplasticus szövet elveszti kontrollját a sejtnövekedés és proliferáció szabályozása felett, ami daganat kialakulásának kedvez. Lehetséges, hogy a H. pylori-fertőzés növeli a mucosa érzékenységét más mutagén és karcinogén tényezőkkel szemben (2). Leírták a vaca gén sejtproliferációt gátló képességét, azonban lényegesen jelentősebb az EGF receptorához történő kötődése és az EGFR foszforilációját gátló hatása, amely gátolja a mucosalis repair mechanizmust (3, 15). A real-time PCR vizsgálatunk eredményének eltérése a hisztológiai vizsgálattal megállapított H. pylori-statustól feltehetően a szövettani értékelés nem megfelelő érzékenységéből adódik. A real-time PCRvizsgálat érzékenysége és kvantitatív analízis módszere további értékes információkkal szolgálhat a H. pylori jelenlétéről és szerepéről. Az összetett H. pylori törzsekkel fertőzöttek arányát azonban még PCR-technikával is nehéz felbecsülni, mivel: 1. csak egy biopsziás mintát vizsgálunk, amely nem informál a gyomor más részén megtelepedett baktérium-törzsekről, 2. a caga-pozitív és caga-negatív H. pylori-törzsek szimultán kolonizációra is képesek és a nagyobb denzitású benövi a kisebb sűrűségű baktériumkolóniát, amely befolyásolja a PCR eredményét (13). Eredményeink igazolják, hogy a H. pylori genotípusainak meghatározása LightCycler készüléken szenzitív és igen gyors módszer, amelynek számos előnye van a hagyományos PCR-technikával szemben. Zárt kapilláris rendszere miatt jelentősen csökken a PCR-termékek kontaminációja, gyorsasága és olvadáspont-analízis módszere egyszerű termékmegkülönböztetést tesz lehetővé. 513
6 Köszönetnyilvánítás: Köszönettel tartozunk Szentmihályi Anna dr.-nak (Országos Közegészségügyi Intézet) és Hiroyuki Yamaguchi dr.-nak (Dept. of Microbiology Kyorin University School of Medicine Tokyo, Japan) munkánkhoz nyújtott segítségükért. IRODALOM: 1. Costa, J. M., Ernault, P., Bretagne, S.: Rapid and quantitative detection of Toxoplasma gondii by PCR. Biochemica, 1999, 3, Granelli, P., Fichera, G., Zennaro, F. és mtsai: Expression of the Epidermal Growth Factor receptor gene in human intestinal metaplasia: a preliminary report. Scand. J. Gastroenterol., 1997, 32, Konturek, P. C., Bobrzynski, A., Konturek, S. J. és mtsai: Epidermal growth factor and transforming growth factor alpha in duodenal ulcer and non-ulcer dyspepsia patients before and after Helicobacter pylori eradication. Scand. J. Gastroenterol., 1998, 33, Li, L., Kelly, L. K., Ayub, K. és mtsai: Genotypes of Helicobacter pylori obtained from gastric ulcer patients taking or not taking NSAIDs. Am. J. Gastroenterol., 1999, 94, Morrison, T. B., Ma, Y., Weis, J. H. és mtsa: Rapid and sensitive quantification of Borrelia burgdorferi-infected mouse tissues by continuous fluorescent monitoring of PCR. J. Clin. Microbiol., 1999, 37, Munoz, C., Jane, M., Gonzalez-Cuevas és mtsai: Evaluation of a simple rapid polymerase chain reaction (PCR) technique for the diagnosis of Helicobacter pylori infection in childhood. Enferm Infec. Microbiol. Clin., 1999, 17, Nath, K., Sarosy, J. W., Hahn, J. és mtsa: Effects of ethidium bromide and SYBR Green I on different polymerase chain reaction system. J. Biochem. Biophys. Meth., 2000, 42, Nauck, M. S., Gierens, H., Nauck, M. A. és mtsai: Rapid genotyping of human plateled antigen 1 (HPA-1) with fluorophore labelled hybridization probes on the LightCycler. Br. J. Hematol., 1999, 105, Osawa, H., Inoue, F., Yoshida, Y.: Inverse relation of serum Helicobacter pylori antibody titres and extent of intestinal metaplasia. J. Clin. Pathol., 1996, 49, Rasmussen, R., Morrison, T., Herrmann, M. és mtsa: Quantitative PCR by continuous fluorescence monitoring of a double strand DNA specific binding dye. Biochem, 1998, 2, Reischl, U., Leppmeier, B., Heep, M. és mtsai: Rapid and specific detection of Helicobacter pylori by LightCycler PCR. Springer, Ririel, K. M., Rasmussen, R. P., Wittwer, C. T.: Product differentiation by analysis of DNA melting curves during the polymerase chain reaction. Anal. Biochem., 1997, 245, Rudi, J., Rudy, A., Maiwald, M. és mtsai: Direct determination of Helicobacter pylori vaca genotypes and caga gene in gastric biopsies and relationship to gastrointestinal diseases. Am. J. Gastroenterol., 1999, 94, Segal, E. D., Lange, C., Covacci, A. és mtsai: Induction of host signal transduction pathways by Helicobacter pylori. Proc. Natl. Acad. Sci., 1997, 94, Seto, K., Hayashi-Kuwabara, Y., Yoneta, T. és mtsai: Vacuolation induced by cytotoxin from Helicobacter pylori is mediated by the epidermal growth factor receptor in HeLa cells. FEBS Letters, 1998, 431, Shaw, J. J., McCleskey, F. K., Beninga, K. K. és mtsai: Rapid detection of Tularemia with real-time PCR. Inf. Med., 1998, 15, Smoot, D. T., Wynn, Z., Elliott, T. B. és mtsai: Effects of Helicobacter pylori on proliferation of gastric epithelial cells in vitro. Am. J. Gastroenterol., 1999, 94, Yamaoka, Y., Kodama, T., Guiterrez, O. és mtsai: Relationship between Helicobacter pylori icea, caga, and vaca status and clinical outcome: studies in four different countries. J. Clin. Microbiol., 1999, 37, (Ruzsovics Ágnes dr., Budapest, Szentkirályi út ) 514
