Mezıgazdasági Szakigazgatási Hivatal Élelmiszer lelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság 1095 Budapest, Mester utca 81. 1465 Budapest, 94. Pf. 1740. 1/456 3010; Fax: 1/215 6858 etbi.titkarsag@oai.hu
Tartalomjegyzék I. Bevezetés 1 II. Általános információk 2 1. A minták leírása 2 2. A minták készítése 2 3. Minták tárolása 2 4. Homogenitás 2 5. Stabilitás, tartósítás 2 6. Résztvevıszám és határidık 3 7. Vizsgálatok 3 8. Javasolt módszer 4 9. NRL kísérleti rész 4 III. A körvizsgálatban részt vett laboratóriumok 8 IV. Eredmények 9 V. Értékelés 11 Mellékletek 12 1. számú melléklet: Értesítés a 7-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat mintáinak átvételérıl 2. számú melléklet: Kísérılevél a mintákhoz 14 3. számú melléklet: Útmutató a 7-2011 számú jártassági körvizsgálat végrehajtásához 15 4. számú melléklet: Kódértesítı 17 5. számú melléklet: A validálási paraméterek meghatározása 18 6. számú melléklet: A 7-2010 számú élelmiszerlánc JV eredményközlıjének és útmutatójának küldése 7. számú melléklet: Eredményközlı lap 21 A 7-2011 sz. élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat felelısei 22 13 20 I
I. Bevezetés A tejminták ceftiofur tartalmának mikrobiológiai gátlóanyag módszerrel történı vizsgálatára kiírt 7-2011 számú laboratóriumi jártassági körvizsgálatot az élelmiszerlánc körvizsgálatok részeként szerveztük. A részvevık vizsgáló-teljesítményének független és objektív becslése érdekében a következı szempontokat érvényesítettük, ill. tartottuk be: 1. A körvizsgálat szervezése és megrendezése során messzemenıen figyelembe vettük a nemzetközi elıírásokat. 2. A résztvevık egyértelmő tájékoztatókat, útmutatókat és jelentkezési lapokat kaptak azért, hogy a laboratóriumok fel tudják mérni, milyen szakmai-, gazdasági- és idıterhelést jelent számukra a körvizsgálatban való részvétel. A kommunikációt a körvizsgálat lebonyolítása során folyamatosan fenntartottuk. (Az ISO/IEC 17043:2010 és az MSZ EN ISO/IEC 17025:2005 elıírásokat betartva.) A körvizsgálatban ceftiofur állatgyógyászati szermaradékot tartalmazó szarvasmarha tejet kellett a résztvevıknek a szőrıvizsgálatok (screening) követelményeinek megfelelıen pozitívként vagy negatívként értékelni. Forgalomban lévı ceftiofur hatóanyagú állatgyógyászati készítmények: Készítmény Hatóanyag Állatfaj Ceftiomax Ceftiofur sertés, szarvasmarha Excenel RTU Ceftiofur sertés, szarvasmarha Excenel SP Ceftiofur sertés, szarvasmarha Cevaxel Ceftiofur (nátrium só formában) sertés, szarvasmarha 1. ábra: A ceftiofur szerkezete. A ceftiofur és metabolitjai a tejjel, a vizelettel és a bélsárral egyaránt ürülnek. A ceftiofur maximális maradékanyag-határértéke (Maximum Residue Level [MRL]) tejre a Bizottság 37/2010/EU Rendelete alapján 100 µg/kg. 1
II. Általános információk 1. A minták leírása: Mőanyag edényben 2 db tejmintát kaptak a laboratóriumok. Minden laboratórium egy vak mintát és egy ceftiofurral szpájkolt tejmintát kapott. A kiküldött minták mennyisége kb. 10 ml/edény volt. A minták értékeléséhez minden résztvevı számára 2-3 ml 1 mg/ml-es ceftiofur standard oldatot küldtünk a mintákkal együtt. Ez a standard víz/acetonitril (50/50, v/v) elegyben oldottuk, +4 ºC-on kellett tárolni. Ez a tömény standard oldat a vizsgálataink alapján 4 hétig stabil. Az 1 mg/ml-es standardot minden résztvevı vízzel továbbhígította és ezzel a vizes standard oldattal végezte a vizsgálatai során a szpájkolást. 2. A minták készítése Negatív szarvasmarha tej mintát (<10 µg/kg, LC-MS/MS) használtunk a minták elkészítése során. 