!HU000007930T2! (19) HU (11) Lajstromszám: E 007 930 (13) T2 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (21) Magyar ügyszám: E 06 024137 (22) A bejelentés napja: 2006. 11. 21. (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP 20060024137 (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 178761 2007. 0. 23. (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 178761 B1 20. 02.. (1) Int. Cl.: A61K 3/74 (2006.01) A23C 9/123 (2006.01) A23C 9/127 (2006.01) A23F 3/16 (2006.01) (30) Elsõbbségi adatok: 200337640 200. 11. 22. JP (72) Feltaláló: Takeda, Kazunori, Hakusan-shi, Ishikawa-ken (JP) (73) Jogosult: Carrozzeria Japan Co., Ltd., Chuo-ku Tokyo (JP) (74) Képviselõ: Lengyel Zsolt, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest (4) A dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású bakteriális tenyészet és az azt alkalmazó termék HU 007 930 T2 A leírás terjedelme 12 oldal (ezen belül 4 lap ábra) Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 199. évi XXXIII. törvény 84/H. -a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.
1 HU 007 930 T2 2 A találmány mûszaki területe A találmány tárgyát emberben és állatokban a dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású bakteriális tenyészetek képezik, amelyek nyersanyagként alkalmazhatók topikális gyógyszerekhez (kenõcsök), bõrrendellenességek gyógyszereihez, kozmetikumokhoz, gyógyszerekhez, mint például orális gyógyszerekhez, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerekhez, vagy az ezen termékekhez vagy nyersanyagaikhoz hozzáadva alkalmazhatók. Közelebbrõl a találmány tárgyát baktériumoknak zöld tea jelenlétében való tenyésztésével elõállított tenyészetek képezik. Ezenfelül a találmány tárgyát a bakteriális tenyészeteket alkalmazó topikális gyógyszerek (kenõcsök), bõrrendellenesség gyógyszerek, kozmetikumok, gyógyszerek, mint például orális gyógyszerek, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerek képezik. 1 20 2 30 3 40 4 0 60 A találmány háttere Az atopikus dermatitisz egy tipikus dermatitisz, amely betegséget ekcéma jellemez, a bõr gyulladása által okozott viszketéssel, allergének, mint például kullancs, házi por, pollen, penész és bizonyos élelmiszerek miatti allergiás reakció miatt, vagy a bõr szárazsága (száraz bõr) és védekezési rendellenesség okozza. Hagyományos terápiaként általában hosszú távú terápiát hajtottak végre az életkörülmények javításával (étrendi kúra és a környezeti allergének eltávolítása). Emellett a gyulladást ami egy tünet szuppresszáló eljárásként topikális szteroid gyógyszert, Tacrolimushidrátot, vagy nem szteroid topikális gyógyszert alkalmaznak közvetlenül a gyulladás helyén. Ezenkívül a viszketés szuppresszálására szolgáló eljárásként antihisztamin gyógyszert adnak be orálisan. Másrészrõl a bõrsérülések a bõr felszíni szöveteinek károsodásai, amit zúzódás, égések, horzsolásos sebek, mûtétek vagy sebesülések okoznak. A bõrsérüléseket általában az élõ szervezetek regenerálóképessége és természetes gyógyuló képessége gyógyítja meg az elsõsegélynyújtás után. Azonban a természetes gyógyulás általi regeneráció sokáig tart. Emellett befolyásolja a folyamatos fájdalom és bakteriális fertõzés. Tehát végeztek terápiákat a regenerálóképesség javítására, a fájdalom csökkentésére, a bakteriális fertõzés megakadályozására és a gyulladás csökkentésére terápiás gyógyszereknek közvetlenül a sebhelyeken történõ alkalmazásával. A bõrrendellenességek gyógyszereiként a bõr rendellenességeinek mint például dermatitisz és bõrsérülések gyógyítására szteroid topikális gyógyszereket, mint például diflorazon-acetát, betametazon-valerát, flucinonolon-acetonid, dexametazon, fluocinonid és alclometazon-propionát; nem szteroid