Filaria kimutatás elméleti alapjai és a differenciáldiagnosztika lehetőségei Dr. Bókony Brigitta 2015.03.17. Előfordulás D. immitis trópus, szubtrópus import betegség (USA, Olaszország) az elmúlt évtizedben új helyeken jelent meg 2009-ben autochton eset leírása Mo-on! D. repens jellemzően Óvilágban az elmúlt évtizedekben felmérések addig mentes országokban É-i terjedés Mo: 1998-ban autochton leírás 1
Dirofilaria immitis vékony, hosszú féreg (12-30 cm), nőstények hosszabbak a hímeknél jobb szívfélben, ehhez csatlakozó erekben, v. cava caud., a. pulmonalis kutya és más kutyafélék macska, görény, ember élettartam: adult 3-5(-10) év mf néhány hónap (akár 1-2 év!) Dirofilaria repens karcsú féreg (5-17 cm), nőstények hosszabbak a hímeknél bőr alatti kötőszövetben összecsavarodva, lassan növő, nem fájdalmas csomók kutya és más kutyafélék macska, ragadozók, ember élettartam: adult - 2-3 év, mf 1-2 hónap 2
Fejlődésmenet közvetett fejlődés, vektor: szúnyogok nőstény a vérbe üríti a 300 µm-es mikrofiláriákat vérszívással szúnyogba kerül: 1-3 hét alatt L3 újabb vérszívással kerül a bőr alatti szövetekbe L4 L5 fiatal felnőttek ivarérett adultok pp: D. repens 6-8 hónap D. immitis (6) 7-9 hónap 1 évesnél idősebb állatban leggyakrabban tünetmentes vagy jellegtelen tünetek hangsúly a megelőzésen van, mert a gyógykezelés... ne legyen melléklelet a mikrofilária szívféreg?! zoonózis!!! 3
Tünetek Differenciáldiagnosztika D. immitis: fáradékonyság, köhögés, kondícióromlás, dyspnoe, tachipnoe, anorexia, cyanosis D. repens: enyhe bőrgyulladás, viszketés, szőrhullás, csomók Differenciáldiagnosztika Szóba jöhető elváltozások D. immitis: légzőszervi megbetegedések (fertőző eredetű pl. kennelköhögés, tüdőféreg) D. repens: bármi, ami bőrtünetet okoz csomók daganat 4
Diagnosztika mikrofiláriák kimutatása az első lépés vérkenet: natívan vagy festve (ha sok a mf) vastagcsepp: élő mf mozgás Knott: ez a standard módszer! vvt hemolízis + koncentráció hematokrit módszer: (csak ha van mikrohematokrit centrifuga...) mikroszűrés: kereskedelmi forgalomban már nem kapható... Diagnosztika kenet vastagcsepp Knott Hol végezzük? rendelő / labor rendelő labor Miből? EDTA (heparinos, citrátos) EDTA (heparinos, citrátos) EDTA (heparinos) Érzékenység ~10 µl 50-100 µl 1 ml Specificitás D. immitis / D. repens D. immitis / D. repens D. immitis / D. repens Mikor végezzük? véletlen 1. körös szűrés 2. körös szűrés 5
Vérkenet Vérkenet 6
Vérkenet Vastagcsepp 7
Knott teszt kivitelezése 1 ml EDTA-s (v. heparinos) vér + 9 ml 2%-os formalint összekeverünk egy centrifugacsőben 5 percig 1500-as fordulaton centrifugáljuk a felülúszót elöntjük hozzáadunk 1-2 csepp 0,1%-os metilénkék festéket tárgylemezre szélesztjük és mikroszkóppal vizsgáljuk Knott teszt 8
Knott teszt Knott teszt 9
Knott teszt (szaponinnal ) Diagnosztika ha van mikrofilária kifejlett férgeket feltételez milyen féreg?! Dirofilaria immitis, D. repens Dipetalonema, Acanthocheilonema, Brugia spp. Angiostrongylus vasorum!!! 10
