AMOXICILLINUM TRIHYDRICUM. Amoxicillin-trihidrát

Átírás

1 Amoxicillinum trihydricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur /2013:0260 AMOXICILLINUM TRIHYDRICUM Amoxicillin-trihidrát C 16 H 19 N 3 O 5 S.3H 2 O M r 419,4 [ ] DEFINÍCIÓ (2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-Amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino]-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2- karbonsav-trihidrát. Fermentációs termék félszintetikus származéka. Tartalom: 95,0 102,0% (vízmentes anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos por. Oldékonyság: vízben kevéssé oldódik; etanolban (96%) alig oldódik; zsíros olajokban gyakorlatilag nem oldódik. Híg savak és híg alkáli-lúgok oldják. AZONOSÍTÁS Első azonosítás: A. Második azonosítás: B, C. A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS amoxicillin-trihidráttal. B. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat: 25 mg vizsgálandó anyagot 10 ml R nátrium-hidrogén-karbonát oldatban oldunk. Összehasonlító oldat (a): 25 mg CRS amoxicillin-trihidrátot 10 ml R nátrium-hidrogén-karbonát oldatban oldunk. Összehasonlító oldat (b): 25 mg CRS amoxicillin-trihidrátot és 25 mg CRS ampicillin-trihidrátot 10 ml R nátrium-hidrogén-karbonát oldatban oldunk. Lemez: R szilanizált szilikagél lemez. Kifejlesztőszer: 10 térfogatrész R acetont R ammónium-acetát R tömény ecetsavval ph 5,0 értékre beállított 154 g/l töménységű oldatának 90 térfogatrészével elegyítünk.

2 Amoxicillinum trihydricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur Felvitel: 1 μl. Kifejlesztés: 15 cm-es fronttávolságig. Szárítás: levegőn. Előhívás: a foltok megjelenéséig jód-gőztérbe helyezzük és nappali fényben értékeljük. Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat: a kromatogramon két, egymástól jól elkülönülő folt látható. Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramjának főfoltja helyét, színét és méretét tekintve egyezzék meg az a) összehasonlító oldat főfoltjával. C. Kb. 2 mg anyagot egy kb. 150mm hosszú, 15 mm átmérőjű kémcsőben 0,05 ml R vízzel átnedvesítünk, majd 2 ml R kénsav formaldehid reagenst adunk hozzá. A kémcső tartalmát rázogatással összekeverve, gyakorlatilag színtelen oldatot nyerünk. A kémcsövet ezután 1 percre vízfürdőbe helyezzük. Az oldat sötétsárgára színeződik. VIZSGÁLATOK S oldat. 0,100 g anyagot R szén-dioxid-mentes vízzel 50,0 ml-re oldunk. Az oldást ultrahanggal vagy enyhe melegítéssel segítjük elő. ph (2.2.3): 3,5 5,5. Az S oldatot vizsgáljuk. Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): +290 és +315 között (vízmentes anyagra). Az S oldatot vizsgáljuk. Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Tompítóoldat (ph 5.0). 250 ml R nátrium-dihidrogén-foszfát oldat ph-ját 5,0-ra állítjuk R híg nátriumhidroxid oldattal, majd R vízzel 1000,0 ml-re hígítjuk. Vizsgálati oldat (a). 30,0 mg vizsgálandó anyagot A mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Vizsgálati oldat (b). 30,0 mg vizsgálandó anyagot A mozgófázissal 20,0 ml-re oldunk. Az oldatot közvetlenül felhasználás előtt készítjük. Összehasonlító oldat (a). 30,0 mg CRS amoxicillin trihidrátot az A mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (b). 4,0 mg CRS cefadroxilt az A mozgófázissal 50 ml-re oldunk. Az oldat 5,0 ml-éhez 5,0 ml a) összehasonlító oldatot adunk és az elegyet az A mozgófázissal 100 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). 2,0 ml a) összehasonlító oldatot az A-mozgófázissal 20,0 ml-re hígítunk. A kapott oldat 5,0 ml-ét az A-mozgófázissal tovább hígítjuk 20,0 ml-re. Oszlop: méretei: l = 0,25 m; Ø = 4,6 mm, állófázis: R kromatográfiás célra szánt oktadecilszililezett szilikagél. Mozgófázis: A-mozgófázis: R acetonitril tompítóoldat (ph 5,0) (1+99 V/V), B-mozgófázis: R acetonitril tompítóoldat (ph 5,0) (20+80 V/V),

