Felhasználói i tapasztalatok az URISED software modernizálását t követk vetıenen Az URISED kiért rtékelı modul fejlıdésének bemutatása a PTE Laboratóriumi riumi Medicina Intézet 2008-as mérési m adatbázis zisán Kovács L. Gábor, G Nagy Csilla, Tarrné Szíjárt rtó Piroska, Rékási Zsuzsanna, Magyarlaki Tamás, Vas Tibor PTE Laboratóriumi riumi Medicina Intézete és II. sz. Belgyógy gyászati Klinika
Bevezetés A vizeletüled ledék k vizsgálat jelentısége nagy mennyiségő informáci ció. Diagnózis alátámaszt masztása sa (vese, húgyh gyúti, máj, m metabolikus betegségek). gek). Monitorizálás s (krónikus betegek követk vetése - tünetmentes betegek szőrése). se).
A mikroszkópos vizsgálat hátrh tránya - hibalehetıségei Manuális mintaelıkész szítés-idıigényes Sok hibalehetıség ID csere különbözı vizeletmennyiség túl l erıs s vagy gyenge centrifugálás elvész vagy összetörik a partikulum reziduális volumen különbk nbözısége álnegatív v eredmény interobserver variabilitás AUTOMATIZÁLÁS
URISED vizeletüled ledék k vizsgáló automata Az üledék k alkotók k azonosítása sa automatikusan törtt rténik A A mintakezelés s reprodukálhat lható A A mintákr król l teljes látóteres l teres képeket k tárolt A A tárolt t képek k alapján n az eredmények felülvizsg lvizsgálata lata elvégezhet gezhetı,, szinte nem szüks kséges utólagos mikroszkópos vizsgálat. A A képek k oktatási célra c alkalmasak
Célkitőzés Az URISED (77 Elektronika Kft) vizeletüled ledék automata alakfelismerı modul (M5-M6) M6) fejlıdésének bemutatása a PTE Laboratóriumi riumi Medicina Intézet 2008-as mérési m adatbázis zisán.
M5 és s M6 modul A készülékkel 2008 tavaszán végeztük az elsı vizsgálatainkat, akkor még a 2007-es év végén bevezetett 5-ös kiértékelı modul (M5) eredményeit vetettük össze a referenciaként alkalmazott hagyományos mikroszkópos eredményekkel. A legújabb, 6-os kiértékelı modul (M6) 2009 nyár elején jelent meg. A két modul összehasonlító vizsgálatát a tavalyi méréseink automatikus újraértékelésével végeztük. A két vizsgálati eredmény összehasonlításával határoztuk meg az elırelépést a kiértékelésben.
M5 és s M6 modul Az M5 megfelelı pontossággal azonosította az üledékalkotókat. A rendszer megbízható szemikvantitatív eredményt adott. A M6 modul esetében már nem fókuszáltak egyszerre minden üledékalkotó felismerésének továbbfejlesztésére. A célkitőzés a leggyakrabban elıforduló és diagnosztikailag nagyon fontos vörösvértestek és fehérvérsejtek felismerésének javítása, az eredmények kvantitatívabbá tétele.
Minták Betegek és s módszerekm - kb. 500 friss vizelet minta (90 %-ban% a nephrologiai ambulanciáról). l). Vizeletminták k mérésem - URISED vizelet automatán n M5 és s M6 modullal értékelve. - Referencia módszer: m fénymikroszkf nymikroszkópos vizsgálat Hycor KOVA száml mlálókamrában
Hagyományos mikroszkopizálás: s: Referencia módszerm 6-9 ml vizelet minta 10 percig, 2000 RPM fordulattal centrifugálva, speciális pipettával a felülúszó eltávolítása, reszuszpendálás, fénymikroszkóppal, 400x nagyítás, süllyesztett kondenzor mellett Hycor-Kova számláló kamrában 9 nagykocka leolvasása és ebbıl részecske/ulre számolás a kiinduló térfogat figyelembevételével
URISED vizeletüled ledék k automata Az URISED 2ml vizeletmintából 200 ul t speciális küvettába tölt, melyet centrifugál (10 sec, 2000 RPM). A küvettát mikroszkóp fölé helyezve különbözı pozíciókban 15 képet készít automata fókuszálással. Az alakfelismerı programja azonosítja az üledék alkotókat. A vizsgálat külön reagenst nem igényel.
