SZABÁLYTALAN, NEM SPÓRAKÉPZŐ GRAM- POZITÍV PÁLCÁK. Dr. Szabó Dóra

Átírás

1 SZABÁLYTALAN, NEM SPÓRAKÉPZŐ GRAM- POZITÍV PÁLCÁK Dr. Szabó Dóra

2 Baktériumok klasszifikálása Faj (=Spezies) Nemzetség(=Genus) Család Rend Osztály Törzs (=Divisio) Királyság (Regnum) Taxonómia Staphylococcus aureus Staphyloccus genus Micrococcaceae család Bacillales Bacilli Firmicutes Bacteria

3 Baktériumok klasszifikálása Az egy fajba tartozó baktériumok az alábbi tulajdonságokban megegyeznek: Mikroszkópos és makroszkópos megjelenésük Anyagcseréjük Biokémiai tulajdonságuk Genetikailag a 16s RNS kódoló DNS szekvenciájuk

4 Részletes bakteriológia Baktériumok tulajdonságai Baktériumok szerepe a betegségekben 1. Mikroszkópos Morfológia 2. Makroszkópos Morfológia (tenyésztés) 3. Biokémiai tulajdonságok 4. Szerológiai jellegzetességek (Antigén szerkezet) 5. Virulenciafaktorok 6. Pathomechanizmus és klinikai képek 7. Labordiagnózis (kórokozó kimutatás) 8. Kezelés 9. Megelőzés, profilaxis 10. Epidemiológia

5 SZABÁLYTALAN, NEM SPÓRAKÉPZŐ GRAM-POZITÍV PÁLCÁK Corynebacterium spp. Listeria monocytogenes Erysipelothrix rhusiopathiae Lactobacillus spp.

6 Corynebacterium spp. Corynebacterium diphteriae Diphteroidok Fakultatív pathogén Normál flóra tagja

7 Corynebacterium diphteriae Már az ókorban is ismerték 1821-ben Bretonneau írta le önálló kórképként Kórokozóját Klebs, Löffler toxinját Roux, Yersin írta le először Anatoxint Ramon állította elő 1924-ben

8 Transzmisszió Cseppfertőzéssel emberről emberre Esetleg direkt kontaktussal Reservoir csak humán

9 Lokális gyulladás- Baktérium lokális marad!! infekció helyén epithelsejtek elpusztulnak, gyulladásos reakció erek kitágulnak, leukocyták, vvt-k kiszabadulnak felszínen exudáció, környező szövetekben oedema Exudatum megalvad, - necrotikus epithelen szívós álhártya szürkészöld fibrinből, elhalt leucytákból, vvt-ből álló képződmény, alapjáról nehezen leválasztható

10 Diphteria pharyngitis

11 Diphtheria - pseudomembrane

12 39-éves nő torok. Tünetei: láz, rossz közérzet, torokfájdalom az álhártya leválasztása után vérzés!

13 Lágy szájpad - perforáció

14 PATOGENITÁS Toxin mediálta betegség! Phage acquirálása vezet a toxin termeléshez (lysogén konverzió ) gazdasejt kromoszómájába épült profág kódolja Exotoxin ( polypeptid ) A fragment: toxin funkció B fragment: transport és kötödés

15 A toxin hatása A fragment: toxin hatás a receptorhoz való kötődés után szív, ideg és epitheliális sejtek a cytopalzmába kerül Toxin A: ADP-ribozil-transzferáz ADP-ribozil csoport NAD koenzimről EF-2 re (elongációs faktor) EF-2: egyetlen szubsztrátja az enzimnek( spec. hisztidinvariáns a támadáspontja ) a fehérje szintézis leállítása sejthalál

16 2-6 napos inkubáció helyi károsodás az exotoxin termelés következményeként infekció helyén epithelsejtek elpusztulnak, gyulladásos reakció erek kitágulnak, leukocyták, vvt-k kiszabadulnak felszínen exudáció, környező szövetekben oedema Exudatum megalvad, - necrotikus epithelen szívós álhártya szürkészöld fibrinből, elhalt leu-ból, vvt-ből álló képződmény, alapjáról nehezen leválasztható exudative pharyngitis ( tonsillák, pharynx, larynx ) az exudativum vastag pseudomembrant képez (baktérium, fibrin, lymphocyták, elhalt sejtek ) a pseudomembrán eltávolítása során vérzés alakulhat kijellegzetes tünet! Légutak obstrukciója