Helicobacter pylori fertozés biopsziás mintákból. történo kimutatásának újabb lehetoségei a gyomor idült. gyulladásos betegségeiben
Helicobacter pylori fertozés biopsziás mintákból történo kimutatásának újabb lehetoségei a gyomor idült gyulladásos betegségeiben Dr. Ruzsovics Ágnes PhD értekezés tézisei 2004, Budapest Semmelweis Egyetem
RészletesebbenDIGITÁLIS MIKROSZKÓPIA AZ EMÉSZTŐRENDSZERI SZÖVETI
DIGITÁLIS MIKROSZKÓPIA AZ EMÉSZTŐRENDSZERI SZÖVETI MINTÁK DIAGNOSZTIKÁJÁBAN Doktori tézisek Ficsór Levente Semmelweis Egyetem, 2. sz. Belgyógyászati Klinika Klinikai Orvostudományok Doktori Iskola Programvezető:
RészletesebbenA vastagbélhám sejtkinetikai változásainak vizsgálata gyulladásos vastagbélbetegségekben a gyulladás szövettani aktivitásának függvényében
A vastagbélhám sejtkinetikai változásainak vizsgálata gyulladásos vastagbélbetegségekben a gyulladás szövettani aktivitásának függvényében Doktori (PhD) dolgozat Gastroenterológia c. PhD program keretében
RészletesebbenHelicobacter pylori által kiváltott sejtkinetikai változások a gyomor premalignus elváltozásaiban. Unger Zsuzsa
Helicobacter pylori által kiváltott sejtkinetikai változások a gyomor premalignus elváltozásaiban Unger Zsuzsa Témavezeto: Dr. Prónai László Bírálók: Dr. Rácz István Prof. Dr. Papp János Szigorlati bizottság:
Részletesebbenmintasepcifikus mikrokapilláris elektroforézis Lab-on-Chip elektroforézis / elektrokinetikus elven DNS, RNS, mirns 12, fehérje 10, sejtes minta 6
Agilent 2100 Bioanalyzer mikrokapilláris gélelektroforézis rendszer G2943CA 2100 Bioanalyzer system forgalmazó: Kromat Kft. 1112 Budapest Péterhegyi u. 98. t:36 (1) 248-2110 www.kromat.hu bio@kromat.hu
RészletesebbenAz áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben. Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga
Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga Labmagister Kft aktivitásai HumanCell SynLab Diagnosztika MensMentis LabMagister
RészletesebbenA kvantitatív PCR alkalmazhatósága a fertőző bronchitis vakcinák hatékonysági vizsgálatában. Derzsy Napok, Sárvár, 2011 Június 2-3.
A kvantitatív PCR alkalmazhatósága a fertőző bronchitis vakcinák hatékonysági vizsgálatában Pénzes Zoltán PhD, Soós Pál PhD, Nógrády Noémi PhD, Varga Mária, Jorge Chacón PhD, Zolnai Anna PhD, Nagy Zoltán
RészletesebbenHer2 fehérje overexpresszió gyomorrákokban: Hazai tapasztalatok
Her2 fehérje overexpresszió gyomorrákokban: Hazai tapasztalatok Dr. Lotz Gábor, Dr. Szirtes Ildikó, Dr. Kiss András Prof. Tímár József, Prof. Kulka Janina Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézet - Exophyticus
RészletesebbenNorvég Finanszírozási Mechanizmus által támogatott projekt HU-0115/NA/2008-3/ÖP-9 ÚJ TERÁPIÁS CÉLPONTOK AZONOSÍTÁSA GENOMIKAI MÓDSZEREKKEL
Norvég Finanszírozási Mechanizmus által támogatott projekt HU-0115/NA/2008-3/ÖP-9 ÚJ TERÁPIÁS CÉLPONTOK AZONOSÍTÁSA GENOMIKAI MÓDSZEREKKEL KÖZÖS STRATÉGIA KIFEJLESZTÉSE MOLEKULÁRIS MÓDSZEREK ALKALMAZÁSÁVAL
RészletesebbenVibrio, Campylobacter, Helicobacter. Biotípusok. Virulencia faktorok. Vibrio cholerae. Vibrionaceae. Szabó Judit
Vibrionaceae Vibrio cholerae: cholera Vibrio, Campylobacter, Helicobacter Vibrio parahaemolyticus: tenger gyümölcsei, hasmenést okoz Vibrio vulnificus: tengerben való fürdés, súlyos bőr és kötőszöveti
RészletesebbenAZ ÁRPA SZÁRAZSÁGTŰRÉSÉNEK VIZSGÁLATA: QTL- ÉS ASSZOCIÁCIÓS ANALÍZIS, MARKER ALAPÚ SZELEKCIÓ, TILLING
Hagyomány és haladás a növénynemesítésben AZ ÁRPA SZÁRAZSÁGTŰRÉSÉNEK VIZSGÁLATA: QTL- ÉS ASSZOCIÁCIÓS ANALÍZIS, MARKER ALAPÚ SZELEKCIÓ, BÁLINT ANDRÁS FERENC 1, SZIRA FRUZSINA 1, ANDREAS BÖRNER 2, KERSTIN
RészletesebbenA CYTOKIN AKTIVÁCIÓ ÉS GÉN-POLIMORFIZMUSOK VIZSGÁLATA HEL1COBACTER PYLORI FERTŐZÉSBEN ÉS CROHN BETEGSÉGBEN
% A CYTOKIN AKTIVÁCIÓ ÉS GÉN-POLIMORFIZMUSOK VIZSGÁLATA HEL1COBACTER PYLORI FERTŐZÉSBEN ÉS CROHN BETEGSÉGBEN BEVEZETÉS Mind a Helicobacter pylori fertőzésre, mind pedig a gyulladásos bélbetegségekre, mint
RészletesebbenTüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a PD-L1 és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása
Tüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása Téglási Vanda, MoldvayJudit, Fábián Katalin, Csala Irén, PipekOrsolya, Bagó Attila,
RészletesebbenA keringı tumor markerek klinikai alkalmazásának aktuális kérdései és irányelvei
A keringı tumor markerek klinikai alkalmazásának aktuális kérdései és irányelvei A TM vizsgálatok alapkérdései A vizsgálatok célja, információértéke? Az alkalmazás területei? Hogyan válasszuk ki az alkalmazott
RészletesebbenMolekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén
Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén Dr. Dallmann Klára A molekuláris biológia célja az élőlények és sejtek működésének molekuláris szintű
RészletesebbenIn Situ Hibridizáció a pathologiai diagnosztikában és ami mögötte van.
