Módszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére



Hasonló dokumentumok
Ragyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól

Adatgyőjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb mőszerei

Speciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek

Az új Thermo Scientific icap TQ ICP-MS bemutatása és alkalmazási lehetőségei. Nyerges László Unicam Magyarország Kft április 27.

Engedélyszám: /2011-EAHUF Verziószám: Humángenetikai vizsgálatok követelménymodul szóbeli vizsgafeladatai

Száloptika, endoszkópok

Áramlási citometria / 4. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK

Dr. JUVANCZ ZOLTÁN Óbudai Egyetem Dr. FENYVESI ÉVA CycloLab Kft

FFD-SZONDA FEJLESZTÉSE ÉS ELSŐ TEREPI TAPASZTALATOK

mintasepcifikus mikrokapilláris elektroforézis Lab-on-Chip elektroforézis / elektrokinetikus elven DNS, RNS, mirns 12, fehérje 10, sejtes minta 6

Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben. Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga

Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET)

A DOHÁNYZÁS OKOZTA DNS KÁROSODÁSOK ÉS JAVÍTÁSUK VIZSGÁLATA EMBERI CUMULUS ÉS GRANULOSA SEJTEKBEN. Sinkó Ildikó PH.D.

Abszorpció, emlékeztetõ

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban

Intelligens fotometria. Célba jutni okosan. Áttekinthető ikonok a komplikált listák helyett

Intelligens Digitális Szenzortechnika

Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév

Műszeres analitika II. (TKBE0532)

Modern Fizika Labor. 11. Spektroszkópia. Fizika BSc. A mérés dátuma: dec. 16. A mérés száma és címe: Értékelés: A beadás dátuma: dec. 21.

Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Modern Biofizikai Kutatási Módszerek

Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén


Fluoreszcencia 2. (Kioltás, Anizotrópia, FRET)

9 gyak. Acél mangán tartalmának meghatározása UV-látható spektrofotometriás módszerrel

Pedagógiai Programja

ELEKTROANALITIKA (ELEKTROKÉMIAI ANALÍZIS)

Élelmiszerek. mikroszennyezőinek. inek DR. EKE ZSUZSANNA. Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium. ALKÍMIA MA november 5.

Anyagvizsgálati módszerek Elektroanalitika. Anyagvizsgálati módszerek

Szívelektrofiziológiai alapjelenségek. Dr. Tóth András 2018

Részletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025)

Sokszínű. Élhető. Budaörs.

Dr. JUVANCZ ZOLTÁN Óbudai Egyetem Dr. FENYVESI ÉVA CycloLab Kft

FiT032 elektrokémiai gyorsteszter használati utasítás

Indikátorok alkalmazása a labordiagnosztikai eljárások minőségbiztosításában

Kontrol kártyák használata a laboratóriumi gyakorlatban

(11) Lajstromszám: E (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA

5. Az adszorpciós folyamat mennyiségi leírása a Langmuir-izoterma segítségével

TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL

VILÁGÍTÓ GYÓGYHATÁSÚ ALKALOIDOK

Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai

A Flowcytometriás. en. Sinkovichné Bak Erzsébet,

Szénhidrátok elektrokémiai detektálása, fókuszban a laktóz

ATOMEMISSZIÓS SPEKTROSZKÓPIA

In vivo szövetanalízis. Különös tekintettel a biolumineszcens és fluoreszcens képalkotási eljárásokra

Szerves oldott anyagok molekuláris spektroszkópiájának alapjai

Gyors-kinetikai módszerek

Abszorpciós fotometria

Az eddig figyelmen kívül hagyott környezetszennyezések

MSZAKI ZOMÁNCOK ÉS ÜVEGEK ELLENÁLLÁSI VISEL- KEDÉSE IGEN KORROZÍV KÖZEGBEN Dr. Günter Schäfer - Pfaudler Werke GmbH

Környezeti kémia II. A légkör kémiája

Sejt. Aktin működés, dinamika plus / barbed end pozitív / szakállas vég 1. nukleáció 2. elongáció (hosszabbodás) 3. dinamikus egyensúly

Szívbetegségek hátterében álló folyamatok megismerése a ciklusosan változó szívélettani paraméterek elemzésén keresztül

Radioaktív nyomjelzés

PÉCSI TUDOMÁNYEGYETEM. Fluoreszcens módszerek alkalmazása nanostruktúrák vizsgálatában. Jánosi Tibor Zoltán

JAVÍTÁSI-ÉRTÉKELÉSI ÚTMUTATÓ. Orvosi laboratóriumi technikai asszisztens szakképesítés Műszer és méréstechnika modul. 1.

