Klinikai Orvostudományok Doktori Iskola D94

Átírás

1 Klinikai Orvostudományok Doktori Iskola D94 Iskolavezető: Dr. Komoly Sámuel A Nefrológia - Diabetológia programvezető: Dr. Wittmann István Dr. Wittmann István II. sz. Belgyógyászati Klinika Oxidatív stressz hatása az inzulin és erythropoetin effektusára Nephrológiai Centrum Az alábbi hipotézisek vizsgálatát tervezzük: 1. Az enos foszforiláció változik dohányfüst hatására 3T3-L1 adipocytákban. Western-blot-vizsgálatok. 2. Az Akt foszforilációjának vizsgálata Westernblot módszerrel 3T3-L1 adipocytákban oxidatív stressz hatására. 3. Az Erk foszforilációjának vizsgálata 3T3-L1 adipocytákban oxidatív stressz hatására Western-blot módszerrel. 4. Az antioxidáns rezveratrol hatásának vizsgálata az inzulin és erythropoetin jelátviteli útra Western-blottal. 5. A szénhidrátanyagcsere és az oxidatív stressz kapcsolatának vizsgálata folyamatos interstitiális cukormonitorozással (CGMS) és oxidatív stressz markerek mérésével. 6. Hidrogén-peroxid in vivo mérése fejlesztés alatt álló szenzorral. Dr. Wittmann István II. sz. Belgyógyászati Klinika Nephrológiai Centrum A hidroxil szabadgyök-termék orto- és meta- tirozin akkumulációja a krónikus hormonrezisztencia oka A Hormon rezisztencia című szabadalmunkban leírtaknak megfelelően fény derült arra, hogy a hidroxil szabadgyöktermékek akkumulációja következik be az oxidatív stressznek kitett érfalban. Ezeket az eredményeket akarjuk kiterjeszteni: vizsgálni akarjuk a zsírsejtekben az orto- és meta-tirozin akkumulációjának hatására bekövetkező inzulin- és eritropoetin-rezisztenciát, az érben létrejövő acetilkolin-rezisztenciát. Tanulmányozni kívánjuk veseelégtelenségben a kóros tirozinok akkumulációját és annak hatását is. Dr. Nagy Judit II. sz. Belgyógyászati Klinika Kardiovaszkuláris rizikófaktorok és kardiovaszkuláris megbetegedések Nephrológiai Centrum krónikus vesebetegekben A krónikus vesebetegek több mint fele szív- és érrendszeri betegségekben meghal, mielőbb veséiben előrehaladott károsodás alakulna ki. Jelenleg a nephrológia egyik nagy kihívása a szív- és érrendszeri betegségekre való fokozott hajlamú egyének ill. a már kialakult betegségek korai felismerése és megfelelő kezelése krónikus vesebetegekben. A rendkívül sok feladatot tartalmazó témában két résztémát hirdetünk meg: 1. A krónikus vesebetegek (IgANP, polycystas vesebetegek stb.) kardiovaszkuláris rizikóstátusának felmérése non-invazív kardiovaszkuláris vizsgáló módszerek segítségével. 2. A krónikus vesebetegek (IgANP, polycystás vesebetegek stb.) preklinikai kardiális és vaszkuláris (elsősorban arteriosclerosis és atherosclerosis) megbetegedéseinek diagnózisa és prognosztikai faktorai. 1

2 A Reproduktív endokrinológia programvezető: Dr. Szabó István Dr. Szabó István Szülészeti és Nőgyógyászati Klinika A méhen belüli koraszülött magzat életkilátását javító módszerek (klinikai tanulmány). Amnioinfúzió. Méhen belüli direkt szteroid kezelés Hazánkban a koraszülés gyakorisága 8-9 %, melynek oka %-ban az idő előtti burokrepedés. A legnagyobb problémát az jelenti, amikor a magzatvíz terhességi hét között, de főleg a 28. hét előtt folyik el. Ebben az időben a magzat igen alacsony súlyú, különböző szervei éretlenek és megszületése után lecsökken az életben maradási esélyük. A legfőbb cél, hogy próbáljuk a szülést késleltetni. Abban az esetben, ha magzatvíz minimális és ha a feltételek adottak, akkor a magzatvizet pótolni tudjuk fiziológiás nátriumkloriddal. Ezzel lehetővé válik, hogy a magzat tovább fejlődjön méhen belül és a szülést nem kell megindítani. Eddig ezzel a beavatkozással átlagosan 30 nappal sikerült a terhességet meghosszabbítani. A koraszülött magzatoknál az egyik legnagyobb probléma a tüdő funkcionális éretlensége. Az édesanyának adott szteroid injekció sietteti a magzati tüdő érését, kedvező hatásának eléréséhez azonban óra szükséges. Abban az esetben, ha a szteroid injekció kontraindikált, vagy a kedvező hatás kifejtéséhez nincs elegendő idő, akkor méhen belüli magzat kapja meg intramuscularisan ezt az injekciót. A kedvező hatás kifejtéséhez elegendő pár óra és a megszületett koraszülötteknél a légzési zavarok kisebb mértékben jelentkeznek. A témában jelentkező feladata, a klinikai tanulmány során a kezelésben nem részesült, illetve a kezelést kapottak (amnioinfúzió, direkt magzati szteroid kezelés) eredményeinek összehasonlítása. Dr. Gőcze Péter Szülészeti és Nőgyógyászati Szteroid-profil vizsgálatok endokrin és pszichiátriai kórképekben Dr. Kilár Ferenc Klinika Bioanalititkai Intézet A vizeletszteroid-profil módszer kiemelkedő fontossággal bír több endokrin megbetegedés differenciál diagnosztikájában és kutatásában. Vizsgálataink során vizeletszteroid-profilokat határoztunk meg különböző, nőket érintő megbetegedésekben (anorexia nervóza, petefészek alacsony válaszkészsége kontrollált petefészek stimuláció után, korai terhesség hormonális változásai in vitro fertilizációt követően). Célunk volt ezen endokrin és pszichiátriai kórképek klinikumának jobb megismerése, hormonális hátterével kapcsolatos ismeretek bővítése. Vizsgálni kívántuk, létezik-e ezekre a kórképekre specifikusan jellemző vizeletszteroid-profil, illetve a detektált változások értelmezhetők-e a diagnosztika, valamint a terápia szintjén. A szteroid hormonok és metabolitjaik mérésére alkalmazható többféle módszer közül a gázkromatográfia/tömegspektrometria módszerét alkalmaztuk a vizeletben található szteroid metabolitok meghatározására. Dr. Gőcze Péter Szülészeti és Nőgyógyászati Klinika A humán papillomavírus (HPV) fertőzés meghatározásának jelentősége a méhnyakrák szűrési stratégiájában és a rákmegelőző állapotok nyomonkövetési eljárásában A kutatás célja az, hogy a HPV DNS meghatározás, mint szűrővizsgálati eljárás, lényegesen javíthatja-e a méhnyakrákszűrés hatékonyságát, valamint a méhnyakon végzett műtéti beavatkozások számát csökkentheti-e. Befolyásolhatja-e a szűrési stratégiát a HPV genotípusok meghatározása és előfordulási gyakoriságuk feltérképezése a rákmegelőző állapotok és a méhnyakrák területén? A vizsgálatok során tisztázni szeretnénk, hogy kóros citológiai és szövettani 2

3 mintákban milyen gyakorisággal, melyik HPV törzs mutatható ki. A méhnyakon végzett műtét után a perzisztáló HPV fertőzés miként befolyásolja a betegség kórlefolyását. 1.0 Triage az enyhe fokú citológiai atypiával rendelkező nők esetében 2.0 A kóros szűrési lelettel rendelkező nők nyomonkövetési stratégiája 3.0 A rákmegelőző állapotok CIN terápiás jóslata 4.0 Az elsődleges HPV teszt, egyedüli, vagy hagyományos citológiával kombinálva történő alkalmazása Dr. Gőcze Péter Dr. Kiss István Szülészeti és Nőgyógyászati Klinika Orvosi Népegészségtani Intézet A human papillomavirus (HPV) fertőzésekkel kapcsolatos tájékozottság, az egészségfejlesztés lehetőségei és a HPV előfordulásának gyakorisága: populáció-alapú epidemiológiai vizsgálatok A méhnyakrák prekancerózus állapotai szűrővizsgálatokkal közel 100%-osan felismerhetők és kezelhetők, mégis a méhnyakrák a második leggyakoribb daganattípus nőkben világszerte. Magyarországon évente körülbelül 1200 új esetet diagnosztizálnak és közel 500-an halnak meg méhnyakrák következtében, ezzel Magyarország az incidenciát tekintve negyedik, a mortalitást tekintve pedig az ötödik helyen áll az EU tagállamai között. A hallgató feladata a HPV fertőzések és méhnyakrákos megbetegedések primer és szekunder prevenciójának gátjainak feltárása hazánkban (országos szintű, kérdőíves felméréssel). Különböző méhnyakrák prevenciót célzó edukációs intervenciók lebonyolítása, azokról hatékonysági felmérés készítése. Célok: feltárni, hogy van-e összefüggés a serdülőkorúak szociodemográfiai sajátosságai, szexuális magatartása és a HPV-fertőzések primer és szekunder prevenciójával kapcsolatos ismereteik, attitűdjeik között, valamint hogy hogyan változnak ezek a különböző intervenciók hatására. Prospektív tanulmányban a HPV-fertőzések egyik legveszélyeztetettebb csoportjának, a prostituáltaknak vizsgálata, és annak megállapítása, hogy milyen az alacsony és magas rizikójú HPV prevalencia ezen rizikócsoport anális, cervicalis és pharyngealis mintáiban kontrollcsoporthoz képest, valamint hogy van-e összefüggés a HPV prevalencia és a szexuális szokások, óvszerhasználat között. Dr. Gőcze Péter Szülészeti és Nőgyógyászati Stressz reakció és endokrin változások vizsgálata szülészeti és Klinika nőgyógyászati beteganyagon A műtét után kialakuló szisztémás stressz, számos biológiai rendszerre van hatással, mint az autóimmun rendszer, a központi idegrendszer, valamint az endokrin rendszer. A stressz válasz mértékét többek közt meghatározza a műtéti beavatkozás, az alkalmazott aneszteziológiai technika, valamint a posztoperatív fájdalomcsillapítás. A műtéti stressz hiperkatabolizmushoz, a testsúly csökkenéséhez, és immunszupresszióhóz vezethet, ennek mechanizmusa jelenleg pontosan nem ismert, de központi szerepet játszik benne a hipotalamusz-hipofizis-mellékvese által irányított glükokortikoidok és kortizol felszabadulása valamint a proinflammorikus citokinek. Műtéti stressz hatására bekövetkező endokrin változások (kortizol, glukokortikoid, ACTH) ismertek az irodalomban. Tanulmányunk célja, a nőgyógyászati műtétek, ill. szülés során alkalmazott különböző aneszteziológiai eljárások hatásának vizsgálata a hormon rendszerre, elsősorban a vizelettel ürülő stressz hormonokra. A következő hormonokat vizsgálnánk: (5a-AD, androstanediol; D5-AD, androstenediol, An, androsterone; D5-AT, ndrostenetriol; athb, allo-tetrahydrocorticosterone, athf, allo-tetrahydrocortisol; a-c, a-cortol; a-cl, a-cortolone; h-cl, h- cortolone, DHEA, dehydroepiandrosterone; Et, etiocholano-lone; F, cortisol, androsterone; 11-O-PT, 11-keto-pregnanetriol; 11-OH-An, 11-hydroxyandrosterone; 16-OH-DHEA, 16-hydroxy-DHEA; 11-OH-Et, 11-hydroxy-etiocholanolone; 20a-OH-F, 20a-hydroxycortisol; 6h-OH-F, 6h-hydroxycortisol; PD, pregnanediol; D5-PD, pregnenediol, PT, pregnanetriol; D5-PT, pregnenetriol; THA, tetrahydro-11-dehydrocorticosterone, THB, 3