200 ml tejhez 4 ml 10 µg/ml koncentrációjú vizes ceftiofur oldatot adtunk és homogenizáltuk. A minta koncentrációja 200 µg/l (2 MRL) volt. 3. Minták tárolása: A tejmintákat a vizsgálatok megkezdéséig mélyhőtıben kellett tárolni -10 ºC alatt. A minták újra homogenizálását írtuk elı a vizsgálatok megkezdésekor a kíméletes kiolvasztás után, a tároló mőanyag edények többszöri összerázásával. 4. Homogenitás: A pozitív mintából 15 párhuzamost tettünk fel a legérzékenyebb táptalajt tartalmazó M. Lutea ph 8-as csészére. A gátlási zónák 4; 5; 5; 4; 4; 4 ; 4; 4; 5; 4; 4; 4; 4; 5; 5 mm-nek adódtak. Átlag: 4,33 mm, szórás: 0,49 mm, relatív szórás: 11,3%. Mivel a mérıeszközünk felbontása 0,5 mm volt, ezért a minták homogenitása megfelelı. A negatív minták nem adtak gátlást. 5. Stabilitás, tartósítás: A tapasztalatok szerint a tejmintákban levı antibiotikum a mintát -10 ºC alatt tárolva 3 hétig stabil. 2
Tárolási vizsgálat: Gátlás (M.Lutea ph 8) (3 minta átlaga, mm) Napok száma MRL 2MRL 1 3 4,6 7 3,2 5,3 14 5,1 6,7 21 3,3 4,7 Átlag 3,65 5,33 Szórás 0,975 0,967 Relatív szórás 26,7 % 18,2 % Tehát a 21 nap elteltével a minták eredménye pozitív maradt és a kiindulási értékhez képest nem változott számottevıen. 6. Résztvevıszám és határidık: A körvizsgálat résztvevıinek száma: 11 laboratórium A minták átadásának idıpontja: 2011.04. 12. A vizsgálatok végrehajtásának határideje: 2011.05. 16. 7. Vizsgálatok A vizsgálat elkezdésének idıpontjára elıírtuk, hogy az a mintaátvételt követıen 2 héten belül történjen meg. 3
Vizsgálandó paraméter: A gátlási zóna nagysága és ebbıl a minta minısítése a screening vizsgálatokkal összhangban pozitív vagy negatív eredmény. Az MgSzH Regionális Laboratóriumai számára a validálás elvégzése kötelezı volt, amelyre egy validálási útmutatót adtunk ki. A validálás során meghatározandó paraméterek: 1. Legérzékenyebb táptalaj MRL koncentrációjú (µg/kg) standard oldat alapján 2. Vak minta átlagos gátlása (mm) 3. Vak minta legnagyobb gátlása (mm) 4. MRL értékre spájkolt minta (µg/kg) átlagos gátlása (mm) 5. MRL értékre spájkolt minta legkisebb gátlása (mm) 6. Kimutatási képesség (ccβ) (µg/kg) 7. Kimutatási képességhez (ccβ) számolt gátlási zóna (mm) 8. Javasolt, - jártassági körvizsgálat lévén nem kötelezı- módszer: OÉVI V.M. RTA+SU/19. A vizsgálatokat a MGSZH, ÉTbI Élelmiszer Toxikológiai Nemzeti Referencia Laboratórium (továbbiakban NRL) is elvégezte, amelynek eredményeit a következıkben részletezzük. 9. NRL kísérleti rész: Standard oldat készítése 25 ml-es mérılombikban 25,0 mg ceftiofur standardot (FLUKA Lot: 1285964, Budapest, Magyarország) mértünk be és feloldunk acetonitril-víz (50/50, v/v) elegyben. Az oldat koncentrációja 1 mg/ml (1000 ppm). Az 1 mg/ml-es oldatból 200 µl-t desztillált vízzel 20 ml-re hígítunk mérılombikban, az oldat koncentrációja 10 µg/ml (10 ppm). A 10 µg/ml-es oldatból 100 µl-t hígítunk desztillált vízzel 10 ml-re mérılombikban, az oldat koncentrációja 100 µg/liter (100 ppb). Ez az oldat felel meg az MRL értéknek. Legérzékenyebb táptalaj B. Subtilis B. Subtilis M.Lutea B. Subtilis Standard Reprezentatív BGA ph6 BGA ph8 ph8 BGA TMP koncentráció az molekula gátlási gátlási gátlási gátlási zóna MRL értéken zóna (mm) zóna (mm) zóna (mm) (mm) ceftiofur 100 µg/l 0,5-1 negatív 5 negatív 4
Validálás A validálás során meghatározott paraméterek: Érzékenység, specifikusság, pontosság, ccβ (Fm) MRL koncentráció: Valódi pozitív (N + ): 20 Valódi negatív (N - ): 20 100 µg/l Pozitív teszt eredmény Pozitív megegyezés (PA): 20 Álpozitív (FP): 0 Negatív teszt eredmény Álnegatív (FN): 0 Negatív megegyezés (NA): 20 Érzékenység: a módszer azon képessége, amely megmutatja biztonsággal kimutatható a szennyezettség. Érzékenység (%)= (PA/N + )x100 = 20/20x100 = 100 Specifikusság: a módszer azon képessége, hogy segítségével különbséget lehet tenni a megfelelı és a nem megfelelı döntés között. Specifikusság (%)= (NA/N - )x100=20/20x100=100 