HAEMOKULTÚRA VIZSGÁLATOK JELENTİSÉGE AZ INFEKCIÓZUS KÓRKÉPEK MIKROBIOLÓGIAI DIAGNOSZTIKÁJÁBAN dr.gálffy Zsuzsanna SE ÁOK Transzplantációs és

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "HAEMOKULTÚRA VIZSGÁLATOK JELENTİSÉGE AZ INFEKCIÓZUS KÓRKÉPEK MIKROBIOLÓGIAI DIAGNOSZTIKÁJÁBAN dr.gálffy Zsuzsanna SE ÁOK Transzplantációs és"

Aurél Nemes
8 évvel ezelőtt
Látták:

1 HAEMOKULTÚRA VIZSGÁLATOK JELENTİSÉGE AZ INFEKCIÓZUS KÓRKÉPEK MIKROBIOLÓGIAI DIAGNOSZTIKÁJÁBAN dr.gálffy Zsuzsanna SE ÁOK Transzplantációs és Sebészeti Klinika

3 A SEPSIS FOGALMA BAKTERIAEMIA:élı baktérium jelenléte a vérben SIRS /Systemic Inflammatory Response Syndrome / testhımérséklet <35 C, vagy > 38 C : pulzusszám > 90/ min: légzészám > 20/ min,vagy hyperventiláció fehérvérsejtszám < 4000/ mm³ vagy 12000/mm³ SEPSIS A SIRS-t mikrobiológiailag igazolt infekció idézi elı MODS Multiple Organ Dysfunction Syndrome

min: légzészám > 20/ min,vagy hyperventiláció fehérvérsejtszám < 4000/ mm³ vagy

4 A bakteriaemia különbözı formái folyamatos szakaszos átmeneti áttöréses endodocarditis intravénás eszköz fertızés mintavétel ideje nem fontos mintavétel a hidegrázás kezdetekor /intermittáló obstrukció a fertızött epe és húgyuti rendszerben /. nem steril nyálkahártya felületen végzett manipuláció után pl. urológiai fogászati,gasztroenterológiai adekvát terápia mellett pozitív a HK pl- intraabdominális fertızés, diabetes mellitus

fertızött epe és húgyuti rendszerben /. nem steril nyálkahártya felületen végzett manipuláció után pl.

5 A sepsis etiológiája Antibiotikum éra elıtt: Gram pozitív baktériumok S.pneumoniae,S.pyogenes,S.aureus Gram -negatív baktériumok Gram pozitív baktériumok kórházi fertızésekbıl MRSA, Staph.aureus vancomycin rezisztens Enterococcus Napjainkban % Gram pozitív baktérium % Gram negatív baktérium 3-5 % Gomba 10 % Anaerob % polimikróbás

aureus 1950-1980 Gram -negatív baktériumok 1995- Gram pozitív baktériumok kórházi

6 A sepsis patogenezise Valamilyen kórokozó kerül a véráramba baktérium, gomba, protozoon, vírus Vagy a mikroorganizmus felépítésében szerepet játszó anyag kerül a véráramba endotoxin peptidoglikán, candida mannánja

mikroorganizmus felépítésében szerepet játszó anyag

7 A sepsis patogenezise Nem közvetlenül idézik elı a sepsist, hanem endogén mediátorok fokozott termelését indítják el. tumor nekrózis faktor,-tnf interleukin Il-1,IL-6,IL-8 fagocita aktiváló faktor PAF

8 DIAGNÓZIS A sepsis korai felismerése és kezelése elengedhetetlenül fontos. 1. mőtét, orvosi beavatkozás 2 beültetett testidegen anyag 3. krónikus alapbetegség / pl. diabetes mellitus hajlamosít S.aureus,S. pneumoniae,e.coli sepsisre, cirrhosis hepatis Gram-negatív bakterialis sepsisre, és S.pneumoniae sepsisre hajlamosít 4. léphiány 5. csökkent védekezıképesség / gyakori a sepsis / 6. vese és epeúti obstrukció E.coli sepsisre hajlamosít 7. decubitus / polimikrobás /

aureus,S. pneumoniae,e.coli sepsisre, cirrhosis hepatis Gram-negatív bakterialis sepsisre, és S.

