Újabb immunszupresszív kórképek következményei modern sertésfajtákban

Átírás

1 Újabb immunszupresszív kórképek következményei modern sertésfajtákban BONAFARM II. SERTÉS NAP Dalmand 2013 Június 13 Dr. Csillik Zoltán

2

3

4 PCV2, PRRS PCV2: T lympocytákban szaporodik. Ly depléció T Ly csoport elkötelezett tagjainak apoptózisa, lymphocyta depléció, lymphopenia, csökkent immunválasz, dendritikus sejtek (APC) alulstimuláltsága PRRSV: Macrophagokban szaporodik antigén prezentáció romlik, alustimuláltság, macrophag károsodások

5 PCV2 fertőzés PMWS szintű reprodukciója Konvencionális állomány CD/CD állomány SPF állomány GF állomány Inokulátum 75-85% 71% 10-15% 8% Szövet homogenizátum 81-86% % 4% Szövet homogenizátum szűrlete 80-87% + 18% 4% Klónozott PCV2 DNS 80-90% na 19-24% 6% Klónozott PCV2 DNS replikátuma 81-87% na 19-21% 5%

6 PARVO 4, Mycoplasmosis Parvo 4: lymphoid-mononucleáris sejtekhez asszociált fertőzés macrophag funkció romlik, alulstimulált immunrendszer Mycoplasmosis: Alveolarius macrophagokhoz, antigén prezentáló sejtekhez kötött fertőzés és következményes funkcióromlás. BALT hyperplasia, de MCPHG funkció károsodott. Intracelluláris lokalizáció.

7 Sertéspestis, Afrikai sertéspestis Endothel károsodást okozó vírusos kórképek. Endothel sejtek az erek belső felszínén található lapos, multipotens sejtek. Belőlük számos immunfunkciójú sejt differenciálódhat ki (plazmasejtek, histyociták). Károsodásuk abszolút gyulladásos és immunológiai funkció károsdással jár.

8 Endotoxinok hosszú távú hatása Endotoxin szivárgás miatt a Gramm negatív bakteriális kolonizáció fokozott szintje mellett tartós és erős immunstimuláció alakul ki. Ezért az enterális szeptikus bakteriális hátterű kórképek a lymphocyta sejt stimuláción keresztül segítik a PMWS, immunszupresszió, társinfekciók (légzőszervi kórképek, staphylococcosis, streptococcosis) kialakulását.

9 Salmonellák és egyéb Gramm negatív baktériumok kolonizációja a gyomorbél traktusban gyomor vékonybél vastagbél bélfal véráram A Salmonellák a vékonybélnél lépnek a véráramba

10 Plazma Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF- ) koncentrációja fiz. só és LPS injektálást követően sertésben 5000 Plasma TNF- a (pg/ml) Hour post injection Saline 0.5 mcg/kg LPS 5 mcg/kg LPS

11 Plazma Interleukin-6 (IL-6) koncentrációja fiz.. só és LPS injektálást követően sertésben 2000 Plasma IL-6 (pg/ml) Hour post injection Saline 0.5 mcg/kg LPS 5 mcg/kg LPS

12

13

14

15

16 Bél immunfunkciói: 8. Oral tolerance I. Választott malacok tranziens allergiás reakciót mutatnak táplálék antigénekkel, elsősorban szója antigénekkel szemben. Idősebb malacokban nem alakul ki súlyos fokú nyálkahártya hyperszenzitivitás, mert ezek ún. oral tolerancián mennek át.