topikális gyógyszereket, mint például bufexamac, bendazac és sprofen; atopikus dermatitisz gyógyszereket, mint például Tacrolimus-hidrát; és fekély elleni gyógyszereket, mint például Eláz, lizozim-klorid, borjúvérkivonat és tretinoin-tokoferil alkalmaztak. Beszámoltak arról, hogy az erõs szteroid topikális gyógyszerek mellékhatásokat okoznak, mint például lázat és krónikusan kialakuló oszteoporózist és arterioszklerózist, az alany testének nagy felületeire való hosszú távú alkalmazás miatt. Ezenfelül azt javasolták, hogy az erõs szteroid topikális gyógyszer nagy mennyiségének hosszú távú beadása csecsemõnek vagy gyermeknek szuppresszálhatja a testmagasság növekedését, és a növekedés visszamaradását okozhatja. Ezenkívül a szteroid topikális gyógyszerek nem alkalmazhatók baktériumok vagy gombák miatti bõrgyulladásra. A nem szteroid gyulladásgátló fájdalomcsillapító gyógyszereknek kisebb a gyulladásgátló hatása, mint a szteroid topikális gyógyszereké, és fõként enyhe esetekben alkalmazzák azokat. Alig figyeltek meg mellékhatásokat, de erõsen érzõdnek a bõr kiütései és irritáció. A tacrolimus-hidrát, amely egy immunszuppresszív nem szteroid topikális gyógyszer, és atopikus dermatitisz gyógyszerként alkalmazzák, bõrirritációt okoz. Emellett beszámoltak a karcinogenicitásáról Japánon kívül. Ezenkívül mivel a tacrolimus-hidrátot nemrég kezdték el alkalmazni és a biztonságossága nincs igazolva, úgy döntöttek, hogy a tacrolimus-hidrátot nem lehet alkalmazni újszülött csecsemõkben, csecsemõkben, kisgyermekekben és gyerekekben. Emellett tilos az alkalmazása terhes nõkben és esetleg terhes nõkben. Az eláz, lizozim-klorid, borjúvérkivonat és tretinointokoferil, amelyeket fekély elleni gyógyszerekként alkalmaznak a bõrre, tiltottak olyan személyeken, akik érzékenyen reagálnak az egyes gyógyszerekre. Ezenfelül az olyan tünetek, mint a sokk, bõrirritáció és pirosodás lehetnek a mellékhatások, a gyógyszerektõl függõen. A technika állása Hagyományosan sok figyelmeztetés volt a mellékhatásokról, és az emberekben és állatokban a dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõr sebgyógyulását gyorsító hatású bõrrendellenesség-gyógyszerek alkalmazásáról. Ily módon igény volt nagyon biztonságos, a dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõr sebgyógyulását gyorsító hatású bõrrendellenességgyógyszerek kifejlesztésére, amelyek nagyon sokoldalúak és természetes forrásokból származnak. Ismertek bõrrendellenesség-gyógyszerként alkalmazható, természetes forrásból származó tejsavbaktériumok a dermatitisz kialakulásának szuppresszálására, ami egy allergiaellenes készítmény, amelyet tejsavbaktériumokkal és tojásalbuminnal szenzitizált egérlépbõl származó limfociták tojásalbumint tartalmazó tápközegben történõ felszuszpendálásával állítanak elõ (JP A 200 139160); hatóanyagként nagy allergiaellenes aktivitású tejsavbaktériumot tartalmazó és allergiaellenes funkciójú ital vagy étel (JP A 200 13737); és az ember belében élõ tejsavbaktériumokat alkalmazó allergiaellenes gyógyszerként alkalmazott étel, amelynek allergiaellenes hatása van allergiás betegségek javítására és megelõzésére, mint például szénanátha, allergiás bronchiális asztma, allergiás rhinitisz és atopikus dermatitisz (JP A 2000 9697). A bõrsérülések gyógyulásának gyorsítására szolgáló bõrrendellenesség-gyógyszernek alkalmas tárnak fel a 2
