VÉRCSOPORTOK Vércsoport-szerológiai kompatibilitás Dr. Nemes Nagy Zsuzsa

Vércsoportszerológia kezdetei Karl Landsteiner

Vörösvérsejt antigének

Vércsoport antigének Örökletes tulajdonságok Genetikusan allélrendszerek és/ vagy kapcsolt gének határozzák meg Az egyedfejlődés során különböző időben jelennek meg

Vércsoportrendszerek A vörösvérsejtek felületén található antigéneket vércsoportrendszerekbe sorolták Jelenlegi rendszerezés: genetikai alapú ISBT( International Sociaty for Blood Transfusion) 34 vércsoport rendszer- több száz antigén

A vörösvérsejt antigének szerkezete A vörösvérsejt membrán alkotói Kémiai tulajdonságuk szerint: szénhidrátok proteinek glikoproteinek glikolipidek

Vércsoport antitestek

Az antitestek osztályozása ALLOANTITESTEK idegen, de saját fajon belüli antigénnel szemben termelődnek AUTOANTITESTEK saját antigénnel szemben termelődnek XENOANTITESTEK más fajon belüli antigénnel szemben termelődnek

Az antitestek IN VITRO reakció mód szerint Komplett vagy direkt agglutinálók IgM Inkomplett antitestek IgG

Az IgG típusú ellenanyag Az ellenanyagok 75%-a 2 nehéz, 2 könnyű lánc A placentán átjut Inkomplett, meleg típusú, immunantitest

Az IgM immunglobulin Az immunglobulin készlet 10% -a Makromolekula: pentamer szerkezetű A korai immunválaszra jellemző Komplex, szénhidrát antigénekkel reagál Természetes, hideg típusú antitest

A vörösvérsejt antigénekkel szemben kialakuló alloimmunizáció mechanizmusa vörösvérsejt antigén APC specifikus B sejt aktiváció specifikus alloantitest immunkomplex komplement, fagocita rendszer aktiváció antigén eliminálása

Vércsoport szerológiai vizsgálatok Ismeretlen vörösvérsejt antigén kimutatása ismert antitest tartalmú reagenssel Ismeretlen antitest kimutatása a savóból/ plazmából ismert antigenitású teszt vörösvérsejtekkel

Vérminta (24 órán belüli) Natív Citrátos EDTA- s Heparinos nem megfelelő!

Az antigén- antitest reakciók IN VITRO formái Precipitáció Hemolízis Agglutináció Abszorbció Elúció

Az agglutináció Specifikus fázis Specifikus antigén-antitest kötődés

Az agglutináció Aspecifikus fázis Az immunkomplexek összekapcsolódnak, térrács alakul ki.

Az agglutinációt befolyásoló tényezők Reakció közeg Komplett agglutininek: fiz.só Inkomplett agglutininek: LISS (alacsony ionerősségű közeg) albumin és egyéb makromolekulák proteolitikus enzimek (papain, bromelin) AHG (Coombs) technikák

Az agglutinációs reakciók értékelése 1. Pozitív reakció agglutináció jelenléte (++++ +,+/-) 2. Negatív reakció agglutináció hiánya 3. Kevert mező pozitív és negatív reakció egyidejű jelenléte

Az agglutinációs reakciók értékelése Kevert mező nem csoport azonos vér transzfúzióját követően -szerológiai okok/ vérkészlet miatt a beteg nem csoport azonos vért kapott -transzfúziós szövődmény csontvelő transzplantációt követően haematológiai betegség esetén chimerizmus

Autoagglutinációs kontroll 1.A vérminta sejtjének és savójának vizsgálata reagens nélkül 2. A vérminta sejtjének vizsgálata hatóanyag nélküli közegben Értékelhető vizsgálat= autokontroll negatív Az autokontroll pozitív,ha a vörösvérsejtek fedettek autoantitesttel alloantitesttel gyógyszerellenes antitesttel sympexis képző savó

AB0 vércsoportok A ( A antigén) B ( B antigén) AB ( A és B antigén) 0 (nincs A és B antigén)

