Marker koncepció (Bovilis BVD)

Átírás

1 Marker koncepció (Bovilis BVD) VI. MSDay Budapest február 21. Dr. Földi József

2 Mi a marker vagy diva koncepció? Típusai BVDV NS3 (p80) marker vakcinák és tesztek A BVDV NS3 marker elv gyakorlati alkalmazása - javaslatok

3 Mi a marker vagy diva koncepció? Diva Divus?

4 Mi a marker vagy diva koncepció? Diva = Differentiation of Vaccinated and Infected Animals Vakcinázott és fertőzött állatok elkülönítése Mi szükséges ehhez? Ismert marker tulajdonsággal rendelkező antigén Monoklonális ellenanyag Bartha Adorján 1961, K61 törzs Lomniczi Béla 1987, mitől attenuált a K61 törzs?

5 Alapelv Egy antigén (vírus, vakcina) marker tulajdonsága kizárólag a marker elemre elkülönítő monoklonális ellenanyagon alapuló tesztben mutatkozik meg. Ez ELISA típusú teszt. Marker vírusneutralizáció nincs! Vírusneutralizáció Nem marker ELISA Marker ELISA Nem fertőzött, nem vakcinázott Neg Neg Neg Nem fertőzött, marker vakcinázott Poz Poz Neg Fertőzött, akár vakcinázott akár nem Poz Poz Poz Nem marker vakcinázott, akár fertőzött akár nem Poz Poz Poz

6 Marker vakcina típusok 1. Deléciós markerek Aujeszky vírus IBR vírus ge vs gb - elég nagyméretű vírus - a hiányzó vírus fehérje nem lehet életfontosságú - a hiányzó vírus fehérje nem lehet kulcsfontosságú az immunválasz szempontjából

7 Marker vakcina típusok 2. Alegység vakcinák Klasszikus sertéspestis E2 vs E rns - Vektor vírus teljesen más mint az eredeti pl.: Pestivirus - Baculovirus - immunválasz szempontjából kulcsfontosságú fehérje kifejeződése a vektorban

8 Marker vakcina típusok 3. Nem strukturális proteineken alapuló marker RSZKF 3ABC BVDV NS3 (ApX IV) - Nem strukturális protein = NEM alkotóeleme a vírusnak (nincs a virionban) - ENZIMEK, a virion szintézisét és összeépülését segítik - Ha nincs vírus replikáció, nincsenek jelen

9 A Pestivirusok (BVDV) NS3 nem strukturális proteinje - NS3 illetve NS2-3 régebbi nevén p80/p125 - Tripszinszerű serin proteináz ÉS nukleozid trifoszfatáz - A vírus replikáció kezdetén nagy mennyiségben szintetizálódik - Ellenanyag termelést vált ki - Ha nincs vírus replikáció, nem képződik = INAKTIVÁLT VAKCINA!!!

10 BVDV NS3 (p80) marker vakcinák és tesztek - A vakcina csak inaktivált lehet élő vakcina vírus szaporodik az állatban = van NS3 és ellenanyag - A marker jelleg erősségét a gyártási eljárás befolyásolja NEM minden inaktivált BVD vakcina NS3 marker ezt vizsgálni kell (a gyártónak) - Marker teszt = BVDV NS3 (p80) ellenanyagok kimutatásán alapuló ELISA Fajlagosság* Specificitás Érzékenység* Szenzitivitás Ingezim BVDV Compac (Ingenasa, Sp) 100% 90% Idexx BVDV P80** (Idexx USA) nincs adat nincs adat Serelisa BVD p80 (Synbiotics, Fr) 100% 94% Svanovir BVDV p80 Ab (Svanova, Svédo.) 98% 92% Cedi-test BVDV (Cedi Diagnostics, NL) 99% 98% * Vírusneutralizációs próbához viszonyítva ** korábban Pourquier BVD/MD-BD P80

11 BVDV VN átlagtiter és NS3 pozitív állatok arányának alakulása négyszeri Bovilis BVD vakcinázás után VN titer p80 ELISA Poz BVDV VN titer V1 V2 V3 V4 Két NS3/p80 ELISA teszttel vizsgálva Napok Arias és mtsai. nem publikált adatok

