A minőségellenőrzés szerepe a helyes gyógyszergyártási gyakorlatban

Debreceni Egyetem rvos és Egészségtudományi Centrum Nukleáris Medicina Intézet Témakörök PET radiogyógyszerek minőségellenőrzése 1. A minőségellenőrzés szerepe a helyes gyógyszergyártási gyakorlatban 2. A F[FDG] minőségellenőrző vizsgálatai Dr. Jószai István Vegyész, minőségellenőrző laborvezető 3. A CMetionin minőségellenőrzése A radiogyógyszerkészítés szabályai, aktivitásszámítás Radiogyógyszerészet gyakorlat 2012. november 15. 4. Műszerek kvalifikálása, vizsgálati módszerek validálása 2012 2 A minőségellenőrzés szerepe a helyes gyógyszergyártási gyakorlatban 1. Milyen PET radiogyógyszereket ismer? 2. Mo.on melyek használatosak a humán diagnosztikában? 1. Pl.: FFDG, CMetionin, Cacetát, FFMIS, [ C]PIB 2. FFDG, CMetionin, Cacetát 2012 3 2012 4

Gyógyszergyártás Magyarországon bármilyen gyógyszergyártási tevékenység (ideértve a gyógyszer hatóanyagok gyártását, csomagolását, gyógyszerkészítmények gyártását, felszabadítását, minőségellenőrző vizsgálatát) csak a Gyógyszerészeti és Egészségügyi Minőség és Szervezetfejlesztési Intézet rszágos Gyógyszerészeti Intézet (GYEMSZI GYI) által kibocsátott, érvényes gyógyszergyártási engedély birtokában végezhető. A gyártóhelynek az érvényes törvényeknek, rendeleteknek és GMP irányelveknek megfelelően kell működnie. A gyógyszergyártási engedély jogosultjának biztosítania kell, hogy az általa gyártott termékek megfelelőek legyenek arra a célra, amire szánták őket, és hogy a forgalomba hozatali engedély követelményeinek eleget tegyenek. Ezen kívül, ezek a termékek nem veszélyeztethetik a betegeket azzal, hogy nem kielégítő a biztonságuk, a minőségük vagy a hatékonyságuk. A elyes Gyógyszergyártási Gyakorlat (GMP) irányelvei. A hatályos európai irányelv (Eudralex Volume IV) fordítása 3. verzió, 2008. július 1., rszágos Gyógyszerészeti Intézet. 2012 5 A helyes gyártási gyakorlat a gyógyszeripari minőségbiztosításnak az a része, amelynek révén biztosítható, hogy a gyógyszert úgy gyártsák és ellenőrizzék, hogy az megfeleljen az előírt követelményeknek, a forgalomba hozatali engedélyben foglaltaknak és alkalmas legyen arra a célra, amire engedélyezték. A minőséggel kapcsolatos ügyek megbízható megoldására olyan egységesen szervezett és hibátlanul működő minőségbiztosítási rendszerre és minőségellenőrzésre van szükség, amelybe a GMP vagyis a elyes Gyógyszergyártási Gyakorlat nemzetközi szabályai is beépültek. GMP (Good Manufacturing Practice), helyes gyógyszergyártási gyakorlat A elyes Gyógyszergyártási Gyakorlat (GMP) irányelvei. A hatályos európai irányelv 2012 (Eudralex Volume IV) fordítása 3. verzió, 2008. július 1., rszágos Gyógyszerészeti Intézet. 6 A Nukleáris Medicina Intézet gyógyszerésze beleegyezésével gyárthatóe eddig nem törzskönyvezett jelzett vegyület humán célra? Magyarországon ki végezhet gyógyszergyártást? NEM!!! Gyógyszergyártási engedéllyel rendelkező gyártóhely!!! 2012 7 2012 8