In Situ Hibridizáció a pathologiai diagnosztikában és ami mögötte van. Kneif Józsefné PTE KK Pathologiai Intézet Budapest 2017. 05. 26 Kromoszóma rendellenesség kimutatás PCR technika: izolált nukleinsavak
RészletesebbenVálasz Prof. Dr. Szabó János opponensi bírálatára
Válasz Prof. Dr. Szabó János opponensi bírálatára Szeretném megköszönni Szabó Professzor Úr véleményét, építő jellegű kritikáját és a doktori értekezés elfogadására tett javaslatát. A különböző témakörökkel
RészletesebbenPeptikus fekélybetegség modern szemlélete
Peptikus fekélybetegség modern szemlélete Herszényi László Semmelweis Egyetem, Budapest II. sz. Belgyógyászati Klinika 2013. november 14. Fekélybetegség Jelentőség Kiszámíthatatlan lefolyás A fekélyek
RészletesebbenA tüdő adenocarcinomák szubklasszifikációja. Dr. Szőke János Molekuláris Patológiai Osztály Budapest, 2008 december 5.
A tüdő adenocarcinomák szubklasszifikációja Dr. Szőke János Molekuláris Patológiai Osztály Budapest, 2008 december 5. Háttér A tüdő ACA heterogén tumor csoport és a jelenlegi klasszifikáció elsősorban
Részletesebben3. gyakorlat: nukleinsav-tisztítás, polimeráz láncreakció
3. gyakorlat: nukleinsav-tisztítás, polimeráz láncreakció A vírus genetikai anyagának vizsgálata (direkt víruskimutatási módszer) biztosítja a legrészletesebb és legspecifikusabb információkat a kimutatott
RészletesebbenMangalica specifikus DNS alapú módszer kifejlesztés és validálása a MANGFOOD projekt keretében
Mangalica specifikus DNS alapú módszer kifejlesztés és validálása a MANGFOOD projekt keretében Szántó-Egész Réka 1, Mohr Anita 1, Sipos Rita 1, Dallmann Klára 1, Ujhelyi Gabriella 2, Koppányné Szabó Erika
RészletesebbenA pre-analitika szerepe a patológiai minták. Dr. Lotz Gábor Semmelweis Egyetem, II. sz. Patológiai Intézet
A pre-analitika szerepe a patológiai minták megőrz rzöttségében Dr. Lotz Gábor Semmelweis Egyetem, II. sz. Patológiai Intézet A sebészeti anyagok útja Műtő OPTIMÁLIS HŐMÉRSÉKLET (20-22 C) IDŐFAKTOR (15
Részletesebben4 vana, vanb, vanc1, vanc2
77 1) 2) 2) 3) 4) 5) 1) 2) 3) 4) 5) 16 12 7 17 4 8 2003 1 2004 7 3 Enterococcus 5 Enterococcus faecalis 1 Enterococcus avium 1 Enterococcus faecium 2 5 PCR E. faecium 1 E-test MIC 256 mg/ml vana MRSA MRSA
RészletesebbenDNS-szekvencia meghatározás
DNS-szekvencia meghatározás Gilbert 1980 (1958) Sanger 3-1 A DNS-polimerázok jellemzői 5'-3' polimeráz aktivitás 5'-3' exonukleáz 3'-5' exonukleáz aktivitás Az új szál szintéziséhez kell: templát DNS primer
RészletesebbenA zsírszövet mellett az agyvelő lipidekben leggazdagabb szervünk. Pontosabban az agy igen gazdag hosszú szénláncú politelítetlen zsírsavakban
BEVEZETÉS ÉS A KUTATÁS CÉLJA A zsírszövet mellett az agyvelő lipidekben leggazdagabb szervünk. Pontosabban az agy igen gazdag hosszú szénláncú politelítetlen zsírsavakban (LCPUFA), mint az arachidonsav
RészletesebbenImmunhisztokémia: Előhívó rendszerek, problémák és megoldások
Immunhisztokémia: Előhívó rendszerek, problémák és megoldások Dr. Krenács Tibor Semmelweis Egyetem I.sz. Patológiai és Kísérleti Rákkutató Intézet Budapest Patológus Klasszikus patomorfológia Klinikai
RészletesebbenSALMONELLA SSP. GYORS, MOLEKULÁRIS BIOLÓGIAI MÓDSZEREKKEL TÖRTÉNŐ DETEKTÁLÁSA
SALMONELLA SSP. GYORS, MOLEKULÁRIS BIOLÓGIAI MÓDSZEREKKEL TÖRTÉNŐ DETEKTÁLÁSA Nyirő-Fekete B., Tabajdi-Bajza N., Kovácsné Kis É., Pocklán E., Zoller L., Micsinai A., Gasparikné Reichardt J. Hungalimentaria
RészletesebbenVárandós nők Streptococcus agalactiaeszűrése
Várandós nők Streptococcus agalactiaeszűrése MALDI-TOF MS módszerrel Pappné Ábrók Marianna, Arcson Ágnes, Urbán Edit, Deák Judit Szegedi Tudományegyetem, Általános Orvostudományi Kar Klinikai Mikrobiológiai
