Mérések visszavezethetősége ISO 15189:2003(E) 5.6.2. MSZ EN ISO/IEC 17025:2001 5.6. NAR-20-IX D.2. Horváth Andrea NAT ODL-SZAB Szegedi Tudományegyetem Klinikai Kémia Intézet Az előadás az IFCC Joint Committee on Traceability in Laboratory Medicine által kiadott CD-ROM (2002) felhasználásával készült.
Előadás témák Fogalmak Szabványok és irányelvek Alapelvek Visszavezethetőségi lánc és kalibrációs hierarchia Teendők
Fogalmak Visszavezethetőség: egy mérési eredménynek vagy etalon értékének az a tulajdonsága, hogy ismert bizonytalanságú összehasonlítások megszakítatlan láncolatán keresztül kapcsolódik országos vagy nemzetközi etalonokhoz. Valódiság (trueness) Valódi érték - helyes (konvencionális valódi) érték - mért érték Elsődleges etalon (primary reference material) Nemzetközi/nemzeti etalon (inter/national meas. std) Referencia etalon (measurement standard) Tanúsított anyagminta (certified reference material, CRM) Anyagminta (reference material, RM) Átvihetőség (commutability)
Commutability - átvihetőség Commutability of a material - ability of a material to yield the same numerical relationships between results of measurements by a given set of measurement procedures, purporting to measure the same quantity, as those between the expectations of the relationships obtained when the same procedures are applied to other relevant types of material (ISO 15194, 3.5)
Akkreditálási szabványok MSZ EN ISO/IEC 17025:2001 5.6. 5.6.2.1.1. a berendezések kalibrálási programját úgy kell kialakítani és működtetni, hogy biztosítsa a laboratórium által végzett kalibrálások és mérések visszavezethetőségét egészen a nemzetközi mértékegység rendszerig (SI). A laboratórium maga határozza meg saját mérőetalonjainak és mérőműszereinek visszavezethetőségét az SI-rendszerig, megszakítatlan kalibrálási lánc útján ISO 15189:2003(E) 5.6.2. 5.6.3. A laboratórium mérőeszközeinek kalibrálására és a valódiság meghatározására szolgáló programot úgy kell megtervezni, hogy a mérések SI-rendszerre való visszavezethetősége biztosítható legyen NAR-20-IX D.2. D.2.1.3. A laboratórium a kalibráló anyagokat, kalibrálási értékeket és azok mérési bizonytalanságát, továbbá mindezek eredetét és visszavezethetőségét dokumentálja.
Szabványok ISO 17511:2003 In vitro diagnostic medical devices. Measurement of quantities in samples of biological origin. Metrological traceability of values assigned to calibrators and control materials. ISO 18153:2003 Metrological traceability of values for catalytic concentration of enzymes assigned to calibrators and control materials. ISO 15194:2002 In vitro diagnostic medical devices - Measurement of quantities in sample of biological origin -Description of reference materials (). ISO 15195:2003 Laboratory medicine - Requirements for reference measurement laboratories. ISO 15197: 2003 Requirements for in vitro blood glucose monitoring systems for self-testing in managing diabetes mellitus. ISO 15198 Clinical laboratory medicine-in vitro diagnostic medical devices - Validation of manufacturer s recommendations for user quality control.
Szabványok ISO/CD 17593 Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems - Requirements for in vitro monitoring systems for self-testing of oral anticoagulant therapy ISO 19001:2002 In vitro diagnostic medical devices-information supplied by the manufacturer with in vitro diagnostic reagents for staining in biology
IVD direktíva, irányelvek EU Directive 98/79/EC on IVD MDs, Annex I, Essential requirements A3. 2. The traceability of values assigned to calibrators and/or control materials must be assured through available reference measurement procedures and/or available reference materials of a higher order. EAL-G12 Mérő és vizsgáló eszközök visszavezethetősége nemzeti (országos) vagy nemzetközi etalonokra. NAR EAL-G12 (MAB-23) 1. kiadás, 1998. június Az EAL-G12 fordítása a nemzeti alkalmazásra vonatkozó bevezetéssel.
Alapelvek 1 A mérő- és vizsgáló eszközök kalibrálással történő visszavezethetőségét nemzetközi vagy nemzeti etalonokra a gyártmányok csereszabatossága iránti nemzeti és nemzetközi igény teszi szükségessé. A mérések valódisága a legmagasabb rangú etalonokra való visszavezethetőség révén biztosított.