1 HU 007 930 T2 2 1 20 2 30 3 40 4 0 60 JP A 182411, JP A 08 099860, JP A 06 128140 és JP A 06 06041 iratokban, természetes hatóanyagként tejsavbaktériumokat alkalmaznak egy sejtaktiváló anyagot, mint például tejsavbaktériumokat és egyszerû termálforrásvizet, vízoldható rutint, spárgakivonatot vagy a Rosa rugosa szárított virágrügye, Prunus japonica szárított magja és a Chaenomeles lagenaria szárított gyümölcse által alkotott csoportból kiválasztott növényi kivonatokat tartalmazó készítményként. A JP 11276072A irat egészséges élelmiszerként hasznos fermentált anyagot tár fel, amely zöld teán szaporodni képes tejsavbaktérium tenyésztésével kapható; a JP200013211A irat egészséges élelmiszert tár fel, amely laktobacillusokat és zöldtea-kivonatot tartalmaz; és az US 6383482B1 irat súlycsökkentõ készítményt ismertet, amely laktobacillusokat és zöld teát tartalmaz. A feltaláló a zöld teát célozta meg, mint ami helyettesíti a fent említett természetes anyagokat, és az találta, hogy a baktériumok zöld tea jelenlétében való tenyésztése nagyon biztonságos, és hogy topikális gyógyszerek (kenõcsök), bõrrendellenesség-gyógyszerek, kozmetikumok, és olyan gyógyszerek, amelyeknek erõs szuppresszálóhatása van a dermatitisz kialakulására és a bõrsérülések gyógyulásának gyorsítására, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerek állíthatók elõ a bakteriális tenyészetek alkalmazásával. A találmány célja baktériumok zöld tea jelenlétében való tenyésztésével elõállított tenyészetek és az ilyen tenyészeteket alkalmazó termékek biztosítása, mint például topikális gyógyszerek (kenõcsök), bõrrendellenesség-gyógyszerek, kozmetikumok, és olyan gyógyszerek, amelyeknek erõs szuppresszálóhatása van a dermatitisz kialakulására és a bõrsérülések gyógyulásának gyorsítására, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerek, amelyek nagyon biztonságosak és sokoldalúak. A kefir, amelyrõl azt gondolják, hogy a Kaukázusban van a szülõhelye, tejsavbaktériumokkal és élesztõvel fermentált hagyományos tejtermék. A kefirt startertenyészetként szolgáló kefirszemcsék tejben való tenyésztésével állítják elõ. A feltaláló azt találta, hogy ez a természetes anyag, a kefirszemcse, biztonságos az emberek és állatok számára, még akkor is, ha italként, ételként, kozmetikumként vagy takarmányként alkalmazzák, és további intenzív kutatásokat végzett kefirszemcsék különféle alkalmazásaira. A feltaláló azt találta, hogy az a tenyésztett folyadék, amelyet kefirszemcsék zöld teában történõ tenyésztésével állítanak elõ, és azután eltávolítják a bakteriális sejteket a bakteriális tenyészetbõl, kiváló bõrfehérítõ hatású. A feltaláló továbbá azt is felismerte, hogy a kefirszemcséknek erõs antioxidáló képessége van, és szabadalmi bejelentést tett kozmetikumként (JP A 2004 149442). Már benyújtottak egy szabadalmi bejelentést kefirszemcsékbõl elválasztott baktériumok vagy a baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport tenyésztésével kapott bakteriális tenyészetre, és az azok alkalmazásával elõállított termékekre [2004 17969 számú japán szabadalmi bejelentés, bejelentés dátuma: 2004. június 14.; EP 1 607 476 A1, amely egy 4(3) EPC szerinti dokumentum]. Ezenfelül benyújtottak már egy szabadalmi bejelentést kefirszemcsékbõl elválasztott baktériumok vagy a baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport olyan tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével kapott bakteriális tenyészetre, amely tápközeg fekete üröm-kivonatot tartalmaz fõ alkotóelemként, és az azok alkalmazásával elõállított termékekre (2004 311983 számú japán szabadalmi bejelentés, bejelentés dátuma: 2004. október 27.). Ezenfelül benyújtottak már egy szabadalmi bejelentést kefirszemcsékbõl elválasztott baktériumokat vagy a baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport olyan tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével kapott bakteriális tenyészetre, amely tápközeg zöld teát és fekete teát tartalmaz fõ alkotóelemként, és az azok alkalmazásával elõállított termékekre (200 091618 számú japán szabadalmi bejelentés, bejelentés