Vitamin D 3 (25-OH) mérése Elecsys 2010 automatán Jauk Anna Baranya Megyei Kórház Klinikai és Mikrobiológiai Laboratórium Pécs MOLSZE Kongresszus 2009.08.29. PÉCS
D vitamin A D vitamin a napsütésnek kitett bır által elıállított, vagy ételekkel (tojás, halolaj, növények stb.) fogyasztott, zsírban oldódó szteroid hormon prekurzor Biológiailag inaktív. Két egymást követı hidroxiláció (elsı a májban, második a vesében) után válik biológiailag aktív, 1,25 dihidroxi-d-vitaminná, ez a D-hormon.
D vitaminok A D vitamin két legfontosabb formája a D 3 (cholecalciferol) és D 2 (ergocalciferol) vitamin, ez utóbbit élelemmel kell bevinni, míg a D 3 vitamint az emberi szervezet is elı tudja állítani. A plazmában fehérjéhez kötve transzportálódnak (Vitamin-D Binding Protein, DBP - lipoprotein). A D vitaminnak napjainkban több mint 40 metabolitja ismert. Kémiailag secosteroidok (nyitott B győrős steroidok). Meghatározásukra elfogadott referens módszer a Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-TMS, vagy izotóp-diluciós LC-TMS).
D 3 vitaminok (cholecalciferol) Calciol 7-dehydrocholesterol-ból keletkezik a bırben UV (270-300 nm) hatásra. Ez a hullámhossz-tartomány csak 3-nál nagyobb UV index esetében van jelen. Mérsékelt égövön 10 15 perces expozíció szükséges, hetente kétszer (kéz, kar, arc) az elégséges vitamin keletkezéséhez. Intenzív UV hatás degradálhatja is a keletkezett vitamint.
D 3 vitaminok (C 27 H 44 O) Calciol OH csoport nélküli D 3 vitamin Calcidiol (25-OH D 3 vitamin) ezt mérjük a D vitamin státusz becslésére a vérben, a májban hidroxilálódik Calcitriol Calcitriol (1,25-OH D 3 vitamin) ez a biológiailag aktív forma, a vesében hidroxilálódik
D 2 vitamin (ergocalciferol) Ergosterol-ból keletkezik UV hatásra, növényekben, gombákban, - gerincesekben nem! Az ergosterol rendkívül erısen képes absorbeálni az UV sugarakat, ezzel védve a gerinctelenek szervezetét az UV sugárzástól. C 22 és C 23 között kettıs kötés C 24 -en methyl csoport) A szérumban mérhetı 25-OH D 2 vitamin kizárólag külsı bevitelbıl származik (gyógyszer, növényi bevitel, táplálék kiegészítık).
Szintézis D 3 V O N A L D 2 V O N A L
1,25-(OH) 2 D 3 Vitamin (kalcitriol, az aktív D hormon)
D 3 Vitamin metabolizmus
Anyag és módszer Szérum 25-Hydroxyvitamin D 3 meghatározása (nmol/l) Több mint 1100 beteg mintáját vizsgáltuk, közülük kb. 15% követett, kezelt eset. Jelen statisztikai feldolgozás az elıször mért, kezelés elıtti adatokból történt. Minta: natív szérum, 4 órán belül mérve Módszer: ECLIA (elektrochemiluminescens kompetitív immunoassay) ROCHE Mőszer: Elecsys 2010 Statisztika: SPSS 15. programcsomag
Adatok eloszlása (n=1164 ) Expected Cum Prob 300 200 100 0 210,0 190,0 170,0 150,0 130,0 110,0 90,0 70,0 50,0 30,0 10,0 DVIT Normal P-P Plot of DVIT 1,0,8,5,3 0,0 0,0,3,5,8 Std. Dev = 22,25 Mean = 60,8 N = 1164,00 1,0 DVIT N Mean Std. Error of Mean Median Mode Std. Deviation Variance Skewness Std. Error of Skewness Kurtosis Std. Error of Kurtosis Range Minimum Maximum Sum Percentiles Statistics Valid Missing 25 50 75 a. Multiple modes exist. The smallest value is shown 1164 3 60,82,652 60,00 55 a 22,251 495,106,850,072 2,603,143 208 5 213 70793 46,00 60,00 73,00 Observed Cum Prob
Eredmények (nemek, korcsoportok szerint) D-vitamin medián értékek D-vitamin medián értékek korcsoportos felosztásban D-vitam in koncentráció (nm ol/l) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Férfi Nı 59 58 D-vitamin (nmol/l) 100 80 60 40 20 0 Férfi 63 63 59 58 55 57 Nı 20-39 40-69 >70 Korcsoportok (év)
Téli és nyári D vitamin adatok D-vitamin koncentráció Téli D-vitamin értékeke 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 0 100 200 300 400 500 600 esetszám DVIT N Mean Std. Error of Mean Median Mode Std. Deviation Variance Skewness Std. Error of Skewness Kurtosis Std. Error of Kurtosis Range Minimum Maximum Sum Percentiles Statistics Valid Missing 25 50 75 503 0 60,04,893 59,00 55 20,028 401,132,717,109 1,437,217 148 14 162 30199 46,00 59,00 72,00 D-vitamin koncentráció 160 140 120 100 80 60 40 20 0 Nyári D-vitamin értékek 0 100 200 300 400 500 600 esetszám DVIT N Mean Std. Error of Mean Median Mode Std. Deviation Variance Skewness Std. Error of Skewness Kurtosis Std. Error of Kurtosis Range Minimum Maximum Sum Percentiles Statistics Valid Missing 25 50 75 526 3 59,62,999 58,00 62 22,905 524,640,625,106,872,213 136 5 141 31359 44,75 58,00 71,00
Következtetések I. A 25-OH D 3 vitamin értékek normál eloszlást mutattak a vizsgált populációban (n=1164) Percentilisek: 25 (Q1): 46,0 nmol/l 50 (Medián): 60,0 nmol/l 75 (Q3): 73,0 nmol/l Irodalmi medián: 60,2 nmol/l! Nincs szignifikáns különbség férfiak és nık értékei között
Következtetések II. Nincs szignifikáns különbség (p=0,38) a téli (október-március) n=503; medián=59,0 és a nyári (április-szeptember) n=526; medián=58,0 nmol/l) értékek között (ellentétben néhány irodalmi adattal) A 70 év feletti korcsoport mediánjai: nık:57,0 férfiak:55,0
Analitikai specificitás A ROCHE 25-Hydroxyvitamin D 3 teszt a 25-OH-D 3 és az 1,25-(OH) 2 -D 3 vitamin szinteket méri Ez utóbbi - az aktív hormon ezerszer alacsonyabb koncentrációban kering a vérben, mint a D vitamin státusz megítélésére a gyakorlatban alkalmazott 25-OH-D 3 vitamin A kívülrıl bevitt D 2 vitaminokkal adott keresztreaktivitás 10% alatti Kolekalciferol, ergokalciferol gyakorlatilag nem ad kereszt-reakciót
Interpretáció D vitamin eredmények értékelésekor figyelembe kell venni, hogy egy módszer totál D vitamint mér (D 2 + D 3 ), vagy D 3 vitamint. Az egészségügyi szempontból kívánatos koncentrációt ( referencia tartomány?!) a fentiek figyelembevételével kell megadni ( 75,0 nmol/l?)