GRAM POZITÍV ÉS GRAM NEGATÍV ANAEROB BAKTÉRIUMOK GRAM POZITÍV SPÓRAKÉPZŐ PÁLCÁK DR. Ghidán Ágoston 2014.10.13.
A humán anaerob normál flóra bőrön, szájüregben, hüvelyben, emésztő traktusban Bőr habár állandóan levegővel érintkezik az anaerobok jelen vannak dominánsak az 'anaerob diphtheroidok' propionibacteriumok
Szájüreg anaerobok megtalálhatóak: a mandulák és a nyelv kriptáiban gingiva tasakoban, plakkokban újszülöttekben is megtalálható de a számuk akkor nő meg amikor a fogak áttörnek A leggyakoribbak: Prevotella, Fusobacterium, Peptostreptococcus, Veillonella, és néhány anaerob Gram-pozitív pálca
Mintavétel és tenyésztés az anaerobok érzékenyek az oxigénre de nem egyformán Bacteroides fragilis és Clostridium perfringens 2-4 % O 2 elvisel anaerob tenyésztésre alkalmas minta: váladékok, szövetdarabok mintavételkor és szállításkor kerülni kell az O 2 való érintkezést száraz vattatampon nem megfelelő
Metronidazol: csak anaerobok ellen hatásos - legtöbb baktérium érzékeny növekvő rezisztencia!!! ß-Laktám antibiotikumok - az anaerobok penicillinre érzékenyek - B. fragilis penicillin rezisztens rezisztens még: ampicillin, amoxycillin, piperacillin, - imipenem és meropenem lehet ellenük hatásos - ß-laktamáz gátlóval kombinálva a B. fragilis ellen hatásos
Clindamycin: a legtöbb anaerob érzékeny rá Chloramphenicol: hatásos szintén az anaerobokra Erythromycin, co-trimoxazole, tetracyclinek: hatásosak Glycopeptidek, aminoglycosidek és quinolonok: hatástalanok Kezelés - elhalt szövetek eltávolítása - drainezés, tályogok megnyitása Megelőzés: kemoprofilaxis: cefuroxime vagy metronidazol
Genus Anaerob baktériumok Anatómiai hely Gram-negatív anaerob - Gram-negatív pálca: - Bacteroides sp. Vastagbél - Prevotella sp. Szájüreg - Porphyromonas sp. Szájüreg - Fusobacterium sp. Szájüreg, vastagbél - Gram-negatív coccus - Veillonella Szájüreg, vastagbél
Bacteroides vékony pálca vagy coccobacillus normál bélflóra tagja a normál székletben 10 11 B. fragilis/g található Betegségek: endogén eredet peritonitis, decubitus, tályogok azonosítás: biokémiai reakciók alapján, gázkromatográfiával, MALDI-TOF
Prevotella keskeny pálca vagy coccobacillus általában felsőlégúti megbetegedésekből izolálható P. bivia, P. disiens női urogenitális traktusban megtalálható agytályog, tüdőtályog, empyema
Porphyromonas szájüreg normál flórájához tartozik megtalálható szájüregi tályogokban, melltályogokban, perianális és húgyúti infekciókban
Fusobacterium nucleatum szivar alakú pálcák kénhidrogént, vajsavat és propionsavat termel szájüregi infekciókból izolálható
Akut nekrotizáló ulcerativ gingivitis Plaut-Vincent angina, fusospirochaetosis a fogíny és a bucca érintve van tünetek: fájdalmas, vérző fogínyek, néha álhártyával felrakott bűzös lehelet Gram festéssel igazolható
Veillonella Gram-negatív coccusok normál szájflóra és bélflóra tagja hasznos baktériumnak tartják tejsavat gyengébb savakra bontja Fontosabb speciesek: V. parvula, V. dispar, V. atipyca
Gram-pozitív anaerobok Gram-pozitív pálcák - Actynomyces Szájüreg - Lactobacillus Hüvely - Propionibacterium Bőr - Eubacterium, Bifidobacterium, Arachnia Szájüreg, vastagbél - Clostridium Vastagbél, talaj Gram-pozitív coccus - Peptostreptococcus Vastagbél