Pontosság: a valódi értéktıl való eltérés. Pontosság (%) = [(PA+NA)/N]x100=100 Valódi megegyezés (N) N = N + +N - = 20+20 = 40 Mivel nem volt álpozitív, sem álnegatív mérési eredményünk, ezért az érzékenység, a specifikusság és a pontosság is 100 %. CCβ (Fm): a vegyület azon legkisebb koncentrációja, amely akkor határozható és/vagy mérhetı meg, ha a hiba valószínősége β. Az MRL-lel nem rendelkezı vegyületek esetén ez az érték az a legkisebb koncentráció, amelyet a módszer ténylegesen kontaminált mintában mérni tud 1-β statisztikai bizonyossággal. Az MRL-lel rendelkezı szerek esetén ez az érték azt a koncentrációt jelenti, amelynél az MRL 1-β statisztikai bizonyossággal állapítható meg. Minden vizsgálat esetén meg kell határozni az analitikai választ. Ezután az átlagos választ (M) és a szórást (sd) kell kiszámolni. Ez a mátrix-specifikus cut-off érték (Fm). CCβ (Fm) számítása: Negatív minta kiválasztása: a legérzékenyebb táptalajon, 20 csészén vizsgáltuk meg a mintát. Negatív a minta, ha a gátlási zóna kisebb vagy egyenlı a vak minta átlagos gátlási zónájával. Ráméréses minták elkészítése: 3 pontos kalibrációt az MRL érték körül a negatív tej mintára ráméréssel (0,5 MRL, MRL, és 2 MRL) 3-3 csészén a legérzékenyebb táptalajon. 5
Koncentráció ( µg/kg ) 50 (0,5 MRL) 100 (MRL) 200 (2 MRL) Analitikai válasz (gátlási sugár, mm) 0,5 0,5 1 0,5 1 0,5 2 2 3 2 3 3 4 5 4 4 4 5 Analitikai válasz Átlag(mm) 0,7 2,5 4,3 Ábrázoljuk a gátlási zónák (mm) függvényében a koncentráció értékeket (µg/liter). 6
Az MRL értéknek megfelelı koncentrációjú szpájkolt mintát, legérzékenyebb táptalajon 20 csészére tettük fel. Ezután meghatározható az átlagos válasz, ami a gátlási zóna nagysága mm-ben. Koncentráció kiszámítása: Excel táblázatban megadjuk a koncentráció (µg/kg) függvényében a gátlási zónák átlageredményeit (mm). A diagramvarázslóból kiválasztjuk a pontszerő ábrázolást. Ábrázoljuk az x tengelyen a mm, y tengelyen a koncentráció értékeket. Trendvonal felvételénél válasszuk a lineáris görbetípust. Az egyebek választásánál jelöljük ki a diagram megjelenítéséhez az egyenes egyenletét (y = ax + b). Az Excel kiszámítja az egyenletet, melybe x helyére behelyettesítjük a mm értékeket és megkapjuk a koncentráció adatokat. Ezután meghatározható az átlagos válasz (M) és ennek a szórása (sd). Ezekbıl az adatokból számolható a CCβ értéke, mely µg/kg koncentrációt jelent. MRL ( µg/l ) 100 Átlagos válasz (M) Analitikai válasz (mm) Fm = M 1. 64 sd M = a mért koncentráció szinten kapott átlag érték (µg/kg) sd = a mért koncentráció szinten kiszámított szórás (µg/kg) CCβ (Fm) = M-1,64 x sd = 117-1,64 x 21 = 82 µg/kg. A CCβ értéket elfogadjuk, mert kisebb az MRL-nél. 7 Mért koncentráció ( µg/kg ) 2 96 2 96 3 137 3 137 3 137 2 96 2 96 3 137 3 137 3 137 2 96 3 137 2 96 2 96 3 137 2 96 3 137 3 137 2 96 2 96 2,5 117 Szórás (sd) 0,51 21
III. A körvizsgálatban részt vett laboratóriumok Szervezet neve Baranya Megyei Kormányhivatal Élelmiszerlánc-bizt. és Állategészségügyi Ig. Laboratórium Gyır-Moson-Sopron Megyei Kormányhivatal Élelmiszerlánc-bizt. és Állategészségügyi Igazgatósága Pécs Gyır Helység Kıröstej Kft. - Kıröstetétlen MgSzH ÉTbI Debreceni Regionáis Élelmiszerlánc Laboratórium MgSzH ÉTbI Kaposvári Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium MGSZH ÉTbI Kecskeméti Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium MGSZH ÉTbI Miskolci Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium MGSZH ÉTbI Székesfehérvári Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium MgSzH ÉTbI Veszprémi Regionális Élelmiszer-mikrobiológiai Laboratórium Omega-Vet-Lab. Bt. XILÓZ Élelmiszer Ellenırzı és Szolgáltató Kft. Élelmiszer- és Takarmányvizsgáló Laboratóriuma Kıröstetétlen Debrecen Kaposvár Kecskemét Miskolc Székesfehérvár Veszprém Szombathely Szeged 8
