Point of care a haemostasis diagnosztikában I. ACT, INR, APTI, Multiplate

POCT Point of care testing Decentralized laboratory testing Emergency testing Critical care testing Patient focused testing Medical office testing Immediate care diagnostics Near patient testing Bedside testing Patientennahe Laboratoriumsdiagnostik

POCT intenzív osztály kórházi osztály sürgősségi osztály, betegfelvétel műtő háziorvos, szakrendelés otthon, önvizsgálat speciális pl. rendőrségi

POCT múlt

POCT múlt XVII. század vér elemzése J. Locke, R. Boyle laboratórium

Koncentrálódás Automatizálás Mintaazonosítás Mintaelőkészítés: centrifugálás Széles vizsgálatspektrum Sok minta Nagy teljesítményű rendszer Háttér készülékek Sürgős vizsgálatkérés lehetőség Minőségirányítás Karbantartás Informatika TAT Szakértők, konzultációs lehetőség Laboratórium

Fényposta

csőposta Trombocitaaggregációs vizsgálatokhoz nem alkalmas!! 1853

POCT Kis számú minta Kevés analit Nagyon sürgős Minta nem szállítható Nem érdemes szállítani Teljes vér felhasználása TAT

POCT -Készülék Kicsi (kézi, asztali) Egyszerű Elronthatatlan Karbantartás nélkül Felhasználóbarát szoftver, hardver Kevés gomb Informatikához kapcsolódjon

POCT - módszer Egyszerű Centrifugálás, pipettázás nélkül Szobahőmérsékleten tárolható, használatra kész reagensek Eredmény a labormódszerrel összevethető Minőség-ellenőrzés Segítség a laboratóriumtól

Laboratórium-POCT Labor Koncentrálódás Minőség Automatizálás Mintaelőkészítés Analízis: egy mintából sokféle analit Leletközlés Minőség-ellenőrzésminőségirányítás Szakértelem Mennyiség Ár/vizsgálat TAT Informatika POCT Helyszínen Minőség Egyszerű, robosztus készülék, mintaelőkészítés nélkül, kevés folyamat Minőség-ellenőrzés (segítség a laboratóriumtól) Kis számú mérés Ár: vizsgálat, mintavételi eszközök, cső, szállítás, IDŐ IDŐ Informatika

POCT fő területei Haemostasis Vizelet analitika Vérgáz analízis + Oximetria Vércsoport szerológia Glükóz Kardiológia Terhességi gyorstesztek Toxikológiai gyorstesztek Egyéb

Hemosztázis-POCT Véralvadási problémák életet veszélyeztetőek-műtét nagyon sürgős vizsgálatok Minta stabilitása : ACT: 0 perc INR: 4óra Trombocita aggregáció: 2 óra Csőpostán nem szállítható!! Gyógyszerhatás monitorozás Rendszeres kontrollt igényel (INR)

ACT= Aktivált alvadási idő

ACT= Activated Clotting Time Teljes vér Intrinsic rendszer monitorozása Heparin hatás monitorozása Koagulációs státusz Activátor: kaolin

ACT ACT golden standard szívműtétek Manual ACT: Hattersley, 1966 Hemochron:1970 s HemoTec:1985 Normal range 81-133 seconds Intraoperative range: >400 seconds

Heparin kontrol Idő(sec) 350 300 250 200 150 100 50 apti ACT 0 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1,6 1,8 2 Heparin koncentráció (u/ml)

ACT= activated Clotting Time Cardiovascularis sebészet Érsebészet Cardiális katéter labor Intenzív osztály Gyermekintenzív osztály ECMO Hemodialízis osztály Intervenciós radiológia

ACT HR-ACT High Range (magas heparin szint) LR-ACT Low range (terápiás heparin szint) RACT Recalcified (citrátos minta) HTC Heparináz test cartridge

ACT-HTC 1. Csatorna Heparinázzal 2. Csatorna Heparináz nélkül 120 120 120 260 260 260 260 360 Magyarázat Alapérték Nincs heparin Heparin tartalmú minta Coagulopátia heparin nélkül Coagulopátia és heparin

