A mikrobiológiai diagnosztika, a ribotipizálás és a binary toxin vizsgálat jelentősége a CDI hazai epidemiológiai jellemzésében

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "A mikrobiológiai diagnosztika, a ribotipizálás és a binary toxin vizsgálat jelentősége a CDI hazai epidemiológiai jellemzésében"

Ida Gulyás
4 évvel ezelőtt
Látták:

1 OKI Klinikai és Járványügyi Mikrobiológiai Igazgatóság A mikrobiológiai diagnosztika, a ribotipizálás és a binary toxin vizsgálat jelentősége a CDI hazai epidemiológiai jellemzésében Pászti Judit, Hajdu Ágnes, Barna Zsuzsa, Popovics Éva, Lesinszki Virág, Hajbel-Vékony Gabriella MFKMT Klinikai Mikrobiológiai szekció tudományos ülése, Budapest Március 8.

2 Clostridium difficile előfordulása Természeti környezetben: talajban, vízben, állatok emésztő rendszerében (20-40%) - házi kedvencek; Humán populációban: 1. mikrobióta közösség tagja (lehet, először egészséges csecsemők normál székletflóra tagjaként írták le ben) Firmicutes (Clostridium, Lactobacillus) Bacteroides Bifidobacterium Proteabacteria (Enterobacteriaceae) 2. Toxintermelő variánsa súlyos kórképpel járó hasmenéses megbetegedést okoz Antibiotikum szedését követő hasmenés (AAD) Kórházi tartózkodás alatti/vagy azt követő hasmenés (nozokómiális infekció HAD) Közösségben szerzett infekciós hasmenés

Mikrobiológiai jellemzők Anaerob, Gram-pozitív, mozgó, bunkós fejű pálca Spóraképző, nehezen tenyészthető baktérium Vegetatív alak: a bélben megtalálható, a környezetben 4-6 h túlélés, érzékeny a

3 Mikrobiológiai jellemzők Anaerob, Gram-pozitív, mozgó, bunkós fejű pálca Spóraképző, nehezen tenyészthető baktérium Vegetatív alak: a bélben megtalálható, a környezetben 4-6 h túlélés, érzékeny a gyomor sósavra, antibakteriális szappanokra, alkohol-alapú kézfertőtlenítőkre; Spóra (spóraképzés a stresszre adott válasz): a bélben, (beteg) a környezetben előfordul, rezisztens az antibakteriális szappanokra, alkohol-alapú kézfertőtlenítőkkel szemben. A felületeken, tárgyakon évekig túlél. Infektív dózis <10 spóra

4 Toxin termelés Mikrobiológiai jellemzők A toxin-enterotoxin - gyulladás, nyálkahártyán - enterális tünetek kialakulása B toxin-cytotoxin - adherencia, sejtkárosodás citotoxikus hatás kialakítása Binary toxin (aktin specifikus ADP- riboziltranszferáz)- CDT magas molekulasúlyú fehérje, instabil enterotoxin baktériumtörzs megnövekedett adherenciája a sejtekhez. minden hipervirulens törzs termeli, de pontos szerepe nem tisztázott

5 A hipervirulens C. difficile klón Jellemző a megnövekedett adherencia a target sejtekhez; Magasabb spóraképzési szint Emelkedett (x10) A és B toxin termelés; Binary toxin termelés Fluorokinolonokra és cefalosporinokra rezisztens; Ribotípus: jellemzően 027, de további ribotípusokban is előfordul;

Toxintermelő C. difficile hazai előfordulása - adatforrások NNSR kötelező jelentő rendszer www.oek.

6 Toxintermelő C. difficile hazai előfordulása - adatforrások NNSR kötelező jelentő rendszer EUCDI surveillance; mikrobiológiai vizsgálatokkal kiegészített surveillance periódusok önkéntes

7 C. difficile diagnosztika laboratóriumi diagnózis ajánlott algoritmusa Forrás: ESCMID, 2016 Módszertani ajánlás, második kiadás, OEK, 2016.