dátuma: 200. március 28.). Hasonlóképpen benyújtottak már egy szabadalmi bejelentést kefirszemcsékbõl elválasztott baktériumok vagy a baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport olyan tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével kapott bakteriális tenyészetre, amely tápközeg zöld teát, fekete teát és fekete üröm-kivonatot tartalmaz fõ alkotóelemként, és az azok alkalmazásával elõállított termékekre (200 091624 számú japán szabadalmi bejelentés, bejelentés dátuma: 200. március 28.). Ezenfelül további vizsgálatok eredményeképpen a feltaláló azt találta, hogy a kefirszemcsékbõl elválasztott baktériumok vagy a baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea vagy a zöld teától eltérõ más tea kombinációját és/vagy azok hatóanyagát tartalmazó tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével elõállított bakteriális tenyészet a dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású emberben és állatokban, és a tenyészetek alkalmazhatók nyersanyagként topikális gyógyszerekhez (kenõcsök), bõrrendellenességek gyógyszereihez, kozmetikumokhoz, gyógyszerekhez, mint például orális gyógyszerekhez, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerekhez, vagy az ezen termékekhez vagy nyersanyagaikhoz hozzáadva alkalmazhatók. Azután a feltaláló kifejlesztett olyan termékeket, amelyek dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatásúak, a tenyészetek hozzáadásával topikális gyógyszerekhez (kenõcsök), bõrrendellenességek gyógyszereihez, kozmetikumokhoz, gyógyszerekhez, mint például orális gyógyszerekhez, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerekhez. A problémák megoldásának módozatai A találmányt a következõ megvalósítási módokkal lehet gyakorlatba venni, nevezetesen a találmány tárgya (1) bakteriális tenyészet, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatású, és amelyet kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó bak- 3
1 HU 007 930 T2 2 tériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével állítunk elõ; (2) bakteriális tenyészet, amely bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású, és amelyet kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével állítunk elõ; (3) topikális gyógyszer (kenõcs) és megelõzésre vagy javításra szolgáló kvázigyógyszer, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló és bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású, és olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva; (4) bõrrendellenesség-gyógyszer és megelõzésre vagy javításra szolgáló kvázigyógyszer, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló és bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású, és olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva; () kozmetikum, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatású, és olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva; és (6) orálisan beadott gyógyszer és megelõzésre vagy javításra szolgáló kvázigyógyszer, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatású, és olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva; (7) emellett az olyan tenyészetnek, amelyet úgy állítunk elõ, hogy eltávolítjuk a baktériumokat a fent ismertetett (1) (6) bármelyikébõl, ugyanolyan a hatása és hasonlóan mûködik, mint a fentiek, nevezetesen a dermatitisz kialakulását szuppresszáló és/vagy a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású. A leírásban a dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatás kifejezés alatt azt a hatást értjük, hogy a bõr gyulladása, allergiás tünet, vagy viszketés szuppresszálva van, amikor egy topikális gyógyszert (kenõcsöt), bõrrendellenesség-gyógyszert, kozmetikumot, gyógyszert, mint például orálisan beadott