9 A haemokultúra vétel indikációi 1. Akut bakteriális infekció okozta sepsis 2. Endocarditis 3. Véráramba vezetett idegen eszköz okozta sepsis gyanúja 4. Hirtelen állapotromlás / idısek, csecsemık, alapbetegségben szenvedık/ 5. Bármely ismeretlen eredető lázas állapot / FUO/

Véráramba vezetett idegen eszköz okozta sepsis gyanúja 4.

10 Mennyi vért kell venni, hogy biztosan megtaláljuk a kórokozót? Relativ eredmény 1: 10 ml +5 ml 2: 10 ml +10 ml Vér mennyisége ml Átlag baktérium szám 1 ml vérben bakterémia esetén: felnıtt <1 ; újszülött, csecsemı >5

11 Az optimális vérminta vétele láz esetén bakteriológiai tenyésztésre elhalt baktérium 38 o C élı baktérium gyulladásos sejt 37 o C lázgörbe

12 HAEMOKULTÚRA vizsgálat / A vér direkt bakteriológiai vizsgálata / Gyorsaság Gram festés Antigén kimutatás S.pneumoniae, S.pyogenes sarjadzó és penész gombák gyors RES vizsgálat PCR vizsgálatok

13 A haemokultúra vizsgálata /A vér direkt bakteriológiai vizsgálata / A gyorstesztek nem helyettesíthetik a hagyományos tenyésztési vizsgálatokat és a rezisztencia vizsgálatokat sem.csak tájékoztató jellegőek.

14 AZ EREDMÉNYEK KÖZLÉSE A POZITÍV HK eredményének közlése Gram festés Direkt RES vizsgálata A NEGATÍV eredmény közlése A palackok inkubálásának a végén adjuk ki Általában 5-7 nap

16 Az eredmények közlése VALÓDI POZITIVITÁS Klinikai szempontból a kórképet okozó baktérium tenyészett ki Bakteriológiai szempontból a palack jelzése pozitív, subkultúra is pozitív

17 Az eredmények közlése Valódi pozitivitás eldöntése klinikus feladata! Minden baktérium okozhat bakteriaemiat, infekciót. Enterobacteriaceae Nem fermentáló Gram negatív pálca / Pseudomonas sp. / Gram negatív anaerob pálca / Bacteroides sp./ Streptococcus ssp Staphylococcus aureus co-staphylococcus Sarjadzó gomba Penészgomba

Enterobacteriaceae Nem fermentáló Gram negatív pálca / Pseudomonas sp.

18 HAMIS POZITIVITÁS hamis pozitív izolátum hamis pozitív HK VAK kioltás kontamináns a subkultúra steril / gondolni kell a lassan növı, vagy vmilyen kiegészítıt igénylı baktérium jelenlétére / a HK rendszer nem detektál Vagy ezt nem megvárva oltunk ki MEGFELELİ TÖLTÉS elıírás szerinti mennyiséget Befolyásolja a tenyésztés sikerét

igénylı baktérium jelenlétére / a HK rendszer nem detektál Vagy ezt nem megvárva

19 Az eredmények közlése KONTAMINÁNS : A HK kitenyészett baktérium NEM a kórokozó származhat bırflórából, szennyezett tárgyról

20 KONTAMINÁCIÓ ismételt vérvétellel kiszőrhetı 1 HK több baktérium / de, pl. intraabdominalis folyamatnál lehet / hosszú inkubáció után lesz pozitiv

21 KONTAMINÁCIÓ MELLETT SZÓL A KLINIKAI KÉPET TEKINTVE: Ha:. nincs sepsis a kitenyészett baktériumra jellemzı primer góc hiányzik Opportunista infekcióra hajlamositó állapot hiányzik nincs idegentest infekció egyéb jeleinek hiánya / pl. procalcitonin, CRP hiánya/

22 Az eredmények közlése DE: Co- Staphylococcus Gram-pozitív pálca / aerob, anaerob a bır normál flórája, lehet kontamináns / A viridans Streptococcusok, Clostridium spp. Valódi kórokozó lehet. Co-Staphylococcus leggyakrabban izoláljuk!! 6-20 %-ban valódi kórokozó DE : idegen test, Mübillentyü Shunt, Dialízis katéter Intravascularis katéter Valódi kórokozó lehet.