8 C. difficile infekció laboratóriumi diagnózisa gyorsteszttel

9 C. difficile diagnosztika - hibalehetőségek Mintavétel: vizsgálatra kizárólag a nem formált, hasmenéses széklet fogadható el (Bristol skála 5-7) A minta szállítása: a mintavételt követő legrövidebb időn belül, 4 o C-on (a toxin hőérzékeny), a széklet további tárolása -20 o C on Friss székletmintára van szükség, DE amennyiben a széklet annyira friss, hogy csak vegetatív alakot tartalmaz, az alkoholos előkezeléssel elölhetjük a baktériumot (tenyésztés sikertelen lehet)

kópiában elszórtan meglévő rdns szakaszok nem kódoló régióinak

10 C. difficile tipizálás ribotípus meghatározás járványügyi és surveillance célból PCR- ribotipizálás- a genomban több kópiában elszórtan meglévő rdns szakaszok nem kódoló régióinak méretpolimorfizmusán alapul Értékelés vizuálisan és Fingerprintig programmal

11 Hazai adatok elemzése EUCDI 4 hónap mikrobiológiai vizsgálatokkal kiegészített surveillance alapján

12 A résztvevő kórházak száma és a besorolási szintje (N=94) 100% 90% 10% N=9 17% N=16 38% N=36 35% N=33 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% PRIM SEC SPEC TERT 0% Első szintű Második szintű Harmadik szintű Specializált Krónikus

13 CDI igazolására vett összes minták száma, és a pozitív minták aránya a kórházak besorolási szintje szerint N=1966 N=10740 Összes vizsgált minta CD irányába CD pozitív minták 1966 OKI-ba beküldött minták (binary toxin,ribotipizálás, ABR) 359

14 RT027 RT176 RT036 RT014 RT001 RT002 RT012 RT035 RT078 RT081 RT449 RTAI33 Egyéb RT078 1% Ribotípusok aránya és a binary toxin termelésének megoszlása ribotípusonként (N=359) RTAI33 RT035 1% RT002 2% RT081 1% RT012 2% RT001 2% RT014 3% RT036 4% RT176 4% RT449 1% 1% Egyéb 10% RT027 68% binary toxin termelés poz no neg Izolátumok 76%-a hipervirulens!

15 Gyakori ribotípusba tartozó izolátumok binary toxin termelésének megoszlása (N=358) 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% poz no neg Sertés/malac-humán izolátumok rokon genetikai vonalat képviselnek tipizálási módszerekkel vizsgálható a humán-állati és állati-állati kereszt átvitel a farmokon tenyésztett állatok és vágóhidak között

16 CA-CDI izolátumok ribotípusának és binary toxin termelésének aránya (N=29) RT176 3% RT046 3% RT482 3% RT566 3% RT578 3% ND 7% RT001 4% RT002 7% RT035 4% RT012 4% RT014 7% RT027 48% RT014/0 4% NEG 41% POS 55% NOTEST 4%

17 RT027 és nem-rt027 törzsek aránya megyénként 100% 90% Y 66,6% 80% 70% N 33,4% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%

18 Összefoglalás A CDI ma is az egyik legjelentősebb bakteriális nozokómiális megbetegedés; A 4 hónapos ECDC protokoll szerint lebonyolított, mikrobiológiai vizsgálatokkal kiegészített surveillance-ban 94 kórház/laboratórium részvételével 358 izolátum került tipizálásra; A leggyakoribbnak bizonyult az RT027, de az izolátumok 2/3-a hipervirulens (egyéb binary pozitív RT-ok); Megyénkénti eltérések/ellátó típusok, betegpopuláció összefüggései további elemzés szükséges A CA-CDI izolátumok között 50% a hipervirulens (RT027 és RT176) törzs Országos incidencia becslésére, évközi gyorsjelentésre nem alkalmas (túlbecslés az elkötelezett jelentők részvétele és a CDI szezonalitása miatt) A surveillance periódusok évenkénti megismétlése alkalmas a tendenciák detektálására

19 Összefoglalás Lényeges új információk a CDI országos és intézményi epidemiológiájának pontosabb megértéséhez Rétegzett adatok kórház típusa és mikrobiológiai diagnosztikai jellemzők szerint Epidemiológiai és klinikai jellemzők vizsgálata ribotípus szerint Hipervirulens 027 és nem-027 PCR-ribotípus hazai dominanciájának problémája CA-CDI mikrobiológiai jellemzőinek, elterjedtségének monitorozása A zoonotikus kapcsolatok korai felismerése.

20 Köszönetnyilvánítás Valamennyi résztvevő kórházak munkatársainak a tenyésztő és beküldő laboratóriumok munkatársainak OTFHÁT Kórházi járványügyi osztály munkatársainak és Az OKI laboratóriumaiban dolgozó kollégáimnak

Hasonló dokumentumok

A multirezisztens kórokozók prevenciója az Európai Unió perspektívája Dr Böröcz Karolina Msc Kórházi járványügyi osztály

A multirezisztens kórokozók prevenciója az Európai Unió perspektívája Dr Böröcz Karolina Msc Kórházi járványügyi osztály EAN 2010.11.18 1 Közegészségügyi veszélyek MRK Influenza pandemia bioterrorismus