gyógyszert, és megelõzõ és javító kvázigyógyszert adunk be embernek vagy állatnak. A bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatás kifejezés alatt a regenerálás javulását elõsegítõ hatást értünk, oly módon, hogy a regenerálásra fordított idõ amikor egy topikális gyógyszert (kenõcsöt), bõrrendellenesség-gyógyszert, kozmetikumot, gyógyszert, mint például orálisan beadott gyógyszert, 1 20 2 30 3 40 4 0 60 és megelõzõ és javító kvázigyógyszert adunk be embernek vagy állatnak kevesebb idõre rövidül le, mint amikor az embert vagy állatot kezelés nélkül hagyjuk és az élõ szervezetek regenerálóképessége és a természetesen gyógyuló képessége gyógyítja meg. A bakteriális tenyészet kifejezés magában foglalja kefirszemcsékbõl elválasztott baktériumcsoport vagy kefirszemcsékbõl elválasztott egyedi baktérium tenyésztését, és a tenyészetbõl a bakteriális sejtek elválasztásával kapott tenyészetet. A találmány elõnyei A találmány 1. megvalósítási módja szerint új bakteriális tenyészetet biztosíthatunk a kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatású. A tenyészet biztonságos, mentes toxicitástól és mellékhatásoktól, és alkalmazható különbözõ területeken mint topikális gyógyszerek (kenõcsök), bõrrendellenesség-gyógyszerek, kozmetikumok, gyógyszerek, mint például orális gyógyszerek, és megelõzõ és javító kvázigyógyszerek. A találmány 2. megvalósítási módja szerint új bakteriális tenyészetet biztosíthatunk a kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével, amely bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású. A tenyészet biztonságos, mentes toxicitástól és mellékhatásoktól, és alkalmazható különbözõ területeken mint topikális gyógyszerek (kenõcsök) és bõrrendellenesség-gyógyszerek és megelõzõ és javító kvázigyógyszerek. A találmány 3. és 4. megvalósítási módja szerint új gyógyszert, mint például topikális gyógyszert (kenõcs) és bõrrendellenesség-gyógyszert és megelõzésre vagy javításra szolgáló kvázigyógyszert biztosíthatunk, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló és bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású, és olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva. A találmány. és 6. megvalósítási módja szerint új kozmetikumot, gyógyszert, mint például orálisan beadható gyógyszert és megelõzésre vagy javításra szolgáló kvázigyógyszert biztosíthatunk, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatású, és olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva. A találmány 7. megvalósítási módja szerint új tenyészetet biztosíthatunk, amely dermatitisz kialakulását szuppresszáló és/vagy bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású, és amely a bakteriális sejteknek az 4
1 HU 007 930 T2 2 1 6 megvalósítási módok bármelyike szerinti tenyészetbõl történõ eltávolításával van elõállítva. Az ábrák rövid ismertetése Az 1. ábra egy grafikont mutat a gyógyulási idõ és a testtömeg között dermatitisz kialakulása szuppresszálásának tesztjében. A 2. ábra egy grafikont mutat a gyógyulási idõ és a dermatitiszérték között dermatitisz kialakulása szuppresszálásának tesztjében. A 3. ábra egy grafikont mutat a gyógyulási idõ és a dermatitisz elõfordulási aránya között dermatitisz kialakulása szuppresszálásának tesztjében. A 4. ábra a bõrsérülés húzószilárdságának összehasonlító grafikonját mutatja be gyógyulás gyorsítását értékelõ tesztben. A találmány legjobb kiviteli alakja A találmány példáit részletesebben is ismertetjük. A kefirszemcsékbõl izolált baktériumcsoport Acetobacter cerevisiae SIID1719 2b törzset, Gluconobacter oxydans SIID1719 3b törzset, egy, a Lactobacillaceae családból származó új Lactobacillus sp. SIID1719 6b törzset, Pichiamembrani faciens SIID1719¹ly törzset, Saccharomyces