1 01/2012:0798 ACIDUM FUSIDICUM Fuzidinsav C 31 H 48 O 6.½H 2 O M r 525,7 [6990-06-3] DEFINÍCIÓ ent-(17z)-16α-(acetiloxi)-3β,11β-dihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24-dién- 21-sav hemihidrát. A Fusidium coccineum bizonyos törzseinek fermentálásával, vagy más módon előállított antimikrobás hatású anyag. Tartalom: 97,5 101,0% (vízmentes anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos por. Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; etanolban (96%) bőségesen oldódik. AZONOSÍTÁS A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS fuzidinsavval. B. 1 g anyagot elégetünk. A maradék nem adja a nátriumion a) pont szerinti azonossági reakcióját (2.3.1). VIZSGÁLATOK Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Az oldatokat közvetlenül felhasználás előtt készítjük. Oldószerelegy: R metanol R tömény foszforsav 5 g/l-es oldata R acetonitril (10+40+50 V/V). Vizsgálati oldat. 25 mg vizsgálandó anyagot az oldószereleggyel 10,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (a). 2 mg CRS csúcsazonosításra szánt fuzidinsavat (amely A-, B-, C-, D-, F-, G-, H- és N-szennyezőt is tartalmaz) 1,0 ml oldószerelegyben oldunk.
2 Összehasonlító oldat (b). A vizsgálati oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). A b) összehasonlító oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 10,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (d). Egy üvegcse CRS fuzidinsav-szennyezőkeveréket (amely I-, K-, L- és M- szennyező keveréke) 1,0 ml oldószerelegyben oldunk. Oszlop: méretei: l = 0,15 m, = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt oktadecilszililezett szilikagél (3,5 μm); hőmérséklet: 30 C. Mozgófázis: A-mozgófázis: R metanol R acetonitril R tömény foszforsav 5 g/l-es oldata (20+40+40 V/V); B-mozgófázis: R tömény foszforsav 5 g/l-es oldata R metanol R acetonitril (10+20+70 V/V); Idő (perc) 0 3 3 28 28 33 A-mozgófázis (%V/V) 100 100 0 0 B-mozgófázis (%V/V) 0 0 100 100 Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 235 nm-en. Injektálás: 20 μl. Szennyezők azonosítása: az A-, B-, C-, D-, F-, G-, H- és N-szennyezőt a CRS csúcsazonosításra szánt fuzidinsavhoz mellékelt kromatogram és az a) összehasonlító oldat kromatogramja alapján azonosítjuk; az I-, K-, L és M-szennyezőt a CRS fuzidinsav-szennyezőkeverékhez mellékelt kromatogram és a d) összehasonlító oldat kromatogramja alapján azonosítjuk. Relatív retenciók a fuzidinsavra (retenciós ideje kb. 18 perc) vonatkoztatva: A-szennyező kb. 0,4; B- szennyező kb. 0,5; C-szennyező kb. 0,6; D-szennyező kb. 0,63; N-szennyező kb. 0,65; F-szennyező kb. 0,7; G-szennyező kb. 0,82; H-szennyező kb. 0,85; I-szennyező kb. 0,96; K-szennyező kb. 1,18; L- szennyező kb. 1,23; M-szennyező kb. 1,4. Rendszeralkalmasság: a) összehasonlító oldat: csúcsfelbontás: legalább 1,5, a G- és a H-szennyező között. Követelmények: korrekciós faktorok: a következő szennyezők mennyiségének kiszámításához a megfelelő csúcsterületeket a következő faktorokkal szorozzuk: C-szennyező 0,7; D-szennyező 0,7; F- szennyező 0,3; I-szennyező 0,6; K-szennyező 0,6; M-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (1,0%); G-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,7-szerese (0,7%); L-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5-szerese (0,5%); B-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének négyszerese (0,4%); A-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a c) összehasonlító oldat kromatogramján
