RÉSZLETES BAKTERIOLÓGIA

Átírás

1 RÉSZLETES BAKTERIOLÓGIA

2 Baktériumok csoportosítása Gram pozitív / Gram negatív * Alak szerint: coccus, pálca (hajlott vagy egyenes), coccobacillus, spirocheta Spóraképző / nem spóraképző Aerob / anaerob Intracelluláris (esetleg fakultatív) * Gram szerint nem vagy nem jól festődő: Mycobacterium, Actinomyces Mycoplasma (nincs sejtfal)

3 Rendszertani besorolás - I Gram + coccus: Staphylococcus, Streptococcus Gram coccus: Neisseria, Moraxella, Kingella Gram + pálca: spóraképző: Bacillus, Clostridium nem spóraképző: Corynebacterium, Listeria, Lactobacillus, Erysipelothrix, Gardnerella Gram pálca: bélbaktériumok: E. coli, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter, Yersinia egyéb fermentáló: Vibrio, Aeromonas, Pasteurella nem fermentáló: Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia

4 Rendszertani besorolás - II Gram- coccobacillus: Haemophilus, Brucella, Francisella, Bordetella, Legionella Intracelluláris: Chlamydia (másfajta sejtfal); Mycoplasma, Ureaplasma (nincs sejtfal!); Rickettsia, Coxiella, Ehrlichia, Bartonella Spirális: Campylobacter, Helicobacter; Anaerob: Treponema, Borrelia, Leptospira Gram + pálca: Clostridium (spóraképző), Actinomyces, Mobiluncus, Lactobacillus (nem spóraképző) Gram + coccus: Peptococcus, Peptostreptococcus Gram pálca: Bacteroides, Fusobacterium, Prevotella, Porphyromonas Gram coccus: Veilonella

5 GENNYKELTŐ COCCUSOK Gram + Gram Micrococcaceae család Streptococcaceae család Neisseriaceae család Micrococcus Streptococcus Neisseria Moraxella S. pyogenes (A) Kingella Staphylococcus S. agalactiae (B) S. pneumoniae N. meningitidis Enterococcus (D) N. gonorrhoeae viridáns csoport S. aureus koaguláz negatív staphylococcusok (KNS)

6 Gram-pozitív coccusok Staphylococcusok, Streptococcusok

7 Staphylococcusok

8 Staphylococcusok Staphylococcus aureus Koaguláz-negatív staphylococcusok (KNS) Staphylococcus epidermidis St. saprophyticus St. haemolyticus St. hominis St. lugdunensis etc. (~40 species)

9 Gram festés összes faj A legtöbb faj apatogén, nyálkahártyákon és bőrön normál flóra

10 Tenyésztés nagyon igénytelen fakultatív anaerob nagy, kerek, nyálkás telepek ellenálló: magas hőmérséklet (50 o C 30 perc), kiszáradás, sók (9% NaCl) túlél a kórházakban!

11 Pigment termelés Staphylococcus aureus: arany pigment (staphyloxanthin) Staphylococcus epidermidis: fehér pigment

12 -hemolízis S. aureus (+ S. haemolyticus + S. lugdunensis): erős -hemolízis

13 Kataláz teszt Kataláz +: Staphylococcusok Kataláz -: Streptococcusok cél: Staph / Strepto elkülönítése végrehajtás: H 2 O 2 -t csöppentve a tenyészetre, pozitív esetben erős pezsgés tapasztalható H 2 O 2 H 2 O + O 2

14 S. aureus virulencia faktorok I. Sejthez kötött faktorok Polysaccharid tok Protein A Fc receptor: megköti az IgG Fc részét fagocitózist megakadályozza biofilm képzésben! Clumping faktor fibrin köpeny képzés Teicholsav (CWTA)

15 Protein A

16 Koaguláz teszt -I Koaguláz +: Staphylococcus aureus Koaguláz -: többi Staphylococcus ( KNS ) Cső koaguláz teszt: a törzset alvadásgátolt nyúlplazmába oltva, az néhány óra alatt koagulálja a plazmát (szabad koaguláz) - +

