Sysmex Szeminárium, Budapest 2007.06.01. Sysmex Szeminárium, Budapest 2007.06.01. Dr. Horváth Katalin Eger
Mikroszkópos vérkép Gold standard Hátránya: - szubjektív - magasan képzett helyi szakértıt igényel - idıigényes - helyhez, mikroszkóphoz kötött - a képek nem konzultálhatók - nem tárolhatók oktatáshoz képzéshez - a lemezek tárolása helyigényes, - minıségük romlik
A digitális mikroszkópia formái AKTÍV Típus: PASSZÍV digitális fotó dinamikus VIRTUÁLIS LEMEZ lehet metszet, kenet, sedimentum Funkció: A diagnózist alátámasztó képeket készít a szakértı, továbbítható (e-mail, internet, CD) A szakember önmagának keresi meg az általa távvezérelt mikroszkóppal a diagnózishoz szükséges területeket. A teljes minta digitalizált és valamennyi nagyítás a szerveren rendelkezésre áll. második vélemény teletréning (gyakorlat, képzés) elsı vélemény, második vélemény, teletréning elsı vélemény, második vélemény, teletréning, elektronikus paciens fájl Alkalmazás: J.C.Libeer 2006.
Elıny: Passzív v digitális mikroszkópia - kis minta mennyiség EQA - QualiCont - kiküszöböli a mintakészítés festés inhomogenitását, gyors küldés, eredményközlés - mindenki ugyanazt látja, standardizáció - konzultálható - tárolható, rendszerezhetı - felhasználható oktatásra (esetek), elıadásokban, kiadványokban. Hátrány: - nem a vizsgáló dönt - a jellemzıket emeli ki - továbbnagyítás zoom funkcióval életlenebbé teszi - nem tesz lehetıvé valódi megoszlási értékelést - a képek nagy tárolókapacitást igényelnek (jpg)
31.minta Háziorvos által - elızmények nélküli 77 éves férfibetegtıl kért vérvizsgálatok eredményeibıl: Fvs 5.6 G/l, Hgb 74 g/l, Hct 0.26 l/l, MCV 98.4 fl, MCH 26.9 pg, Thrombocyta 71 G/l, We 3 mm/h, LDH 785 U/l
31.minta Háziorvos által - elızmények nélküli 77 éves férfibetegtıl kért vérvizsgálatok eredményeibıl: Fvs 5.6 G/l, Hgb 74 g/l, Hct 0.26 l/l, MCV 98.4 fl, MCH 26.9 pg, Thrombocyta 71 G/l, We 3 mm/h, LDH 785 U/l
31.minta Háziorvos által - elızmények nélküli 77 éves férfibetegtıl kért vérvizsgálatok eredményeibıl: Fvs 5.6 G/l, Hgb 74 g/l, Hct 0.26 l/l, MCV 98.4 fl, MCH 26.9 pg, Thrombocyta 71 G/l, We 3 mm/h, LDH 785 U/l
Manuális differenciál l vérkép p csökkenés Manualis differenciálás csökkenése Manuális diff. 100 % 3 part diff-es analizátorok Manuális diff. 50 60 % 5 part diff-es analizátorok Manuális diff. 30 40 % 5 part diff-es analizátorok NRBC + IG Manuális diff. 10 20 % 5 part diff-es analizátorok NRBC + IG Dig.képek + IT 1 2 % Hematológiai analizátorok fejlıdése
Digitális képek felhasználása Sysmex LAFIA 1998 Octavia DiffMaster 2001 CellaVision DM96 2004
CellaVision DM96 jellemzıi Kenet Festés DM 96 jellemzıi Automata kenetkészítés (SP-1000i, SP- 100, HemaPrep) Giemsa vagy Wright Giemsa Lemez kapacitás 96 lemez a magazinokban Teljesítmény 40 lemez/óra Lencsék Tárolás 10x, 50x, és 100x 20.000 minta; 100 WBC és egy RBC kép/minta
CellaVision DM96 Digitális színes kamera Lámpaház Objektív tárcsa Motorizált mikroszkóp Immerziós olaj egység Adagoló magazin Bárkód leolvasó
Az optimális monolayer megkeresése se 1. Fix pontról indul 10x nagyítással 2. Az objektív mozog a vékonyabb rész felé és folyamatosan figyeli a képeket 3. Analizálja a vvt számot, sejt kontúrokat és méreteket 4. Ha bizonyos kritériumok teljesülnek ez lesz a start pont, az RBC kép helye 50x nagyítással
Sejtek kinyerése a preklasszifikáláshoz shoz Lokalizálja a magvas sejtek helyzetét a monolayer területen Battleman (Meander) mintázatban haladva A sejtek koordinátáit megjegyzi Átvált 100 objektívre A koordináták szerint kiragadja a képeket (autofókuszálás).
