Citológiai vizsgálatok a kisállatpraxisban Vajdovich Péter A citológiai vizsgálatok célja a tapasztalt elváltozások minőségénekmegítélése: normális, hiperplasztikus (reaktív), diszplasztikus, neoplasztikus a daganatos folyamatok hisztogenezisének megítélése: szöveti eredet, malignitás foka a daganatos folyamatok lefolyásának, szervi, szervrendszeri szétterjedésének vizsgálata (generalizáció) a daganatos folyamatok prognózisának megítélése a terápia hatásának (eredményeinek, következményeinek) vizsgálata A citológiai vizsgálatok előnyei gyors, kis anyag- és műszerigény sebészeti beavatkozás többnyire nem szükséges főképp, de nem csak élő állatok szöveteinek vizsgálatára alkalmas egyes szövetek vizsgálatára (pl. csontvelő, folyadékgyülemek, synovia, liquor, vizelet) alkalmasabb, mint a szövettani vizsgálat A citológiai vizsgálatok hátrányai a mintavétel gyakran nem reprezentáns gyakori a hemodilúció a szöveti szerkezetről nem ad felvilágosítást a sejtek gyakran károsodnak az előkészítés során Főbb mintavételi lehetőségek vékonytű-aspiráció (20, 22 gauge-os tűvel, 5ml-es fecskendővel, 3-5 ml-es vákum alatt az elváltozásba szúrunk, fűrészelő mozdulatokkal, több irányból szúrunk a tű kihúzása nélkül, majd a vákumot visszaengedve a tűt kihúzzuk, a fecskendőről leválasztva, majd ismét
visszahelyezve tárgylemezre fújjuk a tartalmat, a tárgylemezre egy másik, használatlan lemezt fektetve kenetet készítünk, levegőn szárítjuk) vékony tűvel történő testüregi punkció (a mintát steril EDTA-s csőbe tesszük, majd azt 2000/perc fordulatszámon 5 percig centrifugáljuk, a felülúszót elkülönítjük az üledéktől, abból biokémiai vizsgálatokat végzünk, az üledék buffy coat - magvas sejt - rétegéből veszünk mintát a tárgylemezre, majd azt az előbb említett módszerrel kenjük ki) hüvelytampon (steril vattatamponnal a hüvely előzetes tisztítása és tágítása után mintát veszünk, majd a tampont steril tárgylemezre hengergetve készítünk lenyomati készítményt, a maradék tamponmintát mikrobiológiai vizsgálatra küldhetjük) fültampon (az előzőhöz hasonló módon késztjük elő a mintánkat) prosztata váladék (húgycsőkatéterrel rektális prosztatamasszázs mellett a katéterhez fecskendőt illesztve aspirálva, vagy vékonytűvel oldalról, vagy a gáttájék szúrásával nyerünk mintát) orrüreg tampon vagy lavage (az orrüregbe steril fiz. NaCl-oldatot fújunk, majd a visszaömlő tartalmat felfogjuk és lecentrifufáljuk, az üledékből készítünk kenetet) hörgő-, légcsőváladék vagy lavage (az előzőhöz hasonló módszert alkalmazhatjuk, itt azonban a légcsőbe steril katétert kell vezetnünk a gégetájék szúrásával, vagy endoszkópos vizsgálat során) bőr-, nyálkahártya kaparék (a bőrkaparék mintavételi módszerével veszünk mintát, amit tárgylemezre kikenünk) izületi váladék (izületi punkcióval veszünk mintát steril EDTA-s és heparinos, valamint alavadásgátlót nem tartalmazó csőbe, a mintavétel után az izületi nedv egy cseppjét azonnal 2
tárgylemezre kenjük, a heparinos minta a mucinalvadási teszt végzésére alkalmas, az EDTA-s csőben lévő mintát a testűri folyadékgyülemhez hasonló módon készítjük elő) lenyomati készítmény (kimetszett szervre, szövetre friss metszést ejtünk, majd a felületre erős nyomással tárgylemezt érintünk) A szövetek citológiai vizsgálatának főbb szempontjai megállapítjuk a sejtpopuláció nagyságát (pl.: össz-, magvas-, vörösvérsejt szám) megfigyeljük a kenet sejtdússágát (kenetszélek!) megkeressük az adott szövetre jellemző sejteket (reprezentatív -e a minta?) megállapítjuk a szöveti sejtek elváltozásait megkeressük az adott szövetre nem jellemző sejteket meghatározzuk a domináló sejttípust megállapítjuk, hogy a szöveti folyamatok jellegét A szöveti folyamat jellege szerint lehet: gyulladásos (neutrofilia, monocytosis stb.), nem gyulladásos ha gyulladásos: szeptikus, nem szeptikus szeptikus folyamatra utaló jelek: baktériumok láthatók sejten belül és kívül, ill. magdegeneráció a gyulladásos sejtekben - baktériumtenyésztést és rezisztencia-vizsgálat végzése javasolt nem szeptikus folyamatok esetén keresük az egyéb okokat daganat, nekrózis, immunfolyamat, 3
epehólyagruptura, húgyhólyagruptura bélperforáció (ez gyakran szeptikus) ha nem gyulladásos: reaktív (pl.: mesothelsejt, fibroblast, vagy macrophagsejt proliferáció), neoplasztikus ha reaktív a folyamat, akkor keressük a szöveti irritáció okait (véres jellegű folyadékgyülem és liquor esetén következtethetünk a vérzés idejére) ha neoplasztikus, keressük a daganat szöveti eredetét: epithelialis (szélesebb citoplazmájú, egymással gyakran összetapadt, jól elkülöníthető sejthártyával rendelkező sejtek) mesenchymalis (orsóalakú, szoliter formában megjelenő, gyakran granulált citoplazmájú, nyúlványos, nem jól elkülönülő sejthártyával rendelkező sejtek) egyéb (pl.: kereksejtes daganat) meghatározzuk a daganat tulajdonságát: malignitas fokát, szöveti, szervi terjedésének jellegét másodlagosan kialakuló folymatokat: gyulladás, fibrotikus folymatok stb. A malignitás citológiai kritériumai Sejtszintű kritériumok a kenetek sejtdúsak a sejtek közti kapcsolatok károsodottak (oka a kenetek sejtdússágának) az adott sejtpopuláció rá nem jellemző helyen való megjelenése a sejtek általában polimorfok Citoplazmatikus kritériumok 4
bazofília (a nagyobb RNS-állomány miatt) - gyakori a reaktív folyamatokban is kevésbé kifejezett sejthártya fokozott mertékű vakuolizáció (gyakran a mag mellett), granuláció (aktív mirigysejtekre is jellemzők) Magszintű kritériumok (a sejtszintű és a citoplazmatikus kritériumoknál megbízhatóbbak) a mag és magvacska pleomorfiája (nem fiziológiás alak, nagyság) mag/citoplazma arány növekedés a magok egymáshoz viszonyított alakja, nagysága (és száma) változó a magvacskák alakja, nagysága, száma (egy sejten belül is) változó a magok kromatinállománya szemecskézett vagy, nem fiziológiás elrendeződésű (pl. csomókba rendeződő) magon belül ill. magvacskák körül a magok károsodottak, összenyomottak (nucleolar molding) vagy vakuolizáltak nem fiziológiás magmorfológia pl.: multinukleáris sejtek, mitotikus alakok (a mitotikus alakok reaktív hyperplasiában is megfigyelhető) nem fiziológiás mitotikus folyamatok (pl.: kettőnél több irányba mutató mitózis) 5