Progesteronum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.3-1 PROGESTERONUM Progeszteron 01/2015:0429 C 21H 30O 2 M r 314,5 [57-83-0] DEFINÍCIÓ Pregn-4-én-3,20-dion. Tartalom: 97,0 102,0% (szárított anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos por, illetve színtelen kristályok. Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; etanolban bőségesen oldódik; acetonban és zsíros olajokban mérsékelten oldódik. Polimorfiára hajlamos (5.9). AZONOSÍTÁS A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS progeszteronnal. Amennyiben a szilárd anyagok spektrumai eltérőek, a vizsgálandó anyagot és a referenciaanyagot külön-külön R vízmentes etanolban oldjuk, az oldatokat szárazra párologtatjuk, majd a maradékokból új spektrumokat veszünk fel. B. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. 10 mg vizsgálandó anyagot 1 térfogatrész R metanol és 9 térfogatrész R diklórmetán elegyével 10 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat. 10 mg CRS progeszteront 1 térfogatrész R metanol és 9 térfogatrész R diklórmetán elegyével 10 ml-re oldunk. Lemez: R VRK szilikagél F 254 lemez. Kifejlesztőszer: R etil-acetát R diklórmetán (33+66 V/V). Felvitel: 5 µl. Kifejlesztés: a lemezmagasság háromnegyedéig. Szárítás: levegőn. Előhívás: 254 nm-es ultraibolya fényben.
Progesteronum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.3-2 Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramjának főfoltja helyét, színét és méretét tekintve egyezzék meg az összehasonlító oldat kromatogramjának főfoltjával. VIZSGÁLATOK Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): +186 és +194 között (szárított anyagra). A vizsgálathoz 0,250 g anyagot R vízmentes etanollal 25,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Vizsgálati oldat. 20,0 mg vizsgálandó anyagot a B-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (a). 1,0 ml vizsgálati oldatot a B-mozgófázissal 100,0 ml-re hígítunk. Ezen oldat 1,0 ml-ét a B-mozgófázissal 10,0 m-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 2 mg CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt progeszteront (B-, C-, G-, I- és M-szennyezőt tartalmaz) a B-mozgófázissal 5,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (c). 2 mg CRS csúcsazonosításra szánt progeszteront (D-, E-, J-, K- és L- szennyezőt tartalmaz) a B-mozgófázissal 5,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (d). 20,0 mg CRS H-szennyező azonosítására szánt progeszteront (feltüntetett H-szennyező tartalommal) a B-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (e). 20,0 mg CRS progeszteront a B-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Oszlop: méretei: l = 0,15 m, Ø = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, sűrű keresztkötésű, oktadecilszililezett szilikagél (5 µm). Mozgófázis: A-mozgófázis: R acetontiril R víz (50 + 50 V/V); B-mozgófázis: R víz R acetontiril (20 + 80 V/V); Idő A-mozgófázis B-mozgófázis (perc) (%V/V) (%V/V) 0 20 100 0 20 27 100 0 0 100 27 45 0 100 Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 241 nm-en, H-szennyező esetében 286 nm-en. Injektálás: 10-10 µl vizsgálati oldat, a), b), c) és d) összehasonlító oldat. A szennyezők azonosítása: a B-, C-, G, I- és M-szennyezőket a CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt progeszteronhoz mellékelt kromatogram és a b) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; a D+E-, J-, K- és L-szennyezőket a CRS csúcsazonosításra szánt progeszteronhoz mellékelt kromatogram és a c) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; a H-szennyezőt a d) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók a progeszteronra (retenciós ideje kb. 14 perc) vonatkoztatva: B-szennyező kb. 0,60; J-szennyező kb. 0,65; H-szennyező kb. 0,82; K-szennyező kb. 0,85; C-szennyező kb. 0,93; M-szennyező kb. 1,1; L-szennyező kb. 1,90; I-szennyező kb. 1,95; D- és E-szennyező kb. 2,05; G-szennyező kb 2,65.
Progesteronum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.3-3 Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat: hegy-völgy arány: legalább 4,0, ahol Hp az M-szennyezőnek megfelelő csúcs alapvonaltól mért magassága, és Hv az előbbi csúcsot a progeszteronnak megfelelő csúcstól elválasztó görbeszakasz minimumának alapvonaltól mért távolsága. Követelmények: I-szennyező (a két epimer összege): csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének hatszorosa (0,6%); C-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének háromszorosa (0,3%); B-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének étszerese (0,2%); D- és E-szennyező: csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható csúcs területének 1,5-szerese (0,15%); G-, J-, K-, L- és M-szennyező: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 1,5-szerese (0,15%); H-szennyező 286 nm-nél mérve: legfeljebb 0,15%; a d) összehasonlító oldat kromatogramján a megfelelő csúcs területéből számolva, figyelembe véve a CRS H-szennyező azonosítására szánt progeszteron feltüntetett H-szennyező tartalmát; egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezők: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,1%); szennyezők összesen, kivéve a H-szennyezőt csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének tízszerese (1,0%); elhanyagolási határ: az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5- szerese (0,05%). Szárítási veszteség (2.2.32): legfeljebb 0,5%. Az anyag 0,500 g-ját szárítószekrényben, 2 órán keresztül 105 C-on szárítjuk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (2.2.29) a Rokon vegyületek vizsgálata pontban leírtak szerint, a következő kiegészítéssel. Injektálás: vizsgálati oldat, e) összehasonlító oldat. A százalékos C21H30O2-tartalmat a CRS progeszteron deklarált tartalmi értéke alapján számítjuk ki. ELTARTÁS Fénytől védve. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: B, C, D, E, G, H, I, J, K, L, M. Egyéb kimutatható szennyezők (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10) című általános fejezetet): A.
Progesteronum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.3-4 A. pregna-4,14-dién-3,20-dion, B. (20S)-20-hidroxipregn-4-én-3-on, C. (20R)-20-hidroxipregn-4-én-3-on, D. [(20S)-3-oxopregn-4-én-20-il]-acetát, E. [(20R)-3-oxopregn-4-én-20-il]-acetát,
Progesteronum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.3-5 G. 21-(ciklohexilidén)pregn-4-én-3,20-dion, H. pregna-4,6-dién3,20-dion (Δ6-progeszteron), I. (20RS)-20-metil-3-oxopregn-4-én-21-al, és C* epimere J. pregna-1,4-dién-3,20-dion, K. pregna-4,9(11)-dién-3,20-dion,
Progesteronum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.3-6 L. 20-metilidén-3-oxopregn-4-én-21-al, M. (17α)-pregn-4-én-3,20-dion.