4 tetrahydrocorticosterone; THE, tetra-hydrocortisone; THF, tetrahydrocortisol; THS, tetrahydro-11-deoxycortisol. Ezt egészítenénk ki fájdalom és műtéti terhelésre bekövetkező proinflammatorikus citokinek (pl.il-1, IL-6, TNF-α) valamint akut fázis fehérjék (procalcitonin, 24, C-reaktív protein) ill. mikroalbuminuria szintjének mérésével. Dr. Gőcze Péter Szülészeti és Nőgyógyászati Tumor-asszociált fehérjék vizsgálata különféle nőgyógyászati Klinika kórképekben A PTE ÁOK Biokémiai Intézet, Szülészeti és Nőgyógyászati Klinika és Onkoterápiás Intézet kollaborációja keretében a korábban, illetve jelenleg is végzett lepényi-, és onkológiai kutatásainknak molekuláris biológia eszközeivel történő folytatását tűzi ki célul a pályázat. Fontos célunk egy Daganatos betegek szövet-, vizelet- és szérum-mintabankjának létrehozása és folyamatos fejlesztése, elsősorban méhnyak-, méhtest, és petefészekrákok esetében. A kontroll és beteg minták párhuzamos nyomon követését, értékelést a proteomika és genomika módszereivel végezzük el. A különféle mintákban megjelenő overexpresszált fehérjék normál, valamint pathológiás értéktartományait határozzuk meg, amely által, reményeink szerint eddig ismeretlen tumor- asszociált, -specifikus fehérjéket fedezhetünk fel. Ezen fehérjék molekuláris biológiai jellemzését, funkcionális analízisét végezzük el. Távolabbi célunk, hogy az általunk leírt fehérjék vizsgálatai lehetőséget teremtenek olyan klinikai tesztek kidolgozására, amelyek alkalmasak lehetnek a daganatos betegek diagnosztizálásához és monitorizálásához. Dr. Szilágyi András Szülészeti és Nőgyógyászati A polycystas ovarium syndroma (PCOS) etiológiája, diagnosztikája és Klinika kezelése A polycystas ovarium syndroma (PCOS) a fertilis korú nők leggyakoribb endokrinopathiája, etiológiája ennek ellenére még nem teljesen tisztázott. Az utóbbi években előtérbe került a hyperinsulinaemia, insulin rezisztencia etiológiai szerepe, és ennek megfelelően az insulin érzékenységet fokozó szerek terápiás alkalmazása a PCOS kezelésében. A kutatási téma felöleli a PCOS hormonális és klinikai jellemzőinek (vérzészavar, meddőség, obesitas, a petefészkek ultrahang eltérései) összefüggését az insulin rezisztenciával, valamint az eredmények alapján az insulin érzékenységet fokozó szerek klinikai alkalmazásának indikációját. A PCOS betegek insulin rezisztenciája hosszú távú következményeinek (terhességi diabetes, 2-es típusú diabetes, cardiovascularis rizikó) vizsgálata, prevenciója is a kutatási téma részét képezi. Dr. Szilágyi András Szülészeti és Nőgyógyászati Újabb lehetőségek a meddőség kezelésében Klinika A meddőség a gyermeket tervező párok mintegy 5-10%-át érinti. A kezelési lehetőségek a meddőség okától függően szerteágazóak, ugyanakkor egyre újabb módszerek kerülnek kidolgozásra, majd rutin klinikai alkalmazásra. A legjobban fejlődő területeket az ovuláció indukciós módszerek, továbbá a különböző asszisztált reprodukciós technikák ( lombikbébi program ) képezik. A kutatási téma elsősorban klinikai vizsgálatokat jelent az új kezelési protokollok kidolgozása terén, valamint az alkalmazott eljárások eredményességének összehasonlító vizsgálatát. Az asszisztált reproduktív technikák alkalmazása során számos klinikai és laboratóriumi altéma kutatására nyílik lehetőség. A kezelési protokollok, a cyclus monitorizálása, a kiegészítő gyógyszeres kezelések, az in vitro laboratóriumi munka, valamint az újszülöttek nyomon követése, mind nyitott kérdéseket, kutatási lehetőségeket nyújtanak. 4

5 A Molekuláris patológiai és laboratóriumi vizsgálatok jelentősége az orvosi diagnosztikában és terápiában programvezető: Dr. Miseta Attila Dr. Miseta Attila Laboratóriumi Medicina Intézet A foszfoglükomutáz szerepe a lítium terápiás hatásmechanizmusában A mániás-depressziós pszichózisok között a bipoláris affektív megbetegedés az unipoláris depresszió után a második helyen áll gyakoriság tekintetében. Előfordulása hazánkban különösen gyakori, de más országokban is meghaladja az 1%-ot. Saját feledzésünk az, hogy a PGM csökkent aktivitása jelentősen (6-9szer) megemelkedett kalciumraktározással is jár galaktóz jelenlétében élesztőben. A kalcium anyagcsere drámai megváltozása kihat a sejtben végbemenő fehérje módosulásokra különösen az ergasztoplazmás retikulumban. Ez a jelenség szerepelhet a lítium hatás alapját képező mechanizmusok között, s részleteit sejt és molekuláris biológiai módszerekkel kívánjuk tovább vizsgálni. Dr.Ludány Andrea Laboratóriumi Medicina Intézet A proteomika módszertanának alkalmazása a humán fehérjék vizsgálatában A módszertani fejlesztés elsődleges célja a kutatási eredményeink hasznosulása a klinikai biokémiában. Az elmúlt évek során az egyedi fehérje molekulák specifikus (immunkémiai) kimutatása eredményezte az egyik megújuló irányát az orvosi laboratóriumi diagnosztikának. Ezzel párhuzamosan ma már a molekuláris genetikai vizsgálatok is közvetlenül hasznosulnak a klinikai laboratóriumi diagnosztikában. A laboratóriumi medicinában tekintettel a fehérje molekulák biológiai változékonyságára (poszttranszlációs módosulások) - forradalmi változás várható a proteomika vizsgálatoktól, amelyek a jövőben kikerülhetetlenül az analízisek előterébe kerülnek. Ez a kutatási terület, egyrészt a minták fehérjéinek nagyfeloldású elektroforetikus elválasztását (különböző egy és két dimenziós technikák), érzékeny fehérje detektálási lehetőségeket (ezüstözési eljárások), valamint célirányosan válogatott betegmintákat igényel. Esetünkben a módszertan jórészt kidolgozott és előzetes tapasztalatokkal rendelkezünk különböző normál humán mintákra ( a véren kívül pl. szekrétumokra és vizeletre is). A szükséges kollaborációs kapcsolatok a proteomika vizsgálatok kiteljesedéséhez mostanra kiépültek az Orvostudományi Kar Orvosi Kémiai és Biokémiai Intézete kutatócsoportjával, a tömeg -spektrometriás mérések (pl. MALDI technika) területén. A klinikai biokémiában ritkán analizált és noninvazívan nyerhető betegmintákra (nyál és könny) szándékozzuk a vizsgálatokat elsősorban kiterjeszteni. Ismert és még azonosítatlan biomarkerek kimutatását várjuk hasznosulni a daganatos betegségek vagy a krónikus metabolikus zavarok (diabetes) diagnosztikájában. Dr. Kőszegi Tamás Laboratóriumi Medicina Intézet Savoldékony kismolekulasúlyú szérumfehérjék vizsgálata szisztémás megbetegedésekben Az albuminnál kisebb molekulatömegű szérumfehérjék között sok, biológiailag aktív molekulát találunk (citokinek, akut fázis fehérjék, stb.). Intézetünkben néhány évvel ezelőtt perklórsavas kicsapásos módszert dolgoztunk ki a 67kDa-nál kisebb szérumfehérjék izolálására, mennyiségi mérésére és elektroforetikus szeparálására. Immunoblot vizsgálattal kimutattuk, hogy a perklórsavban oldódó fehérjék közt az alfa-1-glikoprotein jelentős mennyiségben szerepel. Egészséges egyének fehérje mintázatát összehasonlítva szisztémás betegségben szenvedők fehérje mintázatával, jelentős mennyiségi és minőségi különbségeket találtunk. A módszerrel malignus daganatos betegségnél kimutattuk, hogy a kemoterápia során a savoldékony fehérje frakció mennyisége megnő, az elektroforetikus mintázatokban jellegzetes eltéréseket találtunk. A tervezett kutatás célja malignus betegségekben és szepszisben a perklórsavban oldódó szérumfehérjék további jellemzése, betegségre specifikus molekulák vagy molekula mintázatok keresése, a markernek ítélt fehérjék azonosítása. Módszerként nagyfeloldású egy- és kétdimenziós gélelektroforézist, western blot módszert, immunkémiai vizsgálatokat és a PTE Biokémiai és Orvosi Kémiai Intézetével kollaborálva tömegspektrometriás méréseket alkalmazunk. 5

