Vázlat Növényi hatóanyagok kimutatása nektárból és mézből Farkas Ágnes, Molnár Réka Pécsi Tudományegyetem ÁK Farmakognóziai Tanszék Herpai Zoltán, László József Wessling Hungary Kft. Méz orvosság, élelmiszer minősítés Saját kutatási eredmények medvehagyma nektár és méz mérgező nektárok és mézek - maszlag fajok nektárvizsgálata Boros Borbála Pécsi Tudományegyetem TTK Szőlészeti és Borászati Kutatóintézet Mel Méz (Ph. Hg. VIII., Ph. Eur. 5.) Mel depuratum (Ph.Hg. VII.) Apis mellifica L. - házi méh (Apidae) Azonosítás: VRK: fruktóz, glükóz, szacharóz törésmutató fajlagos vezetőképesség optikai forgatóképesség HMF (5-hidroximetilfurfurol) klorid-tartalom szulfát-tartalom Magyar Élelmiszerkönyv 1-3-2001/110 sz. előírása cukortartalom fruktóz- és glukóztartalom szacharóztartalom nedvességtartalom t vízben oldhatatlan szilárdanyag-tartalom elektromos vezetőképesség savfok diasztázaktivitás és HMF-tartalom A méz szerepe a gyógyászatban gyulladt nyálkahártya bevonása (pl. torokgyulladás) köhögési inger csillapítása enyhe köptető ízjavító (Tóth 2010) Antibakteriális: d Agustino Barbaro et al., 1961; Dustmann, 1979; Braniki, 1981; Willix et al., 1992; McCarthy, 1995; Cooper et al., 1999; Vardi et al., 1998; Molan és Betts, 2008 Sebgyógyító: Blomfield, 1973; Armon, 1980; Dumronglert, 1983; Wadi et al., 1987; Efem, 1988; Faraouk, 1988; Abuharfeil et al.,1999; Tonks et al., 2001; Subrahmanyam és Ugane, 2004; Miri et al., 2005; Mashhood et al., 2006; Molan és Betts, 2008 Méz gyógyhatása kiegészülhet a növény jellemző gyógyhatásával Méz: ö é h tó k növény hatóanyagok + méhek enzimek, hormonok stb. 1
Akácméz: jó köhögés csillapítására és gyomorsav-túltengésre Aranyvessző méz: kiváló vesetisztító, húgyúti fertőtlenítő Galagonyaméz: szívbetegségek esetén, szívgyengeségnél Gesztenyeméz: visszér-panaszoknál és trombózisok megelőzésére Hársméz: légúti hurutoknál, görcsöknél, lázas állapotnál ajánlott Levendulaméz: álmatlanságra, vesepanaszokra ajánlott Mentaméz: sok illóolaj; emésztést serkentő, puffadást csökkentő, görcsoldó és fájdalomcsillapító hatású Somkóróméz: trombózis-megelőző hatású Vöröshagymaméz: légúti megbetegedésekre kiváló Fajtamézek speciális hatóanyagok (markervegyületek) kevés vizsgálat Manuka méz (Leptospermum scoparium) antibakteriális, sebgyógyító fenolos vegyületek (Weston et al. 2000, Snow és Manley-Harris 2004, Koichi et al. 2005) Célkitűzés: é különböző botanikai eredetű nektár- és mézminták egyedi hatóanyagok 2
Hársméz (Tilia spp.) Hárs nektár zsírsavak bomlástermékei fenil-propanoidok izoprenoidok alkaloidok monoterpének Mecsek, rfű (Allium ursinum L.) Tilia platyphyllos Scop. Hársméz: 3,9-epoxi-1-p-mentadién Tilia cordata Mill. transz-8-paramentén-1,2-diol cisz-rózsaoxid Blank I. et al. (1989) Z. Lebensm. Unters. Forsch., 198: 426-433. Radovic B.S. et al. (2001) Food Chemistry 72: 511-520. hárséter Naef R. et al. (2004) Chemistry and Biodiversity, 1 (12): 1870-1879. Amtmann M. (2009) Különleges fajtamézek botanikai eredetének és illó komponenseinek összefüggése. PhD dissz. Budapesti Corvinus Egyetem Bakony, Bakonybél ( vadfokhagyma ): antibakteriális vérnyomáscsökkentő koleszterinszint-csökkentő érelmeszesedés-gátló trombocita-aggregáció-gátló g g (Szabó 2005) méz: Ajánljuk szív- és érrendszeri betegségekre. Feltételezhető, hogy gyógyító hatású légzőszervi megbetegedésekre. A medvehagyma méz a növény gyógyhatásait hordozza. hatóanyagai alliin (S-allil-L-cisztein szulfoxid) alliin-liáz allicin (diallil-diszulfid-oxid) diszulfid Póréhagyma (Allium porrum) SDS-PAGE: nektár: póréhagyma lektin és az alliináz méz: mindkét fehérje aktivitása (degradálódik? inaktiválódik?)