RészletesebbenA minta feldolgozásának alternatívái malignus lymphomák molekuláris diagnosztikájában
A minta feldolgozásának alternatívái malignus lymphomák molekuláris diagnosztikájában Méhes Gábor DEOEC Pathologiai Intézet Debrecen MPT 69. Kongresszusa, Siófok, 2010 A sebészi minta (pl. nyirokcsomó)
RészletesebbenMAGYOT évi Tudományos Szimpóziuma Május 5-6, Budapest
MAGYOT 2017. évi Tudományos Szimpóziuma Május 5-6, Budapest A petefészekrákok kezelésében nem régen került bevezetésre egy újabb fenntartó kezelés BRCA mutációt hordozó (szomatikus vagy germinális) magas
RészletesebbenCYP2C19 polimorfizmusok szerepe a clopidogrel rezisztencia vizsgálatában iszkémiás stroke-on átesett betegekben
CYP2C19 polimorfizmusok szerepe a clopidogrel rezisztencia vizsgálatában iszkémiás stroke-on átesett betegekben Bádogos Ágnes DE-ÁOK V. évfolyam Témavezető: Dr. Bagoly Zsuzsa Debreceni Egyetem, Általános
RészletesebbenImmunológia alapjai. Az immunválasz szupressziója Előadás. A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek
Immunológia alapjai 19 20. Előadás Az immunválasz szupressziója A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek Mi a szupresszió? Általános biológiai szabályzó funkció. Az immunszupresszió az
RészletesebbenSzinoviális szarkómák patogenezisében szerepet játszó szignálutak jellemzése szöveti multiblokk technika alkalmazásával
Szinoviális szarkómák patogenezisében szerepet játszó szignálutak jellemzése szöveti multiblokk technika alkalmazásával Fónyad László 1, Moskovszky Linda 1, Szemlaky Zsuzsanna 1, Szendrői Miklós 2, Sápi
RészletesebbenBiológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására
Szalma Katalin Biológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására Témavezető: Dr. Turai István, OSSKI Budapest, 2010. október 4. Az ionizáló sugárzás sejt kölcsönhatása Antone
RészletesebbenTRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL Az egyes biomolekulák izolálása kulcsfontosságú a biológiai szerepük tisztázásához. Az affinitás kromatográfia egyszerűsége, reprodukálhatósága
RészletesebbenLymphoma sejtvonalak és gyerekkori leukémia (ALL) sejtek mikro RNS (mir) profiljának vizsgálata
Lymphoma sejtvonalak és gyerekkori leukémia (ALL) sejtek mikro RNS (mir) profiljának vizsgálata Dr. Nemes Karolina, Márk Ágnes, Dr. Hajdu Melinda, Csorba Gézáné, Dr. Kopper László, Dr. Csóka Monika, Dr.
RészletesebbenA rosszindulatú daganatos halálozás változása 1975 és 2001 között Magyarországon
A rosszindulatú daganatos halálozás változása és között Eredeti közlemény Gaudi István 1,2, Kásler Miklós 2 1 MTA Számítástechnikai és Automatizálási Kutató Intézete, Budapest 2 Országos Onkológiai Intézet,
RészletesebbenEpithelialis-mesenchymalis átmenet vastagbél daganatokban
Epithelialis-mesenchymalis átmenet vastagbél daganatokban Éles Klára Országos Onkológiai Intézet Sebészi és Molekuláris Daganatpatológiai Centrum Budapest, 2010. 12. 03. Epithelialis-mesenchymalis átmenet
RészletesebbenTermékenységi mutatók alakulása kötött és kötetlen tartástechnológia alkalmazása esetén 1 (5)
Termékenységi mutatók alakulása kötött és kötetlen tartástechnológia alkalmazása esetén 1 (5) Termékenységi mutatók alakulása kötött és kötetlen tartástechnológia alkalmazása esetén Kertész Tamás Báder
RészletesebbenA fiziológiás terhesség hátterében álló immunológiai történések
A fiziológiás terhesség hátterében álló immunológiai történések APAI Ag ANYAI Ag FERTŐZÉS AUTOIMMUNITÁS MAGZATI ANTIGEN ALACSONY P SZINT INFERTILITAS BEÁGYAZÓDÁS ANYAI IMMUNREGULÁCIÓ TROPHOBLAST INVÁZIÓ
RészletesebbenDoktori (PhD) értekezés tézisei. Helicobacter pylori által kiváltott sejtkinetikai változások a gyomor premalignus elváltozásaiban.
