CYNARAE FOLIUM. Articsókalevél

Átírás

1 Cynarae folium Ph.Hg.VIII. Ph.Eur CYNARAE FOLIUM Articsókalevél 01/2010:1866 DEFINÍCIÓ A drog az articsóka Cynara scolymus L. egész vagy aprított, szárított levele. Tartalom: legalább 0,8% klorogénsav (C 16 H 18 O 9 ; 354,3) (szárított drogra). SAJÁTSÁGOK Makroszkópos és mikroszkópos sajátságait az Azonosítás rész A és B pontja írja le. AZONOSÍTÁS A. A teljes levél 70 cm hosszú és 30 cm széles lehet. A lemez a felső részétől a levélnyéltől mért 1-2 cm-es távolságig mindkét felén mélyen tagolt. A levél alsó része elkeskenyedő. A karéjok fogas szélűek, csúcsuk kihegyesedő; nincs tövisekké módosulás. A levél színi oldala zöld színű és finom, fehéres fedőszőrök borítják. A fonáki epidermisz halványzöld vagy fehér, hosszú szőrök sűrű, összekuszálódott tömege borítja. A levélnyél felső oldala sík, a főér a színi oldalon nem emelkedik ki; a fonáki oldalon erőteljesen kidomborodó, hosszában bordázott, akárcsak a levélnyél. A főér és a levélnyél mindkét oldala feltűnően szőrös. B. A drogot elporítjuk (1000). A drogpor szürkészöld színű. Mikroszkóp alatt, R klorál-hidrát oldatban vizsgálva, benne a levéllemez epidermiszének töredékei láthatók. A színi epidermisz sejtjei egyenes, vagy kissé hullámos falúak, a fonáki epidermisz sejtjei erősebben hullámos falúak. Anomocitikus szerkezetű gázcserenyílások (2.8.3) mindkét oldali epidermiszen megtalálhatók. A drogporban egysoros, soksejtű fedőszőrök nemezszerű tömege is látható. E fedőszőrök többsége néhány sejtből álló rövid alappal, és igen hosszú, keskeny, gyakran görbült csúcsi sejttel rendelkezik, vagy 4-6 hengeres sejtből áll. Ritkán rövid nyelű, két- vagy többsejtű fejes mirigyszőrök is előfordulnak. A levélnyél és az erezet szállítószöveteinek töredékei is megtalálhatók.

2 Cynarae folium Ph.Hg.VIII. Ph.Eur A. A levéllemez felső epidermisze felülnézetben B. A levéllemez alsó epidermisze felülnézetben gázcserenyílásokkal és fedőszőrökkel C. Fedőszőrök töredékei D. Soksejtű, kétsoros mirigyszőrök felülnézetben E. Levéllemez keresztmetszete mirigyszőrrel F. Szállítószövet töredékei ábra. Illusztráció az articsókalevél azonosításához (lásd Azonosítás B. pont) C. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. 2,0 g elporított drogot (1000) 20 ml R etanollal (60 %V/V) 2 órán át időközönként megkeverve állni hagyunk. Ezután a keveréket megszűrjük.

3 Cynarae folium Ph.Hg.VIII. Ph.Eur Összehasonlító oldat. 5 mg R luteolin-7-glükozidot és 5 mg CRS klorogénsavat R metanollal 10 ml-re oldunk. Lemez: R VRK szilikagél lemez (5-40 μm) [vagy R VRK szilikagél lemez (2-10 μm)]. Kifejlesztőszer: R vízmentes hangyasav R vízmentes ecetsav R víz R etil-acetát ( V/V). Felvitel: 10 μl [vagy 2 μl], 10 mm-es [vagy 8 mm] sávok formájában. Kifejlesztés: 13 cm-es [vagy 6 cm-es] fronttávolságig. Szárítás: levegőn. Előhívás: a lemezt 5 percen át 100 C-on melegítjük, majd a még meleg lemezt először R 2-aminoetil-difenilborinát 10 g/l-es, R metanollal készült oldatával, majd R makrogol g/l-es, R metanollal készült oldatával bepermetezzük; a kromatogramot 365 nm-es ultraibolya fényben értékeljük. Értékelés: a vizsgálati és az összehasonlító oldat kromatogramján megjelenő zónák sorrendje a következő ábrán látható. A vizsgálati oldat kromatogramján további zónák is megjelenhetnek. A lemez teteje Világoskéken fluoreszkáló zóna Luteolin-7-glükozid: sárga vagy narancsszínű, fluoreszkáló zóna Klorogénsav: világoskéken fluoreszkáló zóna Sárga vagy narancsszínű, fluoreszkáló zóna (luteolin-7-glükozid) Világoskéken fluoreszkáló zóna (klorogénsav) Összehasonlító oldat Vizsgálati oldat VIZSGÁLATOK Összes hamu (2.4.16): legfeljebb 20,0%. Szárítási veszteség (2.2.32): legfeljebb 12,0%. Az elporított drog (710) 1,000 g-ját szárítószekrényben 2 órán át 105 C-on szárítjuk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (2.2.29).

4 Cynarae folium Ph.Hg.VIII. Ph.Eur Vizsgálati oldat. 0,500 g elporított drogot (1000) 50,0 ml R metanollal 1 órán át 70 C-on visszafolyóhűtő alkalmazásával vízfürdőn melegítünk. Ezután a keveréket centrifugáljuk, majd a felülúszót 200 ml-es mérőlombikba töltjük. Az eljárást megismételjük, és a mérőlombik tartalmát R vízzel 200,0 ml-re kiegészítjük. Összehasonlító oldat. 5,0 mg CRS klorogénsavat 50,0 ml R metanolban oldunk. Az oldat 5,0 ml-ét mérőlombikba visszük, és 5 ml R metanol hozzáadása után R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: méretei: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm, állófázis: R kromatográfiás célra szánt oktadecilszililezett szilikagél (5 μm), hőmérséklet: 40 C. Mozgófázis: A-mozgófázis: R tömény foszforsav R víz (0,5+99,5 V/V). B-mozgófázis: R tömény foszforsav R acetonitril (0,5+99,5 V/V). Idő (perc) A-mozgófázis (%V/V) B-mozgófázis (%V/V) Áramlási sebesség: 1,2 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 330 nm-en. Injektálás: 25 μl. Rendszeralkalmasság: vizsgálati oldat: a kromatogram egyezzék meg a ábrán látható kromatogrammal; csúcsfelbontás: legalább 2,0 a klorogénsav és az utána következő csúcs (2. csúcs) között. A klorogénsav százalékos tartalmát a következő összefüggés alapján számoljuk ki: A1 m2 p A m 2 1,

5 Cynarae folium Ph.Hg.VIII. Ph.Eur ahol A 1 = a vizsgálati oldat kromatogramján látható klorogénsav-csúcs területe; A 2 = az összehasonlító oldat kromatogramján látható klorogénsav-csúcs területe; m 1 = a vizsgálandó drog tömege, grammban; m 2 = a CRS klorogénsav tömege az összehasonlító oldatban, grammban; p = a CRS klorogénsav százalékos klorogénsavtartalma. 1. klorogénsav 2. ismeretlen anyag ábra. Kromatogram az articsókalevél tartalmi meghatározásához: vizsgálati oldat