http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20609432 Egy, a Curcuma longa-ból izolált poliszacharid kivonat immunserkentı tevékenységei. Yue GG 1, Chan BC, Hon PM, Kennelly EJ, Yeung SK, Cassileth BR, Fung KP, Leung PC, Lau CB. Szerzıi információ Kivonat Számos kurkuminoidot és szeszkviterpenoidot izoláltak a Curcuma longa (CL)-ból, és ezekrıl kimutatták, hogy sokféle gyógyszerészeti hatással bírnak. A jelenlegi tanulmányban a CL forró vizes kivonata poláris frakcióinak immunmodulátor tevékenységét kutattuk, emberi perifériás vér mononukleáris sejtjeinek (PBMC) felhasználásával. Eredményeink azt mutatták, hogy a forró vizes kivonat magas polaritású frakciója ösztönzı hatásokat nyilvánított ki a PBMC szaporodásában, amint azt a [metil-(3)h]-timidin beépülési vizsgálat kiderítette. Egy arra irányuló kísérletben/próbálkozásban, hogy izoláljuk azokat a hatóanyagokat, amelyek felelısek ezekért a tevékenységekért, további etil-acetátos, butanolos és etanolos elkülönítést végeztünk el progresszíven. A citokin-termelıdéseket (TGF-béta, TNF-alfa, GM-CSF, IL-1alfa, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13, stb.) modulálta a poliszachariddal feldúsított frakció, amint azt az ELISA és a citokin fehérjesor elrendezése is kimutatta. A CD14 pozitív festéső PBMC arányát megnövelték ezek a frakciók. Az aktív frakció monoszacharid összetételét GC-MS-sel és gél átszivárgásos kromatográfiásan határoztuk meg. A C. longa poliszacharidjainak immunserkentı hatásait a PBMC-re most mutattuk ki elıször. Ezek a felfedezések felderítették a C. longa nyers kivonatának lehetséges felhasználását is (mely kurkuminoidokat és poliszacharidokat tartalmaz), és javallt táplálékkiegészítı olyan rákbetegek számára, akiknek immunmőködését elnyomták a kemoterápiás kezelések. PMID: 20609432 [PubMed - indexed for MEDLINE] PMCID: PMC2917522 Free PMC Article Eredmények: 6 1.
1. ábra. Forrás: A Curcuma longából izolált poliszacharid kivonat immunserkentı Vázlatos táblázat, mely bemutatja a CL forró vizes kivonatának frakcióképzését. A zárójelben található számok a százalékos hozamot/eredményt mutatják (w/w).
2. 2. ábra. Forrás: A Curcuma longából izolált poliszacharid kivonat immunserkentı A H1 H4 frakcióval kezelt PBMC szaporodási válasza. A sejteket 96 lyukú lemezeken vetettük el, és a H1-H4 frakciók 200 μg/ml-es tenyésztő közegében inkubáltuk 72 óráig, expressziójuk pedig az átlagos %-os arányt mutatja percenkénti számoláskor azokban a kezelt és kezeletlen sejtekben, melyek 8 különböző donortól származnak. Az eredmények expressziója + S.E.M. átlagos koncentrációjára történt, a 8 vérmintára, melyek mindegyike 4-4 bemélyedésbe került. A kezelt és kezeletlen csoportok közötti különbségeket Mann Whitney teszttel hasonlítottuk össze. * p < 0.05 a kontroll csoporttal való összehasonlítás szerint. Grace G. L. Yue, et al. Int J Biol Macromol. ;47(3):342-347
3. 3. ábra. Forrás: A Curcuma longából izolált poliszacharid kivonat immunserkentı
A H2 frakcióval kezelt PBMC TNF-α-termelésének szaporodási válasza. (A) A PBMC-t egy 96 lyukú tányérra/lemezre vetették el, majd inkubálták H2 frakció 100 800 μg/ml-es tenyésztési közegében 72 órán keresztül, expressziója pedig az átlagos %-os arányt fejezi ki percenkénti számolásban azokra a kezelt és kezeletlen sejtekre nézve, melyek 8-9 donortól származtak. A tenyészet szupernatánsait 24 órás, H2-frakcióval történő inkubáció után gyűjtötték össze, a citokin TNF-α (B), IFN-γ (C), IL-6 (D) és TGF-β (E) koncentrációit pedig specifikusan ELISA-val határozták meg. Az eredmények átlagos + S.E.M. koncentrációt mutatnak a 10 vérmintában minden egyes mélyedésben. A különbségeket a kezelt és a kezeletlen kontroll csoportok között Mann Whitney teszt segítségével hasonlították össze. * p < 0.05, ** p < 0.005 a kontroll csoporttal összehasonlítva.
4. 4. ábra. Forrás: A Curcuma longából izolált poliszacharid kivonat immunserkentı A PBMC-ből a H2 frakció serkentésének hatására kiválasztott citokinek termelésének reprezentatív profilja. PBMC (2 10 6 sejteket) tenyésztettek H2 (200 μg/ml)-rel vagy anélkül 24 órán keresztül egy 96 lyukú lemezen/tányéron. A sejtmentes szupernatánsokat (felszínen úszó anyagok) összegyűjtötték, a citokineket a szupernatáns kultúrából pedig hozzávetőlegesen megszámlálták egy antitest alapú RayBio emberi citokin sor III. segítségével. Pozitív és negatív kontrollokat terveztek (1a, 1b, 2a, 2b, 7l, 8l) és (1c, 1d, 2c, 2d, 7k, illetve 8k)-ra. B: A táblázat felsorolja az antitestek formáit a citokin sorra.
5. 5. ábra. Forrás: A Curcuma longából izolált poliszacharid kivonat immunserkentı. A H2 frakció hatásai a CD14, CD4 és CD8 expressziójára a PBMC-ben. A sejteket a H2 frakció különféle koncentrációiban (200 800 μg/ml) inkubálták 72 órán keresztül. A: A 7-8 vérdonortól származó PBMC száma, amelyek festése egyenként pozitív volt CD14-re, és mérték a fluoreszkáló aktivált sejt kiválasztódást, majd leképezték ide úgy, mint a pozitív festésű sejtek százalékát 20.000 életképes PBMC-nként. B: Az együtt festett CD4 + és CD8 + sejtek aránya 20.00 életképes PBMC-nként (n=10). A sorozat középértéket mutat. A különbségeket a kezelt és a kezeletlen kontroll csoport között Mann Whitney teszt használatával hasonlítottuk össze. * p < 0,05 a kontroll csoporthoz viszonyítva.
6. 6. ábra. Forrás: A Curcuma longából izolált poliszacharid kivonat immunserkentı A gél átszivárgási kromatográf kimutatja a H2 frakció tartalmát. Három csúcsot érzékeltünk 11.29, 20.48 és 22.74 perces késleltetési időben.