cerevisiae SIID1719 4y törzset és Pichia anomala SIID1719 y törzset tartalmaz. A kefirszemcsékbõl izolált baktériumcsoportot és az új Lactobacillus sp. SIID1719 6b törzset a Lactobacillaceae családból külön-külön tenyésztettük zöld tea jelenlétében, és a bakteriális sejteket eltávolítottuk a kapott bakteriális tenyészetekbõl. Az ily módon kapott tenyészeteket a következõ értékelési teszteknek vetettük alá, hogy a tenyészeteknek van¹e hatása a dermatitisz kialakulásának szuppresszálására és a bõr sebgyógyulásának gyorsítására. Az eredmények megerõsítették, hogy a baktériumcsoport és a Lactobacillus sp. SIID1719 6b önmagában dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatású volt. Ezenkívül a találmány szerint hasonló funkciójú tenyészeteket is alkalmazhatunk, amelyeket a Lactobacillus sp. SIID1719 6b olyan szimbióta baktériumokkal tenyésztjük együtt, amelyek biztonságosságát már igazoltuk. Emellett a tenyésztõ tápközeg a zöld teától eltérõ más teát és/vagy annak hatóanyagát is tartalmazhatja, a zöld tea mellett. Az új Lactobacillus sp. SIID1719 6b a Lactobacillaceae családba tartozó fajt letétbe helyeztük egy nemzetközi szabadalmi mikroorganizmus letéti szervnél, amely a National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Japan, mint FERM AP 20062, és átminõsítettük nemzetközi letétté FERM ABP 299 számon. Tipikus példaként a Lactobacillaceae családba tartozó új Lactobacillus sp. SIID1719 6b zöld teát tartalmazó tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével és azután a bakteriális sejtek kapott bakteriális tenyészetbõl történõ eltávolításával elõállított tenyészetet alkalmazzuk. A dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatások értékelési tesztjeit a következõképpen végeztük: 1 20 2 30 3 40 4 0 60 Dermatitisz kialakulása szuppresszálásának tesztje Elõször NC/Nga egereket amelyekben szokásos táplálási körülmények között a levegõ tisztítása nélkül nagy gyakorisággal spontán kialakul a dermatitisz kontrollként nem kezelési csoportba, peach angel (dermális felvitel) csoportba, peach angel (dermális felvitel és orális beadás) csoportba és összehasonlításként 0,1% Protopikus kenõcs (dermális felvitel) csoportba osztottuk be a testtömeg szerint a rétegezett sorozatos randomizációs módszer alkalmazásával (az egyes csoportok átlagos tömege: 2, 2,8 kg). A peach angel csoportok tenyészeteit SIID1719 6b zöld teát tartalmazó tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével állítottuk elõ 48 órán keresztül, és azután eltávolítottuk a bakteriális sejteket a kapott bakteriális tenyészetbõl. Mindegyik csoportban 12 egér van. A tartási körülmények, azaz a hõmérséklet, páratartalom, takarmány, víz, etetési körülmények ugyanazok voltak az összes egér esetében. A peach angel (dermális felvitel) csoportba tartozó egereknek transzdermálisan 0, ml tenyészetet, a peach angel (dermális felvitel és orális beadás) csoportba tartozó egereknek transzdermálisan 0, ml és orálisan ml/testtömeg¹kg tenyészetet, és a 0,1% Protopikus kenõcs (dermális felvitel) csoportba tartozó egereknek transzdermálisan 0, g 0,1% Protopikus kenõcsöt adtunk be. A beadást 6 hetes egereknek végeztük naponta egyszer 49 napig (7 hét). Az egyes egerek tömegét hetente egyszer lemértük, és a bõr állapotát hetente kétszer megfigyeltük a dermatitisz értékelési standardjainak megfelelõen (dermatitiszérték: szintû értékelés, lásd az 1. táblázatot). A testtömeg kapott változásait az 1. ábrán mutatjuk be, a dermatitiszértéket a 2. ábrán mutatjuk be, és a dermatitisz elõfordulási arányát a 3. ábrán mutatjuk be. Érték 1. táblázat Dermatitisz megfigyelési érték tünet 0 (normál) nem fordul elõ dermatitisz vagy teljesen gyógyult 1 (enyhe) viszonylag enyhe