A minőségellenőrzés helye a helyes gyógyszergyártási gyakorlatban MINŐSÉGELLENŐRZÉS A minőségellenőrzés által kiadott eredményeket felülbírálhatja a gyártás vezetője? ELYES GYÓGYSZERGYÁRTÁSI GYAKRLAT MINŐSÉGBIZTSÍTÁS ELŐÁLLÍTÁS NEM!!! 2012 9 2012 10 A minőségellenőrzés szerepe a gyógyszergyártásban A minőségellenőrzés felépítése CÉL FELADAT A MINŐSÉG PNTS MEGÁLLAPÍTÁSA GYÓGYSZER Rendszeralkalmasság MINTAVÉTEL, MINTAELŐKÉSZÍTÉS VIZSGÁLAT DKUMENTÁCIÓ MÓDSZERFEJLESZTÉS KVALIFIKÁLÁS ÉS VALIDÁLÁS ELLENMINTÁK TÁRLÁSA STABILITÁS VIZSGÁLAT ALAPKÖVETELMÉNYEK MEGFELELŐ FELSZERELÉS KÉPZETT SZEMÉLYZET JÓVÁAGYTT ELJÁRÁSK A MINTAVÉTELEZ, A VIZSGÁLATZ 2012 Minőségellenőrzés Műszerek és vizsgálati módszerek minősítése kvalifikálás és validálás 2012 12

Minőségellenőrző labor Mire van szükség a minőségellenőrzés kialakításakor? 1. Megfelelő berendezés 2. Képzett személyzet 3. Jóváhagyott eljárások 2012 13 2012 14 Bejárat Anyagátadó zsilip Tisztatérből (C) 2012 15 2012 16

Tisztatéri követelmények a részecskeszám tekintetében Izotópmunkahely Mintaelőkészítés A elyes Gyógyszergyártási Gyakorlat (GMP) irányelvei. A hatályos európai irányelv 2012 (Eudralex Volume IV) fordítása 3. verzió, 2008. július 1., rszágos Gyógyszerészeti Intézet. 17 2012 A F[FDG] gyártásából származó szennyező anyagok F[FDG] minőségellenőrzés A c A c Ac [ 1 8 F] F Tf Ac Ac Ac Tf= S 2 CF 3 Ac F Ac Ac A c Ac F Ac Cl glucose F A F[FDG] ELŐÁLLÍTÁSÁNAK LÉPÉSEI F IZTÓP ELŐÁLLÍTÁS CIKLTRNNAL A SZINTÉZISPANEL ÉS AZ SZTÓBERENDEZÉS TISZTÍTÁSA A F[FDG] SZINTÉZISE KÉSZ TERMÉK 2012 19 ACETNITRIL [ 16 ] 2 13 N ETANL ACETN KRYPTFIX 2.2.2. F p VIZUÁLIS ELLENŐRZÉS TARGETFÓLIA 48 V Ac F[FDG] 2012 20

atóanyag azonosítás és radiokémiai tisztaságvizsgálat normál fázisú PLC módszerrel A FFDG minőségellenőrzése során milyen minőségi paramétereket kell vizsgálnunk? 1. Radiokémiai tisztaság 2. ldószermaradvány 3. Kriptofix tartalom 4. p 5. Radionuklidos tisztaság 6. Vizuális ellenőrzés 2012 21 atóanyag: F[FDG] PLC rendszer: PLC pumpa Injektor Gázmentesítő egység Kromatográfiás oszlop JASC PU2080 Rheodyne 7725i, 20µl loop JASCDG208054 RI detektor Knauer K2301 Radioaktivitás (RA) detektor Interfész LiChrocart LiChrosper 100 N 2, 250 4,5 mm 5µm ATMKI LCNet II/ADC Szennyező: Ac F[FDG] Kromatográfiás körülmények: 2,5 ml/min,izokratikus elúció. Kiértékelő 2012 szoftver ChromPass Ver. 1.7.403. 22 C 2 Ac Ac Ac 25ºC F Injektált térfogat: 20 µl Eluens: 95:5 V/V% acetonitril:víz elegy Standard: 19 F [FDG] Mintaelőkészítés: Ac 1:1 standard oldat: F [FDG] minta atóanyag azonosítás és radiokémiai tisztaság vizsgálat kromatogramja 200 Radioaktivitás detektor Törésmutató detektor DETEKTRVÁLASZ, mv 160 120 80 40 0 RADIKÉMIAI TISZTASÁG: %TERÜLET > 96% Ac F[FDG] F[FDG] ATÓANYAG AZNSSÁG: IDŐ = ±5% 19 F[FDG] 0 1 2 3 4 5 6 7 8 IDŐ, perc 2012 23 A FFDG PLC vizsgálatából milyen információt nyerünk? 1. Radiokémiai tisztaság 2. Azonosítás 2012 24