IV. Eredmények 9
Validálási eredmények Laboratórium Legérzékenyebb táptalaj Vak minta gátlása (mm) MRL koncentrációjú minta gátlása (mm) Kimutatási képesség (ccβ) µg/kg 4 M.Lutea ph 8 0 3,8 32 5 M.Lutea ph 8 0 1,8 89 19 M.Lutea ph 8 0 - - 48 M.Lutea ph 8 0 - - 52 M.Lutea ph 8 0 3,8 89 57 M.Lutea ph 8 0 4,6 81 69 M.Lutea ph 8 0 1,8 83 77 M.Lutea ph 8 0 3,3 85 81 M.Lutea ph 8 0 3,6 99 89 M.Lutea ph 8 0 1,8 59 91 M.Lutea ph 8 0 - - NRL M.Lutea ph 8 0 3,5 82 Körvizsgálati eredmények 1. minta (pozitív tej minta). 2. minta (vak tej minta). Magyarázat: -: nincs adat Laboratórium Eredmény Értékelés 4 pozitív megfelelı 5 pozitív megfelelı 19 pozitív megfelelı 48 pozitív megfelelı 52 pozitív megfelelı 57 pozitív megfelelı 69 pozitív megfelelı 77 pozitív megfelelı 81 pozitív megfelelı 89 pozitív megfelelı 91 pozitív megfelelı Laboratórium Eredmény Értékelés 4 negatív megfelelı 5 negatív megfelelı 19 negatív megfelelı 48 negatív megfelelı 52 negatív megfelelı 57 negatív megfelelı 69 negatív megfelelı 77 negatív megfelelı 81 negatív megfelelı 89 negatív megfelelı 91 negatív megfelelı 10
V. Értékelés A validálást minden Regionális Laboratórium sikeresen elvégezte el. A detektálási kapacitások (CCβ) minden laboratórium esetén kisebb volt az MRL értéknél. A M.Lutea ph 8-as táptalaj érzékenysége ceftiofurra a laboratóriumok között nagyon eltérı. Ennek oka az lehet, hogy még azonos táptalaj típus esetén is az elıkészítési technikán nagyon sok múlik. A körvizsgálati minták azonosítása minden laboratórium számára sikerült. 11
Mellékletek 12
1. számú melléklet: Értesítés a 7-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat mintáinak átvételérıl Feladó: Körvizsgálat MTL Küldve: 2011. április 5. 16:21 Címzett: aliz.bartha@lva.co.at; anna.a@korostej.hu; mail@korostej.hu; bacslab@t-online.hu; balintanal@tonline.hu; bazella@t-online.hu; bertalan.andrasne@nydr.antsz.hu; david.mihaly@foodanalytica.hu; Debreczeni Lajos; duranyik.jozsef@laboratoriumkft.hu; fonagy.andrea@dar.antsz.hu; kamank@oai.hu; lemmerj@oai.hu; lorincznea@oai.hu; margit.biro@sgs.com; gyula.sasvari@sgs.com; mborbely@agr.unideb.hu; molnarl@oai.hu; monika.szabo@lva.co.at; omega.vet.lab@gmail.com; scheilye@oai.hu; szeredia@oai.hu; szipolai@oai.hu; szokolicsj@oai.hu; fodor.imi62@gmail.com; veres.zoltan@wessling.hu; xiloz2010@gmail.com; hubam810@gmail.com Másolatot kap: marthnej@oai.hu; karolyia@oai.hu; domanyg@oai.hu; Körvizsgálat MTL Tárgy: Értesítés élelmiszerlánc jártassági körvizsgálati minták átvételére Fontosság: Sürgıs Tisztelt Résztvevık! A 6-, 7-, 8-, 9, 10- és a 11-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat mintái 2011.04.12-én (kedd) 9 és 16 óra között átvehetık a Mezıgazdasági Szakigazgatási Hivatal, Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóságán. Cím: 1095 Budapest, Mester utca 81. Emlékeztetıül: A 6-2011. számú körvizsgálat tárgya: Élelmiszer adalékok vizsgálata lisztkeverékben. A 7-2011. számú körvizsgálat tárgya: Antibakteriális gátlóanyag (A+Su négycsészés) vizsgálata tejben. A 8-2011. számú körvizsgálat tárgya: Szulfonamidok vizsgálata mézben. A 9-2011. számú körvizsgálat tárgya: Pb, Cd vizsgálata baromfi izomban. A 10-2011. számú körvizsgálat tárgya: Aflatoxin (B1, B2, G1, G2) vizsgálata hántolt földimogyoró iszapban. A 11-2011. számú körvizsgálat tárgya: Klórozott peszticidek vizsgálata sertés zsírban. Kérjük, hogy a minták szállítására -a minták jellegétıl függıen- hőtıtáskát hozzanak magukkal. Üdvözlettel: a Szervezık 13
