Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-1 01/2014:0926 LEVONORGESTRELUM Levonorgesztrel C 21 H 28 O 2 M r 312,5 [797-63-7] DEFINÍCIÓ 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on. Tartalom: 98,0 102,0% (szárított anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos por. Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; diklórmetánban mérsékelten oldódik; etanolban (96%) kevéssé oldódik. AZONOSÍTÁS A. Fajlagos optikai forgatóképesség (lásd Vizsgálatok). B. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS levonorgesztrellel. VIZSGÁLATOK Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): 35 és 30 között. 0,200 g anyagot R diklórmetánnal 20,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. A. A-, B-, H-, K-, M-, O-, S-, U-szennyezők. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Oldószerelegy: R kromatográfiás célra szánt víz R1 acetonitril (30+70 V/V) Vizsgálati oldat. 10,0 mg vizsgálandó anyagot ultrahang segítségével 7 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 10,0 ml-re hígítjuk.
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-2 Összehasonlító oldat (a). 5 mg CRS 1 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelt (amely A-, H-, K-, M-, O- és S-szennyezőt tartalmaz) ultrahang segítségével 3,5 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R vízzel 5,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 1,0 ml vizsgálati oldatot az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítunk. Ezen oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 10,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). 5,0 mg CRS levonorgesztrel-b-szennyezőt 35 ml R1 acetonitrilben oldunk, és az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (d). 5,0 mg CRS noretiszteront (U-szennyező) 35 ml R1 acetonitrilben oldunk, és az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: méretei: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, beágyazott poláros csoportokat tartalmazó, oktilszililezett szilikagél (5 μm); hőmérséklet: 30 C. Mozgófázis: A-mozgófázis: R1 acetonitril R kromatográfiás célra szánt víz (40+60 V/V); B-mozgófázis: R1 acetonitril; Idő (perc) A-mozgófázis (%V/V) B-mozgófázis (%V/V) 0 50 100 20 0 80 Áramlási sebesség: 0,7 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel 215 nm-en; az O-szennyező vizsgálatához pedig 200 nm-en. Injektálás: 50 μl. Szennyezők azonosítása: az A-, H-, K-, M- és S-szennyező azonosítására a CRS 1 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelhez mellékelt kromatogramot és az a) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk 215 nm-en, az O-szennyező azonosításához pedig 200 nm-en; a B-szennyező azonosítására a c) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; az U-szennyező azonosítására a d) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók a levonorgesztrelre (retenciós ideje kb. 20 perc) vonatkoztatva: H-szennyező kb. 0,5; U-szennyező kb. 0,8; K-szennyező kb. 0,85; A-szennyező kb. 0,91; M-szennyező kb. 0,95; O- szennyező kb. 1,16; B-szennyező kb. 1,26; S-szennyező kb. 1,9. Rendszeralkalmasság: jel/zaj viszony: legalább 60, a b) összehasonlító oldat kromatogramján megjelenő főcsúcsra számolva; hegy-völgy arány: legalább 3,0, ahol H p = az M-szennyezőnek megfelelő csúcs alapvonaltól mért magassága és H v = az M-szennyező csúcsát az A-szennyező csúcsától elválasztó görbeszakasz minimumának az alapvonaltól mért távolsága. A százalékos tartalmi értékek kiszámolása: korrekciós faktorok: a szennyezők mennyiségének számításához csúcsterületüket a következő korrekciós tényezővel szorozzuk: A-szennyező = 0,4; M-szennyező = 3,1; O- szennyező = 2,6; B-szennyező: a c) összehasonlító oldat B-szennyező koncentrációját vesszük alapul;
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-3 U-szennyező: a d) összehasonlító oldat U-szennyező koncentrációját vesszük alapul; bármely más szennyező: a d) összehasonlító oldat U-szennyező koncentrációját vesszük alapul; Követelmények: A- B- és K-szennyező: egyenként legfeljebb 0,3%; O-szennyező 200 nm-en: legfeljebb 0,3%; M-, S- és U-szennyező: egyenként legfeljebb 0,2%; U-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a d) összehasonlító oldat kromatogramján a megfelelő csúcs területének kétszerese (0,2%); H-szennyező: legfeljebb 0,15%; egyedi határértékhez nem kötött (nem-specifikált) szennyezők: egyenként legfeljebb 0,10%; szennyezők összesen, az O-szennyező kivételével: legfeljebb 1,0%; jelentési határérték: 0,05%. B. V-, W-szennyezők. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Oldószerelegy: R kromatográfiás célra szánt víz R1 acetonitril (30+70 V/V) Vizsgálati oldat. 10,0 mg vizsgálandó anyagot ultrahang segítségével 7 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 10,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (a). 5 mg CRS 2 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelt (amely V- és W-szennyezőt tartalmaz) 3,5 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R vízzel 5,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 5,0 mg CRS etinilesztradiolt ultrahang segítségével 35 ml R1 acetonitrilben oldunk, és az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 3,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: méretei: l = 0,15 m, Ø = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, oktilszililezett szilikagél (3 μm); Mozgófázis: A-mozgófázis: R1 acetonitril R kromatográfiás célra szánt víz (40+60 V/V); B-mozgófázis: R kromatográfiás célra szánt víz R acetonitril (10+60 V/V); Idő (perc) A-mozgófázis (%V/V) B-mozgófázis (%V/V) 0 1 92 8 1 3 92 82 8 18 3 6 82 18 6 16 82 60 18 40 16 21 60 0 40 100 21 32 0 100 Áramlási sebesség: 1 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel 20 nm-en. Injektálás: 50 μl.