Actinomyces A genus több speciest is tartalmaz: A. bovis (állatpatogén); A. naeslundii, A. odontolyticus, A. viscosus - ritkán okoznak betegséget és a normál szájflóra tagjai A. israelii a legjelentősebb humán patogén
Morfológia, biokémiai tulajdonság: Gram-pozitív, karcsú pálca, gyakran fonal alakú Szövetekben sárgás tőkéket képez, amely kisebb baktériumtömegeknek felel meg. Anaerob baktérium, lassan szaporodik
Patogenitás: az actinomycosis - endogén eredetű fertőzés sérülés, gennyes folyamatok elősegítik kialakulását, melynek három megjelenési formája van: cervicofacialis: az arcra és a nyakra lokalizálódik, fognyak-, gyökér caries, gingivitis, caries progresszíva, zománc demineralizáció, plakk
thoracalis: főleg tüdőfolyamatokat jelent abdominalis: az appendix és a coecum krónikus gyulladásaként jelentkezik - betegség helyén a szövetek duzzadtak - a terület deszkakemény tapintású és a sipolyokból sűrű genny ürül Diagnózis, terápia: - gennyből Gram-festés, tőkék kimutatása - sebészi feltárás mellett penicillin + szulfonamid kombináció
Propionibacterium 4 species: P. acnes P. propionicum Morfológia: G + pleomof pálca Tenyésztés : anaerob véres agar proteáz, lipáz, hisztamin, porfirin termelés Klinikai kép:** acne vulgaris **carbunculus, phlegmone, sepsis ** dentoalveoláris infekció, dentális plakk Terápia: tetracyclin, clindamycin
Eubacterium pleomorf baktériumok fontosabb speciesek: E. brachy, E. nodatum a bélflórában megtalálhatóak tályogokból izolálhatóak E. yurii kukoricacső alakzatot képez
Lactobacillus acidophilus Szájüregben normál flóra (sok species) cukor -- tejsav -- fogzománc károsodik -- caries Hüvelyben normál flóra (Döderlein pálca) savi ph védelem kórokozókkal szemben Tenyésztés: Rogosa táptalajon
Mikrobiológiai teszt a caries rizikó felmérésére Lactobacillus és Streptococus mutans csíraszám meghatározás nyálban, dentális plakk-, vagy interdentális terület váladékában A minta higításainak szélesztése: Rogosa-, Mitis - Salivarius agarra - csíraszámolás Magas caries hajlam: Streptococcus mutans CFU 1,OOO.OOO/ ml Lactobacillus CFU 1OO.OOO/ ml
Bifidobacterium 8 species: B. dentocariosa Morfológia: G+ bunkós végű pálca, láncban Tenyésztés: anaerob véres agar Előfordulás: száj-, bél-, vagina flóra, csecsemők bélflórája---kolonizációs rezisztencia Klinikai kép: caries? perodontális betegségek? Probiotikum
SZÁJÜREGI INFEKCIÓK CAPNOPHIL KÓROKOZÓI
Actinobacillus actinomycetemcommitans Előfordulás: szájüreg normál flórája Morfológia: G- coccobacillus Tenyésztés: véres agar, CO 2 atmoszféra Virulencia faktorok: leucotoxin IgA proteáz, kollagenáz Klinikai kép: **agresszív parodontitis **destruktiv periodontitis **abscessus, osteomyelitis
Eikenella corrodens Morfológia: G+ karcsú, kicsi pálca Tenyésztés: véres agarba süllyed CO 2 atmoszféra Előfordulás: szájüreg normál flóra Klinikai kép: szájüregi gennyes folyamatok
Capnocytophaga Morfológia: G +/- pálca Tenyésztés: véres agar, CO 2 atmoszféra Előfordulás: subgingivális normál flóra Klinikai kép: gingivitis, parodontitis, osteomyelitis
Bacillus, Clostridium
Gram-pozitív spóraképző pálcák Aerob Anaerob Bacillus Clostridium B. anthracis C. botulinum B. cereus C. perfringens C. difficile C. tetani
Bacillus anthracis Morfológia: - csilló nélküli pálca - 4-5 m hosszú - rövid láncokat alkot (bambusznád) - spórát képez (élő szervezetben nem) - spóraképzés 15 C-on