17 Koaguláz teszt -II Clumping teszt - felszíni kötött koaguláz fibrinogént köt koaguláció ( Staphaurex, Pastorex ) végrehajtás: a baktériumot latex részecskék felszínére kötött fibrinogénnel összekeverjük tárgylemezen baktérium összecsapódás (pillanatszerű)

18 S. aureus virulencia faktorok II. Enzimek (invázió, terjedés) Hialuronidáz lebontja a proteoglikánt a kötőszövetben Fibrinolizin (=staphylokináz) fibrin gócokat feloldja (hasonlóan a streptokinázhoz) Lipáz zsír- és olaj- degradáció (elősegíti a szőrtüszők kolonizációját) Nukleáz (DN-áz)

19 S. aureus virulencia faktorok III. Cytotoxinok Hemolizinek (alfa, béta, gamma, delta) hemolitikus toxinok, melyek elbontják a vvt-ket, neutrophileket, makrofágokat, vérlemezkéket Leukocidinek elbontják a leukocitákat (felelősek a bőr és lágyrészek nekrotikus lézióiért, pl. nekrotizáló hemorrhágiás pneumonia) Panton-Valentin leukocidin (PVL) minden CA-MRSA-ban jelen van nincs hemolitikus aktivitása

20 S. aureus virulencia faktorok IV. Exotoxinok TSST-1 (toxic shock syndrome toxin) Szuperantigén! gyakran tampon használattal összefüggésben lokalizált fertőzés (hüvely vagy seb), de a toxinnak távolhatása is lehet MOF kezdetben jellegzetes kiütés (leégés szerű)

21 S. aureus virulencia faktorok IV. Exotoxinok folyt. Exfoliatív toxin Szuperantigén! SSSS = staphylococcal scalded skin syndrome (morbus Ritter) az exfoliatív toxin proteáz aktivitása bőrhámlást okoz nincs gyulladás (fontos a diagnózisnál!) főleg kisgyerekekben

22 S. aureus virulencia faktorok IV. Exotoxinok folyt. Enterotoxinok (A-F) Szuperantigének! hőstabil: sima főzést kibírja (100 o C, 30 min) ételmérgezés: hányinger, hányás, hasmenés C, D: tejtermékekben

23 Staphylococcus aureus bőrfertőzések I. Folliculitis folliculitis szemen: árpa Furunkulus Karbunkulus bakteriémia, láz Impetigo árpa furunkulus impetigo

24 Staphylococcus aureus bőrfertőzések II. Cellulitis a bőr mélyebb rétegei és az alatta lévő szövet fertőzése Bullózus impetigo SSSS lokalizált formája Bullózus impetigo

25 Staphylococcus aureus bőrfertőzések III. Sebfertőzések égés, posztoperációs, sérüléssel kapcsolatos bőrflórából eredő (endogén)

26 Invazív fertőzések Osteomyelitis hematogén terjedés vagy sérülés felülfertőződése Endocarditis szívműtéttel kapcsolatban (főleg műbillentyű) 50% letalitás Pneumonia elsősorban alap tüdőbetegség esetén vagy mesterséges lélegeztetésnél Meningitis a bakteriális meningitisek 1-9%-a Sepsis kórházi betegek szepszisének fele immunszupresszáltakban

27 Antibiotikum kezelés bőrfertőzés: lokális kezelés Nagymértékű rezisztencia!! Antibiogram kötelező penicillin rezisztencia: ~ 90% Methicillin rezisztencia (MRSA): országonként eltérő rezisztencia az összes béta-laktámra & másra is

28 MRSA fertőzések kezelése Vancomycin! egyéb: linezolid, TMP-SMX, clindamycin, tertacyclin, quinupristin/dalfopristin (Synercid), aminoglikozidok

29 MRSA előfordulása MRSA % az invazív izolátumokban Magyarországon: (OEK adatok)

30 Staphylococcus aureus hordozás Gyakran előfordul a bőr és nyálkahártyák normál flórájában ( tranziens flóra ) Hordozási arány: ~20% hosszú távon ~30% intremittálóan magasabb arányban: kórházi betegek és személyzet ekcémás betegek farmerek Hordozás helye: orr és torok nyálkahártya perinazális bőr, kéz bőr perianális bőr