Abszorpciós spektroszkópia

MAGYAR ÉLELMISZERKÖNYV. Codex Alimentarius Hungaricus /78 számú előírás

1. feladat Összesen: 7 pont. 2. feladat Összesen: 16 pont

Nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia (HPLC)

Adatgyőjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb mőszerei

Hangfrekvenciás mechanikai rezgések vizsgálata

Elektrokémiai érzékelők használata toxikus gázok mérésére

1. feladat Összesen: 8 pont. 2. feladat Összesen: 11 pont. 3. feladat Összesen: 7 pont. 4. feladat Összesen: 14 pont

Zárójelentés. ICP-OES paraméterek

Hangfrekvenciás mechanikai rezgések vizsgálata

Röntgen-gamma spektrometria

A műanyag csomagolóanyagok nem szándékosan hozzáadott összetevőinek kioldódásvizsgálata

SBR-rendszer folyamat-optimalizációja mikroszkópos eleveniszap-vizsgálat segítségével

Nanokeménység mérések

Reakció kinetika és katalízis

Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE

Kémiai átalakulások. A kémiai reakciók körülményei. A rendszer energiaviszonyai

SEGÉDLET A PÁRTOK GAZDÁLKODÁSA TÖRVÉNYESSÉGÉNEK PÉNZÜGYI SZABÁLYSZERŰSÉGI ELLENŐRZÉSÉHEZ

Szentjánosbogár, trópusi halak, sarki fény Mi a közös a természet fénytüneményeiben?

Modern fizika laboratórium

Hamuvizsgálat alkalmazásának vizsgálata. Pomucz Anna Boglárka környezetvédelmi referens Herman Ottó Intézet Nonprofit Kft.

Szerves kémiai analízis TANTÁRGYI KOMMUNIKÁCIÓS DOSSZIÉ

Hamuvizsgálat alkalmazásának lehetőségei

Abszorpciós fotometria

Adatgyőjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb mőszerei

Géntechnikák. Immunoassays. Ágnes

a NAT /2010 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

A évi integritásfelmérések céljai, módszertana és eredményei

On-line és off-line helyszíni hibagáz analízis. Czikó Zsolt MaxiCont Kft. 2009/10/16 1

TARTALOM. Bekezdések Bevezetés A jelen Nemzetközi Könyvvizsgálati Standard hatóköre 1 Hatálybalépés időpontja 2 Cél 3 Fogalmak 4 Követelmények

Titrimetria - Térfogatos kémiai analízis -

11.3. A készségek és a munkával kapcsolatos egészségi állapot

ÁGAZATI SZAKMAI ÉRETTSÉGI VIZSGA VEGYÉSZ ISMERETEK EMELT SZINTŰ SZÓBELI VIZSGA MINTAFELADATOK ÉS ÉRTÉKELÉSÜK

Mágneses szuszceptibilitás mérése

Ecetsav koncentrációjának meghatározása titrálással

Záró Riport CR

A II. kategória Fizika OKTV mérési feladatainak megoldása

Jegyzőkönyv Arundo biogáz termelő képességének vizsgálata Biobyte Kft.

A magyarországi tájházak hálózata Kiemelkedő Érték Meghatározása

23. Indikátorok disszociációs állandójának meghatározása spektrofotometriásan

XXXVI. KÉMIAI ELŐADÓI NAPOK

A ferrát-technológia klórozással szembeni előnyei a kommunális szennyvizek utókezelésekor

A 9,9 -biantril különleges fluoreszcenciája

Modern Fizika Labor Fizika BSC

Átírás:

Módszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére Az ASEA-ban található reaktív molekulák egy komplex szabadalmaztatott elektrokémiai folyamat, mely csökkenti és oxidálja az alap sóoldatot, melynek eredménye számos ismert reaktív molekula egyensúlyi helyzete. Ezek a reaktív molekulák stabilak és standard analitikai módszerekkel mérhetők az ASEA-ban. Az ilyen reaktív molekulák azonosak az élő sejtekben természetes úton termelődő ilyen molekulákkal, melyek jelenlétét sikeresen mérték az elmúlt 30 évben bizonyos fluoreszcens színezékek, mint indikátorok használatával. Az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzése rendszeresen történik három standard fluoreszcens indikátor használatával, név szerint R- phycoerithrin (RPE), Aminophenyl fluorescein (APF) és Hydroxyphenil fluorescein (HPF). Ezek a fluoreszcens molekulák fizikailag megváltoztatják alakjukat (és fényességüket, amikor érintkezésbe