6 Dr. Kőszegi Tamás Laboratóriumi Medicina Intézet Humán szérum aktin, és aktinkötő fehérjék prediktív értékének vizsgálata súlyos katabolikus állapotokban A szervezet egészét érintő szöveti károsodások mértékének megítélése a jelenlegi rutin laboratóriumi diagnosztikában használt paraméterek alapján nem végezhető el kielégítő pontossággal. Ugyanakkor jól ismert, hogy minden sejtünk tartalmaz aktint, mely a citoszkeleton integráns részét képezi. A legújabb irodalmi adatok alapján vált csak ismertté, hogy súlyos szöveti lézió (kiterjedt műtét, trauma, szepszis, ARDS) esetében az elpusztult sejtekből az elsősorban fibrilláris formában lévő aktin G aktinná depolimerizálódva a vérbe kerül. A G aktint scavanger jellegű fehérjék (Gelsolin, D vitamin kötő fehérje) megkötik és a keringésből eliminálják. Amennyiben az aktin kínálat meghaladja a kötő fehérjék kapacitását, a G aktin többlet szabaddá válva megjelenik a plazmában és mennyiségétől függően súlyos többszervi elégtelenséget képes kiváltani. A kutatás célja SDS-poliakrilamid gélelektroforézis + western blot és kvantitatív kemilumineszcenciás detektálás alkalmazásával a keringő aktin- és aktinkötő fehérjék meghatározása a fenti betegcsoportok szérum mintáiból. A vizsgálat monitorozó jellegű, összefüggést keresünk a mért paraméterek és a szisztémás szöveti károsodás közt. Az aktin és a gelsolin meghatározása várhatóan új fehérje markerként lesz alkalmazható a fokozott szöveti károsodás mértékének objektív megítéléséhez. Dr. Kőszegi Tamás Laboratóriumi Medicina Intézet Ochratoxin A toxicitásának vizsgálata különböző szövetkultúrákon Az ochratoxin A (OTA) egy világszerte előforduló mikotoxin, mely jelentős szerepet játszik az un. Balkáni Endemikus Nefropátiában. Az OTA toxicitása elsősorban a vese tubulus sejtjeire irányul, de hatásmechanizmusa jelenleg sem tisztázott kellőképpen és más szervek (pl. máj) is károsodást szenvedhetnek. Az OTA hatásmechanizmusa még nem kellően felderített, feltehetően genotoxikus, fehérjeszintézist gátló, fokozza a szabadgyök képződést, mindezek hatására nekrózist és apoptózist idéz elő a célsejtekben. A tervezett kutatás célja az OTA toxikus hatásainak molekuláris szintű jobb megismerése in vitro szövettenyészeti modellben. Az OTA hatásmechanizmusának tisztázására tervezzük új citotoxicitási módszerek kifejlesztését, a fehérjék transzkripciós rátájában bekövetkező változások felderítését. Nyomon követjük a citoszkeleton morfológiájának változását fluoreszcens mikroszkópos vizsgálattal (aktinfalloidin). Kiemelt fontossággal bír az OTA-sejt kölcsönhatás vizsgálata fluoreszcens spektroszkópiával és flow cytometriával. A toxin hatásmechanizmusának felderítése lehetőséget ad védő hatású molekulák tesztelésére. Ebben az összefüggésben a természetben is előforduló, elsősorban növényi eredetű protektív faktorok (antioxidánsok, kompetitív hatású molekulák) vizsgálatát tervezzük. A sejtes modellekben kitapadó és szuszpenzióban növő sejtkultúrákat egyaránt alkalmazni kívánjuk. Dr. Kőszegi Tamás Laboratóriumi Medicina Intézet Etnofarmakobotanikai szempontból jelentős gyógynövényfajok Dr. Papp Nóra Farmakognóziai Intézet citoprotektív hatásának in vitro vizsgálata szövettenyészetekben Erdély etnobotanikai szempontból feltáratlan, állandó orvosi és gyógyszerellátással nem rendelkező településein számos ígéretes új gyógynövény taxon, vagy már ismert fajok új indikációja keltette fel az érdeklődést további kutatások céljából. A feljegyzett fajok hatóanyagokra vonatkozó adatai között a téma a taxonok antioxidáns és egyéb lehetséges citoprotektív hatásának vizsgálatára koncentrál. A jelölt feladata az egyes településeken folytatott terepmunka során a gyűjtött adatokból kiválasztott taxonok és drogrészeik vizsgálata in vitro sejtes modellben. A gyógynövényekből izolált karotinoidok, flavonoidok, polifenolok és sok más, elsődlegesen antioxidáns hatással bíró molekula jelentős preventív tényezőnek számít a krónikus degeneratív betegségek (malignus adaganatok, autoimmun kórképek, szív érrendszeri betegségek, stb.) kialakulásában. Az epidemiológiai vizsgálatokból, állatkísérletes modellekből és in vitro kísérletes rendszerekből nyert nagyszámú megfigyelés ellenére a protektív növényi anyagok hatásmechanizmusa nem teljesen ismert. Feltételezhető és modell kísérletekben részben igazolt is, hogy a citoprotekcióban az egyik legjelentősebb tényező az antioxidáns sajátság. Ugyanakkor a jelenség megértését nehezíti, hogy az irodalomban a legtöbb szerző egy izolált molekulát vizsgál, viszont a kedvező hatás kifejtéséhez minden bizonnyal több protektív faktor 6

7 együttes jelenlétére van szükség. A jelen kutatás részben a már ismert antioxidáns molekulák további jellemzésére, részben több antioxidáns együttes hatásának vizsgálatára fókuszál. A kísérletekhez sejtes modelleket kívánunk használni: kitapadó szövetkultúrákat (pl. fibroblaszt, HepG-2, MDCK, stb.), illetve szuszpenzióban növő limfoid sejteket (pl. Jurkat, K-562). A citoprotekciót szabadgyökös indukció (pl. menadion adása) után mérjük biolumineszcenciás életképesség (ATP/protein) módszerrel, kemilumineszcenciás követéssel és fluoreszcens spektroszkópiás eljárásokkal, ahol a sejteket intracellulárisan az oxidációs fokra érzékeny fluoreszcens festékkel jelöljük. A fluoreszcenciás módszert flow cytométerre is adaptálni kívánjuk. A vizsgálatok további részét képezi a kezelt sejtek fehérje mintázatában bekövetkező változások követése SDS-PAGE módszerrel, kiegészítve kemilumineszcenciás Western blot analízisekkel. B Molekuláris patomorfológia programvezető: Dr. Pajor László Dr. Pajor László Pathológiai Intézet Kombinált in situ pheno- és genotypus analizis alkalmazása a pathomorphologiában Egy mikroszkóposan azonositható phenotypushoz (morphologia és immunphenotypus) nem feltétlenül egy genotypus rendelhető, ami phenotypus szinten fel nem ismerhető heterogenitást jelent. Ilyen azonos phenotipushoz tartozó genetikai heterogenitás gyakran előfordul reaktiv és daganatos sejtek között, mivel a daganatos transzformáció során nem változik meg feltétlenül a phenotipus, de a specifikus genotypus változás ( akvirált genetikai aberráció) csak a tumorsejtre jellemző. Példaként emlithető a pre-b-sejt és a call leukaemiás sejtek u.a. CD10+, CD19+, CD34+ phenotypusa vagy a plasmasejtek és a myeloma sejtek u.a. CD20-, CD38+. CD45-, CD138+ phenotypusa. Biokémiai módszerekkel nem, esetleg csak nagy mennyiségű anyagot igénylő és nem teljesen tiszta populációt adó sejtszortirozást követő molekuláris módszerekkel lehet ezt a genotypus heterogenitást feltárni. Ugyanakkor az immuncytologia / histologia és konzekutiv in situ hybridizáció (ISH) alkalmazásával, relokalizációs mikroszkópos rendszerekben a phenotypus asszociált genotypus egyedüli módon és nagy precizitással vizsgálható és azonositható.a program e fenti módszertannal a genetikai heterogenitás vizsgálatát célozza meg pall-ben és myeloma multiplex-ben komplex flow cytometrias és PCR technologiát is felhasználva és az adatokat a betegség-lefolyással korreláltatva. Tekintettel arra, hogy az ISH-ós jelmintázat automatizált felismerésében döntő jelentősége van a genomikus vs fizikai jeltávolság aránynak, ezen technologia standardizációjának vizsgálata ugyancsak része a programnak. Dr. Pajor László Pathológiai Intézet Hyperdiploid gyermekkori acut lymphoblastos leukaemia cytogenetikájának vizsgálata Az acut lymphoblastos leukaemia (ALL) a leggyakoribb gyermekkori rosszindulatú, daganatos megbetegedés. Az alul- illetve túlzott kezeléseket elkerülő, optimális terápia megválasztását a betegségspecifikus, nem random kromoszómális genetikai aberációk jelenlétén vagy hiányán alapuló nemzetközi osztályozás határozza meg. A betegség két leggyakoribb subtypusa az ETV6/RUNX1 translocatiot hordozó, illetve az közötti modalis kromoszóma számmal bíró hyperdiploid csoport, melyek együttesen az összes gyermekkori ALL kb. 55%-át, a 2-7 éves korban kialakuló betegségek kb. 80%-át teszik ki. A kutatás célja a feltételezhetően in utero kialakuló hyperdiploid ALL korai felismerése és kezelése szempontjából legfontosabb 4 vagy 5 kromoszómális eltérés azonosítása. A nem osztódó, interfázisban lévő sejtmagokon elvégzett, relocalizációs technikát is alkalmazó, automatizáltan kiértékelt fluorescencia in situ hibridizációs vizsgálat (i-fish) a leghatékonyabb módszer az említett számbeli kromószómális elváltozás illetve ennek klonalis fejlődése kimutatásához. A vizsgálatok a Pathologiai Intézetben archivált nagy számú gyermek ALL csontvelő minták vizsgálatán alapszanak. 7