Szerológia Diagnosztika gyors, megbízható (gyártó függő!) fals negatív: prepatens periódus, csak hím férgek, 1 nőstény (kétes eredmény) fals pozitív: 1% körül csak D. immitis (D. repens nem zárható ki!) PCR Diagnosztika drága, gyors, tévedés kizárva legalább 1 mf a mintában több eljárás is van (genus- vagy fajspecifikus primerek, RT) 11
Diagnosztikai nehézségek Ha nincs mikrofilária macskában (görényben) gyakori nincs fertőzöttség?! csak nem látjuk! immunválasz kevés vagy nincs mf csak hím férgek vannak még nem ivarérettek (pp) gyógyszeres kezelés alatt áll Diagnosztika kiegészítő lehetőségek: röntgen, ultrahang diagn. alátámasztása, súlyosság megítélése RTG: kitágult tüdőerek, jobb szívfélmegnagyobbodás, mellűri folyadékgyümel echocardiogáfia: féregpopuláció nagysága, szívben és tüdőerekben + szívelváltozások 12
Diagnosztika Enyhe Mérsékelt Súlyos "Caval syndrome" Tünetmentes vagy köhögés Köhögés, terhelési intolerancia (fáradékonyság), kóros tüdőhangok Köhögés, terhelési intolerancia (fáradékonyság), dyspnoe, kóros szív- és tüdőhangok, hepatomegália, syncope (ájulás), ascites, elhullás Hirtelen fellépő súlyos levertség és gyengeség, hemoglobinemia és hemoglobinuria Dirofilaria immitis kezelésének lehetőségei Dr. Bókony Brigitta 2015.03.17. 13
Terápiás lehetőségek Adulticid kezelés melarsomin (Immiticide) thiacetarsamide (Caparsolate) kevésbé hatékony Mikrofilaricid kezelés makrociklikus laktonok: ivermectin nincs forgalomban (off label) milbemicin oxim Milbemax tabletta moxidectin Advocate spot-on selamectin Stronghold spot-on Kiegészítő terápia Melarsomin Adulticid terápia 2 adagos protokol: 2.5 mg/kg im. (!) 2x (24 óra különbséggel) az adultok 90%-át elpusztítja 3 adagos protokol: 2.5 mg/kg im. 1x, majd 1 hónap múlva 2.5 mg/kg im. 2x (24 óra különbséggel) az adultok 98%-át elpusztítja 14
sebészi eltávolítás Adulticid terápia nagy féregszám esetén (caval syndrome) spec. aligátor fogóval, fluoroszkóp mellett jobb v. jugularis externa néhány hét múlva gyógyszeres kezelés a fennmaradó férgek elpusztítására Mikrofilaricid kezelés tabletta vagy spot-on havonta 1x egész éven át megelőzés!!!!!!!!!!!!!!!!!!! mikrofiláriák, L3 és L4 ellen hatásos terápiás rés: fiatal felnőttekre már nem hatnak a makrociklikus laktonok, de még nem hat rá a melarsomin adulticid terápia előtt min. 2 hónappal meg kell kezdeni mf, L3, L4 elpusztul, többi felnő a melarsominhoz anafilaxiás reakció! 15
Doxiciklin endoszimbionta Wolbachia baktérium mf termeléshez, fejlődéshez szükséges makrociklikus laktonokkal együtt adva az adulticid terápiát hatékonyabbá teszi ha melarsomin nincs vagy kontraindikált havi mikrofilaricid mellett napi 2x 10 mg/kg dózisban 4 hétig fél évente antigénteszt Szteroid Kiegészítő kezelés prednisone 0.5 mg/kg napi 2x, 1 hétig 0.5 mg/kg napi 1x, 1 hétig 0.5 mg/kg minden második nap 1-2 hétig NSAIDs/aszpirin/heparin kérdéses a használatuk (különböző szakirodalmak mást ajánlanak) 16
