mtorc1 and C2 komplexhez köthető aktivitás különbségek és ennek jelentősége humán lymphomákbanés leukémiákban

HTML
DOWNLOAD

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "mtorc1 and C2 komplexhez köthető aktivitás különbségek és ennek jelentősége humán lymphomákbanés leukémiákban"

Valéria Pintérné
8 évvel ezelőtt
Látták:

1 mtorc1 and C2 komplexhez köthető aktivitás különbségek és ennek jelentősége humán lymphomákbanés leukémiákban Sebestyén A, Márk Á, Nagy N, Hajdu M, Csóka M*, SticzT, Barna G, Nemes K*, Váradi Zs*, KopperL Semmelweis Egyetem I. Patológiai és Kísérleti Rákkutató Intézet és II. Gyerekklinika

2 3 2,74 3,5 3 3,1 2,9 kezeletlen Rapamycin 2,5 2,5 P-4EBP1 ELISA OD 2 1,5 1,5,52,7 1,53,4,4,2.nap 15. nap 33.nap.nap 33.nap 3 hónap relapszus jó prognózis rossz prognósis P-4EBP1 ELISA 2 1,5 1,5,8 1,4,1,5,72 2. beteg ,55 ALL sejtek magas mtoraktivitás, bizonyos érték felett várható rossz prognózis, Még itt a C1/C2 aktivitás arányokat nem tudjuk, most kezdjük a vizsgálatokat, de az invitro short termrapamycinérzékenységben talált különbségekutalnak rá, hogy egyedi különbségeket mutathat és a rossz prognózisú betegek esetében az esetleges jövőbeni inhibitor alkalmazások előtt mindenképp érdekes szempont lehet ennek megállapítása PLOSOne Nemes K, Sebestyén A et al. 213

3 mtor mammalian target of rapamycin Amino savak oxigén Rapamycin Makromolekulák bioszintézise Fehérje szintézis Lipid szintézis Stressz Anyagcsere glikolízis Glükóz felvétel mtor aktivitás Autofágia Túlélés Energia ellátottság Növekedési faktorok citoszkeleton Sejtciklus progresszió Növekedés mtorjelút elemeit érintő mutációk (PI3K, RHEB, AKT1,2,3 aktiváló mutáció; PTENinaktiváló mutáció). A humán rosszindulatú daganatokmintegy 5%-ában konstitutívan aktivált az mtor jelút. Hematológiai malignitásokbanleírt magas mtor aktivitás AML (hátterében RTK és N-RAS, K-RAS mutációk) -Leviset al23, Ahmadet al 211 CML, B-ALL (BCR-ABL fúziós fehérje áll a hátterében)-kharas 25 MM-benfokozott AKT aktivitás -Peneet al 22 Köpenysejtes lymphomákés veserákok esetén az mtor gátlás már a klinikai gyakorlat része

4 Fehérje, lipid szintézis,autofágia, energiaháztartás, anyagcsere citoszkeleton túlélés/anyagcsere

5 Cél: Lymphomák, bizonyos leukémiák mtoraktivitásának karakterizálása mtoraktivitás két komplex mennyiségének, aktivitásának mtor inhibitor érzékenység meghatározása Vizsgálati lehetőségek Módszerek: fehérje szinten: szöveti minták v. vér, csontvelő - IHC, TMA, ELISA, Western blot primer leukémia sejtek, ly-le sejtvonalak kezelése mtori-okkal in vitro, in vivo Lymphoma TMA 1 esettel primer ALL sejtek Rapamycin(C1) DLBCL 8 eset Sejtvonalak (DLBCL és HL is) NVP-BEZ235(dual-mTORC1 és PI3K gátlás) HL 8 eset Lymphoma xenograftok(dlbcl, HL és BL) PP232 (C1 és C2 gátló) 5 gyerekkori ALL proliferáció, apoptózis vizsgálat xenograft tumor növekedésének vizsgálata P P S6