17 Oral és intestinal tolerance II. Okai: T Ly alosztály: T suppressor (regulátor) sejtek adaptálódni képesek (Bailey et al, 2001). Immunsupressiv cytokinek mint pl. Interleukin 10 és a Transzferáló Béta Növekedési Faktor szabadulnak lassan fel. Hozzájárul a rezidens microflora is az intestinalis tolerancia kialakulásához TLR rendszeren keresztül (Smith and Nagler-Anderson, 2005)

18 Választáskori hasmenések immunológiai értelmezése Bailey és mtsai (2001) új értelmezést adnak a választási hasmenéseknek. Eszerint átmeneti egyensúlytalanság van a motoros-szekréciós, abszorbciós szabályozás és a mucosa immun effektor funkciói között. Illetve az immun-gyulladásos szabályozás adja, vagy alapozza meg a hasmenéseket, vagy fokozott szekréciót HYPERSECRETIO SYNDROMA. Ehhez járul a szója bázisú takarmány adása miatti bél-hyperszenzitivitási reakció.

19 Választáskori hasmenések immunológiai értelmezése II. Ebben a modellben a malacoknál a regulációs szabályozás és immunszupresszív hatások miatt szekréciós és motilitási zavarok miatt gyakorta BOS (bacterial overgrowth syndrome) alakul ki. Ugyanakkor a megnövekedett effektor sejt funkciók válthatják ki a táplálék allergiát.

20 Bélfelszíni antigén és biogén amin hatások Bélhámon antigén hatású molekulák vannak. Abszorbciós-szekréció folyamatok zavara a gyulladásos (allergiás), illetve az egyéb immunfunkciók részleges kiesése, vagy zavara jöhet létre. Bailey és mtsai erre vezeti vissza az ún. hypersecretios syndroma létrejöttét. APUD sejtek jelenléte az egyrétegű hengerhámban.

21 Tapasztalatok a gyakorlatban Nehezen magyarázható megfigyelések: 1. Erős immunogén Mycoplasma vakcina használat után PMWS + mycoplasma dominanciájú pneumoniák. Erős immunogén vivőanyagok, immunstimulánsok pld. levamisol

22 PMWS + sertés interstitiális tüdőgyulladása

23 PMWS sertés tüdőgyulladás szövettana

24 PMWS + sertés interstitiális tüdőgyulladása

25 Megnagyobbodott felületes lágyéki nyirokcsomó

26 Megnagyobbodott mesenteriális nyirokcsomó

27 Nyirokcsomók immunreakciója összefoglaló Csökken az antigén prezentáció képessége (macrophagok lekötése phagolysosomáikban apoptotikus testek, interdigitalis és follicularis dendritikus sejtek megfogynak) Csökken a sejtes immunitás (CD4+ T memória sejtszám redukció) Csökken a humorális immunitás (CD2+ B ly szám redukció, B ly apoptózis) TCGF redukció miatt endotheliális venulák felépülése rendellenes

28 Reaktív nyirokcsomó szövettana

29 PMWS + sertés nyirokcsomó reakciója

30 PMWS + sertés nyirokcsomója

31 Egyéb immunstimulánsokra hasonló reakciók Baypamun (juh parapox vírus kivonat). Eredetileg fiatal malacok immunstimulálására használták Immunstimuláns (fenotiazin vázból levezetett) anthelmintikumok (albendazol) Levamizol

32 Egyéb antigének jelenléte is szükséges PCV-2 PMWS szintű manifesztációjához

33 PMWS társfertőzések Leggyakoribb vírusos társfertőzések: PRRS PCV-1 PPV

34 Vírusos koinfekciók előfordulása 3 éves, 250 PMWS + telepet érintő felmérő vizsgálat adatai szerint: PCV-2 + PPV = 35% PCV-2 + PCV-1 = 15% PCV-2 + PRRS = 27%

35 PMWS reprodukálhatósága SPF és GF sertés állománynál Csak PCV-2 fertőzés PCV-2 + PPV Nincs klinikai tüneti manifesztáció PMWS klinikai manifesztáció

36 PMWS ko-infektív alapú reprodukálhatóságának magyarázata Genetikai értelmezés Azonos DNS vírusok, azonos sejtciklusban támadnak és a PPV előkészíti a lassabb PCV-2 fertőzésnek a sejtet. Immunszupresszió Mindkét vírus monohistiocytotrop. Macrophagokhoz, mononuclearis sejtek asszociált fertőzések