ACT Mágneses keverés

INR K-vitamin antagonisták: Warfarin Syncumar Terápia: élelmiszer K-vitamin egyéb fehérjéhez kötődő gyógyszerek felszívódás, metabolizmus Mérgezés: kumarinszármazékok (rodenticid)

Módszerek összehasonlítása

CoaguChek Termékcsalád XS, XS Plus, XS Pro Beteg önellenőrzésére Háziorvosi rendelő részére Kórházi felhasználásra

CoaguChek Termékcsalád XS, XS Plus, XS Pro Megbízható, gyors eredmények és kényelmes használat. Kisméretű, kézben is tartható készülék A készülékek egy csepp kapilláris (vagy natív vénás) vérből határozzák meg a protrombin időt. A tesztcsík mintafelviteli zónája a készüléken kívül esik, könnyebb a felcseppentés akár felülről, vagy oldalról is. Eredményt egy perc alatt adnak, és a mérési eredményeket tárolják a memóriában dátummal és időponttal együtt.

CoaguChek Termékcsalád A méréshez nincsen szükség kalibrációra, azt a tesztcsíkok mellé adott kalibrációs kód segítségével a készülékek automatikusan elvégzik. Minden egyes tesztcsík használatakor On board quality control. Hibás tesztcsíkkal nem lehet mérni. Szobahőmérsékleten tárolható tesztcsíkok Humán rekombináns szöveti tromboplasztin Dade Behring (ISI 1 körüli)

CoaguChek Termékcsalád Mérési elv a kialakuló trombin proteáz aktivitása kerül kimutatásra. humán rekombináns tromboplasztint és egy Electrozyme TH peptid szubsztrátot tartalmaz. (beszárított) Az Electrozyme TH, a szerin proteázok (mint a trombin is) kimutatására alkalmas. A tromboplasztin beindítja az alvadási folyamatot és trombin keletkezik. A trombin hasítja az Electrozyme TH szubsztrátot, egy peptiddé és egy elektrokémiailag aktív phenylenediaminra, mely elektromos jelet generál.

Coagucheck módszer elve

CoaguChek XS Pro Tulajdonságai Megbízható, gyors eredmények és kényelmes használat. Egy csepp kapilláris vér (8 µl) szükséges a gyors, és pontos INR eredményhez. Könnyű felcseppentés akár felülről vagy oldalról is. Szobahőmérsékleten tárolható tesztcsík. On-board minőség-ellenőrzés. A labor eredményekkel egyező eredmények. Beépített vonalkódolvasó: minta és kezelőazonosítás

CoaguChek XS Pro dokkoló egység funkciója A dokkoló egységnek 3 funkciója van 1. Feltöltse az akkumulátor - csomagot 2. Támogassa a kommunikációt egy adatkezelő rendszerrel 3. Összekapcsolható egy számítógéppel

Minden tesztcsík dobozhoz tartozik egy kódcsip. CoaguChek XS Pro Tesztcsík A kódcsip tartalmazza a tesztspecifikus információkat (lejárat, lotszám stb.). A tesztcsíkot szobahőmérsékleten kell tárolni. Minden új doboz megnyitásánál helyezze be a dobozban található kódcsipet a készülékbe.

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Minőségellenőrzés A CoaguChek XS Pro készülék több, független módszerrel végez minőségellenőrző teszteket: A készülék minden bekapcsolásánál ellenőrzi az elektronikus alkatrészeket és funkciójukat. A tesztcsík lejárati idejének és gyártási sorozat információjának ellenőrzése. Minőségellenőrzési funkció működik a tesztcsíkba építve. Meghatározott, előírt minőségellenőrző mérés a CoaguChek XS PT kontroll. Külső minőség-ellenőrzés? Összemérés a laboratóriummal?