23 Co-Staphylococcus valódi oka e a bakteriaemiának?? Különbözı idıpontokban levett HK azonos AB 48 órával a vérvétel után azonosítottuk a baktériumot IGEN

24 A haemokultúra eredményének értékelése A valódi pozitivitás eldöntéséhez a beteg kórtörténete, fizikális vizsgálata, testhıje, teljes- és qualitatív leukocytaszáma, a betegség lefolyásának ismerete kell.

25 A HAEMOKULTÚRA AUTOMATÁK HASZNÁLATÁNAK ELİNYEI gyorsaság egyszerőség kényelem folyamatos ellenırzés kontamináció csökkenése azonnali pozitivitás jelzés több minta egyidejő vizsgálata

26 Automata hemokultura rendszer Signal rendszer Hagyományos palackok

27 BD BACTEC

28 BacT/ALERT haemokultúra automata rendszer

29 Honnan vegyünk vért a HK palackba? - vacuténeres vérvételi rendszeren keresztül - perifériás vénából - aerob / anaerob palackba - esetleg gomba palackba - a palackra írt mennyiségő vért veszünk

30 Honnan NE vegyünk vért a HK palackba! infúzióra, vagy transzfúzióra használt vénából állandó vénakanülön át

31 BACTEC automata mőködési elve

32 BD BACTEC PLUS resin A rezin funkciói: Adszorbció révén közömbösíti az antibiotikumokat. A rezin gyöngyök mechanikus lizáló hatást fejtenek ki a vérsejtekre és a fagocitált mikroorganizmusok kiszabadulnak. A baktérium aggregátumok mechanikai desintegrációja

33 BDBACTEC TM Rezin táptalaj CH CH 2 CH CH 2 CH CH 2 CH CH 2 CH CH 2 SO - 3 H + SO - 3 H + CH CH 2 CH 2 CH CH 2 CH CH 2 Kation-cserélı polimer Nem-ionos polimer A kation-cserélı rezin az ionosan pozitív antibiotikumokat köti meg, mint az aminoglycosidok. A polimer adszorbens az antibiotikumok hidrofób regióit képesek megkötni Spaargaren et al. 1998, JCM;36,3731

34 BacT/ALERT mőködési elve

35 A POZITÍVITÁS FELISMERÉSÉRE SZOFTVER ALGORITMUSOK SZOLGÁLNAK akcelerációs algoritmus detektálja a megemelkedı CO2- termelést, ami az organizmus lag fázisból log fázisba való átmenetének idıszakára esik a növekedési algoritmus a folyamatosan emelkedı CO2 termelést detektálja,nı a mikroorganizmus mennyisége a küszöbérték detektálása azon alapszik, hogy az organizmus log fázist követıen egy stacioner fázisba kerül, miközben olyan mennyiségő CO2-t termel, amely meghalad egy bizonyos elıre meghatározott szintet, küszöbértéket

36 BACTEC BacT / ALERT Fluorescens kolorimetriás aerob aerob anaerob anaerob gomba gomba nincs Gyanta aktív szén Kationos ioncserélı gyanta antibiotikum aminoglikozidokat megköti / vér--lyzozim Polimer abszorbens gyanta transzferrin az antibiotikum hidrofób gammaglobulin részével kapcsolódik peroxidok Késleltetett funkció szobahın tároljuk óra nincs

37 KÖSZÖNÖM A FIGYELMET!

Hasonló dokumentumok

A hemokultúra vételének metodikája

A hemokultúra vételének metodikája Hajdú Edit Szegedi Tudományegyetem Szent-Györgyi Albert Klinikai Központ Klinikai Mikrobiológiai Diagnosztikai Intézet 14. Országos Antibiotikum Továbbképző Tanfolyam