PLC rendszer AUTSAMPLER RI DETEKTR PUMPA KLNNA RA DETEKTR INTERFACE BX A FFDG PLC vizsgálata során milyen detektort alkalmazunk a radioaktív komponensek kimutatására? SLVENT RGANIZER 1. Radioaktivitás detektor DEGASSER 2012 25 UV DETEKTR 2012 26 Radiokémiai tisztaság vizsgálat radiotlc módszerrel A radiokémiai tisztaság vizsgálat radiotlc kromatogramja atóanyag: F[FDG] Szennyező: Ac F[FDG] F C 2 Ac Ac Ac Ac RADIKÉMIAI TISZTASÁG: %TERÜLET > 95% F TLC rendszer: Kromatográfiás körülmények: radiotlc szkenner GMC béta detektor Szoftver minigita Star (raytest)5 Beta Detector GMC (raytest) GINA Star TLC (raytest) Silica gel 60F254 típusú kromatográfiás vékonyréteg Eluens 95:5 V/V% acetonitril:víz elegy Kifejlesztési idő: 45 perc 2012 27 2012 28

RadioTLC rendszer GMC BETA DETEKTR A FFDG TLC vizsgálata során milyen radioaktív komponenseket tudunk kimutatni? SZKENNER 1. Szabad F 2. FFDG 3. Acetilezett FFDG 2012 29 2012 30 ldószermaradványok gázkromatográfiás meghatározása ldószermaradvány vizsgálat kromatogramja Szennyezők Megengedett koncentráció (mg/ml) acetonitril 0,52 aceton 6,25 etanol 6,25 Mintaelőkészítés: 5 µl Metanol (ISTD) (0,6 g/l) 95 µl F[FDG] minta A gázkromatográf egységei: Clarus 500 GC FID detektorral NCI 901 Interfész boksz TotalChrom Client/Server and Workstation Software Kromatográfiás körülmények: Kolonna: Porabond U., 25m, 0,32mm, 7 µm. Detektor: FID Injektor hőmérséklete: 250 C Detektor hőmérséklete: 250 C Vivőgáz nyomása: 30 psi Split arány: 15 Levegő: 45 ml/min idrogén: 450 ml/min Injektált térfogat: 1 µl őmérséklet program: 60 C 1 perc, 2 C/perc 100 C. 2012 Belső standard: metanol 31 2012 32

Clarus 500 gázkromatográf A FFDG gázkromatográfiás vizsgálata során milyen komponenseket tudunk kimutatni, ehhez milyen detektort és típusú kolonnát kell alkalmazni? 1. Etanol aceton, acetonitril 2. Lángionizációs (FID) detektor 3. Kapilláris kolonna 2012 33 2012 34 γspektrometriás vizsgálatok A F[FDG] γspektruma Radionuklidos azonossági a vizsgálat Követelmény Vizsgálat gyakorisága EGYSÉGEK TÍPUS 2,5E06 5 kev 5 kev energia csúcs etente 2,0E06 109,7 perc ± 5% etente Ge félvezető detektor Főerősítő, nagyfeszültségű tápegység, előerősítő tápegység GEM 10P4 Canberra CPS 1,5E06 1,0E06 Radionuklidos tisztaság t vizsgálat Követelmény Vizsgálat Személyi számítógép analizátor kártyával Canberra 5,0E05 Szennyező radionuklid max 0,1% etente gyakorisága Eu152 Energiakalibrálás 0,0E00 0 500 1000 1500 2000 ENERGIA, kev 2012 35 2012 36