Alapelvek 2 A visszavezethetőség egy mérési eredménynek vagy etalon értékének az a tulajdonsága, hogy meghatározott referencia, általában országos vagy nemzetközi, etalonokhoz, ismert bizonytalanságú összehasonlítások megszakítatlan láncolatán keresztül kapcsolódik (ld. kalibrációs hierarchia). VIM 1993, 6.10.
meghatározott referencia, általában országos vagy nemzetközi, etalonokhoz Mi minősül referenciának? Primer referencia módszerrel meghatározott primer kalibrátor, mely visszavezethető az SI mértékegységre: pl. SRM911b NIST cholesterol primer kalibrátor. Nemzetközi konvencionális (nem primer!) referencia módszerrel meghatározott nemzetközi konvencionális kalibrátor, mely nem vezethető vissza az SI mértékegységre: pl. HbA1c meghatározás HPLC- MS módszerrel Nemzetközi konvencionális (nem primer!) referencia módszerrel meghatározott nem nemzetközi konvencionális kalibrátor, mely nem vezethető vissza az SI mértékegységre: pl. HDL-C, hematológiai (vvt és fvs szám), alvadási faktor kalibrátorok Nemzetközi konvencionális (nem primer!) kalibrátor, mely nem nemzetközi konvencionális referencia módszerrel meghatározott és nem vezethető vissza az SI mértékegységre: pl. WHO standardok A gyártó által megválasztott, de nem nemzetközi referencia módszerrel meghatározott, nem nemzetközi konvencionális kalibrátor: pl. CA-125, D-dimer, Chlamydia-, és HIV-ellenes antitest. Konszenzus értékkel rendelkező kalibrátor
Referencia mérőrendszerek Analit pontos definiálása humán mintában Referencia módszer, amely az analitot specifikusan méri Primer vagy szekunder matrix alapú anyagminta (RM) Referencia laboratóriumok hálózata
Analit pontos definíciója Az analit definíciója feleljen meg a használati célnak. Két típusú analitot különböztetünk meg: A típus: jól meghatározott kémiai entitás, amely visszavezethető az SI mértékegységre analit (mmol/l) pl. koleszterin, urea, elektrolitok. B típus: nem kellőképpen meghatározható, általában heterogén összetételű mérendő anyag, amely nem vezethető vissza az SI mértékegységre szubsztancia (IU/mL) pl. CEA, PSA, alvadási faktorok B típusú mennyiségek esetén különösen fontos az analit pontos definiálása.
Referencia módszer és anyagminta Az A típusú analitok mérésére referencia mérőrendszerek rendelkezésre állnak. A B típusú szubsztanciák rendkívüli heterogenitása miatt azok meghatározására független nemzeti vagy helyi mérőmódszerek nem, csak nemzetközi konvencionális referencia módszerek használhatók (pl. enzimek, 37C, IFCC módszer) A B típusú szubsztanciák esetében a referencia anyagminták csak fenntartásokkal alkalmazhatók humán mintákban. A B típusú szubsztanciák mennyiségének meghatározására csak nemzetközi konvencionális etalonok használata elfogadott.
JCTLM: www.bipm.org
JCTLM Missziós Nyilatkozat azonosítja és fontossági sorrendbe állítja azon mérendő anyagokat (referens anyagok), melyekre szükséges a nemzetközi visszavezethetőség és összehasonlíthatóság bátorítja a megfelelő szervezeteket, hogy vállaljanak felelősségét a referencia módszerek és mérési eljárások és referencia anyagok kifejlesztésében bátorítja az IVD ipart, hogy alkalmazza a referencia mérési rendszereket bátorítja az EQA szervezőket, hogy az elfogadott referencia mérési rendszereket alkalmazzák támogatja az akkreditációra készülő laboratóriumokat széleskörű idevágó információt ad az érdeklődőknek tudományos és szervezési segítséget, tanácsokat ad a résztvevő feleknek
JCTLM adatbázis
JCTLM I. lista - CRM Certified reference materials and reference measurement procedures for well-defined chemical entities with determined values traceable to SI units, and internationally recognized reference procedure-defined measurands; e.g. Electrolytes, Enzymes, Drugs, Metabolites and Substrates, Non- Peptide Hormones, some Proteins www.bipm.org/en/committees/jc/jctlm/jctlm-db/
JCTLM II. lista - RM Reference Materials that are value-assigned using an internationally agreed upon protocol; e.g., WHO reference materials for Blood Typing, Coagulation Factors, Microbial Serology, Nucleic Acids, and some Proteins. The values of the measurands in the reference materials on this List are not SI-traceable and/or no internationally recognized reference measurement procedures exist that are applicable to patient samples. www.bipm.org/en/committees/jc/jctlm/jctlm-db/
Referencia anyagok
Referencia módszerek
Laboratóriumok hierarchiája Nemzeti Metrológiai Intézet Akkreditált Referencia Laboratóriumok (kalibráló laboratóriumok: ISO 17025, ISO 15195) Gyártó Standardizációs Laboratóriumai Rutin Laboratóriumok
Referencia laboratóriumok
Kalibrációs hierarchia A mérés SI mértékegységének meghatározása Primer kalibrátor Primer referencia módszer Szekunder referencia módszer Szekunder kalibrátor Gyártó munka-kalibrátor Gyártó termék-kalibrátor Rutin minta Gyártó primer vagy szekunder kalibrátorral kalibrált mérőmódszere Gyártó munka-kalibrátorral kalibrált mérőmódszere Felhasználó gyári termékkalibrátorral kalibrált rutin mérőmódszere Rutin mérés eredménye
Példa visszavezethető kalibrátorra
Példa visszavezethető kalibrátorra
Alapelvek 3 Minden etalon kalibrálásának van mérési bizonytalansága. A kalibrálási hierarchiában a magasabban elhelyezkedő etalonnak kisebb a bizonytalansága.