Az AB0 rendszer antigénjei Szénhidrátok Glikoprotein, glikolipid molekulák oligoszaharid részei Közös prekurzorból alakulnak ki

Az AB0 rendszer antitestjei Természetes antitestek Főként IgM osztályú immunglobulinok (kevés IgG) Hideg antitestek, vizsgálatuk szobahőmérsékleten történik +37 o C-n is aktívak A komplement rendszert aktiválják, hemolízist okoznak Jelenlétük a Landsteiner szabálynak megfelelő= reguláris antitestek

Landsteiner szabály

Rh rendszer és jelentősége A legimmunogénebb vércsoport rendszer az AB0-t követően Legfontosabb antigénje az RhD protein Rh pozitív= D antigén jelenléte(4+) Az Rh negativitás az RhD protein hiánya Variáns D-k(gyenge, parciális) (3+, +/-)

Rh rendszer és jelentősége A legfontosabb antigének: D, C, c, E,e Rh fenotípusnak (C,c,E,e) megfelelő transzfúzió bizonyos betegeknél elengedhetetlen Transzfúziós jelentőség: Rh D kompatibilis készítményt kell adni Antitestek: immun eredetűek, IgG osztályúak, Transzfúziós szövődményt, ÚHB-t okoznak

Rh rendszer antigénjei Szám CDE/Rh Megjegy szám CDE/Rh Megjegy Rh1 D / Rh 0 Erős immunogén Rh12 G/ rhg D-vel C- vel Rh2 C/ rh Imm. Rh17 /Hr 0 Gyakori Rh3 E/ rh Imm. Rh18 /Hr Gyakori Rh4 c/ hr Erős immunogén Rh19 /hrs E variáns Rh5 e/ hr 98% Rh20 VS, e s / Feketék Rh6 f, ce/ hr Össz. Rh21 C G / C-vel Rh7 Ce/ rhi Össz. Rh22 ce / össz Rh8 C w / rhw1 Ritka Rh23 Wiel, D w / ritka Rh9 C x / rhx Ritka Rh10 V, ce s / hr v Feketék 20% Rh25 LW/ Törölt! Rh11 E w / rh w2 Ritka Rh26 Deal, c-like c-vel

Az RH gének

D variánsok a gyakorlatban Gyenge D (korábban Du) Parciális D

Rh rendszer antitestjei Általában immunantitestek (transzfúzió,terhesség) Természetes antitestek is lehetnek (anti-d, anti-e, anti-c, anti-cw) Autoantitestek is lehetnek (anti-e, anti-c) Általában IgG osztályúak, de lehetnek IgM vagy IgA osztályba tartozók

A humán vércsoport rendszerek (ISBT) Szám Jelölés Név 001 AB0 AB0 002 MNS MNS 003 P1Pk P1Pk 004 RH RH 005 LU Lutheran 006 KEL Kell 007 LE Lewis 008 FY Duffy 009 JK Kidd

Az antigének immunogenitása

Kompatibilitás Kompatibilitás: vércsoport szerológiai megfelelőség A transzfundált készítmény túlélése a recipiens keringésében normális Minden transzfúzió előtt kompatibilitási vizsgálatokat kell végezni

Kompatibilitási vizsgálatsor Transzfúziós Szabályzat (2008. 2010.) Laboratóriumi vércsoport: 1.AB0, RhD 2.Direkt Coombs teszt(dat) 3.Ellenanyagszűrés Ellenanyag-azonosítás Laboratóriumi keresztpróba(lk)

AB0 kompatibilitás vörösvérsejt készítmények esetén Lehetőleg AB0 csoport azonos, de mindenképpen AB0 kompatibilis készítményeket kell adni. Figyelem: más a kompatibilitás sejtes- és plazmakészítmények esetén

AB0 kompatibilitás vörösvérsejt készítmények esetén Recipiens vércsoportja Kompatibilis vvs készítmények vércsoportja A A és 0 B B és 0 AB AB, A, B és 0 0 0

A plazma(ffp) kompatibilitása Kompatibilis az a plazma tartalmú készítmény, amely a recipiens ellen nem tartalmaz ellenanyagot.