2. számú melléklet: Kísérılevél a mintákhoz É Mezıgazdasági Szakigazgatási Hivatal Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság 1095 Budapest, Mester utca 81. 1465 Budapest, 94. Pf. 1740. 1/456 3010; Fax: 1/215 6858 etbi.titkarsag@oai.hu A Körvizsgálatban résztvevı Laboratóriumok vezetıi részére Székhelyén Ikt.sz.: 02.4/1884/ 000 /2011. Tárgy: 2011. április 12-i 07-2011-es számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat Ügyintézı: Marthné Schill Judit Domány Gábor Tölgyesi Ádám Szegény Zsigmond Melléklet: 2 db Tisztelet Laboratóriumvezetı Asszony/Úr! 2011. április 12-én a 07-2011-es számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat keretében 2 darab tejmintát küldünk Önöknek. A jártassági körvizsgálat vizsgálat célja az antibakteriális gátlóanyag vizsgálata. Kérjük, hogy a vizsgálatokat és az eredményközlést a mellékelt Útmutató és az e-mailben küldött Excel formátumú Eredményközlı szerint hajtsák végre. A bizalmas ügykezelés érdekében a 2011. évi élelmiszerlánc körvizsgálatokban résztvevıként kapott laboratóriumi kódszámukról egy zárt borítékban levı tájékoztatóból értesülnek, amelyet szintén mellékelünk. Budapest, 2011. április 12. Mellékletek: Üdvözlettel: 1. sz. melléklet: Útmutató 2. sz. melléklet: Kódértesítı 3. sz. melléklet: Validálási útmutató dr. Oravecz Márton igazgató fıállatorvos 14
3. számú melléklet: Útmutató a 7-2011 számú jártassági körvizsgálat végrehajtásához Kísérılevél 1. sz. melléklete: Útmutató a jártassági körvizsgálat végrehajtására A körvizsgálat tárgya: Tej ceftiofur tartalmának a vizsgálata mikrobiológiai gátlóanyag módszerrel. Az élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat száma: 07-2011. A körvizsgálat idıpontja: 2011. április-május 1. Általános elıírások Mőanyag edényben 2 db tejmintát (1. minta/kisz. sorsz. és 2. minta/kisz. sorsz.) kaptak a laboratóriumok. A kiküldött mintamennyiség: kb. 10 ml/edény Minden laboratórium számára 2-3 ml 1 mg/ml-es ceftiofur standard oldatot küldünk a mintákkal együtt. A standard víz/acetonitril (50/50, v/v) elegyben lesz oldva, +4 ºC-on kell tárolni és 4 hétig stabil. Az 1 mg/ml-es standardot természetesen mindenki vízzel hígítsa tovább és vizes standard oldattal végezze a szpájkolást. A ceftiofur MRL értéke tejre az EU No. 37/2010-es rendelete alapján 100 µg/kg. 1.1. Minták tárolása: Mélyhőtıben -10 ºC alatt 1.2. Homogenitás A mintákat nagyon alapos keverés után szereltük ki. A mintákat, a minta elıkészítéseket megelızı bemérések elıtt, az esetleges szétválás miatt a tároló mőanyag edények többszöri 180 o -os mozgatásával célszerő újra homogenizálni. 1.3. Stabilitás, tartósítás A tapasztalatok szerint a tejmintákban levı antibiotikum a mintát -10 ºC alatt tárolva 3 hétig stabil. 2. Vizsgálatok 2.1. A vizsgálat elkezdésének idıpontja: Az érkezéstıl számítva 2 héten belül. 2.2. Vizsgálandó paraméterek: A gátlási zóna nagysága és ebbıl a minta minısítése a screening vizsgálatokkal összhangban (pozitív vagy negatív). Az MgSzH Regionális Laboratóriumai számára a validálás elvégzése kötelezı. Javasolt, - jártassági körvizsgálat lévén nem kötelezı- módszerek, szabványok: OÉVI V.M. RTA+SU/19. 3. Eredmények megküldése: A laboratóriumra vonatkozó körvizsgálati kódértesítıt a minták mellett elhelyezett zárt borítékban találják. 15
Az Excel formátumú eredményközlı lapot elektronikusan elküldjük az Önök e-mail címére. Kérjük a mérési eredményeket és a mérésekkel kapcsolatos egyéb információkat ezen az Excel eredményközlı lapon küldjék vissza e-mailen az mtl-ringtest@mgszh.gov.hu és másolatban a domanyg@oai.hu címekre. Visszaküldéskor az állománynév lehetıleg utaljon a laboratórium kódjára, tehát javasoljuk, hogy a file nevében az X helyére írják be a laboratórium körvizsgálati kódját. Az e-mailen történı beküldési lehetıség választása esetén, papíron/faxon már nem szükséges megküldeni az eredményeket! Az eredmények beküldési határideje: 2011. május 16. 