Tenyésztés: aerob 12-45 C-on növekszik spórát oxigén jelenlétében képez telepei sugárirányba nőnek, medúzafőhöz hasonlítanak véres agaron nem hemolizál leves táptalajban vattaszerű üledéket képez
Ellenálló képesség: spórák ellenállóak Gruinard szigetén (Skócia) 1942 és 1943 között spórát tatrtalmazó bombát robbantottak kísérleti célból (robbanástól a spóra nem pusztul el) 1986-ig a spórák életképesek maradtak talajcserét és formaldehides dekontaminációt végeztek
Virulencia faktorok: két plazmid toxinokat kódol poly-d-glutaminsav tok antifagocita hatású Exotoxinjai: letális faktor - nekrotoxin ödéma faktor kalmodulindependens adenilcikláz protektiv antigén
Bacillus anthracis - Epidemiológia
Patogenitás: spórák germinációja a bejutás helyén majd haemorrhagias gyulladás a szövetekben ödéma képződéssel Patogenitás feltétele: - tokképzés (antifagociter hatás) - Exotoxinok termelése
Fertőzés forrása: főleg növényevő állatok: kecske, juh, szarvasmarha, antilop, zsiráf, zebra dögevők, ragadozók nem betegszenek meg boncolással, nyúzással, test darabolásával a spórák a környezetbe kerülnek
direkt kontaktus bőranthrax inhalációval tüdőanthrax elfogyasztással oropharyngealis, gastrointestinalis anthrax Toxin hatására: vérbőség, ödéma Bőranthrax - pokolvar: bőrsérülés - papula vesicula - pustula - ulcus - pustula maligna nyirok - vér - halál
Oropharyngealis: álhártya képződés a garatban Bélanthrax: emberben: hasmenés, mely alig véres
Immunizálás: Mo: csak háziállatokat, élő attenuált baktériummal immunizálják USA: katonák immunizálása alegység vakcina öböl szindróma? Kína, Oroszország: élő, attenuált Terápia: penicillin, tetracyclin, ciprofloxacin
Szaprofita bacillusok Ritkán okoznak emberi megbetegedést B. cereus Jellemzői: nagy pálcák láncokban szabálytalan szélű fénytelen telepek tok nincs véres agaron - béta-hemolizáló
ételmérgezés (enterotoxin) 2 féle toxin: hányással járó (hőrezisztens) - 1-6 óra múlva hasmenéssel járó (hőérzékeny) - 1-24 óra lappangás Diagnosztika: az ételben 10 5 /g B. cereus
Terápia: tüneti kezelés Sebfertőzés esetén: Vancomycin, Clindamycin, Fluoroquinolon B. stearothermophilus hőlégsterilizáló, autokláv működésének ellenörzése
Clostridiumok közös jellemzői Gram - pozitív pálcák: orsó alakú anaerobok spórások: a spóra deformálja a baktériumsejteket elhelyezkedésük species specifikus peritrich csillósak kivéve C. perfringens (tokot termel) legtöbb species talajban megtalálható állatok, emberek bélcsatornájának normál flórájának tagjai
CLOSTRIDIUM TETANI Bevezetés: 1 millió estet közöltek 1975-ben az újszülöttkori halálozási aránya 90% Heted napos halál Magyarországon az 1950-es évek elején - 500 megbetegedés évente újszülöttekben 40%-os, idősebb korban 80%-os halálozással 2007-ben 3 ember halt meg tetanusban (1941 előtt születtek, és védőoltást nem kaptak)
Újszülöttkori tetanus becsült halálozási aránya (1991-ben 1000 lakosra vetítve) kevesebb mint 1 1-5 több mint 5
Jelentett tetanusos esetek a trópusi régiókban (1990-1995)
Clostridium tetani Morfológia: Gram-pozitív pálca végálló spóra dobverő alak peritrich csillós - mozgékony Tenyésztés: obligát anaerob Holman, Brewer táptalajon, 3-4 napig Antigén szerkezet: csilló alapján 10 típus (de azonos toxin) Exotoxinok: tetanospazmin tetanolizin Patogenitás: Tetanus - merev görcs Spóra bejutása: sérülésen át, köldökcsonkon át,