Közlik a gyártók a kalibrátor értékének meghatározási módszerét és a mért értékhez tartozó mérési bizonytalanságot?
Mit kell tudni a kalibrátorokról és kontrollokról? Származás, típus (nemzetközi, nemzeti, stb.) Ki adta ki? (WHO, BCR, NIST, IFCC, stb.) Kalibrálási bizonyítvány (tanúsított vagy nem?) Eredet (humán, állati, mikrobiális, arteficiális, stb.) Gyártási eljárás (szintetikus, rekombináns, neutrális) Molekuláris forma (isomer, glycerol vagy glycerol észter, stb.) Halmazállapot, fázis (vizes oldat, szuszpenzió, liofilizált) Kezelési körülmények, tárolási feltételek, stabilitás Az analit értéke, egysége + mérési bizonytalanság Az érték visszavezethetősége Mátrix (pl. pufferelt BSA oldat) Felhasználási cél
Közlik a gyártók ezeket az adatokat?
ISO 17511 Information on metrological traceability to be given in the instructions for use of an in vitro diagnostic medical device EN 375:2001 (especially see 5.16) applies. The uncertainty of the assigned values of calibrators and trueness control materials shall be provided on request to the professional end-user when available. Information shall also be given on the commutability of the product calibrator as regards the measurement procedure which assigned the value to the material and the end-users' routine measurement procedure for which the material is intended.
Átvihetőség - mátrix hatás
Átvihetőség - mátrix hatás
Testoterone traceability chain Material Calibration Procedure Value assignment SI: nmol/l Gravimetry Pure Testosterone Working calibrator Human sera Product calibrators [& pooled sera] ID-GC/MS Immunoassay XYZ, master procedure Immunoassay XYZ, end user s procedure Routine sample nmol/l D. Stöckl engedélyével
SteroStar Testosterone Stero St a r y = 0,985x + 0,62 r = 0,995 D. Stöckl engedélyével
HbA1c standardizáció DCTT standard: cél harmonizáció IFCC standard metrológiai visszavezethetőség Klinikai hasznosíthatóság???
Minőség és mennyiség viszonya Laboratóriumi vizsgálatok száma (x1000) és a mért értékek eltérésének össszefüggése 40 30 eltérés % (0 = célérték) 20 10 0-10 -20-30 -40 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 NACB 2002: Inter-lab CV <5% Intra-lab CV <3% 2003. évi hazai HbA1c QualiCont adatok alapján készítette Prof. Endrőczi Elemér
Hogy mondjam el neked...?
Gyártók teendői A laboratóriumban használt kalibrátorok és a valódiság meghatározására szolgáló kontrollok eredete ismert. A kalibrátorok SI-rendszerre való visszavezethetősége és a társuló mérési bizonytalanság dokumentált kalibrálási bizonyítvány. A kontrollok visszavezethetősége és a társuló mérési bizonytalanság dokumentált. Jobb, visszavezethető és kommutábilis kalibrátorok előállítása.
Laboratóriumok teendői A laboratóriumban használt kalibrátorok, kalibrálási eredmények és a kapcsolódó mérési bizonytalanságok ellenőrzöttek és dokumentáltak. A kalibrátorok visszavezethetősége dokumentált (ahol a gyártó megadja). A laboratórium eljárásokkal rendelkezik a kalibrátorok kezelésére, tárolására és használatára vonatkozóan. A A laboratórium rendszeresen ellenőrzi kalibrálásainak helyességét, és meghatározza az újrakalibrálások rendjét. Igazolt tanúsított anyagminta használata (pl. CRM) Elfogadott konszenzus standard vagy konszenzus módszerrel meghatározott referencia anyag használata Referencia és rutin módszerrel nyert kalibrálások és mérések összehasonlítása (ún. módszer korreláció) A termék-kalibrátor valódiságának (ún. gyári érték ) ellenőrzése pl. torzítás vizsgálattal Külső minőségellenőrzési/jártassági programokban való részvétel