8 Dr. Pajor László Pathológiai Intézet Prognosztikus és prediktiv faktorok diagnosztikus és klinikai jelentősége prostata carcinomában A prostatarákos betegek számára az onkológiában használt prognosztikus és prediktiv márkerek vizsgálata meghatározó, a műtéti indikációkban és a target terápiában stratifikációt tehet lehetővé. A projekt során az új prognosztikus és prediktiv faktorok ( AMACR, androgén receptor /AR/, Bcl-2, HER2/neu, synaptophysin, chromogranin, p53, MIB-1, ERG, EGFR, caspase, 34βE12) morphologiai és immunhistologiai vizsgálatát tervezzük. Ezeket a hagyományos morphologiai (grading, Gleason-score, tumorméret, Helpap-grading), valamint klinikai (UH) és labor (PSA) paraméterekkel vetjük össze. A szövettani metszeteken tömegspektrometriára épülő molekuláris képalkotási technikával (Imaging Mass Spectrometry) proteomikai illetve metabolomikai vizsgálatokat is végzünk. A fentiekkel új, komplex imformáció remélhető a PSA-csökkenés, a tumor progresszió, a terápia reszisztencia / válaszkészség vonatkozásában. A projekt keretében együttműködünk a PTE-ÁOK Biokémiai Intézetével valamint a Johannes Orth Institut für Pathologie und Neuropathologie Göttingen, Németország intézettel is. A Keringéspatológiai állapotok vizsgálata in vivó sebészi modelleken és klinikai beteganyagon programvezető: Dr. Rőth Erzsébet Dr. Rőth Erzsébet Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A glutathion-s-transzferáz enzim és gén-polimorfizmusának szerepe az endogén adaptációban és a posztkondicionálás folyamatában kísérletes és klinikai vizsgálatok során Az iszkémiás posztkondicionálással kiváltható védelem a ma ismert leghatékonyabb celluláris endogén védelmi mechanizmus az I/R károsodásokkal szemben. Az elmúlt évtizedben a jelenség vizsgálata a kardiovaszkuláris kutatások egyik kiemelt területévé vált, hatékonyságát és mechanizmusát kísérletes körülmények között számos tanulmány igazolja. A glutathion-s-transzferáz (GST) antioxidáns enzim aktivitása nagyban meghatározza a sejtek oxidatív stresszre adott gyulladásos és adaptív válaszát, valamint fontos szerepet tölt be az iszkémiás posztkondicionálás során. A GST legfőbb szerepe az oxidatív stressz során keletkezett káros termékek redukált glutationnal történő konjugálása, így kevésbé toxicus termék létrehozása. A GST enzim három fő csoportja különböztethető meg, melyek közül a citoszólban jelenlevő GST enzim jelentős szerepet tölt be az oxidatív stresszel szembeni védelem, sejtproliferáció, apoptózis irányításában. A GST családnak mai ismereteink szerint hét alcsoportja különböztethető meg (Mű, Pi, Téta, Alfa, Szigma, Omega és Zéta), melyek genetikai polimorfizmusa összefüggésbe hozható az oxidatív stresszel, gyulladásos folyamatokkal szembeni sejtszintű védekezés károsodásával. A tervezett vizsgálatok egy részében primer szívizom sejttenyészeten tanulmányozható a GST szerepe az oxidatív stresszel és az iszkémia-reperfúzióval szembeni védekezésében, valamint az intracelluláris jelátviteli utak szerepe az iszkémiás posztkondicionálás során. A munka további célkitűzése klinikai beteganyagon az I/R károsodás következtében kialakuló oxidatív és gyulladásos válaszfolyamatok kimutatása és ezek összefüggése a GST polimorfizmusával.ezen folyamatok részletesebb megismerése segíthet új diagnosztikus és terápiás stratégiák kifejlesztésében, melyek javíthatják az IR károsodás kimenetelét, csökkentve a betegek hospitalizációs idejét és annak költségeit. 8

9 Dr. Rőth Erzsébet Sebészeti Oktató és Kutató Intézet Sebészeti és traumatológiai beavatkozások kísérletes és klinikai vizsgálata különös tekintettel az oxidatív stressz és a cytokin egyensúly monitorozására Jól ismert, hogy az elmúlt évtizedben a minimálisan invazív sebészi technikák térhódításával a betegek műtéti megterhelése lényegesen csökkent, gyógyulásuk gyorsabb. Ez a jelenség azonban nemcsak a kisebb műtéti behatolással magyarázható, hanem a szervezet részéről fellépő gyulladásos válaszreakciók intenzitásának csökkenésével is. E mellett számos vizsgálat igazolja, hogy az endogén adaptáció csökkenésével párhuzamosan a műtéti megterhelést követően kialakul az oxidatív stressz állapota, melynek monitorozása humán vérmintákból jól reprodukálhatóan elvégezhető. Klinikai kollaborációban végzett vizsgálatok során a hallgató az operált betegektől meghatározott protokoll szerint gyűjtött vérmintákból sejteket izolálhat (leukocyták, thrombocyták) melyeknek szabadgyök termelése, illetve aggregációs képessége jól tükrözi az oxidatív stressz súlyosságát. E mellett spektrofotometriás, ELISA és flowcytometriás módszerekkel a lipidperoxidáció mértéke, illetve az antioxidáns enzimek mennyisége is meghatározható. Az aktivált sejtek alkalmasak a különböző jelátviteli utak tanulmányozására különös tekintettel a mitogén aktiválta protein kináz család (MAPK), az extracelluláris szignál regulálta kináz (ERK1/2), p38 mitogén aktiválta protein kináz foszforilációs szintjének meghatározására. A molekuláris biológiai módszerekkel kapott eredmények alapján a későbbi terápiás beavatkozásokhoz lehet támpontot nyerni. Dr. Koller Ákos Kórélettani és Gerontológiai Az iszkémia-reperfúzió és a perikardiális folyadék hatása a kisvénák és Intézet kis artériák vazomotor működésére Az iszkémia-reperfúzió a klinikai és az experimentális gyakorlatban nagyon sokszor előfordul. Igen gyakori többek között a vázizom és a szívizom esetében. Igen nagy energiát fordítanak világszerte a vaszkuláris károsodások mechanizmusainak a kutatására, mivel fontos klinikai jelentősége van. Az eddigi kutatások elsősorban a nagyobb erekre koncentráltak és kevesebb figyelem fordult az adott területeket ellátó kisebb artériák és vénák vazomotor működésváltozásaira. A szív felszínén futó erek közvetlenül ki vannak téve a perikardiális folyadéknak, mely kémiai összetétele jelentősen változhat iszkémia-reperfúzió során. Azonban, ezen területeken a kutatás nem számottevő. Alkalmazott módszerek: Vaszkuláris miográf segítségével különböző érterületek mikrométer átmérőjű kis artériáinak és vénáinak vazomotor működését vizsgáljuk (izometriás kontrakciós erő), illetve változó nyomás mellett az érátmérő változásait detektáljuk videomikroszkóp segítségével. Kutatjuk mind a receptoriális, mind az intracelluláris mechanizmusokat, amelyek a simaizom kontrakciós mechanizmusait szabályozzák. Emellett, tömegspektrometriát (MALDI), RT-PCR-t és Western-blot technikákat alkalmazunk a perikardiális folyadék és a vaszkuláris szövet biokémiai összetétel változásainak vizsgálatához. Dr. Menyhei Gábor Sebészeti Tanszék A műtét típusának és az érzéstelenítés módjának hatása a carotis endarteriectomiák eredményeire Számos magas szintű evidenciát nyújtó tanulmány bizonyította a carotis endarteriectomia jótékony hatását és előnyeit a stroke primér és szekundér prevenciójában. Ellentmondó adatok ismertek arról, hogy a műtét típusa (endarteriektomia folttal, folt nélkül, eversiós endarteriectomia) hogyan befolyásolja a műtét eredményességét, a különböző posztoperatív szövődmények arányát, valamint a restenosis gyakoriságát. Intézetünkben az utóbbi években kedvező tapasztalatokat szereztünk a locoregional anaesthesiában végzett carotis reconstructiókkal. A tervezett kísérletes és klinikai vizsgálatok során arra keressük a választ, hogy különböző érzéstelenítési és műtéti típusok mely kombinációjánál érhető el a legjobb klinikai eredmény. Vizsgálni kívánjuk azt is, hogy a 9

10 műtéti szövődmények arányát hogyan befolyásolja az érzéstelenítés módja a különböző életkorú betegcsoportokban. További tisztázandó kérdés, hogy a műtét alatti carotis-kirekesztés időtartama befolyásolja-e a műtét kimenetelét, szövődményarányát. Ennek a kérdésnek a vizsgálatára intraoperatív oxymetriás méréseket is tervezünk. Prospektív klinikai tanulmánnyal kívánjuk elemezni a műtét típusának késői restenosisra kifejtett hatását. Dr. Battyáni István Radiológiai Klinika Modern képalkotó diagnosztikai eljárások kísérletes és klinikai vizsgálata, különös tekintettel a dual source CT alkalmazására A CT, MRI és ultrahang diagnosztika a rohamos technikai fejlesztésnek köszönhetően, egyre újabb perspektívákat nyitottak a betegségek diagnosztikájában. Az új technikáknak köszönhetően, nem csak a vizsgálatok indikációs területei bővülnek folyamatosan, hanem az új vizsgálati lehetőségek megteremtésével, a gyógyításban is egyre eredményesebben használhatók fel. A tervezett klinikai vizsgálatok az u.n. dual source dual energiás CT berendezés adta diagnosztikai előnyök elemzését tűzik ki célul, elsősorban a tüdő és máj betegségeiben, valamint a daganatok non invazív differenciál diagnosztikájában. A új CT technika a dual energiás képalkotás alkalmas a szöveti differenciálásra, anyagmeghatározásra a jód atomok quantitative elkülönítésére ezzel a perifériás artériák állapotának pontos vizsgálatára, az artériában kialakuló plakkok feltérképezésére és a szöveti perfúzió megítélésére. A vizsgálat előnye a korábi technikáknál alacsonyabb sugárterhelés, és az igen gyors adatgyűjtési idő a korábbi technikákkal szemben. A programot választó hallgatónak alkalma lesz megismerkedni a legújabb CT technikák nyújtotta előnyökkel, a legújabb targeting és combo technikák alkalmazásával, és a non-vascularis intervenciós radiológiai beavatkozások hatékonyságát fokozó ultrahang mágneses navigációs rendszerrel. Dr. Battyáni István Radiológiai Klinika Kontrasztanyagok klinikai értéke és új alkalmazásai a képalkotó diagnosztikában A klinikai képalkotó diagnosztikában az egyes vizsgáló módszerek érzékenységét és klinikai alkalmazhatóságát nagymértékben meghatározzák a kontrasztanyagok. A képalkotó diagnosztika specifikussága és szenzitivitása egy adott betegségre, vagy betegségcsoportra egyre inkább fontossá válik, mely napjainkban a specifikus kontrasztanyagok, valamint a molekuláris szintű képalkotás révén valósulhat meg. A képalkotó diagnosztikában ilyen kontrasztanyagokat használhatunk a röntgen diagnosztikában, az ultrahang diagnosztikában és az MRI diagnosztikában egyaránt. A legújabb kutatási eredmények alapján a kontrasztanyag molekulák egyes tulajdonságai különböző biológiai válaszra késztetik az élő szervezetet, mely kockázatot is jelent az egyénre. Ezért a kockázatok csökkentését célzó klinikai vizsgálatok hozzájárulnak a kontrasztanyagok biztonságos alkalmazásához. Az altémában azoknak a kutatásoknak szeretnék teret adni, melyek újabb molekulák speciális kontrasztanyagként történő vizsgálataira, és a klinikai alkalmazás számára már elérhetővé vált kontrasztanyagok további alkalmazási és biztonsági vizsgálataira irányulnak a CT, UH és MRI diagnosztika területén. Dr. Ferencz Andrea Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A gasztrointestinális rendszer keringéspathológiájának klinikai vonatkozásai és kísérletes vizsgálata A gasztrointestinális rendszerdszerben (GIR) számos ischémia/reperfúzióra (I/R) érzékeny szerv (máj, pancreas, vékonybél, vastagbél) található. A splachnikus terület perfúziós nyomásának csökkenése számos folyamatot generál, melyek során kialakuló mikrocirkuláció zavarok különböző súlyosságú oxidatív stressz kialakulásához vezethetnek. A program széles körű lehetőséget ad arra, hogy kísérletes körülmények között olyan állatmodelleket hozzunk létre, melyekben tanulmányozhatjuk a GIR pathológiás keringésének sejtszintű és molekuláris következményeit. A biokémiai és hisztológiai vizsgálatokon 10