12 NS3 pozitív állatok aránya és BVDV VN átlagtiter Bovilis BVD vakcinázás és ráfertőzés után, háromféle NS3 teszttel (A, B, C) Negatív Kétes Pozitív NS3 pozítív állatok aránya 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% ABC ABC ABC ABC ABC ABC 0.nap 28.nap 49.nap 56.nap 63.nap 70.nap BVDV VN titer V1 V2 RF Makoschey és mtsai, Vaccine, 2007

13 NS3 pozitív állatok aránya ötszöri Bovilis BVD vakcinázás négyféle NS3 teszttel (A, B, C, D) szérumból és tejből (V2) 56. (V3) 84. (V4) 112. (V5) A B C D Szérum Állattelepi vizsgálat 100 A B C D Tej (V2) 56. (V3) 84. (V4) 112. (V5) Alvárez és mtsai. The Vet J. 2012

14 Következtetések Többször (>3) vakcinázott állatok egy része (5-40%) vakcinázás után időlegesen pozitív reakciót adhat NS3 tesztben A pozitívan reagálók aránya és ennek időtartama erősen teszt függő NS3 pozitív reakciók gyakrabban fordulnak elő szérum minták, mint tejminták vizsgálata során

15 A BVDV NS3 marker elv gyakorlati alkalmazása - javaslatok A BVDV fertőződés forrásai Egyéb Időszakos vírus ürítők Fertőzött sperma Perzisztens vírus hordozók Értelmetlen a marker elv gyakorlati alkalmazására gondolni, amíg meg nem bizonyosodtunk arról, hogy nincs jelen perzisztens vírus hordozó az állományban, vagy ha jelen van, el nem távolítottuk!!!

16 Mire jó akkor a marker teszt? Rendszeresen vakcinázott, perzisztens vírus hordozótól mentes állományban a vírus cirkuláció nyomon követésére (pl. új perzisztens behurcolása vagy születése) Mikor vegyünk mintákat? Többször vakcinázott állatokból: a legutóbbi oltás idejétől minél távolabb, praktikusan a következő vakcinázással egyidejűleg Növendékekből: 7-12 hónapos korban, praktikusan az első vakcinázással egyidejűleg ( kb. 8 hónapos kor) Milyen mintákat vegyünk? Ha tejelő teheneket mintázunk, akkor inkább tejmintát, egyébként vérmintát

17 Mekkora a javasolt mintaszám? Korcsoportonként 10 minta Milyen gyakran vegyünk mintát? Évente egyszer, ha nincs állat behozatal az állományba 6-12 hónapos növendékek: évente 2-4-szer Megszívlelendők A BVD marker teszt negatív eredménye nem jelenti az állat BVD negatív státuszát (VN, nem marker ELISA pozitív lesz!) A BVD marker teszt nem alkalmas a perzisztens vírushordozók kiszűrésére (PI állatok ellenanyag tesztekben többnyire negatívak) A BVD marker teszt állomány diagnosztikai eszköz, nem alkalmas egyedi fertőzöttségi státusz megítélésére (többször vakcinázott állatok, rövid idővel vakcinázás után átmenetileg pozítvan reagálhatnak a tesztben)

18 Cetere censeo, Carthaginem esse delendam! Marcus Portius Cato Egyébként javaslom, hogy először is a perzisztens vírus hordozó egyedeket ki kell selejtezni! Földi József Köszönöm a figyelmet!

19 Melyik állítás IGAZ az alábbiak közül? A) A BVD vakcina marker tulajdonsága ugyanazon az elven alapul, mint az IBR vakcina marker jellege. B) Minden inaktivált BVD vakcina egyben marker vakcina is C) Van az MSD-nek élő BVDV marker vakcinája is D) A jelenleg alkalmazott marker elv alapján csak inaktivált BVD vakcina lehet marker

20 Mi a vírusok NEM STRUKTURÁLIS proteinjeinek legfontosabb szerepe? A) Védik a vírust az immunrendszer sejtjeitől B) Enzimek, a virion alkotó elemek szintézisét és összeépítését segítik C) Elősegítik a vírus bejutását a sejtbe D) Díszítik az envelopot

21 Mi a neve a BVDV nem strukturális proteinjének, amelynek hiányán a vakcina marker tulajdonsága alapszik? A) ge (régebbi nevén gi) B) E rns (régebbi nevén E2) C) NS3 (régebbi nevén p80) D) MZ/X (régebbi nevén üki 3 )

22 Melyik más betegség elleni marker vakcinával megegyező elven alapul a BVDV marker vakcina? A) Ragadós száj- és körömfájás B) Sertéspestis C) IBR D) PRRS