! több új protein Peumans W.J. et al. (1997) Planta 201: 298-302. nektárvizsgálatok Molnár R., Farkas Á. (2008) Méhészet 56 (2): 6-7. hatóanyagainak detektálása a nektárban és a mézben LC-MS-MS Készülék: Agilent 1200 HPLC, Agilent 6410 MS, ESI+ ionizációval YMC Triart C18 HPLC oszlop Eluens: ph=3 ammónium-formiát puffer Alliin standard - mérhetőség alsó határa (LQ): 20 ng/ml nektár és méz: alliin nem detektálható Ismert mennyiségű alliint hozzáadva alliin mérhető; vizes oldatban gyorsan bomlik 5x hígítás nektár, méz: alliin < 100 ng/ml Ellenőrzés: friss fokhagyma allicin, dipeptidek (alliin nem detektálható bomlékony!) Molnár R., Farkas Á. (2008) Gyógyszerészet 52. Suppl. E-3, 1. o. Molnár R., Farkas Á. (2009) Third International Symposium on Medicinal and Aromatic Plants (SIPAM), Djerba (Tunisia), March 26-28, 2009, p. 90. 3
méz Pollenanalízis Mérgező nektárok és mézek Azonosított pollen (%) Minta Akác Repce Napraforgó Hárs Egyéb 2005 6 11 6 1 2 74 2006 12 3 8 - - 77 2007 6 5 18 3-68 Molnár R., Farkas Á. (2008) Gyógyszerészet 52. Suppl. E-3, 1. o. Molnár R., Farkas Á. (2009) Third International Symposium on Medicinal and Aromatic Plants (SIPAM), Djerba (Tunisia), March 26-28, 2009, p. 90. kék sisakvirág (Aconitum napellus) fehér zászpa (Veratrum album) szellőrózsa (Anemone sp.) Bendiák I. (2010) Méhészet 58 (5): 22. alkaloidjainak detektálása nektárban Maszlag (Datura) fajok: Solanaceae (burgonyafélék) Amerikában, Ázsiában honosak Európa: gyomok, dísznövények D. metel és D. innoxia: atropin (D, L-hioszciamin) L és N források: anticholinerg alkaloid tartalom változó fajok növényi részek CH 3 CH3 N H H atropin D. innoxia: dominancia (Rätsch 2007) D. stramonium: hioszciamin dominancia (Miraldi et al. 2001) D. innoxia Vizsgált Datura fajok: D. innoxia D. metel D. meteloides D. tatula Mintavétel: nektár kalibrált D. tatula kapillárisok atropin és koncentráció: LC-MS D. metel D. meteloides LC-MS vizsgálati módszer: Extrakció: eluens A + szűrés (0,45 mm Mini-Uniprep, Whatman) LC-MS analitikai rendszer: LC-10 ADVP (Shimadzu), MS detektor: LCMS-QP 8000 (Shimadzu) szlop: Ascentis Express C 18 2,7 µm, 50 2,1 mm (Supelco, USA) Eluens: A: 2 v/v % hangyasav metanol:víz = 7:93 B: 2 v/v % hangyasav metanol Gradiens profil: t (perc) B % 0,00 0 10,00 90 10,01 0 15,00 0 Eluens áramlási seb.: 0,2 ml/perc Injektált mintatérfogat: 2 μl Ionizáció: ESI Polaritás: pozitív mód Szárítógáz áramlási seb.: 1,5 l/min Szárító gáz: N 2 CDL hőmérséklete: 250 C Mintatér hőmérséklet: 10 C szloptér hőmérséklet: 50 C D. innoxia D. metel D. meteloides D. tatula Alkaloid koncentráció (μg ml -1 ) atropin 57,80-400,04 1,79-37,00 84,57-131,66 3,25-4,25 120,06-189,86 0,19-0,42 11,00 ± 2,73 17,60 ± 3,24 4
Következtetések növények között eltérések: a fajra jellemző hatóanyagok jelen vannak-e a nektárban illetve a mézben speciális gyógyhatás / mérgező hatás analitikai módszerek különbözősége fajspecifikus jellemző (genetikai háttér) specifikus gyógyhatás igazolása hatóanyagok kimutatása hatástani igazolás Köszönet nektár- és mézvizsgálata: PTE ÁK Farmakognóziai Tanszék Molnár Réka, Papp Nóra Wessling Hungary Kft. Herpai Zoltán, László József Maszlag fajok nektárvizsgálata: PTE TTK Analitikai és Környezeti Kémia Tanszék Boros Borbála, Sylvia Jakabova, Bacskay Ivett, Felinger Attila, Kilár Ferenc Fotók: Hatvani Zsolt, Katona László, Katona Lászlóné Köszönöm megtisztelő figyelmüket 5