Kryptofix 2.2.2 tartalom meghatározása színfoltteszt módszerrel Kryptofix 2.2.2 tartalom meghatározása színfoltteszt módszerrel Kryptofix 2.2.2. Követelmény: 2,2 mg/v V maximálisan felhasznált mennyiség 8 ml Követelmény Vizsgálat gyakorisága 1 FDG készítmény 2 Kryptofix oldat (275µg/ml) <275µg/ml Minden sarzsból 3 Fiziológiás sóoldat 2012 37 2012 38 A F[FDG] minőségellenőrzés összesített eredménye Gyártás szám Gyártás időpont (2007) Kémhatás (p) min. 5, max. 8 Rad.kém.tisztaság PLC, min 96% Rad.kém.tisztaság TLC min 95% ldószer maradék Etanol, max.: 6,25 mg/ml ldószer maradék Aceton, max.: 6,25 mg/ml ldószer maradék Acetonitril, max.: 0,52 mg/ml Kriptofix 2.2.2. Koncentráció <275 mg/ml Radionuklidos tisztaság >99.5 % Felezési idő: 109, 7 perc 5 % (104,25,2) perc CMetionin minőségellenőrzés 2002 08. 07. 6 99, 27 98, 74 <0,035 0, 091 0, 041 <275 >99,5%/3,6 perc 2003 08. 07. 6 98, 07 98, 22 0, 166 0, 544 0, 034 <275 2004 08. 08. 6 98, 14 98, 33 1, 258 0, 851 0, 034 <275 2005 08. 08. 6 99, 27 98, 34 0, 131 0, 205 0, 042 <275 2007 08. 08. 6 99, 30 99, 00 0, 731 0, 269 0, 051 <275 2008 08. 09. 7 99, 98, 69 1, 034 0, 702 0, 132 <275 2009 08. 09. 6 99, 26 98, 67 <0,035 0, 224 0, 034 <275 2010 08. 10. 6 99, 08 98, 55 0, 881 0, 795 0, 037 <275 20 08. 10. 6 99, 19 98, 75 0, 104 0, 232 0, 043 <275 2012 08. 13. 6 99, 24 98, 79 <0,035 0, 081 0, 054 <275 2013 08. 13. 6 99, 33 98, 85 <0,035 0, 105 0, 035 <275 2014 08. 14. 7 97, 68 98, 09 1, 7 1, 036 0, 073 <275 2015 08. 14. 6 97, 99 97, 10 0, 472 0, 307 0, 084 <275 2012 39 2016 08. 15. 7 99, 22 98, 73 1, 040 0, 6 0, 192 <275 >99,5%/3,6 perc S N 2 C 3 I I C 3 S Lomocisztein LMetionin 2012 40 N 2

A CMetionin minőségi követelményei Radiokémiai tisztaság Radiokémiai tisztaság: Radionuklidos tisztaság: ATÓANYAG CMetionin %os aránya >95%. Enantiomer tisztaság: L CMetionin %os aránya >90%, D CMetionin %os aránya <10%. 5 kev fotocsúcs %os aránya >99%. p vizsgálat: indikátorpapír: 4,58,5. 3 [ C] S CMetionin N 2 C 2 Kémiai tisztaság: omocisztein: 2mg/Vml0,2 mg/ml, Metionin: 2mg/Vml0,2 mg/ml. Azonosítás: Egyéb vizsgálat: sterilitás, bakteriális endotoxin. radionuklidos: 5 kev, t 1/2 =19,920,9perc, kémiai: 2012 t R =5%. 41 CMetioninS,Sdioxid SZENNYEZİK 3 [ 3 [ C] N 2 C] N 2 S S 3 [ C] C C 2 2 CMetioninSoxid CMetanol 2012 42 Radiokémiai tisztaság Radiokémiai tisztaság Kromatográfiás körülmények: Kromatográfiás körülmények: Nucleodur C Pyramid, 5 µm kromatográfiás oszlop Eluens K 2 P 4 (p=3,3) MetioninS,Sdioxid Nucleodur C Pyramid, 5 µm kromatográfiás oszlop Eluens K 2 P 4 (p=3,3) CMETININ 1 ml/perc 1 ml/perc Törésmutató detektor Radioaktivitás detektor Kromatografálási idı: 10 perc Metanol METININ Kromatografálási idı: 10 perc MetioninSoxid 2012 43 2012 44

Enantiomer tisztaság Enantiomer tisztaság ATÓANYAG SZENNYEZİ Kromatográfiás körülmények: 2 N S S N 2 LiChrospher C, 5 µm kromatográfiás oszlop Eluens: 30mM NaAc, 17mM Lprolin, 8mM CuAc 2 2 ml/perc Radioaktivitás detektor D( C)METININ L( C)METININ C C 3 3 Kromatografálási idı: 15 perc L CMetionin D CMetionin 2012 45 2012 46 Enantiomer tisztaság Kémiai tisztaság Kromatográfiás körülmények: Kromatográfiás körülmények: LiChrospher C, 5 µm kromatográfiás oszlop Eluens: 30mM NaAc, 17mM Lprolin, 8mM CuAc 2 L( C)METININ Nucleodur C Pyramid, 5 µm kromatográfiás oszlop Eluens K 2 P 4 (p=3,3) 1 ml/perc omocisztein Metionin 2 ml/perc UV/Vis detektor: 225 nm Radioaktivitás detektor Kromatografálási idı: 10 perc Kromatografálási idı: 15perc 2012 47 2012 48