Szaporodás: elhalt szövetekben toxin termelés nincs bakteriémia csak toxémia tetanopasmin - központi idegrendszer károsodik Fertőzés módja: talajspórával szülés kriminális abortusz égési sérülés, köldökcsonk fertőzés Terápia: sebkimetszés antitoxin HTIG tetanus toxoid penicillin, relaxánsok, nyugtatók mesterséges lélegeztetés Prevenció: toxoid a DaPT vakcinában
Morfológia: Gram-pozitív pálca Clostridium botulinum spórák subterminálisan vagy centrálisan helyezkednek Tenyésztés: véres agaron, avas szagú telepek Antigén szerkezet: exotoxint termel lysogen konverzió 8 típusú toxin: A-H A, B, E ember patogén
Patogenitás: botulizmus - hurkamérgezés spóra élelmiszerbe jut germináció, szaporodás és toxintermelés az exotoxin neurotoxikus: gátolja az acetilkolin felszabadulását a szinapszisokban 1-2 ng már halálos - intravénásan petyhüdt bénulás
Tünetek: órák, napok múlva: kancsalság, kettős látás, pupillatágulat nyelés és beszédzavar szájszárazság légzésbénulás majd halál gastroenteritises tünetek lehetnek a beteg tudata végig tiszta láz nincs
Csecsemőkori botulizmus 6 hó alatt a spórák a bélcsatornába kerülve elszaporodnak in vivo toxint termelnek leggyakoribb forrás: méz Nagyon ritkán seb botulizmus törések során, kábítószer bevitel: inhalációval, tűvel
Diagnosztika: - toxin kimutatása (ételből, hányásból, serumból) - állatoltás - neutralizációs próba - toxinkimutatás szérumból (agglut., RIA) Terápia: - polivalens savó (A, B, E) - 80000 egység antitoxin gyorsan - mesterséges lélegeztetés - évente 10-20 eset
Clostridium difficile antibiotikum kezelés hatására a bélben élő rezidens flóra elpusztul C. difficile elszaporodik Morfológia: Gram-pozitív pálca centrális spóra Toxinokat termel: toxin A: enterotoxin toxin B: cytotoxin toxin A: pseudomembranosus colitis (epithelium elhalás, microabsesusok, megacolon)
Tünetek: véres hasmenés görcsös hasi fájdalom láz Diagnosztika: toxinkimutatás székletből (latex agglutinációval, ELISA) Terápia: Metronidazol Vancomycin
Gázgangréna clostridiumok C. perfringens 90% C. novyi C. septicum C. perfringens Gram-pozitív spórás pálca spóra centrálisan helyezkedik el csillótlan, nem mozog véresagaron kettős hemolítikus udvar veszi körül
Termelt toxinok és enzimek Major lethális toxinok Alpha (α) lecitináz (vvt, fvs károsít, beta (β), epsilon (ε), iota (ι) Enterotoxin Minor lethális toxinok Delta (δ), teta (τ), kappa (κ), lambda (λ), mu (μ), nu (ν) Enzimek Neuraminidáz, DNáz, kollagenáz, proteáz hialuronidáz, lipáz CO 2, H 2 S, metán Típusba sorolás a toxin termelése alapján: A, B, C, D, E
Kórképek Gázgangréna endogén: bélruptúra, perforáció, appendicitis után kerül a hasüregbe exogén: spórákat tartalmazó földdel szennyeződik a seb roncsolt sérülés Ételmérgezés Enteritis necrotisans Sepsis
Terápia: sebellátás antitoxin (polivalens) Penicillin Ételmérgezés: fertőzés forrása: húskészítmények hőérzékeny enterotoxint termel A-típusú enterotoxint termelő variáns: hasmenés, hányás, láz, spontán gyógyul Enteritis necrotisans: C-típus: sertés béltartalmával fertőzött hús (nem kellően hőkezelt) - bélfal necrosis, perforatio, halál