Doktori (PhD) értekezés tézisei Helicobacter pylori által kiváltott sejtkinetikai változások a gyomor premalignus elváltozásaiban Unger Zsuzsa Budapest, 2003 Programvezeto: Prof. Dr. Tulassay Zsolt Témavezeto:
RészletesebbenKUTATÁSI JELENTÉS. DrJuice termékek Ezüstkolloid Hydrogél és Kolloid oldat hatásvizsgálata
KUTATÁSI JELENTÉS A Bay Zoltán Alkalmazott Kutatási Közalapítvány Nanotechnológiai Kutatóintézet e részére DrJuice termékek Ezüstkolloid Hydrogél és Kolloid oldat hatásvizsgálata. E z ü s t k o l l o
RészletesebbenA prokalcitonin prognosztikai értéke
A prokalcitonin prognosztikai értéke az első 24 órában Dr. Tánczos Krisztián SZTE Aneszteziológiai és Intenzív Terápiás Intézet Carlet et al. Antimicrobial Resistance and Infection Control 2012, 1:11 Carlet
RészletesebbenRÉSZLETES BESZÁMOLÓ Az OTKA által támogatott konzorcium működésében az Uzsoki utcai Kórház feladata a szövetminták gyűjtése, előzetes feldolgozása, ill. a betegek utánkövetése, valamint az utánkövétésre
RészletesebbenAz anti-apoptózis mechanizmus vizsgálata agyi ischaemia/hypoxia modellekben
OTKA T-037887 zárójelentés Az anti-apoptózis mechanizmus vizsgálata agyi ischaemia/hypoxia modellekben Az ischaemias stroke-ot követően az elzáródott ér ellátási területének centrumában percek, órák alatt
RészletesebbenKERINGŐ EXTRACELLULÁRIS VEZIKULÁK ÁLTAL INDUKÁLT GÉNEXPRESSZIÓS MINTÁZAT VIZSGÁLATA TROPHOBLAST SEJTVONALBAN
2016. 10. 14. KERINGŐ EXTRACELLULÁRIS VEZIKULÁK ÁLTAL INDUKÁLT GÉNEXPRESSZIÓS MINTÁZAT VIZSGÁLATA TROPHOBLAST SEJTVONALBAN Kovács Árpád Ferenc 1, Pap Erna 1, Fekete Nóra 1, Rigó János 2, Buzás Edit 1,
RészletesebbenDETERMINATION OF SHEAR STRENGTH OF SOLID WASTES BASED ON CPT TEST RESULTS
Műszaki Földtudományi Közlemények, 83. kötet, 1. szám (2012), pp. 271 276. HULLADÉKOK TEHERBÍRÁSÁNAK MEGHATÁROZÁSA CPT-EREDMÉNYEK ALAPJÁN DETERMINATION OF SHEAR STRENGTH OF SOLID WASTES BASED ON CPT TEST
RészletesebbenFagyasztás, felolvasztás, preparálás hatása a humán DNS fragmentáltságára. Nagy Melinda. MART VII. kongresszusa Sümeg,
Fagyasztás, felolvasztás, preparálás hatása a humán DNS fragmentáltságára Nagy Melinda MART VII. kongresszusa Sümeg, 215.5.8-9 Bevezetés Intézetünk egyik feladata a férfi infertilitás alapos kivizsgálása,
RészletesebbenColorectalis carcinomában szenvedő betegek postoperatív öt éves követése
Colorectalis carcinomában szenvedő betegek postoperatív öt éves követése Kegyes Lászlóné 1, Némethné Lesó Zita 1, Varga Sándor Attiláné 1, Barna T. Katalin 1, Rombauer Edit 2 Dunaújvárosi Prodia Központi
Részletesebben3. HPV típusok meghatározása RFLP analízissel, típus-specifikus PCR módszerrel és blot assay módszerrel.
OTKA zárójelentés 2007 Részletes összefoglaló Célkitűzések: 1. Human papillomavirusok (HPV) kimutatása colorectalis daganatok miatt eltávolított biopszia mintákból nukleinsav hybridizációs próbával. 2.
RészletesebbenDr. Nemes Nagy Zsuzsa Szakképzés Karl Landsteiner Karl Landsteiner:
Az AB0 vércsoport rendszer Dr. Nemes Nagy Zsuzsa Szakképzés 2011 Az AB0 rendszer felfedezése 1901. Karl Landsteiner Landsteiner szabály 1901 Karl Landsteiner: Munkatársai vérmintáit vizsgálva fedezte fel
RészletesebbenII./3.3.2 fejezet:. A daganatok célzott kezelése
II./3.3.2 fejezet:. A daganatok célzott kezelése Kopper László A fejezet célja, hogy megismerje a hallgató a célzott terápiák lehetőségeit és a fejlesztés lényeges lépéseit. A fejezet teljesítését követően
RészletesebbenSavval kapcsolatos betegségek osztályozása
Savval kapcsolatos betegségek osztályozása Gastrooesophageális reflux betegség NERD, ERD, Barrett s oesophagus Peptikus fekélyek HP +, HP fekélyek Nem HP Nem NSAID fekélyek Fekély-szerű dyspepsia Peptikus
RészletesebbenA PCR TECHNIKA ÉS ALKALMAZÁSI TERÜLETEI
Polimeráz láncreakció A PCR TECHNIKA ÉS ALKALMAZÁSI TERÜLETEI Tetszõleges DNS-szakaszról (templát) rövid idõ alatt korlátlan számú másolatot készíthetünk két iniciáló oligonukleotid (primer) és a DNS-polimeráz
RészletesebbenA bokaízület mozgásterjedelmének változása lábszárhosszabbítás során, állatkísérletes modellen *
A Semmelweis Egyetem Általános Orvosi Kar, Ortopédiai Klinika 1,és a Dr. Bugyi István Kórház, Szentes, Ortopéd Traumatológiai Osztály 2, közleménye A bokaízület mozgásterjedelmének változása lábszárhosszabbítás
RészletesebbenNYOMÁSOS ÖNTÉS KÖZBEN ÉBREDŐ NYOMÁSVISZONYOK MÉRÉTECHNOLÓGIAI TERVEZÉSE DEVELOPMENT OF CAVITY PRESSURE MEASUREMENT FOR HIGH PRESURE DIE CASTING
Anyagmérnöki Tudományok, 39/1 (2016) pp. 82 86. NYOMÁSOS ÖNTÉS KÖZBEN ÉBREDŐ NYOMÁSVISZONYOK MÉRÉTECHNOLÓGIAI TERVEZÉSE DEVELOPMENT OF CAVITY PRESSURE MEASUREMENT FOR HIGH PRESURE DIE CASTING LEDNICZKY
RészletesebbenPOSEIDON DNS PRÓBÁK. Felhasználói Kézikönyv. Használati útmutató. Használati útmutató