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-4 Szennyezők azonosítása: a V- és W-szennyező azonosítására a CRS 2 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelhez mellékelt kromatogramot és az a) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók a levonorgesztrelre (retenciós ideje kb. 12 perc) vonatkoztatva: W-szennyező kb. 0,9; V-szennyező kb. 1,9. Rendszeralkalmasság: a) összehasonlító oldat csúcsfelbontás: legalább 2,8 a W-szennyező és a levonorgesztrel csúcsai között. A százalékos tartalmi értékek kiszámolása: bármely szennyező esetében a b) összehasonlító oldat etinilesztradiol koncentrációját vesszük alapul; Követelmények: W-szennyező: legfeljebb 0,3%; V-szennyező: legfeljebb 0,15%; Szárítási veszteség (2.2.32): legfeljebb 0,5%. Az anyag 1,000 g-ját szárítószekrényben, 105 C-on szárítjuk. Szulfáthamu (2.4.14): legfeljebb 0,1%. Az anyag 1,0g-ját vizsgáljuk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Az anyag 0,200 g-ját 45 ml R tetrahidrofuránban oldjuk. Az oldatot R ezüst-nitrát 100 g/l-es oldatának 10 ml-ével elegyítjük. 1 perc elteltével az elegyet, potenciometriás végpontjelzést alkalmazva (2.2.20), 0,1 M nátrium-hidroxid mérőoldattal titráljuk. Üres kísérletet is végzünk. 1 ml 0,1 M nátrium-hidroxid mérőoldattal 31,25 mg C 21 H 28 O 2 egyenértékű. ELTARTÁS Fénytől védve. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: A, B, H, K, M, O, S, U, V, W. Egyéb kimutatható szennyezők (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10.) című általános fejezetet): C, D, G, I, J, L, N, P, Q, R, T.
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-5 A. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregna-4,8(14)-dién-20-in-3-on, B. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-én-20-in-3-on, C. 13-etil-3-etinil-18,19-dinor-17α-pregna-3,5-dién-20-in-17-ol, D. 13-etil-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-17-ol (3-dezoxolevonorgesztrel), G. 13-etil-6α,17-dihidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (6α-hidroxilevonorgesztrel), H. 13-etil-6β,17-dihidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (6β-hidroxilevonorgesztrel),
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-6 I. 13-etil-10,17-dihidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (10-hidroxilevonorgesztrel), J. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3,6-dion (6-oxolevonorgesztrel), K. 13-etil-17β-dihidroxigon-4-én-3-on (18-metilnandrolon), L. 13-etilgon-4-én-3.17-dion (levodion), M. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregna-4,6-dién-20-in-3-on (Δ6-levonorgesztrel),
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-7 N. 13-etilgon-5(10)-én-3,17-dion (Δ5(10)-levodion), O. 13-etil-17-hidroxi-5α-metoxi-18,19-dinor-17α-pregn-20-in-3-on (4,5-dihidro-5α-metoxilevonorgesztrel), P. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-5-én-20-in-3-on (Δ5-levonorgesztrel), Q. 13-etil-3-metoxigona-2,5(10)-dién-17β-ol, R. 13-etil-3-metoxigona-2,5(10)-dién-17-on,
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-8 S. 13-etil-3-metoxi-18,19-dinor-17α-pregna-3,5-dién-20-in-17-ol, T. 13-etil-3-metoxi-18,19-dinor-17α-pregna-2,5(10)-dién-20-in-17-ol, 17-hidroxi-19-nor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (noretiszteron). 13-etil-3-metoxi-18,19-dinor-17α-pregna-1,3,5(10)-trien-20-in-17-ol, W. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregna-5,7,9-trien-20-in-3-one.