6 NYCS MCL BL Gyermekkori ALL minták vizsgálata (>4 eset) 3. nap 33.nap ps6 DLBCL ps6 HL ps6 ALCL P-4EBP1 ELISA OD 2,5 2 1,5 1,5,67,15 * 1,65 threshold score,7 OD: 1,11 Jó prognózis Rossz prognózis pmtor pmtor pp7s6k CLL MZL ALL pp7s6k pp7s6k ps6 PLOSOne Nemes K, Sebestyén A et al. 213

7 Diffúz nagy B sejtes lymphomák vizsgálata Non-GC: GC: p-s6 68 eset (5 nongc, 18 GC) Karakterizálás Han, Tally, Choi A non-gc esetek 8%-ában magas mtor aktivitást, a GC altípus alacsony mtor aktivitást mutatott. mtor+ non-gcrictoroverexpressziónélkül mtorc1!! p-mtor Rictor Raptor mtor+ non-gc Rictor overexpresszióval Modern Pathol. Sebestyén A et al. 212 mtor + mtor- (emelkedett/magas aktivitás) (alacsony aktivitás) Rictor Raptor mtorc2!!

8 1% 8% 6% 4% 2% mtor - (32 eset) mtor + (18 eset) BHD1 DLBCL sejtvonal mtor inhibitor érzékenység vizsgálata in vitro 2 % idő (hónap) ap o p tózis% % 8% 6% 4% mtor és mtor + Rictor overexpresszióval (28 eset) kontroll R NVP- BEZ235 PP242 72h 3,85 5,5 12,8 6,2 96h 6,95 4,9 14,9 1,3 12h 5,4 7,45 16,2 14,5 2% % Modern Pathol. Sebestyén A et al mtor + Rictor overexpresszióval (22 eset) idő (hónap)

9 A Hodgkin lymphomák 92%-a magas mtor aktivitást mutatott 77/83 6/83 Vizsgálatba bevont betegek túlélése (%) mtormtor+ HL, p-s6 IHC HL, p-s6 IHC Csak 1 esetben tudtunk Rictoroverexpressziótkimutatni, ami arra utal, hogy az mtorc2 komplex expressziójaahl-ekrenem jellemző Apoptózis% a p o p to s is % Tumortérfogat(mm3) p=,42 KMH2- HL sejtvonal, xenograft mtori érzékenysége * * HL, Rictor IHC control V V+R Eto Kontroll R D D+R V V+R Eto Eto+R BMC Cancer Márk Á. et al. 213

10 Igazoltuk mtorc2 komplex elemeinek overexpressziója, aktivitása rosszabb prognózis mtoraktivitás emelkedés lehet terápiás célpont nemcsak köpenysejtes lymphomában, hanem nongc-dlbcl-ek(mtorc1 v. mtorc2) HL-ek(mTORC1) és ALL-ekesetében is, p-s6+s6 ~mtorc1 aktivitás mtor+rictor ~mtorc2 komplex mennyisége Ehhez szükséges igazolni a magas mtoraktivitást, illetve vizsgálni a két komplex mennyiségét (mtorc1 inhibitorok már egyre könnyebben elérhetőek, de Jönnek az újgenerációs inhibitorok) BHD1 sejtvonal (DLBCL) Piros: pontszerű reakció Zöld: sejtmagok autofluoreszcencia DEV sejtvonal (HL) Könnyebb IHC alapú megállapításához lehetőség talán lesz!! - Duolink

11 KÖSZÖNÖM I.Patológia Intézetben kollégáimnak! Hemato-onkológusklinikusoknak!

Hasonló dokumentumok

Lymphoma sejtvonalak és gyerekkori leukémia (ALL) sejtek mikro RNS (mir) profiljának vizsgálata

Lymphoma sejtvonalak és gyerekkori leukémia (ALL) sejtek mikro RNS (mir) profiljának vizsgálata Dr. Nemes Karolina, Márk Ágnes, Dr. Hajdu Melinda, Csorba Gézáné, Dr. Kopper László, Dr. Csóka Monika, Dr.