erithéma, enyhe sérülés vagy hasonló mértékû gyógyulás 2 (közepes) nyilvánvaló erithéma, sérülés, enyhe vérzés, vagy hasonló mértékû gyógyulás 3 (súlyos) közepes-súlyos erithéma, sérülés (külsõ fül részleges folyása), lokalizált fekély, kérgesedés, vagy hasonló mértékû gyógyulás 4 (külsõ fül vérzése) nagy mennyiségû vérzés, külsõ fül vérzéses folyása, nagy területû fekély A nem kezelési csoport átlagos testtömege csökkent a negyedik héten, de azután enyhén emelkedett. Azonban a testtömeg az utolsó napon a legkönnyebb volt az összes kezelt csoport közül. Nem figyeltünk meg szignifikáns különbséget a 0,1% Protopikus ke-
1 HU 007 930 T2 2 nõcs csoportban és a peach angel (dermális felvitel) csoportban, és megerõsítettük a csökkent testtömeget az utolsó napon mindkét csoportban. A peach angel (dermális felvitel és orális beadás) csoport testtömege növekedett a kezdettõl a beadás végéig, és az utolsó napon a legmagasabb volt a testtömege. A dermatitisz elõfordulásának vonatkozásában a nem kezelt csoport átlagos értéke 1,9 volt az utolsó napon és az elõfordulási arány 7%, ami a legmagasabb dermatitisz érték. A 0,1% Protopikus kenõcs csoport átlagos értéke 0,6 volt az utolsó napon és az elõfordulási arány 0%, ami a legalacsonyabb dermatitisz érték. A szignifikáns különbség a nem kezelt csoporthoz képest igazolta a dermatitisz kialakulásának szuppresszálására való hatást. A peach angel (dermális felvitel) csoport átlagos értéke 1,2 volt az utolsó napon és az elõfordulási aránya 67%, és a peach angel (dermális felvitel és orális beadás) csoport átlagos értéke 0,8 volt az utolsó napon és az elõfordulási aránya 0%. Ezeknek a csoportok a szuppresszáló hatású kisebb volt, mint a 0,1% Protopikus kenõcs csoporté, de a szignifikáns különbség a nem kezelt csoporthoz képest igazolta a dermatitisz kialakulásának szuppresszálására való hatást. Emellett igazolta, hogy a kialakulás szuppresszáló hatása a peach angel (dermális felvitel és orális beadás) csoportban magasabb volt, mint a peach angel (dermális felvitel) csoportban. Ez arra utal, hogy a kialakulás szuppresszálása hatásosabban elérhetõ az orális beadással. Ezenfelül ismételten igazoltuk a biztonságosságot. 1 20 2 30 3 40 4 0 60 Bõrsérülés-gyógyulás gyorsítási értékelési teszt Elõször az egyes hím Slc:Wistar-patkányok bõrét bemetszettük megközelítõleg körülbelül 2, cm hosszan nátrium-pentobarbitál érzéstelenítés mellett, és azután összevarrtuk a középsõ részénél. A varratot három nap múlva eltávolítottuk. A patkányokat kontrollként nem kezelt csoportba, SIID1719 6b zöld teát tartalmazó tenyésztõ tápközegben 48 órán keresztül tenyésztésével és azután annak eltávolításával elõállított tenyészettel kezelt peach angel csoportba, és összehasonlító csoportként Olcenon kenõcs csoportba osztottuk be a testtömegek szerint úgy, hogy az egyes csoportok átlagos testtömege megközelítõleg azonos legyen. Mindegyik csoportban 8 patkány van. A tartási körülmények, azaz a hõmérséklet, páratartalom, takarmány, víz, etetési körülmények ugyanazok voltak az összes patkány esetében. A peach angel csoportban található patkányoknak 0, ml tenyészetet adtunk az egyes helyekre a tenyészetbõl naponta egyszer 12 napon keresztül a csoportokba osztást (az elsõ nap) követõen. Az Olcenon kenõcs csoportban található patkányoknak 0 mg Olcenon kenõcsöt adtunk az egyes helyekre naponta egyszer 6 napon keresztül a bõr megvágását (a hetedik nap) követõen. A tesztelt anyagok utolsó beadását követõ napon (a 13. nap) megvizsgáltuk a gyógyulást gyorsító hatást a seb újra felszakításához szükséges húzószilárdság (g/cm) mérésével húzó-nyomó mérõeszközzel. Az eredményeket a 4. ábrán mutatjuk be. A húzószilárdság kifejezés alatt azt az erõt értjük, ami a