31 MRSA hordozás Terjedés megakadályozása: kéz hygiéne! környezet takarítása / fertőtlenítése jód, hexachlorophén személyes védőöltözék (kesztyű) betegek elkülönítése kórházi személyzet rendszeres szűrése Dekolonizáció: intranazális mupirocin Rezisztencia terjedőben! (Magyarország, 2012: 4,5%)

32 Staphylococcus epidermidis Bőr normál flórában, fakultatív (opportunista) patogén főleg nozokomiális fertőzések!! Idegen test eredetű: ízületi protézisek beültetett szívbillentyű i.v. katéterek (szepszis!) húgyúti katéterek (UTI) Gyakori kontamináns a hemokultúrákban! Th: vancomycin

33 Ízületi protézis beültetésekor antibiotikus gyöngyök megelőzési céllal Befertőződött ízületi protézis eltávolítása: jól látható a biofilm

34 Egyéb koaguláz negatív S. saprophyticus: staphylococcusok második leggyakoribb húgyúti kórokozó E. coli után, főleg fiatal nőkben megkülönböztetés S. epid-től: novobiocin rezisztencia Th: ciprofloxacin S. hominis bőrflóra; opportunista patogén S. haemolyticus bőrflóra; opportunista patogén; beültetett eszközök S. lugdunensis agresszív endocarditis

35 S. epidermidis (É) és S. saprophyticus (R) novobiocin koronggal

36

37 Streptococcusok Streptococcus pyogenes Streptococcus agalactiae Streptococcus pneumoniae viridáns streptococcusok Enterococcus genus

38 Streptococcusok csoportosítása Lancfield csoportosítás (sejtfal poliszacharid alapján): S. pyogenes = A (GAS) S. agalactiae = B (GBS) Enterococcusok = D hemolízis alapján: β-hemolizáló: S. pyogenes, S. agalactiae α-hemolizáló: S. pneumoniae, viridáns streptococcusok

39 Streptococcus pyogenes Gram-pozitív coccus, láncokba rendeződve pici, tűszúrásnyi telepek igényes! erős β-hemolízis

40 S. pyogenes virulencia faktorok I. Sejthez kötött faktorok hialuronsav (!) tok M protein F protein (fibronektin kötő)

41 S. pyogenes virulencia faktorok II. Enzimek (invázió, terjedés) streptokináz fibrinoldó (infarktusban!), gennygyülemek feloldása streptodornáz DNáz hialuronidáz ribonukleáz

42 S. pyogenes virulencia faktorok III. Toxinok hemolizinek streptolizin-s (β-hemolízis!, rossz antigén) streptolizin-o (jó antigén ASO-titer!) eritrogén toxin skarlát bőrtünete! Dick-próba (erythema, ha nem volt skarlátos) pirogén exotoxin-a azonos a TSST-vel pirogén exotoxin-b nekrotizáló fasciitisben (=proteáz)

43 S. pyogenes fertőzések I. Légúti torokgyulladás tüszős mandulagyulladás

44 II. Bőrfertőzések Erysipelas erysipelas (orbánc) phlegmone impetigo cellulitis súlyos impetigo

45 II. Bőrfertőzések - 2 Lángnyelv-szerű terjedés Nekrotizáló fasciitis húsevő baktérium

46 Egyéb súlyos, heveny, gennyes fertőzések otitis media, sinusitis meningitis gyermekágyi láz

47 Skarlát testszerte kiütések torokban hordozott S. pyogenes toxinja málnanyelv

48 Post-streptococcális kórképek rheumás láz glomerulonephritis rheumatoid arthritis ASO-titer! allergiás eredetű pár héttel az akut fertőzés után

