Új marker a Cystatin C bevezetése GFR meghatározására Nephrológiai Beteganyagon

Átírás

1 Új marker a Cystatin C bevezetése GFR meghatározására Nephrológiai Beteganyagon Gellérné Jakatics Judit, Horváth Lászlóné, Dr. Hetyésy Katalin Petz Aladár Megyei Kórház Központi Laboratórium

2 Krónikus veseelégtelenség A világon egyre nagyobb egészségügyi problémát jelentenek A végstádiumú vesebetegség elıfordulása folyamatosan nı Definíció: a glomerulus filtrációs ráta (GFR) 60ml/perc alatt van 1,73 testfelület m 2 Ha legalább 3 hónapon keresztül, vagy legalább 3 hónapja fentáll a vese funkcionális, vagy strukturális károsodása normál vagy kóros GFR mellett 2

3 Idült vesebetegség CKD Lakosság több mint 10%-át érinti Hypertonia, diabetes következtében fél millió krónikus vesebetegségben szenvedı él MO.-on Ezt a számot emeli:glomerulosclerosis, glomeruláris- és tubulointersticiális vesebetegségek Idıskor vesefunkciót csökkentı hatása 3

4 Idült vesebetegség stádiumai Stádium Jellemzık GFR (ml/perc/1,73 m 2) Gyakori -ság( %) 1. Vesebet. Norm. v. magas GFR-rel >90 3,3 2. Vesebet. csökkent GFR-rel ,0 3. Mérsékelt veseelégtelenség ,3 4. Súlyos veseelégtelenség ,2 5. végstádiumú <15 v. dialízis 4 0,1

5 GFR a vesefunkció jelzıje Meghatározása: a mindennapi gyakorlatban körülményes (izotóp clearence vizsgálatok) Pontatlan (creatinin clearence 24 órás vizeletgyőjtésbıl) MANET és az MLDT közös ajánlása a GFR képletekkel becsült számítása, az egfr 5

6 egfr Módszertıl függı képlet alapján: GFR=175x(Scr x 0,0113) -1,154 x (kor) -0,203 /x 0,742 ha nı/ (x 1,21 ha fekete rassz) Ahol: GFR (ml/min/1,73 m 2 ); kreatinin ( umol/l) ; kor (év) Normális vagy enyhén csökkent GFR esetén pontatlan, egyéb módszer javasolt 6

7 Endogén kreatinin clearence Kreatinin nem tekinthetı ideális anyagnak Okok: Kis mennyiségben tubulusokon át is kiválasztódik Szervezetben keletkezı mennyisége több befolyásoló tényezıtıl függ Analitikai meghatározás problémái Nincs nemzetközi standardizáció 7

8 Mi tekinthetı ideális Nem metabolizálódik a szervezetben Szabadon halad át a glomeruluson Tubulusok nem vehetik fel, nem választhatják ki, nem szívódhat vissza Húgyutakban sem választódhat ki Egyensúlyi állapot anyagnak? 8

9 Cystatin C Alacsony molekulasúlyú 13,3 kda Citoplazmatikus protein Proteáz inhibitor 120 aminosavból álló, nem glikált fehérje Minden sejtmaggal rendelkezı sejt termeli Nem befolyásolja nem, életkor, izomtömeg 9

10 A Cystatain C szuperfamilia A cystatin C aminosavszekvenciáját 1981-ben fedezték fel. 1. Intracellularis 2. Extracellularis 3. Intravscularis Cystatin A Cystatin B Cystatin C Cystatin D Cystatin E Cystatin F Cystatin S Cystatin SA Cystatin SN LMW-kininogen HMW-kininogen 10

11 Cystatin C Érzékenyebb markere az enyhe renális diszfunkciókank, mint a kreatinin Kis molekulatömeg, stabil termelıdési arány Emelkedett plazmaszint, majdnem kizárólagosan csökkent GFR-hez kapcsolódik 11

12 Cystatin C meghatározása Minták: Szérum, EDTA-s és heparinos plazma Tárolható : 2-8 o C-on 48 óráig, -20 o C-on 6 hónapig stabil Kiolvasztás 37 o C-on Vizsgálat elve: szérumot vagy plazmát összekeverjük cystatin C immunoparticles reagenssel. Keletkezı IC-t mérjük turbidimetriával. 12