POSEIDON DNS PRÓBÁK Felhasználói Kézikönyv Használati útmutató Használati útmutató A Poseidon fluoreszcensen jelölt próbáinak használata A fluoreszcens in situ hibridizáció (FISH) genomi célszekvenciákat
RészletesebbenDiagnosztikai célú molekuláris biológiai vizsgálatok
Diagnosztikai célú molekuláris biológiai vizsgálatok Dr. Patócs Attila, PhD MTA-SE Molekuláris Medicina Kutatócsoport, Semmelweis Egyetem II. sz. Belgyógyászati Klinika Laboratóriumi Medicina Intézet Genetikai
RészletesebbenMTA Doktori Pályázat. Doktori Értekezés PROTEOLYTICUS ENZIMRENDSZEREK ÉS SEJTKINETIKAI PARAMÉTEREK VIZSGÁLATA EMÉSZTŐSZERVI BETEGSÉGEKBEN
MTA Doktori Pályázat Doktori Értekezés PROTEOLYTICUS ENZIMRENDSZEREK ÉS SEJTKINETIKAI PARAMÉTEREK VIZSGÁLATA EMÉSZTŐSZERVI BETEGSÉGEKBEN Dr. Herszényi László Budapest, 2008 TARTALOMJEGYZÉK Rövidítések
RészletesebbenÁramlási citometria, sejtszeparációs technikák. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE
Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára
Részletesebben67. Pathologus Kongresszus
A kemoirradiáció okozta oncocytás átalakulás szövettani, immunhisztokémiai, ultrastruktúrális jellemzői és lehetséges prognosztikus jelentősége rectum adenocarcinomákban 67. Pathologus Kongresszus Bogner
RészletesebbenImmunológia alapjai előadás MHC. szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás.
Immunológia alapjai 5-6. előadás MHC szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás. Antigén felismerés Az ellenanyagok és a B sejt receptorok natív formában
RészletesebbenPatogén mikroorganizmusok vizsgálata molekuláris biológiai módszerekkel
Patogén mikroorganizmusok vizsgálata molekuláris biológiai módszerekkel Rohonczy Kata, Zoller Linda, Fodor Andrea, Tabajdiné, dr. Pintér Vera FoodMicro Kft. Célkitűzés Élelmiszerekben és takarmányokban
RészletesebbenMolekuláris vizsgálatok B- és T-sejtes extranodalis Non-Hodgkin. limfómákban. Dr. Gurbity Pálfi Tímea. Összefoglalás
1 W L 1 Molekuláris vizsgálatok B- és T-sejtes extranodalis Non-Hodgkin limfómákban Dr. Gurbity Pálfi Tímea Összefoglalás A malignus limfómák korai felismerése, a pontos patológiai diagnózis, valamint
RészletesebbenÚjabb ismeretek a Graves-ophthalmopathia kórisméjében
Újabb ismeretek a Graves-ophthalmopathia kórisméjében Dr. Molnár Ildikó 2004 Tézisek Az utóbbi 11 évben végzett tudományos munkám új eredményei 1. Graves-kórhoz társult infiltratív ophthalmopathia kialakulásában
RészletesebbenÚj temékek az UD- GenoMed Kft. kínálatában!
Új temékek az UD- GenoMed Kft. kínálatában! Szolgáltatásaink: Medical Genomic Technologies Kft. Betegtoborzás és biobanking Bioinformatika o Adatelemzés/adatbányászás o Integrált adatbázis készítés Sejtvonal
RészletesebbenADATBÁNYÁSZAT I. ÉS OMICS
Az élettudományi-klinikai felsőoktatás gyakorlatorientált és hallgatóbarát korszerűsítése a vidéki képzőhelyek nemzetközi versenyképességének erősítésére TÁMOP-4.1.1.C-13/1/KONV-2014-0001 ADATBÁNYÁSZAT
RészletesebbenX PMS 2007 adatgyűjtés eredményeinek bemutatása X PMS ADATGYŰJTÉS
X PMS ADATGYŰJTÉS 2007 1 Tartalom Összefoglalás...3 A kutatásba beválasztott betegek életkora... 4 A kutatásba bevont betegek nem szerinti megoszlása... 5 Az adatgyűjtés során feltárt diagnózisok megoszlása...
RészletesebbenSupplementary Table 1. Cystometric parameters in sham-operated wild type and Trpv4 -/- rats during saline infusion and
WT sham Trpv4 -/- sham Saline 10µM GSK1016709A P value Saline 10µM GSK1016709A P value Number 10 10 8 8 Intercontractile interval (sec) 143 (102 155) 98.4 (71.4 148) 0.01 96 (92 121) 109 (95 123) 0.3 Voided
RészletesebbenImmundiagnosztikai módszerek
Western blot/immunoblot Immundiagnosztikai módszerek Katona Éva 2015-03-24 Ag Enzim/Fluorochrome/ izotóp Másodlagos, jelzett At Primer At Western Blotting fehérje/ag preparálás (1) Fehérje tisztítás/extrahálás
RészletesebbenGenetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére
Genetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére Dr. Czeglédi Levente Dr. Béri Béla Kutatás-fejlesztés támogatása a megújuló energiaforrások és agrár
RészletesebbenZárójelentés. ICP-OES paraméterek
Zárójelentés Mivel az előző, 9. részfeladat teljesítésekor optimáltuk a mérőrendszer paramétereit, ezért most a korábbi optimált paraméterek mellett, a feladat teljesítéséhez el kellett végezni a módszer
RészletesebbenÁramlási citometria 2011. / 4. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK
Áramlási citometria 2011. / 4 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára alkalmas
RészletesebbenZárójelentés. A) A cervix nyújthatóságának (rezisztencia) állatkísérletes meghatározása terhes és nem terhes patkányban.
