Ginseng radix Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.1-1 DEFINÍCIÓ GINSENG RADIX Ginzenggyökér 04/005:153 Az ún. fehér ginzeng az ázsiai ginzeng, Panax ginseng C. A. Meyer szárított, egész vagy aprított gyökere; az ún. piros ginzenget a szárítás előtt gőzzel kezelik. Tartalom: összesen legalább 0,40% ginzenozid Rg1 (C 4 H 7 O 14,H O; M r 837) és ginzenozid Rb1 (C 54 H 9 O 3,3H O; M r 1163), szárított drogra vonatkoztatva. SAJÁTSÁGOK Makroszkópos és mikroszkópos sajátságait az Azonosítás rész A és B pontja írja le. AZONOSÍTÁS A. A főgyökér orsó alakú vagy hengeres, olykor elágazó, mintegy 0 cm hosszú és,5 cm vastag; gyakran hajlott, vagy erősen görbült. Felszíne hosszában sávozott és a fehér ginzeng esetében világossárga vagy krémszínű, a piros ginzeng esetében barnás-piros; a gyökér feji részén hajtásrügyek találhatók; törése tömör. Keresztmetszetén egy széles külső zóna található, melyben elszórtan narancsvörös váladéktartók láthatók, belső része pedig finoman sugaras szerkezetű. A főgyökér alsó részén a fehér ginzeng esetében számos vékony oldalgyökér ered; a piros ginzengnél az oldalgyökerek rendszerint hiányoznak. B. A drogot elporítjuk (355). A por enyhén sárgás színű. Mikroszkóp alatt R klorál-hidrát oldatban vizsgálva, benne nagy számban láthatunk vékony falú parenchimasejt-töredékeket, továbbá a nagyméretű váladéktartók töredékeit, melyekben sárgásbarna gyantaszerű váladék található. A vizsgálandó mintában találhatunk ezen felül nem fásodott tracheidákat, továbbá részlegesen fásodott, spirálisan vagy hálózatosan vastagodott falú edényeket is, melyek magányosan, vagy kisebb csoportokban fordulnak elő. Elszórtan kalcium-oxalát rozetták is láthatók. A por vizsgálatát R glicerin és R víz egyenlő arányú keverékében végezve, a mintában nagyszámú keményítőszemcse is megfigyelhető, melyek magányosan, kettesével vagy hármasával állnak, és 1 10 μm átmérőjűek. A piros ginzengben a keményítőszemcsék a gőzzel történő kezelés hatására gyakran deformáltak vagy elroncsolódtak, esetleg hiányozhatnak.
Ginseng radix Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.1- C. Vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatot végzünk (..7). Vizsgálati oldat. 1,0 g porított drogot (355), visszafolyóhűtőt alkalmazva, 10 ml R metanollal (70 %V/V) 15 percig forralunk. Lehűlés után a keveréket megszűrjük, majd R metanollal 10,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat. 5,0 mg R eszcint és 5,0 mg R arbutint 1 ml R metanolban oldunk. Lemez: R VRK szilikagél lemez (5 40 μm) [vagy R VRK szilikagél lemez ( 10 μm)]. Kifejlesztőszer: R etil-acetát R víz R 1-butanol (5+50+100 V/V). A fázisokat 10 percig hagyjuk elkülönülni. A felső fázist használjuk. Felvitel: 0 μl [vagy 4 μl], sávok formájában. Kifejlesztés: 10 cm-es [vagy 5 cm-es] fronttávolságig, telítetlen kamrában. Szárítás: levegőn. Detektálás: a lemezt R ánizsaldehid oldattal bepermetezzük, majd 105 110 C-on 5-10 percig melegítjük. A kromatogramokat nappali fényben értékeljük. Értékelés: az összehasonlító oldat és a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő zónák sorrendje az alábbiakban látható. Arbutin: barna színű folt A lemez teteje Ibolyaszínű zóna: (ginzenozid Rg1 és Rg) Enyhén ibolyás színű zóna (ginzenozid Rf) Ibolyaszínű zóna: (ginzenozid Re) Eszcin: szürke színű oldat Összehasonlító oldat Ibolyaszínű zóna: (ginzenozid Rd) Enyhén ibolyás színű zóna Ibolyaszínű zóna: (ginzenozid Rc) Ibolyaszínű zóna: (ginzenozid Rb1 és Rb) Vizsgálati oldat