4. A körvizsgálattal kapcsolatos bármilyen kérdésben felvilágosítással szolgálnak: Marthné Schill Judit Osztályvezetı, a jártassági körvizsgálat vezetıje. MGSZH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium Telefon: 06-1-467-0460, 06-1- 383-1190 Mobil:06-30-241-0938 E-mail: MarthneJ@mgszh.gov.hu Domány Gábor Osztályvezetı és Tölgyesi Ádám témafelelıs a jártassági körvizsgálat szakértıi. MGSZH, ÉTbI Élelmiszer Toxikológiai Nemzeti Referencia Laboratórium Telefon: 06-1-456-3010 Mobil: +36-30-499-5669 E-mail: domanyg@oai.hu tolgyesia@oai.hu Szegény Zsigmond minıségirányítási mérnök a jártassági körvizsgálat koordinátora. MGSZH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium Telefon: 06-1-467-0460/124. mellék Mobil: (+36)- 70-436-0347 Email: SzegenyZs@mgszh.gov.hu Budapest, 2011.04.12. Eredményes munkát kívánunk! Üdvözlettel: a Szervezık 16
4. számú melléklet: Kódértesítı A kísérılevél 2. sz. melléklete: Kódértesítı «Megr_Kapcs_tartó_Szervezet_neve_» «Kapcsolattartó» «Kapcst_Beosztás» részére «ISZ» «Város» «Utca_hsz» Tárgy: Értesítés jelentkezés elfogadásáról, körvizsgálati kódszámról. Tisztelt «Kapcsolattartó» «Megszólítás»! Értesítjük, hogy elfogadtuk jelentkezésüket az MGSZH, ÉTbI által szervezett 7-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálatra. A körvizsgálatra megfelelı számú jelentkezés történt, így a jártassági körvizsgálatot elindítottuk és ezúton küldjük a mintákat. Ebben a körvizsgálatban az Önök vizsgálati eredményeit a következı számmal kódoljuk: «Labor_Kód» Nyomatékosan kérjük, hogy vizsgálati eredményeiket csak ezzel a kóddal ellátva közöljék! A bizalmas ügykezelés érdekében, kérjük az alábbiak betartását: Vizsgálati adatokat csak az általunk elektronikusan küldött Excel formátumú eredményközlı lapon közöljenek. Az eredményközlı lapon csak az Önök azonosító kódja szerepeljen, minden más adat feltüntetése, még a mérést végzı személy neve is, szükségtelen. A vizsgálatok elvégzése után elegendı, ha elektronikus levél csatolt mellékleteként küldik el a kitöltött eredményközlı lapot a mtl-ringtest@mgszh.gov.hu és másolatban a karolyia@oai.hu címekre. (Mi ezeket visszaigazoljuk.) Az adatokat csak akkor fogadjuk el elektronikusan, ha a jelentkezési lapjukon feltüntetett kapcsolattartójuk (képviselıjük) e-mail címérıl érkezik. Elektronikus aláírást nem várunk el. Ha e-mailen kapcsolt Excel állományban küldik el nekünk a vizsgálati eredményeiket, akkor nem várjuk el a Nyilatkozat: papíralapú adatközlésüket. Az MGSZH Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság vezetısége és a körvizsgálatot szervezı munkatársak kijelentik, hogy munkájuk során az Önök adatait, kódját és eredményeit bizalmasan kezelik. A mérési eredményüket és annak értékelését a záró jelentésben és publikációkban csak a kódszámmal jelölik. Amennyiben szabályozó hatóság közvetlenül kéri a körvizsgálat eredményét, errıl a Laboratóriumot írásban értesítik. Budapest, 2011.04.12. Üdvözlettel: a Szervezık 17
5. számú melléklet: A 7-2011 számú jártassági körvizsgálat validálási paramétereinek meghatározása Kísérılevél 3. sz. melléklete Validálási paraméterek meghatározása 1. Legérzékenyebb táptalaj MRL koncentrációjú (µg/l) standard oldat alapján. Az 1 mg/ml-es (1000 ppm) standard törzsoldatból MRL koncentrációjú oldatot (µg/l) készítünk desztillált vízzel való hígítással. Fontos, hogy nem az egész 1 mg/ml-es oldatot kell hígítani, hanem abból adott térfogatot kivéve kell a hígítást elvégezni. Az MRL koncentrációjú oldat nem mindig készíthetı el egy lépésbıl. Az MRL érték mértékegysége µg/kg, ami megegyezik a µg/l dimenzióval. Az MRL koncentrációjú oldatot felvisszük a csészékre és a legnagyobb gátlási zónájú csészét adjuk meg. 2. Vak minta átlagos gátlása (mm). Korábban levizsgált, gátlást nem adó vagy nagyon kis zónát produkáló 20 különbözı mintát kell feltenni a legérzékenyebb talajra és átlagolni a gátlási zónák összegét. Ez gyakran nulla. Ha nem áll rendelkezésre 20 különbözı minta, akkor egy mintát többször is fel lehet használni. 