Zárójelentés A kutatás fő célkitűzése a β 2 agonisták és altípus szelektív α 1 antagonisták hatásának vizsgálata a terhesség során a patkány cervix érésére összehasonlítva a corpusra gyakorolt hatásokkal.
RészletesebbenStaphylococcus haemolyticus törzsek antibiotikum rezisztenciájának. nak lis megoszlása. sa alapján. Kardos Szilvia,
Staphylococcus haemolyticus törzsek antibiotikum rezisztenciájának nak klonális lis megoszlása sa pulzáló gélelektroforézis alapján Kardos Szilvia, Volter Imréné,, Pesti Józsefné, Ghidán Ágoston, Kristóf
RészletesebbenA Helicobacter pylori kimutatásának DNS-alapú diagnosztikai módszerei
A Helicobacter pylori kimutatásának DNS-alapú diagnosztikai módszerei Ruzsovics Ágnes, Molnár Béla, Tulassay Zsolt LAM-TUDOMÁNY TOVÁBBKÉPZÉS ORVOSI GENOMIKA A Helicobacter pylori DNS-ét specifikusan azonosító
RészletesebbenSOLiD Technology. library preparation & Sequencing Chemistry (sequencing by ligation!) Imaging and analysis. Application specific sample preparation
SOLiD Technology Application specific sample preparation Application specific data analysis library preparation & emulsion PCR Sequencing Chemistry (sequencing by ligation!) Imaging and analysis SOLiD
RészletesebbenImmunhisztokémiai módszerek
Immunhisztokémiai módszerek Fixálás I. Fixálás I. A szövet eredeti szerkezetének megőrzéséhez, az enzimatikus lebontó folyamatok gátlásához: fixálószerek! kompromisszumkeresés - alkoholok: vízelvonók!!!
RészletesebbenInvolvement of ER Stress in Dysmyelination of Pelizaeus-Merzbacher Disease with PLP1 Missense Mutations Shown by ipsc-derived Oligodendrocytes
Stem Cell Reports, Volume 2 Supplemental Information Involvement of ER Stress in Dysmyelination of Pelizaeus-Merzbacher Disease with PLP1 Missense Mutations Shown by ipsc-derived Oligodendrocytes Yuko
RészletesebbenDOKTORI ÉRTEKEZÉS TÉZISEI AZ OPPORTUNISTA HUMÁNPATOGÉN CANDIDA PARAPSILOSIS ÉLESZTŐGOMBA ELLENI TERMÉSZETES ÉS ADAPTÍV IMMUNVÁLASZ VIZSGÁLATA
DOKTORI ÉRTEKEZÉS TÉZISEI AZ OPPORTUNISTA HUMÁNPATOGÉN CANDIDA PARAPSILOSIS ÉLESZTŐGOMBA ELLENI TERMÉSZETES ÉS ADAPTÍV IMMUNVÁLASZ VIZSGÁLATA TÓTH ADÉL TÉMAVEZETŐ: DR. GÁCSER ATTILA TUDOMÁNYOS FŐMUNKATÁRS
RészletesebbenSarkadi Margit1, Mezősi Emese2, Bajnok László2, Schmidt Erzsébet1, Szabó Zsuzsanna1, Szekeres Sarolta1, Dérczy Katalin3, Molnár Krisztián3,
Sarkadi Margit1, Mezősi Emese2, Bajnok László2, Schmidt Erzsébet1, Szabó Zsuzsanna1, Szekeres Sarolta1, Dérczy Katalin3, Molnár Krisztián3, Rostás Tamás3, Ritter Zsombor4, Zámbó Katalin1 Pécsi Tudományegyetem
RészletesebbenSupplementary materials to: Whole-mount single molecule FISH method for zebrafish embryo
Supplementary materials to: Whole-mount single molecule FISH method for zebrafish embryo Yuma Oka and Thomas N. Sato Supplementary Figure S1. Whole-mount smfish with and without the methanol pretreatment.
RészletesebbenMIKROSZATELIT DNS- VIZSGÁLATOK A MOCSÁRI TEKNŐS NÉGY DUNÁNTÚLI ÁLLOMÁNYÁN
MIKROSZATELIT DNS- VIZSGÁLATOK A MOCSÁRI TEKNŐS NÉGY DUNÁNTÚLI ÁLLOMÁNYÁN Molnár Tamás 1, Lanszki József 1, Magyary István 1, Jeney Zsigmond 2, Lehoczky István 2 1 Kaposvári Egyetem Állattudományi Kar,
RészletesebbenA doktori értekezés tézisei. A növényi NRP fehérjék lehetséges szerepe a hiszton defoszforiláció szabályozásában, és a hőstressz válaszban.
A doktori értekezés tézisei A növényi NRP fehérjék lehetséges szerepe a hiszton defoszforiláció szabályozásában, és a hőstressz válaszban. Bíró Judit Témavezető: Dr. Fehér Attila Magyar Tudományos Akadémia
RészletesebbenMolekuláris biológiai módszerek alkalmazása a biológiai környezeti kármentesítésben
Molekuláris biológiai módszerek alkalmazása a biológiai környezeti kármentesítésben Dr. Kovács Tamás, Kovács Árpád László Kármentesítés Aktuális Kérdései 2013 Budapest, 2013.03.21-22 Bioremediáció során
RészletesebbenMit is csinál pontosan a patológus?