lépnek specifikus reaktív molekulákkal. Ezek a konform változások erősítik vagy csökkentik az indikátorok fluoreszcenciáját bizonyos meghatározott fényfrekvencián. A fluoreszcenciának ezt a változását mérik fluorospektrométerrel, ami az indikátorok által kibocsátott fényspektrum intenzitását méri. Az indikátorok leírása A két új eredeti szonda, az Aminophenyl fluorescein (APF) és Hydroxyphenil fluorescein (HPF) melyeket Tetsuo Nagano et al (1) fejlesztett ki, szelektívek az erősen reaktív oxigén fajok (hros) detektálásában. Mind a két szonda alacsony reaktivitást mutat a ROS egyéb formáival szemben. A vizsgálat alapelve: konform változások az APF-ben és HPF-ben molekulák fluoreszcens tulajdonság változások. alig fluoreszcens erősen fluoreszcens Phycobiliprotein fluoreszcens színezék színkép jellemzői Fluor Gerjesztés max Molekulatömeg (nm) Kibocsátás max (nm)

R-Phycoerytrin (RPE) 240,000 480, 545, 565 578 1. ábra A három, az ASEA-ban található reaktív molekulák koncentrációjának mérésére szolgáló indikátor leírása. Az alul található táblázat az R-PE alapvető tulajdonságait sorolja fel. Az indikátorokban bekövetkező változások a reaktív molekuláknak történő expozíció előtt és után, jelzik az ilyen reaktív molekulák létezését. A három indikátor mindegyike egy-egy specifikus reaktív molekulára érzékeny. Ezek az indikátor színezékek mindegyike nagyon rezisztens a hibás pozitív jelzésekre, és ezt nagy mélységekig tanulmányozták. Az ASEA, LLC a Thermo Fischer Scientific által gyártott Nanodrop 3300 fluorospektrométert és magasan képzett analitikusokat alkalmaz, hogy rutinszerűen mérhessék az egyes tétel ASEA-ban található reaktív molekulák mennyiségét. Egy a helyszínen működő független laboratórium majdnem mindennapos rutin alapján használja az ASEA expozíciónak kitett fluoreszcens indikátorok valamelyikét, így mérve az ASEA-ban található reaktív molekulák koncentrációját.

A Minőségbiztosítási folyamat részeként, az ASEA Gold Standardban a reaktív molekulák koncentrációját folyamatosan mérik mindegyik mintában. Azok a tételek, melyekben nincs meg a Gold Standardnak megfelelő reaktív molekula koncentráció, azok megsemmisítésre kerülnek. Ezzel szemben a kiindulási alapnak tekintett sósoldat soha nem mutatott mérhető reaktív molekula koncentrációt, a szabadalmaztatott elektrokémiai folyamat végrehajtása előtt. A 2. ábra egy Nanodrop 3300 kalibrációjáról készült screen-shot, mely mutatja az R-PE indikátor reakcióját a különböző ASEA koncentrációkra. A különbségek a reaktív molekula koncentrációknál egyértelműen láthatók a görbéken. Három mérést végeznek mindegyik mintakoncentráción a megfelelő konzisztencia biztosítása érdekében. A kontroll alap kiindulási sósoldat nem mutat semmiféle fluoreszcenciát, jelezve, hogy reaktív molekulák nincsenek az alap sósoldatban. Ahogy (a kiindulási sósoldatban oldott) ASEA koncentrációja emelkedik, a fluoreszenciában történő változás is egyre nagyobb. 2. ábra: Screenshot, mely bemutatja az R-PE indikátor reakcióját az ASEA különböző koncentrációjánál, 15 önálló mérés (mintánként 3 mérés) eredményei lettek egymásra vetítve. A screenshot 2008 áprilisában egy

tesztmérésen készült. A sósoldat nem vált ki reakciót és az öt különböző ASEA koncentráció egyértelműen meghatározott eredményeket mutat. A 2. ábrán bemutatott görbék magassága jelzi az egyes mintákban található reaktív molekulák mennyiségét. Mindenegyes tételt a Gold Standardnak megfelelően mérnek. Így az ASEA mindegyik tétele garantáltan tartalmazza a reaktív molekulák megfelelő mennyiségét és egyensúlyát. A Minőség Ellenőrző laboratóriumban a legmagasabb tudományos kiválóságnak