3. Vak minta legnagyobb gátlása (mm). A legnagyobb gátlási zónájú vak minta sugara. 4. MRL értékre dúsított (spájkolt) minta (µg/kg) átlagos gátlása (mm). Vak minta spájkolásával MRL koncentrációjú mintát (µg/kg) kell készíteni a törzs oldatból készített adott koncentrációjú oldat segítségével. A legérzékenyebb táptalaj kiméréséhez használt oldat itt nem használható spájkolásra, mert túl híg. Új, számolt koncentrációjú oldatot kell készíteni. Az oldat koncentrációja függ attól, hogy hány gramm vak mintát szeretnénk spájkolni. Példa: MRL = 100 µg/kg (100 µg/l azaz 100 ng/ml) és a mátrix tej. 99 ml vak tejet szeretnénk spájkolni 1 ml adott koncentrációjú vizes oldattal, mert így tudjuk a spájkolt mintát jól homogenizálni. 18
Mindig használható képlet: C1 x V1 = C2 x (V1+V2), ha V2/V1 100 akkor C1 x V1 = C2 x V2 használható. C: koncentráció (µg/kg = µg/l = ng/ml). V: térfogat (µl) vagy tömeg (mg). 1 µl = 1 mg, 1 l = 1 kg. Arra vagyunk kíváncsiak, hogy milyen koncentrációjú oldatból (C1) kell kivenni 1 ml-t hogy azzal homogenizálva a 99 ml vak mintát 100 µg/kg-os spájkolást kapjunk. C1 x V1 = C2 x (V1+V2) C1 (ng/ml) x 1 (ml) = 100 (ng/ml) x (1+99) (ml) Mértékegységre ügyeljünk! C1 = 10000 ng/ml-es oldatot kell készíteni. Az MRL értékre dúsított mintából 20-at teszünk a legérzékenyebb csészére. A 20 minta gátlási zónájának az átlagát adjuk meg. 5. MRL értékre dúsított/spájkolt minta legkisebb gátlása (mm). Az MRL értékő spájkolt minták közül a legkisebb zónát adó minta sugara. Ha a legnagyobb gátlású vak minta sugara nagyobb a legkisebb sugarú MRL értékő minta sugaránál, akkor a validálást meg kell ismételni! 6. Kimutatási képesség (ccβ). Kalibrációs sort készítünk 0,5MRL; MRL és 2MRL értékre spájkolt vak minták segítségével. A kalibrációs egyenletbıl kiszámoljuk a 20 MRL értékő spájkolt mintára kapott koncentrációkat és átlagoljuk (M). A 20 minta szórását (S) is kiszámoljuk. ccβ (µg/kg) = M 1,64 x S. 7. Kimutatási képességhez (ccβ) számolt gátlási zóna (mm). A kalibrációs egyenes egyenletébıl kiszámoljuk, hogy a ccβ értékhez, hány mm-es gátlási zóna tartozik. 19
6. számú melléklet: A 7-2010 számú élelmiszerlánc JV eredményközlıjének és útmutatójának küldése Feladó: Körvizsgálat MTL Küldve: 2011. április 13. 12:08 Címzett: Körvizsgálat MTL Másolatot kap: marthnej@oai.hu; domanyg@oai.hu Titkos másolat: scheilye@oai.hu; szokolicsj@oai.hu; fodor.imi62@gmail.com; xiloz2010@gmail.com; hubam810@gmail.com; anna.a@korostej.hu; mail@korostej.hu; lemmerj@oai.hu; szipolai@oai.hu; molnarl@oai.hu; bazella@t-online.hu; szeredia@oai.hu; kamank@oai.hu; omega.vet.lab@gmail.com X_laborkod_7-2011 JV Tej a~1.xls (25 KB )[Megnyitás weblapként ]; 7-2011 utmutato.pdf (31 KB )[Megnyitás Mellékletek: weblapként ]; 7-2011_Validalasi_utmutato.pdf (24 KB )[Megnyitás weblapként Fontosság: Sürgıs Tárgy: A 7-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat Eredményközlı Excel táblázatának és az Útmutatójának küldése Tisztelt Résztvevık, A 7-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat (antibakteriális gátlóanyag (A+Su négycsészés) vizsgálata tejben) Eredményközlı Excel táblázatát és az Útmutatóját (amelyet papír alapon a minták mellett is megkaptak) kapcsolt állományban küldjük szíves felhasználásra. Ezt az eredményközlı táblázatot a beírt eredményekkel kérjük, hogy 2011.05.16-ig az mtl-ringtest@mgszh.gov.hu és másolatban domanyg@oai.hu e-mail címekre szíveskedjenek visszaküldeni úgy, hogy a file nevében az X helyére az Önök körvizsgálati laborkódját írják be. A körvizsgálati laborkódot a minták mellett levı zárt borítékból tudják meg. Sok sikert a vizsgálatokhoz! Üdvözlettel: a Szervezık 20