Szász A. Marcell Mit is csinál pontosan a patológus? Ceglédi Kossuth Lajos Gimnázium Cegléd, 2015. március 19. www.meetthescientist.hu 1 26 Google - patológus www.meetthescientist.hu 2 26 Google - patológia
Részletesebbena hepatitis vírusok, elsősorban a hepatitis C vírus (HCV) okozta krónikus májbetegség egyes formái
1. A kutatás célja a hepatitis vírusok, elsősorban a hepatitis C vírus (HCV) okozta krónikus májbetegség egyes formái kialakulásának és progressziójának a vizsgálata volt. A folyamatot a vírus sajátságainak,
RészletesebbenA harkányi gyógyvízzel végzett vizsgálataink eredményei psoriasisban között. Dr. Hortobágyi Judit
A harkányi gyógyvízzel végzett vizsgálataink eredményei psoriasisban 2007-2011 között Dr. Hortobágyi Judit Pikkelysömörre gyakorolt hatása 2007-től 2009-ig 1. Lokális hatása 2. Szisztémás hatása 3. Állatkísérlet
RészletesebbenCélzott terápiás diagnosztika Semmelweis Egyetem I.sz. Pathologiai és Kísérleti Rákkutató Intézet, Budapest Tamási Anna, Dr.
Célzott terápiás diagnosztika Semmelweis Egyetem I.sz. Pathologiai és Kísérleti Rákkutató Intézet, Budapest Tamási Anna, Dr. Krenács Tibor KROMAT Dako szeminárium 2017. Napjainkban egyre nagyobb teret
RészletesebbenMolekuláris genetikai vizsgáló. módszerek az immundefektusok. diagnosztikájában
Molekuláris genetikai vizsgáló módszerek az immundefektusok diagnosztikájában Primer immundefektusok A primer immundeficiencia ritka, veleszületett, monogénes öröklődésű immunhiányos állapot. Családi halmozódást
RészletesebbenHelicobacter pylori (Hp) A fekélyt okozó baktérium
Helicobacter pylori (Hp) A fekélyt okozó baktérium - Spirál alakú baktérium a gyomor nyálkahártyában - Emberi szervezetben először 1983-ban mutatták ki (Warren and Marshall) - A világ népességének 50%-a
RészletesebbenHantavírus (Puumala) IgG/IgM-ELISA. 4. Szükséges anyagok és reagensek, amelyeket a teszt nem tartalmaz. Használati Utasítás /Instruction Sheet/
Hantavírus (Puumala) IgG/IgM- Enzimes immunvizsgálat az IgG és az IgM Puumala szerotipusú antitestek meghatározására. Kódszám: Tartalom: Tárolás: PR59156 96 teszt +2-8ºC Használati Utasítás /Instruction
RészletesebbenScan 1200 teljesítmény-értékelés evaluation 1/5
evaluation 1/5 interscience Feladat Összefoglalónk célja a Scan 1200 teljesítmény-értékelése manuális és automata telepszámlálások összehasonlításával. Az összehasonlító kísérleteket Petri-csészés leoltást
RészletesebbenBudapesti Corvinus Egyetem Élelmiszertudományi Kar Mikrobiológiai és Biotechnológiai Tanszék
Budapesti Corvinus Egyetem Élelmiszertudományi Kar Mikrobiológiai és Biotechnológiai Tanszék PATOGÉN MIKROORGANIZMUSOK KIMUTATÁSÁRA SZOLGÁLÓ GYORS MÓDSZEREK ÖSSZEHASONLÍTÓ VIZSGÁLATA Rohonczy Kata Doktori
Részletesebbena legérzékenyebb markerkombináció emlôdaganatoknál
TPA és CA 15-3 a legérzékenyebb markerkombináció emlôdaganatoknál Bevezetés Az emlôrák a leggyakoribb rosszindulatú betegség nôknél. Elôfordulásának gyakorisága 100.000 személybôl átlagosan 60 eset (1)
RészletesebbenA kapcsolófehérjék szerepe és lokalizációja a térdízület poszttraumás synovitisében
Országos Traumatológiai Intézet, Budapest és a Meditori Klinika, Turku (Finnország) közleménye A kapcsolófehérjék szerepe és lokalizációja a térdízület poszttraumás synovitisében JÓZSA LÁSZLÓ DR. KVISTMARTTI
RészletesebbenSEJTVONAL SPECIFIKUS MONOKLONALITÁS VIZSGÁLATOK MIELODISZPLÁZIÁBAN ÉS MIELOPROLIFERATÍV BETEGSÉGEKBEN. Jáksó Pál
Doktori (PhD) értekezés tézisei SEJTVONAL SPECIFIKUS MONOKLONALITÁS VIZSGÁLATOK MIELODISZPLÁZIÁBAN ÉS MIELOPROLIFERATÍV BETEGSÉGEKBEN Jáksó Pál Doktori Iskola: Klinikai Orvostudományok Doktori Iskola vezetője:
RészletesebbenGastrointestinalis betegségek szövettana. Felső GI tractus
Gastrointestinalis betegségek szövettana Felső GI tractus Barrett oesophagus Reflux oesophagitishez társul, de lehet tünetmentes is Emelkedett rizikó oesophagus adenocarcinomára (különösen dysplásiával
RészletesebbenOTKA ZÁRÓJELENTÉS
NF-κB aktiváció % Annexin pozitív sejtek, 24h kezelés OTKA 613 ZÁRÓJELENTÉS A nitrogén monoxid (NO) egy rövid féléletidejű, számos szabályozó szabályozó funkciót betöltő molekula, immunmoduláns hatása
RészletesebbenSupporting Information
Supporting Information Cell-free GFP simulations Cell-free simulations of degfp production were consistent with experimental measurements (Fig. S1). Dual emmission GFP was produced under a P70a promoter
Részletesebben