SZEGEDI TUDOMÁNYEGYETEM Szent-Györgyi Albert Klinikai Központ Patológiai Intézet Endoszkópos ultrahang vezérelt finomtű aspiráció intraabdominalis daganatok diagnosztikájában: 6 év tapasztalatai a Szegedi Tudományegyetemen Vasas Béla 1, Bor Renáta 2, Czakó László 2, TiszlaviczLászló 1, Hamar Sándor 1, KaizerLászló 1, Szepes Zoltán 2 1 Szegedi Tudományegyetem, Patológiai Intézet 2 Szegedi Tudományegyetem, I.sz. Belgyógyászati Klinika XVI. Citológus Kongresszus, 2017
EUS-FNA mintavétel Kis elváltozások is szúrhatóak Minimális invazivitás, alacsony szövődményráta Hozzáférhetősége Magyarországon is egyre szélesebb körű Szenzitivitás 83% (54-95%) Specificitás 100% (71-100%) Negatív prediktív érték 72% (16-92%) Pontosság 88% (65-96%)
EUS centrumok Győr Szombathely Székesfehérvár Budapest Debrecen Zalaegerszeg Kecskemét Szeged Gyula Pécs 13 centrum, kb.1000 vizsgálat évente
EUS-FNA vizsgálatok az SZTE Patológiai Intézetben N= 281 Vizsgálatok száma 4 12 23 45 96 101 2011 2012 2013 2014 2015 2016
EUS-FNA vizsgálatok az SZTE Patológiai Intézetben pancreas 46% nyirokcsomó 17% pancreas cysta 15% mediastinalis tumor 2% máj 7% Klatskin 1% SMT 6% epeút 0% mellékvese abdominalis 1% rectum tumor 3% 2%
EUS-FNA vizsgálatok az SZTE Patológiai Intézetben 100% 80% 60% 40% 20% 0% 0 6 4 5 34 14 37 113 18 37 4 2 3 21 4 1 12 9 0 0 2 2 116 212
A mintavétel eredményességét befolyásoló tényezők Berendezés Endoszkópos vizsgáló Aspirátum vs. hengerbiopszia Aspiratio technikája Szúrások száma Mintavételi tű A patológus tapasztalata Rapid on-site pathology (ROSE) Daganat helye, típusa
EUS-FNA mintavételi technikák VÁKUUM TECHNIKA Nagyobb szívóerő 5, illetve 10 ml vákuumot biztosító fecskendő KAPILLÁRIS/MANDRIN TECHNIKA Mandrin gátolja a tű tápcsatornai kontaminációját és eltömődését. Kis szívóerő a mandrin eltávolításával.
Tanulmány (solid pancreas daganatok) Prospektíven összehasonlítani a mandrin kihúzásával keltett szívóerő és a vákuumszívás eredményességét az alábbi szempontok alapján: o o A technikai sikerességi ráta A kenetek: Száma Sejtdússága Véressége Diagnosztikus értéke Tű átmosásával nyert folyadék diagnosztikusságát Szövethenger (sejtblokk) nyerés arányát Saját, evidencia alapú ajánlás kidolgozása a mintavétel metodikájára vonatkozóan.
Módszerek Prospektív vizsgálat 2014.01.01. és 2016.06.31 között (I. Belgyógyászati Klinika) 92 beteg Inoperábilis vagy bizonytalan viselkedésű szolid pancreas tumor 22 G-s tűvel való szúrás
Eredmények I. Nem diagnosztikus II. Negatív malignitásra III. Atípusos sejtek IV. Neoplasticus Benignus Serosus cystadenoma, stb. Egyéb Low grade NET, IPMN, MCN, solid pseudopapillaris neoplasia V. Malignitás gyanúja VI. Definitív malignitás 92 beteg 72% diagnosztikus
Eredmények AZ EUS-FNA EREDMÉNYESSÉGE SOLID PABCREAS DAGANTOK DIAGNOSZTIKÁJÁBAN TECHNIKÁTÓL FÜGGETLEN MANDRIN TECHNIKA VÁKUUM TECHNIKA Szenzitivitás 83.1% 69.9% 73.5% Specificitás 100% 100% 100% NPV 39.1% 26.5% 29% PPV 100% 100% 100%
Következtetés A mandrin- és a vákuumtechnika egyaránt eredményes eljárás a szolid pancreastumorok endoszkópos ultrahangos mintavételében. Mivel a mandrin technika kevésbé véres keneteket, kevesebb kenetszámot, magasabb diagnosztikus arányt eredményez solid pancreasdaganatokban ezt ajánljuk az első mintavételi technikának Ha ez nem eredményez elégséges anyagot, akkor vákuumtechnika alkalmazása is javasolt (kombinált módszer)
Barbara Ann Centendo et al.: Pancreatic Cytohistology (Cambridge, 2015) A minták kezelése és feldolgozása
Solid vs. cysticus elváltozások o Solid terimék o Direkt kenetek o Cytospin preparátumok o Folyadék alapú cytológia o Sejtblokk minták (formalinban fixált, paraffinba ágyazott) Barbara Ann Centendo et al.: Pancreatic Cytohistology (Cambridge, 2015)