AB0 kompatibilitás plazma készítmények esetén Recipiens vércsoportja A B AB Kompatibilis plazma készítmények vércsoportja A és AB B és AB AB 0 0,A,B és AB

RhD kompatibilitás Lehetőleg RhD azonos, vagy kompatibilis készítményt kell adni. Figyelem: RhD negatív gyermekek és szülőképes korú nők, csak RhD negatív vért kapjanak!

Antitest szűrés Minden vércsoport vizsgálat,vérválasztás során 2 közegben végzendő: LISS/Coombs Enzim Negatív: a vizsgált savóban nincs kimutatható irreguláris antitest Pozitív: a savóban lévő irreguláris antitest jelenlétére utalhat

Antitest szűrés Irreguláris antitest: olyan antitest, amely (a Landsteiner szabályt követő) AB0 antitesteken kívül kimutatható a savóból/plazmából, és/vagy vörösvérsejtihez kötötten.

Direkt Coombs teszt (DAT) Minden vércsoport meghatározás, vérválasztás kapcsán elvégzendő Pozitivitása a vvs-ek Ig és/vagy komplement fedettségére utal

Klinikailag jelentős antitestek Transzfúziós szövődményt okoznak HTR: hemolitikus transzfúziós reakció Újszülöttkori hemolitikus betegséget okoznak (ÚHB)

Irreguláris antitestek jelenléte Pozitív antitest szűrés esetén azonosítást kell végezni,. abban a közegben,ahol a pozitivitás jelentkezett Szükség esetén több közegű azonosítás is végzendő Szükség esetén több hőmérsékleten is el kell végezni az azonosítást (hideg, szobahős,meleg panelek, hőamplitúdó meghatározás) Szükség esetén többféle azonosító panel is használandó Gondolni kell a dózis hatásra

Laboratóriumi keresztpróba Donor vvs+ recipiens savó reakciója Pozitív antitest szűrés/veszélyeztetett recipiens Negatív antitest szűrést követően a keresztpróba többnyire negatív,de nem feltétlenül LISS/Coombs közegben Keresztpróba pozitivitást okozhat : vércsoport specifikus antitest, panantitest, aspecifikusan a vörösvérsejtek közös struktúráival reagáló antiest,gyógyszer, vegyszer, reagens elleni antitest, sympexis

Nem választott és választott vér indikációi Nem választott vér Ellenanyagszűrés,DAT negatív Előzményben is 3 hónapon belüli immunizációs anamnesis negatív Választott vér Ellenanyagszűrés,DAT pozitív Előzményben antitest 3 hónapon belüli immunizációs anamnesis pozitív Hypothermia Csecsemők transzfúziója Fokozott immunizálódási veszély

A kompatibilitás érvényessége A kompatibilitási vizsgálat érvényessége függ: A recipiens transzfúziós anamnesisétől ( kapott-e trafo-t, ha igen, akkor 3 hónapon belül kapta-e, politranszfunált-e) A recipiens egyéb immunizációs anamnesisétől (terhesség, transzplantáció, immunizáció) A recipiens alapbetegségétől, gyógyszereitől (hematológiai, immunológiai betegségek, infekciók)

A kompatibilitás érvényessége Feltételek Kompatibilitás érvényessége 3 hónapon belüli transzfúzió 72 h 2 héten belüli transzfúzió < 72 h Negatív transzfúziós anamnesis /vagy 3 hónapon túli transzfúzió és negatív ellenanyagszűrés 1 hét

KOMPATIBILIS VÉRKÉSZÍTMÉNY KIVÁLASZTÁSA AB0 és RhD azonosság elve A KOMPATIBILITÁS SZABÁLYAIT KELL KÖVETNI MINDEN KOMPATIBILIS KÉSZÍTMÉNY BEADHATÓ Nem csoportazonos, MOSOTT kompatibilis vvs: korlátlan mennyiségben beadható Nem csoportazonos, NEM MOSOTT kompatibilis vvs: 2E beadható vvs Kompatibilitási szabály plazma