11 túl a szignáltranszdukciós útvonalak működésének, a transzkripciós faktorok aktivitásának és a védelmi rendszer kiépülésének folyamatát lehet tanulmányozni. Humán vizsgálatok során lehetőség van a betegekből vett szövetminták biokémiai, szövettani és molekuláris biológiai feldolgozására. Továbbá állatkísérletekben alkalom nyílik különböző, a humán gyakorlatban már alkalmazott vagy bevezetés alatt álló gyógyszerek kipróbálására és a GIR-re kifejtett hatásának tanulmányozására. Dr. Ferencz Andrea Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A szervtranszplantációt követő premalignus és malignus bőrtumorok kísérletes és klinikai vizsgálata különös tekintettel a oxidatív stressz paratéterekre és jelátviteli utakra A szervátültetések után alkalmazott immunszuppresszív kezelés fokozza a daganatos betegségek kialakulásának rizikóját. A transzplantált betegeknél a bőrtumorok incidenciája közel 8-10-szeresére nő a normál populációban előforduló bőrdaganatokhoz képest. A kutatás során a gondozás alatt álló vese-, hasnyálmirigy-, és vese/hasnyálmirigy kombinált transzplantáción átesett betegek bőrgyógyászati szűrővizsgálatát kívánjuk elvégezni. Vizsgálni kívánjuk a betegek perifériás vérmintáiban a különböző oxidatív stressz és gyulladásos paramétereket, az apoptosis mértékét, valamint a szövetminták korszerű hisztopathológiai feldolgozását és a tumormarkek követését. In vitro primer cutan melanoma és ennek metasztatikus nyirokcsomójából sejttenyészeteket kívánunk létrehozni, ahol a sejtek növekedését, invázióját, DNS károsodás mértékét, valamint az apoptózis jelátviteli útjainak (MAP kinázok, PKC, cleaved caspase-3) vizsgálatát tervezzük. Dr. Jancsó Gábor Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A celluláris endogén adaptációs válaszmechanizmusok kísérletes és klinikai vizsgálata Az akut verőérelzáródás okozta szöveti ischaemia és ezt követő szövetelhalás megelőzésére és kezelésére irányuló törekvések alapvető fontosságúak az orvosi kutatásokban. A miokardium iszkémiás prekondicionálása és posztkondicionálása a szív rendkívül fontos adaptációs mechanizmusa, mely hatékonyan fokozza a miokardium stressztoleranciáját. Perifériás szöveteken (vázizom, vese, máj, bélszövet) a pre-és posztkondicionálás hatása és mechanizmusa még kevésbé ismert, klinikai jelentősége sebészeti kórképekben jelentős lehet. Kutatásaink során az adaptációs mechanizmusok komplex folyamatát, és a klinikai alkalmazásának lehetőségeit vizsgáljuk. A program során a miokardium vizsgálatára lehetőség nyílik nyitott és zárt mellkasú (perkután transzlumináris koronária angioplasztika technikával) állatmodell elkészítésére, valamint az endogén adaptáció sejtszintű, molekuláris folyamatainak (szignáltranszdukció, transzkripciós faktorok aktivációjának) vizsgálatára sejtkultúrában. Humán betegekből vett vér, illetve szövetmintákban vizsgálható a reperfúziós folyamatok lefolyása, súlyossága. Állatkísérletes modellekben, illetve sejtkultúrában vizsgálhatók a különböző már a klinikumban használt, illetve új fejlesztésű gyógyszereknek a sejtek adaptációját befolyásoló hatása. Dr. Jancsó Gábor Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A központi idegrendszer iszkémiás-reperfúziós károsodásának vizsgálata Az artéria carotison végzett sebészi beavatkozásokat követően még gondos preoperatív kivizsgálás esetén viszonylag magas a központi idegrendszeri hipoxiás-reperfúziós károsodások kockázata. Kutatásaink célkitűzése egyrészt meghatározni azt a regionális szaturációs (perfúziós) határértéket, illetve intervallumot, amely esetében a sebészi beavatkozások során még nem alakul ki neurológiai deficit, illetve biokémiai paraméterekben sem detektálható neuronális károsodás. Másik célkitűzésünk biokémiai vizsgálatok, illetve funkcionális tesztek segítségével összehasonlítani az általános anesztézia, valamint 11

12 a regionális anesztézia mellett végzett carotis endarteriectomiák posztoperatív szövődményeit. A kialakuló neuronális károsodásokat biokémiai vizsgálatokkal, funkcionális cognitív tesztekkel, és klinikai neurológiai státusz meghatározásával értékeljük. Plazmából vizsgáljuk a Neuron Specific Enolase, Endothelin, Platelet Derived Growth Factor Hypoxia inducible factor (HIF)1-alpha szintjének változásait. Cognitív teszteket (reakcióidő, rövidtávú memória), és neurológiai státusz (afázia, érzés-, mozgászavar) rögzítését a pre- és posztoperatív szakban hosszútávú követéssel végezzük. Dr. Jancsó Gábor Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A diabetes mellitus és az inzulin hatása az iszkémiás-reperfúziós károsodásokban A cukoranyagcserére gyakorolt hatásain kívül az inzulinnak számos sejtvédő hatása ismert. Csökkenti az oxidatív stressz indukálta szabadgyökprodukciót, mérsékeli a thrombociták aggregábilitását, valamint receptoron keresztül prekondicionálást indukál, amely növeli a sejtek iszkémia toleranciáját. Kutatásaink során vizsgálni kívánjuk diabéteszes betegeken a preoperatív adott inzulin kedvező keringésprotektív, illetve általános sejtvédő hatásait. Összehasonlítjuk az inzulin, valamint az orális antidiabetikum kezelésben részesült betegek perioperatív kardiológiai, illetve általános műtéti terhelését. A perioperatív szakban a kardiológiai státusz hemodinamikai paraméterekkel detektáljuk /flow-mediált vazodilatáció (FMD); szisztolés-diasztolés nyomás szívfrekvencia cardiac output, végdiasztolés nyomás, dp/dt, EKG/. Az általános műtéti terhelést az oxidatív stressz markerek, és a leukocita aktiváció mértékének meghatározásával végezzük. Vizsgálataink eredményei az anesztézia vezetésének és a perioperatív szak inzulinterápiájának optimális tervezésével biztonságosabbá tehetik a cukorbetegek műtéti körülményeit, illetve nagy mértékben csökkenthetik ezen betegeknél a sebészeti beavatkozások kardiovaszkuláris szövődményeit. Dr. Jancsó Gábor Sebészeti Oktató és Kutató Intézet Szöveti keringésváltozással járó sebészeti beavatkozások klinikai és kísérletes vizsgálata A sebészeti kórképek és beavatkozások során kialakuló szöveti iszkémia-reperfúzió indukálta folyamatok megismerése alapvető fontosságú a következményes szövődmények kivédése, elkerülése céljából. A sebészeti beavatkozásokat követő iszkémiás-reperfúziós károsodások a szöveti iszkémia időtartamától, az érintett szövetek mennyiségétől, és a szervezet általános állapotától függően befolyásolják a műtéti szövődmények kockázatának kialakulását. Bár az elmúlt évtizedekben a műtéti technika igen jelentős fejlődésen ment keresztül, a fejlett ipari országokhoz hasonlóan a civilizációs betegségek (diabétesz, hipertónia, ateroszklerózis) incidenciájának exponenciális növekedése a hazai érsebészetet is egyre komolyabb kihívás elé állítja. A betegek alacsony prevenciós compliancéja miatt a már előrehaladott stádiumú betegek esetében a korszerű technikák mellett is a szövődmények gyakorisága növekszik. A szöveti keringészavarral járó műtéten átesett betegek esetében a tartós szöveti iszkémia, és az azt követő jelentősen javult (a műtét előttihez képest jóval nagyobb volumenű) reperfúzió miatt kifejezetten jelentkeznek a sejt és szöveti szintű iszkémiás-reperfúziós károsodások. Ezek a folyamatok az intracelluláris antioxidáns-prooxidáns egyensúly felborulásához, következményes oxidatív stressz kialakulásához, és szöveti szinten különböző mértékű, leukociták által mediált gyulladásos válaszreakciókhoz vezetnek. Ezek a kórélettani folyamatok a beavatkozások döntő többségében szubklinikai formában zajlanak, a klinikumban használt diagnosztikával nem mutathatók ki. Azonban ezek a gyakorló orvos számára felszín alatti folyamatok nagymértékben befolyásolják a szövetek mikrocirkulációját, gyógyulását és így a műtéti szövődmények kialakulásának kockázatát. 12