megvágott és meggyógyult seb felnyitásához szükséges. A nagyobb érték az újra felnyitáshoz szükséges nagyobb erõt jelenti, ami a felgyorsult gyógyulást tükrözi. A mérési eredmények igazolták, hogy a peach angel csoport húzószilárdsága alacsonyabb volt, mint az Olcenon kenõcs csoporté, de nagyobb, mint a nem kezelt csoporté. Tehát ez arra utal, hogy a peach angel csoportban volt a bõrsérülések gyógyulását gyorsító hatás. A fent ismertetett megvalósítási módban a Lactobacillaceae családba tartozó új Lactobacillus sp. SIID1719 6b törzset zöld teát tartalmazó tenyésztõ tápközegben történõ tenyésztésével és azután a bakteriális sejtek kapott bakteriális tenyészetbõl történõ eltávolításával elõállított tenyészetet alkalmaztunk. A kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok vagy az új baktériumokat tartalmazó baktériumcsoport zöld tea vagy zöld tea és/vagy zöld teától eltérõ másik tea kombinációja és/vagy azok hatóanyagai jelenlétében történõ tenyésztésével elõállított tenyészetek várható módon az itt bemutatottal ekvivalens hatásúak, nevezetesen szuppresszálják a dermatitisz kialakulását és gyorsítják a bõrsérülések begyógyulását. Ezenkívül az ilyen tenyészeteket tartalmazó gyógyszerek, mint például topikális gyógyszerek (kenõcsök) és bõrrendellenesség gyógyszerek és megelõzésre és javításra szolgáló kvázigyógyszerek várható módon dermatitisz kialakulását szuppresszáló és a bõr sebgyógyulásának gyorsító hatásúak. Emellett az ezeket a tenyészeteket tartalmazó kozmetikumok várható módon dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatásúak. Ezenkívül az ilyen tenyészeteket tartalmazó gyógyszerek, mint például orálisan beadandó gyógyszerek és megelõzésre és javításra szolgáló kvázigyógyszerek várható módon dermatitisz kialakulását szuppresszáló hatásúak. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Készítmény gyógyszerként történõ alkalmazásra, amely készítményt az jellemzi, hogy olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok amelyek nemzetközi letéti száma FERM ABP 299 zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva, vagy olyan bakteriális tenyészet terméket tartalmaz, amely a bakteriális tenyészetbõl a bakteriális sejtek eltávolításával van elõállítva. 2. Készítmény dermatitisz kezelésében történõ alkalmazásra, amely készítményt az jellemzi, hogy olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok amelyek nemzetközi letéti száma FERM ABP 299 zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva, vagy olyan bakteriális tenyészet 6
1 HU 007 930 T2 2 terméket tartalmaz, amely a bakteriális tenyészetbõl a bakteriális sejtek eltávolításával van elõállítva. 3. Készítmény bõrsérülések kezelésében történõ alkalmazásra, amely készítményt az jellemzi, hogy olyan bakteriális tenyészetet tartalmaz, amely kefirszemcsékbõl elválasztott, a Lactobacillaceae családba tartozó új baktériumok amelyek nemzetközi letéti száma FERM ABP 299 zöld tea jelenlétében történõ tenyésztésével van elõállítva, vagy olyan bakteriális tenyészet terméket tartalmaz, amely a bakteriális tenyészetbõl a bakteriális sejtek eltávolításával van elõállítva. 4. Az 1 3. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, ahol a készítmény topikális alkalmazásra szolgál.. Az 1 3. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, ahol a készítmény orális beadásra szolgál. 6. Az 1 3. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, ahol a készítmény dermális alkalmazásra és orális beadásra szolgál. 7
HU 007 930 T2 Int. Cl.: A61K 3/74 8
HU 007 930 T2 Int. Cl.: A61K 3/74 9
HU 007 930 T2 Int. Cl.: A61K 3/74
HU 007 930 T2 Int. Cl.: A61K 3/74 11
Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Szabó Richárd osztályvezetõ Windor Bt., Budapest