3 Amoxicillinum trihydricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur Idő (perc) A-mozgófázis (%V/V) B-mozgófázis (%V/V) 0 t R 92 8 R ( t R + 25) ( R + 25 ) ( t R + 40) ( 40 ) ( t + 55) t t t 92 8 R + R t R = az amoxicillin retenciós ideje a c) összehasonlító oldattal meghatározva Amennyiben a megfelelő csúcsfelbontás biztosítására módosítottuk az eluens összetételét, a gradiens programot és a tartalmi meghatározást is ezzel a módosított összetétellel kezdjük. Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 254 nm-en. Injektálás: μl-t a b) és c) összehasonlító oldatból; az amoxicillin-csúcs megjelenéséig izokratikus elúciót végzünk. 50 μl-t injektálunk a b) vizsgálati oldatból, majd a Mozgófázis pontban leírtak szerinti gradiens elúciót alkalmazzuk; üres kísérlethez az A-mozgófázist injektáljuk és a Mozgófázis pontban leírtak szerinti gradiens elúciót alkalmazzuk. Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat: felbontás: legalább 2,0 az amoxicillin és a cefadroxil csúcsa között (szükség esetén az eluensben módosítjuk az A- és a B-mozgófázis arányát). Követelmények: egyéb szennyezők egyenként: csúcsterületük nem lehet nagyobb, mint a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (1%); N,N-Dimetilanilin ( A vagy B-módszer): legfeljebb 20 ppm. Víztartalom (2.5.12): 11,5 14,5%. 0,100 g anyagot vizsgálunk. Szulfáthamu (2.4.14): legfeljebb 1,0%. 1,0 g anyagot vizsgálunk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (2.2.29). A Rokon vegyületek vizsgálatban leírt módszer szerint járunk el, a következő módosításokkal: Mozgófázis: az A- és B-mozgófázis kezdeti összetétele, ha szükséges, módosítva. Injektálás: a) vizsgálati oldat és a) összehasonlító oldat. Rendszeralkalmasság: a) összehasonlító oldat: ismételhetőség: az RSD legfeljebb 1,0% lehet, 6 injektálásból számolva. A százalékos C 16 H 19 N 3 O 5 S-tartalmat a CRS amoxicillin-trihidrát feltüntetett tartalma alapján számoljuk ki. ELTARTÁS Légmentesen záró tartályban.

4 Amoxicillinum trihydricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur SZENNYEZŐK A. (2S,5R,6R)-6-amino-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2-karbonsav (6- aminopenicillánsav), B. (2S,5R,6R)-6-[[(2S)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino]-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1- azabiciklo[3.2.0]heptán-2-karbonsav (L-amoxicillin), C. (4S)-2-[5-(4-hidroxifenil)-3,6-dioxopiperazin-2-il]-5,5-dimetiltiazolidin-4-karbonsav (amoxicillindiketopiperazin-származékok), D. R = CO 2 H: (4S)-2-[[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino]-karboximetil]-5,5-dimetiltiazolidin-4- karbonsav (amoxicillin penicillosavjai ), és C* epimere E. (2RS,4S)-2-[[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino] metil]-5,5-dimetiltiazolidin-4-karbonsav (amoxicillin penillosavjai),

5 Amoxicillinum trihydricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur F. 3-(4-hidroxifenil)pirazin-2-ol, G. (2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino]-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino]- 3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2-karbonsav (D-(4-hidroxifenil) glicilamoxicillin), H. (2R)-2-[(2,2-dimetilpropanoil)amino]-2-(4-hidroxifenil)ecetsav, I. (2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)ecetsav, J. amoxicillin és amoxicillin-penicillosavak ko-oligomerei,

6 Amoxicillinum trihydricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur K. amoxicillin-penicillosavak oligomerei. L. (2S,5R,6R)-6-[[(2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]amino]-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1- azabiciklo[3.2.0]heptán-2-karbonil]amino]- 3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciklo[3.2.0]heptán-2- karbonsav (6-APA amoxicillin-amid).