Módszer összehasonlítás CoaguChek XS és Innovin reagenssel működő laboratóriumi automata között, illetve kalibrációs adatok a WHO standard preparátumhoz

Normál kontrol INR 3,4 1,3 5,0 1,2 4,5 18 1,1 4,0 1,0 3,5,9,8 3,0 5 8,7 N = 16 ELITE 16 POCT 16 ACL_TOP 2,5 N = 18 ACL Elite Pro 18 POCT 18 ACL_TOP

Coagucheck XS Plus

ACT, INR, APTI Hemochron 15µl teljes vér (csepp) Reagenssel keveredik Csatornában halad Optikai detektálás LED-detektor sor Áramlási sebesség mérés

ACT, INR, APTI Helena Cascade POC Fotomechanikus módszer Tesztkártyák APTI: citrátos minta ACT, INR teljes vér

Trombocita aggregáció Multiplate (Roche)

Multiplate rendszer A thrombocyta funkciók közvetlenül teljes vérben végzett szenzitív vizsgálata Mérési elv: impedancia 300 µl teljes vénás vér Nincs szükség a minta előkészítésére 5 csatornás, párhuzamos mérésekhez Egyszerű számítógép-vezérelte pipettázás Elektronikus és folyadékos minőségellenőrzés 10 percen belül eredmény, 25 teszt/óra

Multiplate készülék Felhasználási hely Egyaránt használható laboratóriumban és betegágy mellett (POC)

Multiplate rendszer Teszt cella (küvetta) technológia Eldobható vizsgálati cella beépített érzékelővel és PTFEbevonatú keverővel. A kettős érzékelő elektródák : QC optikai változók nem befolyásolják a thrombocyta funckió elektronikus észlelését.

Multiplate rendszer Teszt cella (küvetta) technológia Impedancia-aggregométer, amely két, a mintába merülő elektródapár közötti elektromos ellenállás változását méri az idő függvényében. Teljes vér használata POCT Standardizált reagensek Specifikus és átfogó thrombocyta diagnózishoz Erősen szenzitív az Aszpirin, clopidogrel, prasurgrel és IIbIIIa antagonisták hatására

Hirudin Direkt trombin inhibitor Polipeptid Citrátos minta + Ca nem a valóságos képet adja

Multiplate rendszer Reagensek ADPtest ASPItest TRAPtest COLtest RISTOtest ADPtest HS Clopidogrel Aspirin monitoring Standardizált reagensek Specifikus és átfogó thrombocyta diagnózishoz Erősen szenzitív az Aszpirin, clopidogrel, prasurgrel és IIbIIIa antagonisták hatásására

19 March 2014 page 66 2009 Roche Multiplate rendszer Reagensek

Multiple Electrode Aggregometry Multiplate TRAPtest activation inhibition 1 release of arachidonic acid COLtest Collagen TXA 2 ASPItest Arachidonic Acid TXA 2 ArA 1 COX TRAP ADPtest ADP Clopidogrel Prasugrel Cangrelor PGE1 ADPtest HS (ADP + PGE1) GpIIb/IIIa antagonists: Reopro (abciximab) Aggrastat (Tirofiban) Integrillin (Eptifibatid) Aspirin NSAID GpIb-R RISTOtest Ristocetin (vwf dependent)

Multiplate rendszer Egy mérés elvégzése Helyezze a teszt cellát a mérési pozícióba Csatlakoztassa az érzékelő kábeleket Pipettázzon: 300 µl sóoldat+ 300 µl Hirudinos vér AUC: 345 AU*min 3 perc inkubálás Mérési idő 6 perc Eredmény Pipettázza az aktivátort

Multiplate rendszer Paraméterek Folyamatosan rögzíti a vérlemezkék összetapadását. A vérlemezkék az érzékelőkre tapadnak nő az impedancia időgrafikon aggregációs görbe alatti terület (AUC). függ az aggregációs görbe magasságától és meredekségétől. a legalkalmassabb a vérlemezke aktivitás kifejezésére. Két görbe képződik a cella két független érzékelője segítségével. A szoftver által számított értékek az egyes görbék adatainak középértékei.

Multiplate rendszer Paraméterek A képernyőn a görbétől balra látható fekete sáv mutatja az AUC-t. Az erős zöld rész mutatja a referencia tartományt. 19 March 2014 page 70 2009 Roche

Multiplate rendszer Paraméterek no platelet inhibition 100 mg aspirin qd ASPItest 102 U 17 U ADPtest 89 U 134 U 75 mg clopidogrel qd 89 U 31 U 100 mg aspirin + 75 mg clopidogrel qd 8 U 17 U

Köszönöm a figyelmet!