17 Távoli hatás Toxin hatás Perifériás idegek károsodása: lágyszájpad, szemmozgató idegek bénulása Máj, vese, mellékvese károsítás Cardiomyopathia : parenchymatosus degeneráció, zsíros infiltráció, nekrózis, szívdilatáció

18 ORRDIPHTERIA : véres orrfolyás, orrnyílás körül bemaródások BŐRDIPHTERIA Főleg trópusokon gyakori: szubakut bőrgyulladás álhártyával fedett felületes fekélyképződéssel ( retroaurikuláris, anogenitális régió, köldök ) Toxin felszívódása általában gyér, szisztémás hatás nincs KÖTŐHÁRTYADIPHTERIA KÖLDÖKDIPHTERIA SEBDIPHTERIA VULVADIPHTERIA

19 Bőr diphteria

20

21 Bőr diphteria

22 Diagnosztika- Festés Álhártyáról vett minta : Neisser-festés Minta:az elváltozás helyéről- Di-tartályban laborba küldeni Értékelés: Tenyészetből készített kenetben kínai írásjelre emlékeztetően rendeződött pálcák, ált. végálló szemcsékkel BARNA: metakromatikus szemcsék =Babes-Ernst szemcsék=volutinszemcsék=foszfát polimer szemcsék SÁRGA: többi sejtalkotórész

23 Tenyésztés Véres agaron: kicsi, rögös, szürke, szabálytalan telepek Clauberg táptalaj (K-tellurit medium) glicerinnel hemolizált vér ( vér-glicerolát), cisztin és tellurit szelektív differenciáló táptala Telepek barna, fekete telepek ( barna hálóval ), mert a tellurit intracellulárisan redukálódik mitis : 1-2 mm, szürkés-fekete, sima felszínű, könnyen kenhető gravis: 2-3 mm, durva felszínű, szürke, vagy fekete centrum -ált.legsúlyosabb kórképekből ez izolálható intermedius : < 1 mm, sima vagy rögös felszín Jellegzetes szúrós fokhagyma szag! Loeffler s táptalaj dextróz, alvasztott marhasavó, húslébouillon gyors növekedés volutinszemcsék gyorsan nőnek

24 Corynebaktérium Tenyésztés szelektív táptalajokon Löffler táptalaj: fehér telepek képez Clauberg táptalaj: fekete telepeket képez

25 Toxintermelés kimutatása in vivo RÖMER-PRÓBA : tengerimalac leborotvált hasfalába subcutan 0.1mL tenyészet ill. a kontroll állatot előtte 500 E antitoxinnal védjük 2 órával előtte -a csak toxint kapott állat 2-3 nap múlva elpusztul, a másik túlél in vitro ELEK PRÓBA : antitoxinnal végzett gélprecipitációs próba tox gén kimutatása PCR-rel szövettenyészeten toxinhatás kimutatás

26 Römer test (tengerimalac)

27 ELEK-Próba gél-precipitációs reakció

28 3, Epidemiológiai vizsgálatok: -ribotipizálás (rrns gének RFLP mintázatának kimutatásán alapuló, hibridizációs molekuláris tipizálási módszer) -SDS-PAGE -PFGE 4., Schick-próba : a betegség kiállása után tartós immunitás marad vissza tengerimalac számára min. letális dózis 1/50-t vizsgálandó egyén bőrébe: ha nincs immunitás, akkor lokális bőrpír, oedema 5.,Immunszerológiai vizsgálat: 14 napos időkülönbséggel levett savópár Aktuális immunállapot: savó antitoxin titerének vizsgálata passzív haemagglutinációval

29 Terápia Klinikai gyanú esetén azonnal! Antitoxin: amíg le nem kötődött a toxin(ló, nyúl, juh, kecske U im,iv) Kórokozó eliminálása antibiotikummal : penicillin, erythromycin, ampicillin, clindamycin, ciprofloxacin, tetracyclin

30 Prevenció Kötelező védőoltás (1963 óta jelenlegi séma, 1928 óta oltanak, 1938 óta kötelező) Di-Per-Te (diphteria-pertussis-tetanus) Diphteria toxoid Oltás hatékonysága: vérsavóban megjelenő antitoxikus ellenanyagok megjelenésével és koncentrációjával jellemezhető