37 Immunológiai bázisú támadáspont bizonyítása I Csoport II Csoport PCV-2 fertőzött, de nem stimulált immunrendszerű GF állatok PCV-2 vel azonos módon fertőzött GF és immunológiailag stimulált állatok Alkalmazott immunstimuláció: indifferens antigén /KLH/ erős adjuvánshoz kötve /ICFA/

38 Immunológiai bázisú támadáspont bizonyítása II. I Csoport II Csoport PCV-2 fertőzött, nem stimulált GF állomány PCV-2 fertőzött KLH/ICFA kezelt és thyoglycolláttal (steril peritonitist okoz macrophag infiltrációval) IP stimulált GF csoport

39 Vizsgált paraméterek Klinikai tünetek (PMWS) Elhullások PMWS makroszkópos és mikroszkópos pathológiai lelete Vírus DNS azonosítása és mennyisége Virális DNS disztribúciója a szervezetben

40 Eredmények A csak PCV-2 fertőzött GF csoport egyik egyede sem betegedett meg PMWS-ben. Elhullás 0. Virális DNS nem terjedt el Közepes-enyhe hisztopatológiai elváltozások A stimulált csoportok minden egyede megbetegedett PMWS-ben. Elhullás kb. 20% Virális DNS mennyisége nő, elterjed Súlyos hisztopatológiai és makroszkópos lelet.

41 PCV-2 okozta immunreakció felfüggesztése Gnotobiotikus PCV-2 mesterségesen fertőzött malacokat kortikoszteroiddal kezelve nem volt lényeges változás az immunreakció létrejöttében Ugyanezen malacokat cyclosporinnal kezelve: Nem alakultak ki jellegzetes hisztopathológiai laesiók (lymphadenitis granulomatosa) PCV-2 antigénterhelés megnőtt, primer tropizmus a hepatocyták iránt.

42 Cytokinek funkciója Cytokinek hormonszerű peptidek, melyek immunválasz reakció során szabadulnak fel, mint oldható biológiai szignálok és modulálják az immunrendszer működését több mint 100 féle cytokin ismert (interleukinok, chemokinok, interferonok és hematopoietikus növ. faktorok) melyek biokémiailag és funkcionálisan jellemzők az emlősökre elsődleges funkciójuk az immunrendszer működését biztosító kommunikáció fenntartása (sejt-sejt kommunikáció aktiváló, vagy gátló funkciókhoz) másodlagos funkciójuk az immunrendszer végrehajtó feladatával függ össze (antivirális, gyulladásos, növekedési mediátorok)

43 Cytokinek mellékhatásai A cytokinek anorexiát okoznak és katabolizmus irányba tolják az állat anyagcseréjét, antagonizálva a gazdasági haszonállatok teljesítményét (a jó teljesítményt nyújtó fajták rossz immunológiai reszponderek) Gyulladásos és akut válaszreakciók eseményei: anorexia (IL-1, TNF-alpha) és láz (IL-1, TNF-alpha) fokozzák a vázizomzat lebontását (IL-1) és az akut fázis fehérjék májbeli szintézisét (IL-1, IL-6, TNF [tumor necrosis factor]-alpha) fokozzák a hepatikus glukoneogenezist (IL-1) és a triglyceridek bioszintézisét (TNF-alpha) az adipocyták fokozott lipolyzise (IL-1, TNF-alpha) magasabb kortikoszteroid release

44 Miért csak napjainkra okoz a PCV-2 fertőzés PMWS szindrómát? A vírus EA már 1950-es évek vérmintáiból is kimutatható Mégis csak az 1990-es évektől került a cirkovírus fertőzés PMWS szindrómaként leírásra Ma a sertéstartásban az elmúlt 60 év legsúlyosabb gazdaságai kártételéért felelős

45 OKOK A sertések immunrendszere ellustult, mert a növekedési faktorokra irányuló szelekció ellentétes az immundinamizmussal Globalizált sertéspiac Management módszerek sematizálódnak Korai választás Immunbiológiai készítmények elterjedése