13 Dr. Lantos János Sebészeti Oktató és Kutató Intézet A mátrix metalloproteinázok és szöveti inhibitoraik szerepének vizsgálata ischaemia-reperfúziós kórképekben A mátrix metalloproteinázok (MMP) és szöveti inhibitoraik (TIMP) szerepe mind az ischaemia-reperfúziós károsodásban, mind az azt követő gyulladásos válasz kialakulásában valószínűsíthető. A klinikai együttműködésben tervezett munka lehetőséget nyújt az MMP-TIMP rendszernek az újraélesztés kapcsán kialakult generalizált, valamint hosszan tartó végtagi ischaemiával járó, primeren lokális ischaemia-reperfúziós kórállapotokban játszott szerepének vizsgálatára. Lehetőség nyílik a fenti paraméterek klinikai státusszal és a hagyományos laboratóriumi paraméterekkel történő összehasonlítására is. A tervezett vizsgálatok várható elméleti és gyakorlati jelentősége, hogy az egyes folyamatokban mutatkozó specifikus MMP-TIMP aktiválódás ismerete segíthet a későbbiekben a célzott terápiás lehetőségek kimunkálásában. Dr. Lantos János Sebészeti Oktató és Kutató Intézet Oxidatív stressz, leukocita és trombocita aktiváció vizsgálata szeptikus betegek kiegészítő szelén kezelése során A szepszis a szervezet szisztémás gyulladásos válaszreakciója, melyet a reaktív szabadgyökök felszaporodása, a fehérvérsejtek, trombociták és endothel sejtek aktiválódása és a plazma szelén szint csökkenése kísér. A program keretén belül az oxidatív stressz és leukocita aktiváció változása vizsgálható szeptikus betegek kiegészítő szelén kezelése során, mely várhatóan javítja a szervezet antioxidáns státuszát. A PhD hallgató betegektől származó vérmintákban vizsgálhatja a scavenger enzimek aktivitásának változását, a lipidperoxidáció mértékét, az endogén antioxidáns rendszer mennyiségi viszonyait, a teljes vér stimulált gyöktermelését, valamint a trombociták funkcióját. A program lehetőséget teremt továbbá, a kóros vaszkuláris reakciókért felelős sejtek adhéziós receptorai expressziójának tanulmányozására, valamint a sejtek közti kommunikációban jelentős szereppel bíró pro- és antiinflammatórikus citokinek plazma szintjének mérésére is. Lehetőség nyílik továbbá a fenti paraméterek klinikai státusszal és a hagyományos laboratóriumi paraméterekkel történő összehasonlítására is. A tervezett vizsgálatok várható jelentősége, hogy a szervezet oxidatív egyensúlyának, a leukociták, a trombociták aktivált állapotának nyomon követésével megítélhető a szeptikus betegek kiegészítő szelén kezelésének hatékonysága. Dr. Lantos János Sebészeti Oktató és Kutató Intézet Az immunonutríció hatásának vizsgálata a politraumás betegek immunválaszára az oxidatív stressz, a leukocita és trombocita aktiváció tükrében Intenzív terápiás kezelést igénylő számos kórképben közös tényező a szervezet szisztémás gyulladásos válaszreakciója, melyet a reaktív szabadgyökök felszaporodása, a fehérvérsejtek, trombociták és endothel sejtek aktiválódása kísér. A program keretén belül a politraumát szenvedett betegek táplálásában egyre elterjedtebben alkalmazott immunerősítő diéták hatékonysága vizsgálható az oxidatív stressz és leukocita aktiváció nyomon követésével. A jelölt betegektől származó vérmintákban vizsgálhatja a scavenger enzimek aktivitásának változását, a lipidperoxidáció mértékét, az endogén antioxidáns rendszer mennyiségi viszonyait, a teljes vér stimulált gyöktermelését, valamint az izolált trombociták, illetve azok teljes vérben meghatározható aggregációs hajlamát a terápiás beavatkozás során. A program lehetőséget teremt továbbá, a kóros vaszkuláris reakciókért felelős sejtek adhéziós receptorai expressziójának tanulmányozására, valamint a sejtek közti kommunikációban jelentős szereppel bíró pro- és anti-inflammatórikus citokinek plazma szintjének mérésére is. A 13

14 klinikai együttműködésben végzett vizsgálat során lehetőség nyílik a fenti paraméterek klinikai státusszal és a hagyományos laboratóriumi paraméterekkel történő összehasonlítására. A tervezett vizsgálatok várható elméleti és gyakorlati jelentősége, hogy a politraumát szenvedett betegek új típusú táplálásával várhatóan csökkenthető a szepszis, a SIRS és a többszervi elégtelenség előfordulása, valamint újabb adatok nyerhetők a betegek immunfunkcióit javító táplálás hatásmechanizmusáról is. B Kísérletes cardiológia programvezető: Dr. Tóth Kálmán Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika Az atherosclerosis folyamatának lassítása PARP-gátlókkal és scavenger molekulákkal A cerebro- és cardiovascularis betegségek közös pathogenetikai alapja az atherosclerosis. Ismert, hogy mind az atherosclerosis kezdeti lépésének számító endothel dysfunctio kialakulásában, mind a folyamat progressziójában központi szerepet játszik az oxidatív sejtkárosodás. A scavenger hatású SODmimeticumok és természetes polyphenolok, illetve az antioxidáns hatású, de a jelátviteli folyamatokra is lényegi hatással bíró PARP-gátlók védő hatását kívánjuk vizsgálni az atherosclerosis kialakulásával szemben állatmodellben. Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika Oxidatív stressz hatása a vér és vérsejtek tulajdonságaira. Az antioxidánsok védő hatásának vizsgálata Számos betegség kialakulásában játszik szerepet az oxidatív károsodás. Ezek a folyamatok a vérsejteket sem kímélik, így ha megfigyeljük a vérsejtek tulajdonságaiban bekövetkező változásokat, következtethetünk az oxidatív stressz mértékére. Legmarkánsabban a vörösvérsejtek deformálhatósága romlik, ezt filtrációval és ektacitometriával számszerűsítjük. Keressük az oxidatív károsodás modellezésére alkalmas egyéb paramétereket is. Ha az oxidációindukciót bizonyos anyagok jelenlétében végezzük, a károsodás részben kivédhető, így a modell segítségével az ilyen anyagok protektív antioxidáns hatását is mérjük. Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika Vörösvérsejt deformabilitás mérése ektacitometriával. Módszertani felvetések A hemoreológia a vér globális áramlási tulajdonságain felül az egyes alkotók egyedi tulajdonságait is vizsgálja. Az ektacitometria a vörösvérsejtek deformabilitásának jellemzésére alkalmas módszer. A mérés során meghatározzuk, hogy különböző, ismert nagyságú nyíróerők mekkora alakváltozást okoznak a sejteknél. Az eredményeket nem csak az intakt sejt fizikai tulajdonságai határozzák meg, hanem a sejtekkel való manipulációk okozta változások és a mérés körülményei is torzíthatják. A kutatás célja, hogy a módszertani csapdákat felderítsük. Olyan méréstechnikai sztenderdeket akarunk felállítani, melyek mellett az eredmények torzulása minimális. Emellett transzformációs eljárásokat is keresünk, melyek segítségével a különböző körülmények közt végzett mérésekből származó eredmények összehasonlíthatóak. 14

15 Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika Anthracyclin származékok cardiotoxicitásának kivédése PARPgátlókkal és scavenger molekulákkal A doxorubicin akut és rövid idejű adagolásakor fellépő myocardialis károsodásokat tanulmányozzuk, különös tekintettel az oxidatív szívkárosodás markereire, a szív funkcionális teljesítményére és az energia metabolizmusra. A kedvezőtlen reakciókat PARP-gátlókkal illetve antioxidáns tulajdonságú vegyületekkel kívánjuk kivédeni, majd a szívminták Western blot analízisével a MAP-kináz rendszer (ERK, JNK, p38-mapk), valamint a PI3K Akt jelátviteli útvonal aktivitását határozzuk meg. Ezek a kísérletek a doxorubicin terápia cardialis mellékhatását mérsékelni képes molekulák kifejlesztését célozzák. Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika PARP-gátlók, SOD-mimeticumok, illetve természetes polyphenolok Dr. Halmosi Róbert hatásának vizsgálata kísérletes szívelégtelenség modellekben A gazdaságilag fejlett országokban a szívelégtelenség prevalenciája egyre magasabb és a jelen terápiás lehetőségek mellett is magas a betegség mortalitása. Emiatt intenzív kutatások folynak újabb terápiás célpontok azonosítására. A szívelégtelenség modellezése patkányon különböző módszerekkel lehetséges. A LAD-ligatio regionális, isoproterenol subcutan alkalmazása pedig, diffúz subendocardialis myocardialis infarctust okoz, aminek hatására csökken a szív systoles funkciója. Nyomásterhelés miatt alakul ki szívelégtelenség spontán hypertenzív patkányokon, illetve aortaszűkítő beavatkozások (banding) után, ugyanakkor diffúz szívizom károsodást okozhatnak bizonyos cardiotoxicus vegyületek is, mint például az anthracyclin származékok. Meg kívánjuk határozni tehát, hogy a PARP-gátlók milyen molekuláris mechanizmussal képesek gátolni a krónikus szívelégtelenség progresszióját. Vizsgáljuk továbbá a scavenger hatású SOD-mimeticumok és természetes polyphenolok hatását szívelégtelenség modelleinkben, illetve ezen molekulák hatásmechanizmusát. Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika PARP-gátlók hatásának elemzése cardiomyocyta sejtkultúrában, izolált Dr. Halmosi Róbert szívperfúziós és in vivo coronaria ligációs modellen Tanulmányozzuk, hogy egyes poli(adp-ribóz) polimeráz gátló vegyületek milyen molekuláris mechanizmussal képesek a myocardium ischaemiareoxigenizáció okozta károsodását kivédeni. A PARP-gátlók hatását cardiomyocyta sejtkultúrában (hidrogén-peroxid okozta oxidatív stressz), izolált szívperfúziós és in vivo coronaria ligációs modellen (ischaemia-reperfúzió okozta oxidatív stressz) fogjuk elemezni. Vizsgáljuk az így létrehozott oxidatív stressz hatását a myocardium energia metabolizmusára, a szív funkcionális teljesítményére, a kialakuló infarktus nagyságára, a fehérje oxidációra, valamint a lipid peroxidációra. A fenti kísérletek során nyert sejt-, illetve szövetminták Western blot analízisével vizsgálni kívánjuk a MAP-kináz rendszer (ERK, JNK, p38-mapk), valamint a PI3K Akt jelátviteli útvonal aktiválódását és az alkalmazott vegyületek erre gyakorolt hatását. Az ischaemia-reperfúzió által beindított gyulladásos folyamatokkal kapcsolatban az NF-κB, Cox-2, inos enzimek működését és a gyulladásos citokinek felszabadulását vizsgálnánk a gyógyszeres kezelés vonatkozásában. Az intracelluláris jelátviteli folyamatok elemzése az említett oxidatív stressz modellekben a PARP-gátlók hatásmechanizmusának eddig még feltáratlan aspektusait világíthatja meg. Dr. Tóth Kálmán Dr. Késmárky Gábor I. sz. Belgyógyászati Klinika Hemoreológiai paraméterek alakulása klinikai betegcsoportokban. Diagnosztikai és prognosztikai megfontolások A vér áramlási tulajdonsága, a vérsejtek jellemzői számos megbetegedés kapcsán eltérnek a normálistól; néha ezek a változások felelnek a tünetek előidézéséért, máskor csak kofaktorai a betegség kialakulásának. A hemoreológiai paraméterek értékes segítséget nyújthatnak a rizikóbecslésben és a 15