Ginseng radix Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.1-3 VIZSGÁLATOK Idegen anyagok (.8.). Az anyag feleljen meg a Vizsgálat idegen anyagokra című fejezet követelményeinek. Panax quinquefolium. A Tartalmi meghatározás során kapott kromatogramokat értékeljük. A vizsgálati oldat kromatogramján a ginzenozid Rf-nek megfelelő csúcs látható legyen (lásd a 153.-1. ábrát). Amennyiben a drog Panax quinquefoliummal van hamisítva, a ginzenozid Rf-nek megfelelő csúcs nem látható. Az ábra helye 1. ginzenozid Rg1 3. ginzenozid Rf 5. ginzenozid Rc 7. ginzenozid Rd. ginzenozid Re 4. ginzenozid Rb1 6. ginzenozid Rb 153.-1. ábra. Kromatogram a ginzeng tartalmi meghatározásához: vizsgálati olda.t Szárítási veszteség (..3): legfeljebb 10,0%. Az elporított drog (355) 1,000 g-ját szárítószekrényben 100 105 C-on szárítjuk. Összes hamu (.4.16): legfeljebb 7,0%. Sósavban nem oldódó hamu (.8.1): legfeljebb 1,0%. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (..9). Vizsgálati oldat. Kb. 50 g drogot elporítunk (355). Az elporított drog 1,00 g-ját és R metanol 50 %V/V töménységű oldatának 70 ml-ét egy 50 ml-es gömblombikba mérjük. Néhány szem horzsakő hozzáadása után a keveréket vízfürdőn 1 órán keresztül forraljuk, visszafolyóhűtőt alkalmazva. Lehűlés után lecentrifugáljuk, és a felülúszó folyadékot összegyűjtjük. A kapott maradékkal a fenti műveleteket megismételjük. Az összegyűjtött folyadékot csökkentett nyomás alkalmazásával, 60 C-ot meg nem haladó hőmérsékleten szárazra párologtatjuk. A maradékot R acetonitril (0 térfogatrész) és R víz (80 térfogatrész) elegyének 0,0 ml-ében felvesszük, majd a kapott oldat,0 ml-ét R acetonitril (0 térfogatrész) és R víz (80 térfogatrész) elegyével 10,0 ml-re hígítjuk. A hígított oldatot alkalmas membránszűrőn (0,45 μm) injektálás előtt szűrjük.
Ginseng radix Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.1-4 Összehasonlító oldat. 3,0 mg R ginzenozid Rg1-et, 3,0 mg R ginzenozid Re-t, 3,0 mg R ginzenozid Rf-et és 3,0 mg R ginzenozid Rb1-et R metanollal 10,0 mlre oldunk. Oszlop: méretei: l = 0,15 m, Ø = 4,6 mm, állófázis: R kromatográfiás célra szánt oktadecilszililezett szilikagél (5 μm), hőmérséklet: 35 C. Mozgófázis: A-mozgófázis: R víz, melynek ph-ját előzetesen R tömény foszforsavval -re állítottuk be, B-mozgófázis: R acetonitril. Idő A-mozgófázis B-mozgófázis (perc) (%V/V) (%V/V) 0 8 80 0 8 40 80 60 0 40 40 45 60 40 40 60 45 47 40 0 60 100 47 5 0 100 5 55 0 80 100 0 Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 03 nm-en. Egyensúly beállási ideje: 0 perc. Injektálás: 0 μl. Elúciós sorrend: az összehasonlító oldat készítésénél megadott sorrend. A komponensek retenciós idejét regisztráljuk. Rendszeralkalmasság: összehasonlító oldat: csúcsfelbontás: legalább 1,0, a ginzenozid Rg1 és a ginzenozid Re csúcsa között.
Ginseng radix Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.1-5 A vizsgálati oldat kromatogramján azonosítjuk a ginzenozid Rb1 és a ginzenozid Rg1 csúcsait. A ginzenozid Rb1- és Rg1-tartalmat az alábbi összefüggés alapján számítjuk ki: ahol: A1 m p1 A + A m 100 A 3 1 4 m3 p m 100 A 1 = a ginzenozid Rb1 csúcsterülete a vizsgálati oldat kromatogramján, A = a ginzenozid Rg1 csúcsterülete a vizsgálati oldat kromatogramján, A 3 = a ginzenozid Rb1 csúcsterülete az összehasonlító oldat kromatogramján, A 4 = a ginzenozid Rg1 csúcsterülete az összehasonlító oldat kromatogramján, 1 m 1 = m = m 3 = a vizsgálandó drog tömege grammban, a ginzenozid Rb1 tömege az összehasonlító oldatban milligrammban, a ginzenozid Rg1 tömege az összehasonlító oldatban milligrammban, p 1 = a reagens %-os ginzenozid Rb1-tartalma, p = a reagens %-os ginzenozid Rg1-tartalma. ELTARTÁS Fénytől védve.