7. számú melléklet: Eredményközlı lap Körvizsgálat tárgya: Tej antibakteriális gátlóanyag tartalmának meghatározása Körvizsgálat ideje: 2011. április-május Kérjük, hogy csak a színes mezıkbe és egy-egy mezıbe max. 255 karaktert írjon. Eredményközlı lap a 7-2011 jártassági körvizsgálathoz Laboratórium körvizsgálati kódja: Validálási paraméterek (2002/657 EK) értékei: Mintaérkezés dátuma: Vizsgálat befejezésének dátuma: Visszaküldési határidı: 2011.05.16 E-mail: mtl-ringtest@mgszh.gov.hu; és másolatban domanyg@oai.hu Laboratórium körvizsgálati kódja Körvizsgálat száma Körvizsgálati csomag Paraméter Mértékegység Eredmény 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Legérzékenyebb táptalaj MRL koncentrációjú (µg/kg) standard oldat alapján 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Vak minta átlagos gátlása mm Vizsgálati eredmények: Laboratórium körvizsgálati kódja 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Vak minta legnagyobb gátlása mm 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag MRL értékre spájkolt minta (µg/kg) átlagos gátlása MRL értékre spájkolt minta legkisebb gátlása 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Kimutatási képesség (ccβ) µg/kg 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Körvizsgálat száma Kimutatási képességhez (ccβ) számolt gátlási zóna mm mm mm A minta laboratóriumi azonosítója: A minta eredeti jele: Körvizsgálati csomag Paraméter Mértékegység 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Gátlási sugár mm 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Minta értékelése* 07-2011 Élelmiszer tox antibakt. gátlóanyag Megjegyzés 1. minta eredmény 2. minta eredmény *Minta értékelése: Pozitív, ha a minta gátlása nagyobb az MRL értékre spájkolt vak minta átlagos gátlásánál. Negatív, ha a minta gátlása kisebb az MRL értékre spájkolt vak minta átlagos gátlásánál. Kérjük a számítással kapcsolatos kérdések megválaszolását. Képlet: C1*V1=C2*(V2+V1)- --> ha V1<<V2, azaz V2/V1 100, akkor C1*V1=C2*V2 Számolt oldat koncentráció (ng/ml) (C1): ng/ml=µg/kg; 1 ml=1000 µl Használt oldat térfogat (ml) (V1): MRL (ng/ml) (C2): 100 Vak minta térfogata (ml) (V2): 21
A 7-2011 számú élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat szervezésért és értékeléséért felelıs szervezeti egység: Mezıgazdasági Szakigazgatási Hivatal Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság Mőszaki-technológiai Laboratórium Cím: 1095 Budapest, Mester u. 81. E-mail: mtl-ringtest@mgszh.gov.hu A körvizsgálat idıtartama (a mintakiosztástól a zárójelentés elkészítéséig): 2011. április 12. 2011. június 30. A zárójelentés felelıs szerkesztıje: Marthné Schill Judit Osztályvezetı A jártassági körvizsgálat vezetıje MgSzH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium A zárójelentést szerkesztette: Szegény Zsigmond Minıségbiztosítási mérnök A jártassági körvizsgálat koordinátora MgSzH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium és Tölgyesi Ádám a körvizsgálat szakértıje MGSZH, ÉTbI Élelmiszer Toxikológiai Nemzeti Referencia Laboratórium A zárójelentést átvizsgálta: Dömsödi József Élelmiszerlánc-biztonsági mérnök MgSzH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium A jártassági körvizsgálat szakértıi: Domány Gábor Osztályvezetı Tölgyesi Ádám Témafelelıs MGSZH, ÉTbI Élelmiszer Toxikológiai Nemzeti Referencia Laboratórium A zárójelentést jóváhagyta: Dr. Oravecz Márton MgSzH Élelmiszer- és takarmánybiztonsági igazgató fıállatorvos ---- A zárójelentés vége ---- 22