A CMetionin kísérleti gyártás mintáinak minőségellenőrzése Gyáráti tétel Radioké miai tisztaság >95% Enantiomer tisztaság >90% Kémiai tisztaság <0,2mg/ml Radionukli dos tisztaság >99% Felezési idı 19,920,9 20080312 99,7 54,3 99,990 20,4 Műszerek kvalifikálása, vizsgálati módszerek validálása 20080402 99,6 99,3 0,02 99,997 20,9 200804 99,6 99,4 0,02 99,998 20,3 2012 49 2012 50 Műszerkvalifikáció Tervezési kvalifikálás (Design qualification D.Q.) A készülék specifikációjával szemben támasztott igények megfogalmazása Telepítési kvalifikálás (Installation qualification I.Q.) A készülék üzembe helyezése Működési kvalifikálás (perational qualification.q.) A készülék helyes működéséről való megbizonyosodás Üzemelési kvalifikálás (Performance qualification P.Q.) A rendszer az alkalmazott minőségellenőrzési vizsgálatokhoz felhasználható MCL Network of the Council of Europe, Quality assurance document, PA/P/MCL (07) 48 DEF Qualification of equipment core document, EDQM. 2012 EDQM European Directorate for the Quality of Medicines & ealthcare 51 Egy PLC rendszer radioaktivitás detektora javításon esett át. Milyen típusú kvalifikáláson kell átesnie a rendszernek? IQ Q PQ 2012 52

Linearitás vizsgálat LINEARITÁS y = 2,1669x R 2 = 0,9914 12,000 10,000 Milyen célt szolgál a műszerek üzemelési kvalifikálása? Area arány 8,000 6,000 Követelmény: R 2 >0,99 4,000 2,000 A műszer megfelelően működik a készítmény vizsgálati körülményei között! 2012 53 0,000 0 1 2 3 4 5 6 Koncentráció arány KR0201/2 A CLARUS 500 GC kvalifikálása 2012 54 RSD % Csúcsterület = 0,64% RSD % retenciós idő = 0,54% Ismételhetőség Miért fontos, hogy lineáris tartományban mérjen a műszerünk? Követelmény: RSD % < 1% 100 ( yi y) 2 RSD % = y n 1 A vizsgálandó komponens tartalmát pontosan tudjuk meghatározni! ahol, yi y n az egyes mérési eredmények (oldószeristd csúcs alatti terület arányok) a mérési eredmények átlaga a mérési eredmények száma 2012 55 KR0201/2: A CLARUS 500 GC kvalifikálása 2012 56

Vizsgálatvalidálás Vizsgálat típusa Azonosítás Szennyezők Vizsgálata Teljes vizsgálat Vizsgálat típusa Azonosítás Szennyezők Vizsgálata Teljes vizsgálat Validálási paraméter elyesség Pontosság Ismételhetőség Középfokú precizitás Specifikusság Kimutathatósági határ Meghatározási határ Linearitás Tartomány mennyiség kimutatás Validálási paraméter mennyiség kimutatás Egy módszerrel szennyező komponensek mennyiségi Ismételhetőség meghatározását kívánjuk megoldani. Középfokú precizitás Az eljárás minősítése során milyen paraméterekre kell validálni? elyesség Pontosság Specifikusság Kimutathatósági határ Meghatározási határ Linearitás Tartomány IC guideline Validation of analytical procedures: text and methodology Q2(R1) 2012 IC International Conference on armonisation 57 2012 58 A FFDG azonosítás és radiokémiai tisztaságvizsgálat validálása KÖSZÖNÖM A FIGYELMET! Vizsgált paraméter Követelmény Eredmény Az [ F]FDG azonosítási vizsgálatának validálása Linearitás R 2 >0,990 R 2 =0,9965 Kimutatási határérték (LD) < 1 mg/ml 0,09 mg/ml Specifikusság R S >1,5 3,856,92 Robosztusság R S >1,5 1,924,74 Az [ F]FDG radiokémiai tisztaság vizsgálatának validálása Linearitás R 2 >0,990 [ F]FDG R 2 = 0,9985 Ac[ F]FDG R 2 = 0,9972 Precizitás RSD % <1% 0,08% Specifikusság R S >1,5 4,595,01 Robosztusság R S >1,5 2,004,87 VR0902/1: A 2[F]FDG azonosítását és 2012 59 radiokémiai tisztaságát meghatározó PLC módszer validálása MINŐSÉGELLENŐRZÉS 2012 60