o Fixálás és festés 1. Nedves (azonnali) fixálás o 100% metanol, 95% etanol, 80% izopropanol, stb. o Hematoxilyn-eosin, Papanicolaou festés o 2. Száraz fixálás o Levegőn szárítás o Diff-Quick, Giemsa festés
o Fixálás és festés 1. Nedves (azonnali) fixálás o 100% metanol, 95% etanol, 80% izopropanol, stb. o Hematoxilyn-eosin, Papanicolaou festés o 2. Száraz fixálás o Levegőn szárítás o Diff-Quick, Giemsa festés
A nedves fixálás, H&E festés előnyei o Legjobban megőrzött chromatinszerkezet o H&E festés citológiai és szövettani morfológia összevetése o Molekuláris vizsgálatok jobb eredmények nedvesen fixált anyagokon Székely E. és mtsai: Magyar Onkológia 58:311 323, 2014
Pancreas EUS-FNA, H&E, 8x
H&E, 40x
H&E, 40x
Sejtblokk technika Dr. Bor Renáta felvétele, I. Belgyógyászati Klinika, Szeged
H&E
A sejtblokk különösen előnyös: o Jól differenciált ductalis adenocarcinoma o Autoimmun pancreatitis gyanúja o Metastaticus daganat o Lymphoma gyanú o Prognosztikus, prediktív markerek oneuroendokrin daganatok otüdő cc. oemlő cc.
Kenet és sejtblokk o A direkt kenetek és a sejtblokk kombinálása javasolt! o Tű átmosásával nyert folyadék oa tű átmosása fiziológiás sóoldattal, majd levegővel natív csőbe o Cytocentrifugálás okenet vagy sejtblokk o 30%-ban diagnosztikus o Általában károsodott sejtek
Cysticus pancreas léziók Barbara Ann Centendo et al.: Pancreatic Cytohistology (Cambridge, 2015)
Klinikai adatok és kérőlap o o Adekvát klinikai és radiomorfológiai adatok o Ismert daganatos betegség, ennek pontos szövettani típusa o Ismert chronicus pancreatitis, májcirrhosis o Stent jelenléte o Típusos laboreltérések o Tumormarkerek Endoszonográfiás lelet, diagnózis o Az elváltozás helye (szerv, nyirokcsomó, lágyrész) o Nagysága o Solid vagy cysticus (uni- vagy multilocularis), necroticus o Éles határú vagy infiltratív o Soliter vagy multiplex
Klinikai adatok és kérőlap o Mintavétel helye melyik kenet honnan származik? Hány kenet készült? o Mely üreges szerven keresztül történt a mintavétel? o Nyelőcső, gyomor, duodenum, rectum ép nyálkahártya kontamináció! o Van-e sejtblokk (szövethenger)? o Opcionális: Milyen technikával történt a szúrás (mandrin, vákuum)?
Ép gyomor foveolaris hám vagy gastricus IPMN low grade dysplasiával?
Kiegészítő vizsgálatok o Speciális festések o Immuncitokémia o Immunhisztokémia o Molekuláris vizsgálatok
PDAC, nyákfestés (PAS-alciánkék)
CK7, 40x
Immuncytokémia és immunhisztokémia H&E Kissejtes neuroendokrin carcinoma Synaptophysin
Leletezés: Papanicolaou Társaság ajánlása I. Nem diagnosztikus II. Negatív malignitásra III. Atípusos sejtek IV. Neoplasticus Benignus Serosus cystadenoma, stb. Egyéb Low grade NET, IPMN, MCN, solid pseudopapillaris neoplasia V. Malignitás gyanúja VI. Definitív malignitás
Submucosus/intramuralis daganatok Dr. Szepes Zoltán felvétele
Submucosus/intramuralis terimék
Submucosus/intramuralis terimék
GIST Submucosus/intramuralis terimék
CD117+
DOG1+
Nyirokcsomók Robert Hawes et al.: Endosonography (2nd Ed), 2011
Perirectalis nyirokcsomó EUS-FNA
Melanoma malignum
Melanoma malignum (sejtblokk)
69 éves nő, retroperinealis EUS-FNA
CK AE1/AE3
CD3
Ki-67 T-sejt gazdag B-sejt lymphoma
59 éves nő, retroperinealis EUS-FNA Follicularis lymphoma
Összefoglalás Megfelelő kérőlap Megfelelő mintavételi technika Megfelelő kenetkészítési technika Megfelelő, nedves fixálás, H&E festés Direkt kenetek és sejtblokk kombinálása, tű átmosása Kiegészítő vizsgálatok Standardizált leletezés Folyamatos, kétirányú kommunikáció, szoros együttműködés