31 Diphtheria elleni védőoltás a világban

32 Diphtheria Európában

33 Egyéb corynebacteriumok C. jeikeium Opportunista patogén, különösen haematológiai betegek, intravascularis katéterrel rendelkezők. Gyakori az antbiotikum rezisztencia C. urealyticum Opportunista patogén Húgyúti fertőzések: erős ureáz termelés struvit és vesekővek C. ulcerans Identikus exotoxinja révén diphteria C. minutissimum Erythrasma, éles szélű, barnás vörös hámló folt, felületes bőrgyulladás

34 Listeria monocytogenes MORFOLÓGIA: Gram pozitív, peritrich csillós pálca, vagy coccobacillus Tok, spóra nincs TENYÉSZTÉS : fakultatív anaerob, első alkalommal szereti a mikroaerofil környezetet Lemezagaron is tenyészik Véresagaron: fehéres-szürkés telepek, hemolitikus zóna, tejsavas szag ( ferde megvilágításban a telepek kékes fénytörésűek) (Szelektív táptalaj: tripaflavin, nalidixsav, natív vérsavóirrizáló zöld telepek) 4 C-on hűtőben lassan szaporodik- hideg dúsítás!

35 BIOKÉMIA: CAMP +, kataláz +, glükózt bont, esculin+ 22 fokon mozog (flagellum-képzés) 37 fokon nem! ANTIGÉN tul.: O, H Szerocsoportok között Ag rokonság Human fertőzések több, mint 90 %-a Ia, Ib, IV b ( IV b sajt epidémia)

36 Listeria monocytogenes Joseph Lister ( ), angol sebész után lett elnevezve.

37 Listeria monocytogenes EM

38 PATOGENITÁS: fakultatív intracelluláris parazita -sejtfal felszíni proteinjével ( internalin ) kapcsolódik az epithelsejt felszíni receptorához ( E-cadherin) -phagocytosisra kerül, phagolysosomába -alacsony ph-n LYSTERIOLYSIN-t (haemolysin) termelkiszabadul a citoplazmába -szaporodik és a sejt aktin polimerizációját fokozza (Act A) -filopodok képződnek -szomszédos epithel sejtet, makrophagot, májsejtet fertőz -kezdődik elölről MPA: monocytosist produkáló ágenst is termel (váladékokból készült kenetekben monocyták)

39

40 Listeria monocytogenes

41 Felnőttkori listeriosis : kontaminált étellel fertőzés (lágy sajtok, kakaó, hentesáru, tej, fertőzött víz) -gastroenteritis -szepszis, meningitis, endocarditis, arthritis, iritis (fertőzés útja?, zoonózis esetek egy részében igazolható juh, kecske) Listeria meningoencephalitis: kifejezett neurotropizmus Újszülöttkori és időskori purulens meningitisek 3., felnőttkori meningitisek 4. leggyakoribb kórokozója Tünetek: szegényesek Ép T-sejtes immunitás szükséges a szervezetből való eliminálásához immunkomprimáltak különösen veszélyeztetettek)

42

43 Intauterin és újszülöttkori fertőzés: terhességi listeriosis, Korai:intrauterin sepsis-halva születhet a baba (granulomatosis infantiseptica) Késői: 0-3 hetes kor : meningitis, sepsis ( IV.b szerotípus) Perinatalis listerosis

44 Mikrobiológiai diagnosztika 1. Klinikai tüneteknek megfelelő mintákból: hemokultúra, liquor, conjuntiva váladék, magzatvíz, placenta, genitális váladék, meconium, étel ) -mikroszkópos vizsgálat -tenyésztés ( véresagar, szelektív agar, dúsítás!) 2. Tengerimalac vagy fiatal nyúl conjunctiva zsákjába kacsnyi mennyiséget oltva, néhány nap alatt purulens conjunctivitis ( Anton-próba ) Egér-oltás: ip.0.5 ml oltva- elpusztul, színtenyészetben izolálható az egér szívvérből, májból, lépből. 3. Epidemiológiai nyomonkövetés: fágtipizálás, NS vizsgálattal 4.Szerotipizálás : tárgylemezagglutinációval

45 TERÁPIA: cefalosporinokra természetes rezisztencia! Ampicillin + aminoglikozidok jók ( esetleg erythromycin ) IMMUNITÁS Sejtmediált!