16 differenciáldiagnosztikában. Laboratóriumunkban különböző betegcsoportok hemoreológiai felmérését végezzük (plazma és teljes vér viszkozitás, vörösvérsejt deformabilitás és aggregáció, vérlemezke aggregáció), a kapott eredményeket más klinikai paraméterekkel vetjük össze. Újonnan képzett mutatók, pl. a vér oxigénszállító kapacitását jellemző hematokrit/vérviszkozitás arány használhatóságát is vizsgáljuk. Dr. Tóth Kálmán I. sz. Belgyógyászati Klinika Az intracellularis jelátvitel vizsgálata szívizom ischaemia-reperfusio során Langendorff perfusios rendszerben, illetve in vivo akut myocardialis infarctus modellben. Új terápiás targetek azonosítása Az endoplasmaticus reticulum (ER) egy multifunkcionális sejtalkotó, mely a fehérjék termeléséért, a fehérje foldingért, a kálcium tárolásért és a jelátvitelért felelős. Az ER működészavarai UPR-hez (nem hajtogatott fehérjeválaszhoz) vezetnek, ami magában foglalja a fehérjeszintézis gátlását, a fehérjék újra hajtogatódását és a rossz konformációjú (misfolded) fehérjék eltávolítását. Az UPR igyekszik fenntartani a sejt homeosztázisát, de az hosszú ER stressz apoptosist indukál. Az ER stressz-indukálta apoptosis sok betegség kialakulásában játszik szerepet (ischaemia/reperfusio, diabetes, szívelégtelenség, neurodegeneratio). A szívben a fehérje oxidáció, az ischaemia-reperfusio során zavart szenvedett kálcium anyagcsere, illetve szívelégtelenségben a fokozott fehérje szintézis vezethetnek UPR-hez és apoptosishoz. Az ER chaperonok XBP-1 és ATF6 által közvetített indukciója protektívnek tűnnek ischemia/reperfusios károsodással szemben. Az ER stress-indukálta szívizomsejt apoptosis pontos mechanizmusa még nem ismert, de a PUMA (a Bcl-2 család proapoptoticus tagja) aktivációja fontos szerepet játszik mindebben. A PUMA gátlása előnyös lehet tehát az oxidatív sejtkárosodás kivédésében. A A gyermekkori diabetes mellitus epidemiológiája, immunológiája programvezető: Dr. Soltész Gyula Dr. Soltész Gyula Gyermekklinika Diabetes a gyermek- és fiatalkorban -Az 1-es és 2-es tipusú diabetes epidemiológiája - Az 1-es tipusú diabetes micro- és macrovasculáris szövődményei -Az 1-es tipusú diabetes geno és phenotypusának összehasonlitása -1-es tipusú familiaris diabetes -Populációs szűrővizsgálatok 2-es tipusú diabetesben -Modern insulin-kezelés 1-es tipusú diabetesben. B Daganatok molekuláris epidemiológiája programvezető: Dr. Ember István Dr. Ember István Orvosi Népegészségtani Intézet Daganatok molekuláris epidemiológiája A karcinogenezis többlépcsős molekuláris folyamataiban résztvevő környezeti kémiai karcinogének molekuláris epidemiológiai hatásainak elemzése mind genotoxikus, mind epigenetikus karcinogének expozíciója esetén, elsősorban állatkísérletben. A karcinogenezis különböző lépéseihez rendelhető primer prevencióban, így a kemoprevencióban is alkalmazható biomarkerek fejlesztése és vizsgálata főleg molekuláris alapon, elsősorban a daganatos fenotípus és tünetek megjelenése előtt. Vizsgálni a kemoprevenció lehetőségeit, modellezni, a humán kiterjesztés lehetőségét alkalmazni. A célzott fejlesztések közé tartozik a mirns és sirns-ek vizsgálata, chip-technikák alkalmazása a vizsgálatok során. A rosszindulatú daganatos betegségek szekunder prevenciójában 16

17 fehérjeszintű vizsgálatok alkalmazása különböző lokalizációjú tumorokban olyan antitestekkel (pl. MENA), amelyek a jelenleg ismert diagnosztikai lehetőségeknél már lényegesen korábban pozitívvá válhatnak epithelialis tumorokban. Végül, de nem utolsósorban a metasztázisok megelőzésében fontos a molekuláris markerek vizsgálata, elsősorban emésztőszervi, légúti, fej-nyaki daganatokban, különös tekintettel a markerek prediktív értékeire. Egyáltalában fontos, hogy megfelelő valid epidemiológiai adatbázissal rendelkezzünk a daganatokat illetően is és a környezeti faktorokként az egyre fontosabb szerepet játszó szocio-kulturális, oktatási és pszichés okok is feltárásra kerüljenek a megelőzésben. Dr. Ember István Orvosi Népegészségtani Intézet Történelem-egészségtan A magyarság (magyar nemzet) rossz népegészségügyi mutatói, oldódó epidemiológiai és elhúzódó demográfiai krízise a kiváltó okok feltárása kapcsán, az eddig ismert tényezők mellett a magyar történelem (elsősorban XX. századi) negatív hatásai voltak azok, amelyek magyar specifikumként explorálhatók a hasonló szociális, kulturális hátterű európai, illetve közép-európai országok között. Ezen tényezők vizsgálata szociális epidemiológiai, térinformatikai és hagyományos epidemiológiai módszerekkel ad új információkat Magyarország, illetve az ország határain túl is elhelyezkedő magyar nemzet népegészségügyi mutatóinak jellemzésében. B Táplálkozástudományi vizsgálatok gyermekkorban programvezető: Dr. Molnár Dénes Dr. Molnár Dénes Gyermekklinika Intervenció hatása a gyermekkori elhízásra és a cardiovasculáris rizikótényezőkre európai és magyar gyermekpopulációban Európai és magyar gyermekek körében az iskolákban, családban és környezetben indított intervenciós tevékenység hatását kívánjuk felmérni az életmód változására, az egészségtudatos magatartásra és ennek hatását az elhízás és a cardiovascularis rizikótényezők alakulására. Vizsgálni kívánjuk az intervenció hatását táplálkozásra (gyümölcsfogyasztás, zöldségfogyasztás, vízfogyasztás), a fizikai aktivitás, illetve inaktivitás alakulására. A vizsgálatba bevont gyerekek száma európai szinten 17000, magyar vonatkozásban Vizsgálni kívánjuk az intervenció hatásosságát befolyásoló tényezőket: szocioökonómiai tényezők, szűkebb és tágabb környezeti hatások. Dr. Molnár Dénes Gyermekklinika Gyermekkori elhízás kialakulásának és szövődményeinek okai: genetikai és környezeti okok A kutatás saját gondozott betegeink - a régió gyermekkórházainak bevonásával - valamint a jelenleg is folyó kettő Európai Uniós pályázat során bevont kb gyermek adataiból, biológiai mintáiból fog történni. A vizsgálatok magukba foglalják a cardiovascularis rizikófaktorok, metabolikus syndroma gyakoriságának vizsgálatát 2-16 éves gyermekekben. Energia felvételi és leadási vizsgálatok és a táplálékfelvétel szabályozásában részt vevő újabb hormonok vizsgálata anorexiás és elhízott gyermekekben, egyes kandidátus gének szerepének vizsgálata a gyermekkori elhízásban. 17

18 Dr. Molnár Dénes Gyermekklinika Cardiovascularis rizikótényezők előfordulása magyar és európai gyermek populációban Multicentrikus európai vizsgálat során nyert adatok elemzése (17000 európai, 2600 magyar gyermek). A vizsgálat során egy gyermekkorban is könnyen alkalmazható cardiovascularis rizikó becslésére alkalmas pontozási rendszert kívánunk kialakítani, mely részben a családban előforduló cardiovascularis betegségek, illetve rizikófaktorok előfordulásán, valamint individuális adatokon (intrauterin fejlődés, korai csecsemőkori fejlődés és táplálás stb.) alapszik. Dr. Molnár Dénes Gyermekklinika Elhízás és diabetes mellitus genetikai hátterének vizsgálata gyermekekben Az elhízás és diabetes mellitus multifaktoriális megbetegedések, melyeknek ismert genetikai heterogenitása. A program célja mindkét betegség esetén a különböző gén-gén és gén-környezet interakciók vizsgálata molekuláris genetikai módszerekkel. További cél a diabetes mellitus ritkább, monogénes formái, leginkább a MODY (maturity onset diabetes of the young) genetikai vizsgálata. A gyermekkori elhízás és diabetes prevenciója elsődleges cél, népegészségügyi szempontból is, ezért jelen programban is kifejezetten előtérbe kívánjuk helyezni a prevencióra irányuló vizsgálatokat, így a csecsemőkori környezeti hatások, nutricionális és maternális tényezők analízisét, valamint a genetikai és metabolikus interakciók szerepét. Dr. Csábi Györgyi Gyermekklinika A táplálkozás zavarai gyermekkori neuropszichiátriai kórképekben A táplálkozás zavarai gyakran mutatnak komorbiditást neurodevelopmentális vagy pszichoreaktív kórképekkel. Ismertek olyan adatok, amelyek összefüggést tártak fel a kóros elhízás ill. alultápláltság és a kognitív funkciók között. A táplálkozás zavarainak tanulmányozása az utóbbi évtizedekben fokozott jelentőséget nyert, mivel az evészavarok gyakorisága emelkedő tendenciát mutat. A téma feldolgozása során a hallgató gyermekkori neuropszichiátriai kórképekben vizsgálja az evészavarok különböző típusainak megjelenését, tanulmányozza a vizsgált jelenségek klinikai sajátosságait és klinikai epidemiológiai jellemzőit. Tervezzük az obesitas és kóros alultápláltság kognitív funkciókra kifejtett hatásának vizsgálatát. Terápiás lehetőségek vizsgálatára is lehetőség van a téma keretében. B 2/2004 A myocardium ischaemiás és non-ischaemiás károsodásának klinikai, morfológiai, immunológiai és molekuláris biológiai mechanizmusai. Új diagnosztikai és terápiás lehetőségek a szívsebészetben és szívgyógyászatban. programvezető: ideiglenesen Dr. Rőth Erzsébet Dr. Rőth Erzsébet Sebészeti Oktató és Kutató Intézet Az endogén adaptációt indukáló posztkondicionálás kísérletes és klinikai vizsgálata Az endogén adaptáció indukálásának az utóbbi években egyik legkutatottabb területe az u.n. posztkondicionálás. Ennek lényege, hogy az előzően hipoxiás, iszkémiás szöveteket a teljes reperfúzió megindítása előtt rövid iszkémiás,(10-15 sec.) és reperfúziós (2-3 perc) ciklusok előzik meg. A védő hatás 18