Analízis elv detektálás, digitalizálás A mikroszkópos mezı középpontjába helyezett magvas sejt képét elektronikus szignálokká alakítja, digitalizálja.
Analízis elv jellemzık kinyerése A sejt színeibıl vörös, zöld, kék szignálok képzıdnek A magra és cytoplasmára jellemzı mért és számított paraméterek Jellemzı paraméterek: méret, szín, szerkezet (Markov), detektálása Több, mint 300 jellemzı paramétert mér minden sejten.
Analízis elv - Artificial Neural Network (mesterséges ideg hálózat) JELLEMZİK Jellemzık kinyerése Jellemzık kinyerése Σ Σ Σ Σ Σ Σ Σ Σ Σ Σ Statisztikai modell Σ Σ Mono Eo
Analízis elv minta felismerés A talált jellemzıket összevetve a standard értékekkel az ANN (Artificial Neural Network) segítségével a sejttípusok meghatározhatók. Seg Lymph Mono Eo Baso Band Meta Myelo Promyelo Blast NRBC Giant PLT Smudge Artefact Unident.
Az automatizált kép k p analízis elınyei A mikroszkópos differenciálás teljes automatizációja Elindítás után önállóan képes dolgozni Idımegtakarítás különösen alacsony fehérvérsejt szám esetén Sejt összehasonlítás lehetısége referens sejtekkel A mikroszkópizálás standardizálása Visszavezethetıség Bıvíthetı referens sejt adatbázis Minden sejt tárolható az adatbázisban Intra és internetes kommunikáció lehetısége Telehaematológia
Kapcsolódási si lehetıségek -Több rendszer kapcsolódhat közös adatbázishoz - Az adatbázis tárolható és hozzáférhetı lokálisan vagy intézeti hálózaton és interneten. Kapcsolódó munkaállomások (Remote Review Station) CellaVision CellaVision CellaVision DM8 DM96 DM8 DM96 DM96 CellaVision DM8 Intézeti hálózat közös adatbázisa CellaVision DM8
Diff IQ jártasság ellenırzı digitális vérsejtképekkel Oktatásra és a competencia ellenırzésére alkalmas eszköz, hogy minden szakember a betanult, standard módon értékelje a vérsejtek morphológiáját. Saját kenet győjtemény készíthetı a tanításhoz, ellenırzéshez és tanuláshoz. További információ www.cellavision.com/diffiq
Virtuális mikroszkópia 3DHistech Szkenner (automatizált) Mirax scan motorizált Zeiss Axioscope mikroszkóp mintaállvánnyal, plan-apokrom 20x és 40x objektívekkel, az egész készítményt letapogatja, magas optikai felbontású képek CCD kamerával (1024 768 pixel), mindig a fókuszban, lemez digitalizáció, folyamatosan 300 lemezt scannel Nézı software - digitális lemez értékelı Mirax viewer a képeket egy digitális montázsba egyesíti, nézhetı különbözı nagyítással, mérhetı, értékelhetı, jegyzettel ellátható, dokumentálható, konzultálható E modul internetes telekonzultáció (online, offline) Slide server sok felhasználós konzultációs www.pathonet.com Innovációs Nagydíj 2003. 3DHISTECH Kft. Digitális szövettani labor www.3dhistech.com
A digitális és s virtuális mikroszkópia terjedésének gátja g a fogadókészség Technikai: - Standard PC - Nagy sebességő processzor 300 MHz - Internet Explorer 5 - Telefonos vagy ADSL modem - DSL kábel vagy helyi hálózat - Képfrissítı, képtömörítı - Monitor 17-19 colos, true color, > 1024 768 pixel felbontással Szemléleti: - Kíváncsiság, érdeklıdés - Elfogadás - Elsajátítás - Felhasználás: hystológia, cytológia, immunhystochemia, csontvelı-, perifériás kenet, flow cytometria, vizelet üledék, sperma dg, liquor, Gram festés, parazitológia