46 Erysipelothrix rhusiopathiae MORFOLÓGIA: Gram pozitív karcsú pálca, láncokat vagy fonalakat képez, vagy egyedül Csilló, tok, spóra nincs TENYÉSZTÉS: Véres agaron: kicsi áttetsző, csillogó telepek, alfahemolitikus gyűrűvel Na-azidos agaron : szelektíven tenyészik BIOKÉMIA: kat-, ox-,indol-, H2S+

47 Erysipelothrix rhusiopathiae (Gram-positív pálca)

48 Erysipelothrix rhusiopathiae véres agaron

49 1887-ben Rosenbach írta le állatorvosi jelentőség-vágóhídi munkások, állatorvosok, hentesek, halfeldolgozók betegségét okozza ---zoonozis Sertésorbánc kórokozója- szarvasmarhák, szárnyasok, halak betegsége Évekig túlél szennyezett talajban-pácolást, sózást, füstölést bírja! Hő hatására 60 fokon perceken belül elpusztul.

50 Ember fertőződése: zoonosis Fertőzött állat, állati termék bőr mikrosérülései, szúrás 2-7 nap inkubációs idő ERYSIPELOID -vörös, szférikusan terjedő bőrgyulladás -helyi oedema -éles határú lila bőrpír -mérsékelt viszketés,fájdalom -kézízületek fájdalmasak -genny általában nincs -láz, általános tünetek 3-4 hét múlva magától is elmúlik, vagy atb hatására hamarabb Ritkán okozhat: -szepszist, és/vagy endocarditist -diffúz cutan formát

51 Erysipelas a disznóban

52 Erysipeloid

53 DIAGNOSZTIKA 1., Beteg bőrelváltozásából kimetszett szövet Beinjektált, majd visszaszívott fiz. konyhasó-oldat -tenyésztés, identifikálás 2., Virulencia-teszt: fehéregér intraperitoneálisan oltva elpusztul, ( kontroll állatokat hiperimmun sertésorbánc savó megvédi ) TERÁPIA :Penicillin : drug of choice

54 Lactobacillus spp. Morfológia: változatos Gram pozitív pálcák ( vizsgált mintától, alkalmazott tápközegtől függ ) Tenyésztés: változatos Gram pozitív pálcák ( vizsgált mintától, alkalmazott tápközegtől függ ) tomato-juice agar (ph 5) Rogosa : nagy, fehér, kerek, ép szélű telepek

55 Biokémia ox-, kat-, gel-, H2S-, esc + v.- Glükóz-fermentáció alapján: Homofermentatív( glükózból tejsav) Heterofermentatív (glükózból tejsav, etanol, ecetsav, co2) Fakultatív fermentáló (glükózból tejsav, glükonsavból tejsav+)

56 Lactobacillus sp. - Gram festés

57 Epidemiológia Normál flóra tagja szájüreg bél hüvely ( Döderlein-féle bacillus)-tisztasági fok

58 Lactobacillus

59

60 Klinikai kép Fogszuvasodás Szénhidrátokból savas végtermék Savi ph n él, szaporodik Nyálban nagy mennyiségben, jól korrelál caries(hajlam)mal Műbillentyű endocarditis sebváladékok immunkárosodottak Gyomornedv: tumorra utal

61 Fertőzés: autogén infekció! Terápia: nehéz, mert gyakran igen rezisztens ALKALMAZÁSA: probiotikum preventív, terápiás hatású gyomor-, bélhurut, obstipáció, gyomorsavtúltengés, tumor, hasmenés, bélflóra eltolódás esetén

62 Probiotikum A probiotikumok jótékony hatású baktériumok, javítják a bélflóra hatékony működését és az emésztést, kedvezően befolyásolják az immunrendszert és segítik a szervezet vitaminokkal történő ellátását, így gyors regenerálódását. Gátolják a patogén baktériumok növekedését ph csökkentés Baktericid proteinek szekretálása Blokkolják a pathogének tapadását az epitheliális sejtekhez, gátolják az inváziót Nyákot termelnek Modulálják a szervezet immunválaszát Lactobacillus acidophilus, egyéb lactobacillusok Bifidobacterium spp.

63 Lactobacillus, Bifidus sp. Joghurt

64 Prebiotikumok Olyan nem emésztődő anyagok az élelmiszerekben, melyek jótékonyan hatnak a bélflórára

65 Egészségetekre!