Memória: Minta mennyiség: Minta szám: Küvetta adagolás: Reagens: Mintaazonosítás: Fıbb jellemzık: Minta feldolgozás: Automatikus, reprodukálhat lható Direkt eredmény: HPF-szer szerő,, teljes látóterl terő kép Végeredmény: Alakos elem konc. és s kategória Mérıkapacitás: 80 minta/óra 5000 eredmény (képekkel!) g: 2 ml (0.2 ml felhasználva) lva) m: 100 (10 rack 10-10 kémcsk mcsıvel) s: 600 küvetta k 12 küvetta k tartóban s: Be Nem szüks kséges Beépített bárkb rkód d leolvasóval val
Automatikusan azonosított alakos elemek RBC - Vörösvérsejt Baktériumok WBC - Fehérv rvérsejtrsejt Kristályok EPI - Laphámsejt CaOx monohidrát NEC Kis kerek CaOx dihidrát hámsejt (egyéb b hámsejt) h Triple foszfát Cylinderek Húgysav Hyalin Mucus Spermium Pathológi giás Gombák További elemek is láthatl thatóak ak a mintáról l tárolt t nagy látóterő,, mikroszkópos képeken. k
Típusos alakos elemek az URISED automatával Vörösvértestek
Fehérv rvérsejtekrsejtek
Laphámsejtek
Egyéb b hámsejtek h
Hyalin cylinderek
Pathológi giás s cylinder (szemcsés) s)
Sarjadzó gomba
Baktériumok
Ca-oxalat kristályok
Triple foszfát kristály
Húgysav kristály
Cut - off értékek 1 ul vizeletre számolva Mikroszkópos (Rick*) Urised (M5,M6)** VVT (RBC) 5 4,5 FVS (WBC) 20 9 Laphámsejtek (EPI) 50 30 Egyéb b hámsejtek h (NEC) 0,9 0,5 Gomba (YEA) 0,9 0,4 Ca-oxal oxalát t (Caox) 0,9 0,5 Pathológi giás s cylinder (PAT) 0,9 1 Hyalin cylinder (HYA) 3 1 Baktérium (BAC) 1 90 *Rick: Klinikai laboratóriumi diagnosztika, Springer : HPF-rıl ul-re korrigálva. **URISED cut-off érték: mikroszkópos értékekhez igazítva (felülbírálatlan automatikus kiértékelés).
RBC M5 M6 Szenzitivitás 73% 83% Specificitás 79% 86% Pozitív v prediktív érték 63% 75% Negatív v prediktív érték 86% 91% Ténylegesen pozitív v minta 116 135 Ténylegesen negatív v minta 253 278 Tévesen negatív v minta 42 27 Tévesen pozitív v minta 69 45
WBC M5 M6 Szenzitivitás 95% 95% Specificitás 83% 89% Pozitív v prediktív érték 71% 81% Negatív v prediktív érték 97% 97% Ténylegesen pozitív v minta 140 148 Ténylegesen negatív v minta 276 294 Tévesen negatív v minta 8 8 Tévesen pozitív v minta 56 35
A régi r (M5) és s az új j (M6) kiért rtékelés összehasonlításasa Urised M5 (régi kiért rtékelés) Részecske Sensitivity Specificity M6 (jelenlegi (RBC-WBC modul) Sensitivity Specificity RBC 73% 79% 83% 86% WBC 95% 83% 95% 89% NEC 68% 70% 69% 70% EPI 73% 98% 81% 98% YEA 62% 72% 72% 90% Caox 65% 73% 65% 78% PAT 75% 72% 76% 72% HYA 79% 80% 79% 80% BAC 89% 77% 89% 76% Sample 92% 52% 93% 70%
ÖSSZEFOGLALÁS Javult a vörös v és s fehérv rvérsejtek rsejtek felismerése. se. Jelentısen csökkent a tévesen t pozitív és s tévesen t negatív v minták k száma. Az RBC, WBC felismerés s javításával val párhuzamosan p a hasonló mérető és s alakú üledékalkotók k (gomba (YEA), kristály (CRY) felismerése se is javult. Csökkent a zsúfoltnak minısített ( crowded( crowded ), automatikusan ki nem értékelt minták k száma.