19 kialakulása az adott célszerv (szív, tüdő, máj, vese) funkcionális és morfológiai vizsgálatával igazolható. Kísérletes munka során altatott nyulakon, illetve sertéseken torténik a modell létrehozása, a vizsgálni kívánt szerv kipreparálásával., majd 1-2 órás iszkémiat követően a reperfúzió megindítása elött a posztkondicionáló ciklusok alkalmazásával. Vérminták és szövetminták egyaránt rendelkezésre állnak a biokémiai és molekuláris biológiai kiértékeléshez (flow cytometer, ELISA technika, Western blot). Klinikai kollaboráció kialakítását követően (érsebészet, szívsebészet, transzplantációs sebészet) a betegektől megfelelő protokoll alkalmazásával vérminták gyüjthetők, melyekből az oxidatív stressz paramétereit, az endogén védelem státuszát jelző hősokk fehérjéket és az antioxidáns enzimek fehérjéit lehet meghatározni. Eredményes munka esetén javaslatot lehet tenni az eljárás klinikai alkalmazására. Dr. Koller Ákos Kórélettani és Gerontológiai A szuperoxid diszmutáz (SOD) és a H2S antioxidáns hatásának in vivo Intézet és in vitro vizsgálata Az oxidatív stressz, illetve annak kivédése számos egészséges és kóros folyamatban szerepet játszik. Az antioxidáns mechanizmusok egyik első és legfontosabb lépése a szuperoxid szabadgyök diszmutálása, így az antioxidáns mechanizmusok méréséhez a SOD aktivitásának a meghatározása standardként szolgál. Mivel az utóbbi időben a számos antioxidáns mechanizmus/szer között a természetesen előforduló kénhidrogénnek is szerepet tulajdonítanak, érdemes a kétféle szer (a SOD és a H2S) hatékonyságát többféle biológiai rendszerben összehasonlítani. In vitro mérések: Izolált érgyűrűkön miográf segítségével, illetve ugyancsak izolált érszakaszokon nyomás-miográf és videomikroszkóp segítségével vizsgáljuk az érfal simaizom kontrakciós erősségét az oxidatív stressz különböző szintjei mellett. A receptor-közvetítette mechanizmusokat receptorbénítókkal vizsgáljuk. A receptorokat immunhisztokémiai módszerekkel határozzuk meg. In vivo mérések: Az alkalmazott oxidáns/antioxidáns és a receptorok működését befolyásoló szereket altatott patkányoknak i.v. adagoljuk, és a vérkeringési paramétereiket monitorozzuk. Dr. Simor Tamás Szívgyógyászati Klinika Szívizom perfúzió, kamrai funkció és viabilitás vizsgálata szív-mri módszerrel iszkémiás szívbetegekben A kidolgozandó téma fő célkitűzése egy olyan nem invazív, utánkövetéses visgálatra alkalmas humán szív-mri módszer kifejlesztése, mellyel az iszkémiás szívbetegség diagnosztikájában rendkivül fontos szívizom perfúzió zavart és következményes bal kamrai funkció változást egyidejűleg lehet vizsgálni. A Magnevist (Gd(DTPA)) által indukált MRI szignál intenzitás (MRI SI) emelkedés a nem iszkémiás szívizomban és az MRI SI emelkedésének elmaradása az iszkémiás (hypoperfundált) régióban szolgáltatja a kialakuló MRI kontrasztot (MRI SI különbség az iszkémiás és nem iszkémiás régiók között). A multi-slice high resolution human perfúziós MRI technika jelenleg még nem kidolgozott. Ezért munkánk első célkitűzése egy olyan human MRI akvizíciós technika kialakítása, mely magas felbontóképességű képekkel mutatja az egész szívet ( multi-slice MRI ), s ez által pontosan vizualizálja a hypoperfundált szívizom régióját ( multi-slice, high resolution perfusion MRI ). A regionális bal kamra falmozgási rendellenességek kimutatása cine-mri technika segítségével lehetséges. A módszer kissé időigényes, mely miatt a néhány perces iszkémia okozta regionális szívizom falmozgási zavarok kialakulásának dinamikája nem vizsgálható. Jelen munka második célkitüzése tehát egy multi-slice, dual phase high resolution stress MRI technika kialakítása. Az új generációs MRI készüléken (mint a 1.5 T Siemens Vision) lehetőség van arra, hogy megfelő optimizálások elvégzése után megvalósítható a dual phase multi-slice, high resolution perfusion MRI technika is, mellyel a szívizom perfúzió és funkció szimultán vizsgálható. Jelen munka harmadik célkitűzése a dual phase multislice, high resolution perfusion MRI technika kialakítása, bevezetése a humán szív MRI metodikák sorába. A nem invazív szív-mri vizsgálat várható 19

20 előnye az, hogy a szívizom perfúziózavart és következményes bal kamrai funkcióváltozást egy vizsgálattal, szimultán, ugyanazon időben, mutatja. Az MRI vizsgálat lehetővé teszi továbbá, hogy szívmütétek előtti és utáni követéses vizsgálatok során elkülönítsük a nem perfundált, hypoperfundált, normál perfúzióval rendelkező akinetikus, hypokinetikus, normokinetikus és hyperkinetikus bal kamra izom szegmenteket, s így részletekbe menő kinetikai információt nyerjünk a szívizom stunning és hibernáció állapotváltozásairól, amely segít a szívmütétek előtti betegkiválasztásban, és a posztoperatív status megítésében egyaránt. Dr. Simor Tamás Szívgyógyászati Klinika Képalkotó eljárások szerepe a ritmuszavarok diagnosztikájában (noninvazív és invazív) és elektrotherápiájában A 3D térképező eljárások és az intracardialis echocardiográphia fejlődésével egyre szélesebb körben ismerik fel az arrhythmia mechanizmusa és az anatómiai viszonyok kapcsolatának fontosságát. Az intracardialis echocardiographia elektrofiziológiai felhasználása a szívüregi struktúrák azonosítására, az ezeken végzett katéteres térképezésre és manipulációra, a linearis és pontszerű radiofrekvenciás laesiók létrehozásának megfigyelésére és mérésére, a transseptalis punkció irányítására, valamint a beavatkozás közbeni szövődmények kivédésére terjed ki. Sokféle térképezési és katéternavigációs rendszer áll rendelkezésre, ezen rendszerekkel rögzíthető pontosan és reprodukálhatóan az elektrogramidő és amplitudó, lehetőség nyílik az elektrogram forrásának azonosítására: endocardialis, midmyokardialis, epicardialis vagy intracavitalis (pl. papillaris izom), létrejöhet a biztonságos navigáció, melynek során a szövettel való érintkezés felismerhető, az összetett geometria leírható ill mindezen tulajdonságok néhány arrhythmiás ütés alatt kivitelezhetők. Ezen térképező rendszerek alaklmazásával lehetővé vált az elektrofiziológiában MRI és CT 3D képek felvett elektroanatómiai térképekkel történő integrációja is. Dr. Cziráki Attila Szívgyógyászati Klinika Az asszimmetrikus dimetilarginin (ADMA) vizsgálata iszkémiás szívbetegekben Jelentős számú klinikai vizsgálat szignifikáns összefüggést igazol az emelkedett szérum ADMA szint és a major kardiovaszkuláris események előfordulása, valamint a mortalitás között. Így az emelkedett ADMA koncentráció egyszerre tekinthető rizikó tényezőnek, és a kardiovaszkuláris betegséget prognosztizáló markernek. Az ADMA által regulált vaszkuláris reaktivítás különösen fontos a koszorúér keringés szabályozásában. Az ADMA által mediált endotheliumdependens vazorelaxáció a femorális és renális artériákban még kifejezettebb, mint a koszorúerekben.az angiotensin convertáló enzim (ACE) az emberi szervezetben dominálóan a pulmonalis capillaris endothel felszínén expresszálódik. Jól ismert a renin-angiotensin-aldosteron (RAS) rendszer szerepe a kardiovaszkuláris szabályozásban. Bizonyított az ADMA adásával kiváltható ACE protein upreguláció egér myocitákban. Mindezek igazolják a kapcsolódást a szérum ADMA és a koronária, valamint pulmonális endothelhez kapcsolódó ACE között. Emelkedett ADMA serum koncentráció növeli az acut coronaria syndroma kialakulásának kockázatát. Korábbi vizsgálatainkkal igazoltuk, hogy a szérum ADMA szintje csökken koronária sztent implantáció után. Jelenlegi vizsgálatainkkal ezt a megfigyelésünket kívánjuk kiterjeszteni különböző típusú (on pump vs. off-pump) koszorúér áthidaló műtéten (CABG) átesett betegeken. Ezért ebben a projectben megvizsgáljuk CABG műtétre kerülő betegekben a perifériás vérből származó serum ADMA, a sinus coronariusból származó ADMA, valamint a pulmonalis endothelhez kötött ADMA és angiotensinii változását a perioperatív időszakban.. Dr. Cziráki Attila Szívgyógyászati Klinika Az artériás stiffness paraméterek meghatározása magas cardiovascularis rizikóval rendelkező betegeknél Az artériás stiffness paramétereket széles körben alkalmazzák az arteriosclerotikus betegség korai stádiumának igazolására és cardiovascularis rizikó meghatározására. Az artériás stiffness független prediktív értéke igazolt koszorúér eredetű események vonatkozásában. A stiffness paraméterek közül 20