3 látható főcsúcs területének háromszorosa (0,3%); C-, D-, F-, I-, K- és N-szennyező: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének kétszerese (0,2%); egyedi határértékhez nem kötött (nem-specifikált) szennyezők: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,10%); összes szennyező: csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének kétszerese (2,0%); elhanyagolási határ: a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5- szerese (0,05%). Víztartalom (2.5.12): 1,4 2,0%. 0,50 g anyagot vizsgálunk. Szulfáthamu (2.4.14): legfeljebb 0,2%. 1,0 g anyagot vizsgálunk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Az anyag 0,400 g-ját 10 ml R etanolban (96%) oldjuk. 0,5 ml R fenolftalein oldat hozzáadása után az oldatot 0,1 M nátrium-hidroxid mérőoldattal rózsaszínig titráljuk. 1 ml 0,1 M nátrium-hidroxid mérőoldattal 51,67 mg C 31 H 48 O 6 egyenértékű. ELTARTÁS Fénytől védve, 2 8 C hőmérsékleten. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: A, B, C, D, F, G, I, K, L, M, N. Egyéb kimutatható szennyezők (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10.) című általános fejezetet): E, H, J, O. és C * -epimere A. ent-(24sr,17z)-16α-(acetiloxi)-3β,11β,24,25-tetrahidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszt- 17(20)-én-21-sav (24,25-dihidro-24,25-dihidroxifuzidinsav),
4 és C * -epimere B. ent-(17z)-3β,11β-dihidroxi-17[(6sr)-6-hidroxi-7,7-dimetil-2-oxooxepán-3-ilidén]-4β,8,14-trimetil- 18-nor-5β,10α-androsztán-16α-il-acetát (24,25-dihidro-24,25-dihidroxifuzidinsav-21,25-lakton), C. ent-(17z)-3β,11β-dihidroxi-17[(6s)-6-(1-hidroxi-1-metiletil)-2-oxodihidro-2h-pirán-3(4h)-ilidén]- 4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-androsztán-16α-il-acetát ((24R)-24,25-dihidro-24,25- dihidroxifuzidinsav-21,24-lakton), D. ent-(17z)-3β,11β-dihidroxi-17[(6r)-6-(1-hidroxi-1-metiletil)-2-oxodihidro-2h-pirán-3(4h)-ilidén]- 4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-androsztán-16α-il-acetát ((24S)-24,25-dihidro-24,25- dihidroxifuzidinsav-21,24-lakton),
5 E. ent-(17z,24ez)-16α-(acetiloxi)-3β,11β,26-trihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta- 17(20),24-dién-21-sav (26-hidroxifuzidinsav), F. ent-(17z,24ez)-16α-(acetiloxi)-3β,11β-diihidroxi-4β,8,14-trimetil-26-oxo-18-nor-5β,10α-koleszta- 17(20),24-dién-21-sav (26-oxofuzidinsav), G. ent-(17z)-16α-(acetiloxi)-11β-hidroxi-4β,8,14-trimetil-3-oxo-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24- dién-21-sav (3-didehidrofuzidinsav), H. ent-(17z)-16α-(acetiloxi)-3β-hidroxi-4β,8,14-trimetil-11-oxo-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24- dién-21-sav (11-didehidrofuzidinsav),
6 I. ent-(17z)-3β,11β,16β-trihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24-dién-21-sav (16-epi-dezacetilfuzidinsav), J. ent-(17z)-3β,11β-dihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24-dieno-21(16β)- lakton (16-epi-dezacetilfuzidinsav-21,16-lakton), K. ent-(17z)-3β,11β-dihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24dieno-21-(16α)- lakton (dezacetilfuzidinsav-21,16-lakton), L. ent-(17z)-16α-(acetiloxi)-3β-hidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-9(11),17(20),24- trién-21-sav (9,11-anhidrofuzidinsav),
7 M. ent-(17z)-16α(acetiloxi)-3β-hidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24-dién-21- sav (11-dezoxifuzidinsav), N. ismeretlen szerkezetű vegyület, O. ent-(17z)-3β,11β,16α-trihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24-dién-21-sav (dezacetilfuzidinsav).