13 Kalibráció 13

14 Kontrollok 0,91-1,23 mg/l, célérték:1,07 mg/ 14

15 Kontrollok 3,88-5,25 mg/l, célérték:4,57 mg/l 15

16 Ellenırzések A vizsgáló laboratóriumok alapvetı feladatai közé tartozik a mérések bizonytalanságának ellenırzése. Ezek a szórás, az átlagértékek, Emellett egy új teszt bevezetésekor meg kell gyızıdnünk a tesztet gyártó cég által megadott reprodukálhatósági és az interferencia tényezık megfelelnek-e a valóságnak. 16

17 Szórás, átlag C y s t a t i n C m g / l 1,15 1,1 1,05 1 0,95 0, Mintaszám kontroll 1 (0,91-1,23 mg/l; célérték:1,07 mg/l) Szórás:0,028 Átlag:1,066 VK%:2,67 17

18 Szórás, átlag 2. C y s t a t i n C m g / l 4,55 4,5 4,45 4,4 4, Mintaszám Kontroll 2 (3,88-5,25 mg/l; célérték:4,57 mg/l) Szórás: 0,032 Átlag:4, VK%:0,75

19 19 Reprodukálhatóság Cystatin C (mg/l) 0,036 3,58 3,53 3,57 3,61 3,62 0,093 4,24 4,40 4,22 4,18 4,17 0,051 5,96 5,90 5,92 6,03 5,98 0,130 3,08 3,18 3,24 2,93 2,98 0,030 2,98 3,00 3,01 2,95 2,94 0,038 3,19 3,25 3,20 3,17 3,15 0,053 03,53 3,44 3,54 3,57 3,57 0,110 3,58 3,70 3,68 3,47 3,47 0,015 1,22 1,24 1,21 1,20 1,22 0,007 2,31 2,30 2,32 2,31 2,31 szórás átlag 1 hónap 48 órás 24 órás Friss

20 20 Interferencia /lipémia/ 0,90 0,89 9,6 16,2 2,36 2,39 9,3 15,7 0,70 0,73 11,4 23,5 2,19 2,12 10,2 13,6 0,64 0,67 7,3 12,0 1,85 1,86 11,8 11,8 2,64 2,65 9,8 10,4 1,01 0,94 8,5 9,6 2,70 2,68 7,1 9,3 1,65 1,63 7,2 8,2 Lipidmentes cystatin C (mg/l) Cystatin C (mg/l) Koleszterin (mmol/l) Triglicerid (mmol/l)

21 Interferencia /hemolízis/ Hemolizált cystatin C (mg/l) 1,04 0,73 0,67 1,90 0,94 0,80 2,38 4,25 Hemolízis mentes cystatin C (mg6l) 1,02 0,75 0,67 1,91 0,91 0,83 2,35 4,22 0,97 0,94 21

22 Beteganyag A nephrológiai osztállyal együttmőködve a cystatin C bevezetésekor 60 beteg szérum kreatinin-, cystatin C értékeit, valamint a keratini celarence-t és a cystatin C-bıl számított GFR-t hasonlítottuk össze, melyet a következı képlet alapján számolunk. GFR(ml/min)= 69,3 (cystatin C (mg/l) ) 1,60 European Clinical Laboratory 2004, 23: Nol. 22

23 Creatinin clearence és a cystatin C-bıl számított GFR m l/p e rc /1,7 3 m creatinin clearence cystatin C GFR mintaszám 23

24 Konklúzió A cystatin C érzékenyebb markere a renális diszfunkcióknak, mint a kreatinin Specifikusan, gyorsan mérhetı Értéke nem függ a nemtıl, az izomtömegtıl, az életkortól csak kis mértékben Referens tartomány: 60 éves korig: 0,55-1,15 mg/l 60 éves kor felett:0,63-1,44 mg/l 24

25 Konklúzió Szakirodalmi ajánlás alapján a cystatin C értéke: Krónikus hemodialízis programban kezelt beteg esetén: 3,9-7,2 mg/l Akut dialízis szükségessége: 4,25-7,2 mg/l Biztos anuria: 7,2 mg/l felett 25

26 Konklúzió Értékünk az ember A laboratóriumok feladata, hogy pontos, megbízható vizsgálatokat végezzenek. Költségszámítások: Kreatinin(Jaffé): 4,50 Ft/teszt Kreatinin(enzimatikus): 100 Ft/teszt Cystatin C: 612 Ft/teszt 26

27 Köszönöm a figyelmet! 27