Az Amerikai Szívféreg Társaság által ajánlott kezelési protokol Napok 0. nap Kezelés Igazoltan szívféreg pozitív állat: + szerológia megerősítve egy másik gyártó tesztjével vagy PCR vizsgálattal. Mozgáskorlátozás bevezetése (minél súlyosabbak a tünetek, annál jobban kell korlátozni). Ha nem tünetmentes kutyáról van szó: gondoskodni kell a megfelelő klinikai ellátásról és írjuk elő a prednizon* kezelést (*1. hét: 0.5 mg/kg napi 2x, 2. hét: 0.5 mg/kg napi 1x, 3-4. hét: 0.5 mg/kg minden második nap). 1. nap 1-28. nap 30. nap 60. nap 90. nap 91. nap 120. nap 271. nap Mikrofilária elleni kezelés. Mikrofilarémiás állat esetében antihisztamin és szteroid adása javasolt (amennyiben nem kapott előzőleg prednizont). Doxiciklin kezelés 10 mg/kg napi 2x, 4 hétig Mikrofilária elleni kezelés. Mikrofilária elleni kezelés. Első melarsomin injekció 2,5 mg/kg IM. Prednizon* kezelés és további mozgáskorlátozás (ketrecnyugalom). Mikrofilária elleni kezelés. Második melarsomin injekció 2,5 mg/kg IM. Harmadik melarsomin injekció 2,5 mg/kg IM. Prednizon* kezelés és tartsuk fenn a mozgáskorlátozást további 6-8 hétig. Mikrofilária szűrés: ha pozitív, adjuk továbbra is a mikrofilaricid szert. A megelőzés érdekében egész évben adjuk a makrociklikus laktonokat. Szerológiai teszt és mikrofilária szűrés. Esetbemutatás 1. Mennyiségi és minőségi vérkép Fehérvérsejtszám (WBC) 16,4 G/l 6,0-16,0 G/l Neutrophil granulocyta szám 10,4 G/l 3,0-11,5 G/l Lymphocyta szám 3,0 G/l 0,5-4,8 G/l Monocyta szám 1,1 G/l + < 1,4 G/l Eosinophil granulocyta szám 1,8 G/l < 1,2 G/l Basophil granulocyta szám 0,0 G/l < 0,2 G/l Vörösvérsejtszám (RBC) 6,25 T/l 5,0-8,5 T/l Hemoglobin (HGB) 153,0 g/l 120-180 g/l Hematokrit (HCT) 46,9 l/l 36-55 l/l MCV 75,0 fl 63-75 fl MCH 24,5 pg 19,5-26,5 pg MCHC 32,7 g/dl 32-39 g/dl RDW-CV 15,50% 14-19 % Thrombocytaszám (PLT) 262 G/l 200-800 G/l Knott módszer (mikrofilária kimutatás) Pozitív + 17
Esetbemutatás 2. Mennyiségi és minőségi vérkép Fehérvérsejtszám (WBC) 7,4 G/l 6,0-16,0 G/l Neutrophil granulocyta szám 4,0 G/l 3,0-11,5 G/l Lymphocyta szám 1,3 G/l 0,5-4,8 G/l Monocyta szám 1,8 G/l + < 1,4 G/l Eosinophil granulocyta szám 0,2 G/l < 1,2 G/l Basophil granulocyta szám 0,2 G/l < 0,2 G/l Vörösvérsejtszám (RBC) 7,7 T/l 5,0-8,5 T/l Hemoglobin (HGB) 177,0 g/l 120-180 g/l Hematokrit (HCT) 54,0 l/l 36-55 l/l MCV 70,4 fl 63-75 fl MCH 23,1 pg 19,5-26,5 pg MCHC 32,9 g/dl 32-39 g/dl RDW-CV 18,00% 14-19 % Thrombocytaszám (PLT) 333 G/l 200-800 G/l Kenetvizsgálat Mikrofilária Pozitív + Esetbemutatás 3. Mennyiségi és minőségi vérkép Fehérvérsejtszám (WBC) 14,8 G/l Neutrophil granulocyta szám 13,7 G/l Lymphocyta szám 0,9 G/l Monocyta szám 0,2 G/l + Eosinophil granulocyta szám 0,0 G/l Basophil granulocyta szám 0,0 G/l Vörösvérsejtszám (RBC) 6,29 T/l Hemoglobin (HGB) 140,0 g/l Hematokrit (HCT) 46,0 l/l MCV 73,2 fl MCH 22,2 pg MCHC 30,3 g/dl RDW-CV 16,00% Thrombocytaszám (PLT) 132 G/l Knott módszer (mikrofilária kimutatás) Pozitív + Szívférgesség (Dirofilaria immitis) (Ag-ELISA) Pozitív + Dirofilaria immitis+repens (PCR) Dirofilaria immitis (szívféreg) Pozitív + Dirofilaria repens (bőrféreg) Pozitív + 6,0-16,0 G/l 3,0-11,5 G/l 0,5-4,8 G/l < 1,4 G/l < 1,2 G/l < 0,2 G/l 5,0-8,5 T/l 120-180 g/l 36-55 l/l 63-75 fl 19,5-26,5 pg 32-39 g/dl 14-19 % 200-800 G/l 18
Köszönöm a figyelmet! Találkozunk jövő héten CSÜTÖRTÖKÖN! 19