49 Kezelés és megelőzés penicillin!! védőoltás nincs skarlát megelőzésére penicillin (kemoprofilaxis)

50 Streptococcus agalactiae korábban kizárólag állati patogén (bovin mastitis) 1970-es évek óta: újszülöttkori sepsis, meningitis No. 1 újszülöttek fertőzései: korai forma (EOD) első 6 napon belül rizikócsoportok (pl. kis súlyú koraszülöttek) meningitis, sepsis, pneumonia késői forma (LOD) 4 hónapos korig meningitis, bacteriaemia, osteoarthritis

51 S. agalactiae felnőttkori fertőzések terhes nőkben (!!): 20-35% tünetmentes hordozás hüvelyben újszülöttek aquirálják 50-75%-ban 1-2%-ban (súlyos) betegség! terhesség hetében szűrés! chemoprophylaxis: i.v. ampicillin szülés alatt az anyának nem terhes felnőttekben: főleg >60 éves bőr- és kötőszöveti infekciók, bacteriaemia, urosepsis, pneumonia

52 CAMP teszt CAMP +: Streptococcus agalactiae cél: Str. agalactiae diagnosztika végrehajtás: Str. agalactiae és St. aureus fölerősítik egymás β hemolízisét, ha egymásra keresztben oltjuk le őket bacitracin érzékenység: Str. agalactiae S. pyogenes: É S. agalactiae: R St. aureus

53 Streptococcus pneumoniae pneumococcus lebenyes tüdőgyulladás CAP (= közösségben szerzett pneumonia) első számú kórokozója!

54 Egyéb pneumococcus fertőzések meningitis!! otitis media, sinusitis!! peritonitis kúszó szaruhártyafekély (ulcus serpens corneae) életkori megoszlás: <5 éves gyerekek és >60 éves idősebbek WHO: >1 millió kisgyerek hal meg évente!

55 Laboratóriumi kimutatás mikroszkóp: Gram + diplococcusok tenyésztés: véres agaron, 5% CO 2 termosztátban α-hemolízis, köldökös telepek optochin érzékeny epeoldás tok kimutatása antitesttel (tokduzzadási próba, agglutináció) tokfestés Optochin érzékenység

56 Pneumococcus vakcinák Pneumovax 23 Poliszacharid vakcina (MSD) felnőtteknek 23 tok antigén Prevenar-13 < 2 éves gyerekeknek (2, 4, 15 hónapos korban) konjugált oltás 13 szerotípus: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F, 3, 6A, 19A Összesen: 94 féle tok antigén (= 94 szerotípus)

57 Pneumococcus tünetmentes hordozása A hordozók a fertőzések legfőbb forrásai főleg kisgyerekekben nagyon gyakori, kb % hordozó (óvodás korban tetőzik) felnőttkorra lecsökken szezonálisan változik különböző szerotípusú törzsek, egyszerre több is lehet 1-2 héttől néhány hónapig terjedhet a konjugált oltás hat a hordozásra is

58 Enterococcus E67 táptalajon Enterococcus genus normál bélfóra tagjai mikroszkóp: párosával vagy rövid láncban tenyésztés: igénytelen! epetűrő (40%), sótűrő, hőtűrő: 60 o C 30 perc hemolízis: lehet α, β vagy γ eszkulin hidrolízis

59 Enterococcus fertőzések Nozokomiális fertőzések! húgyúti fertőzések (katéter) septicemia, endocarditis (vénás kanül) peritonitis, hasüregi tályog staphylococcusok után a 2. leggyakoribb Gram+ E. faecalis, E. faecium nagyfokú rezisztencia! - vancomycin R (VRE) - antibiogram készítés kell - rezisztenciagének rezervoárja!!

60 Viridáns streptococcusok S. mutans, S. mitis, S. sanguis, S. oralis, S. salivarius α-hemolízis fertőzések: szubakut bakteriális endocarditis (szívbillentyűkön) foghúzás kapcsán caries!

61 Caries (Streptococcus mutans) első lépés: zománc demineralizációja (tejsav és más szerves savak termelése cukorból) később tovább a dentin réteg is

62

63 Peptostreptococcusok normál flóra szájüregben, bélben, hüvelyben obligát anaerobok! bűzös gázok termelése fertőzések: tályog (tüdő, agy), kismedencei gyulladás kezelés: metronidazol, clindamycin