07/2012:20910 2.9.10. ETANOLTARTALOM Az itt előírt módszerek etanoltartalmú folyékony gyógyszerkészítmények vizsgálatára vonatkoznak. Valamely folyadék etanoltartalmát a folyadék 100 térfogategységében lévő etanol térfogategységeinek száma jelenti, 20±0,1 C hőmérsékleten mérve. Ennek ismert elnevezése: térfogatszázalékban (%V/V) kifejezett etanoltartalom. Az etanoltartalmat a 100 gramm folyadékra vonatkoztatott, grammokban mért etanol mennyiségével is kifejezhetjük. Ennek elnevezése: tömegszázalékban (%m/m) kifejezett etanoltartalom. "A" MÓDSZER Oldott anyagokat tartalmazó készítmények vizsgálata során az oldott anyagokat el kell távolítani az etanolból, amelyet desztillálással határozunk meg. Ha etanolon és vizen kívül egyéb illékony anyagok is desztillálhatnak, az adott cikkely előírja a megfelelő óvintézkedéseket. Valamely etanol-víz elegy etanoltartalma, 20±0,1 C-on mért sűrűsége és relatív sűrűsége (vákuumra korrigált) közti összefüggés az alkoholtáblázatokban található, melyeket a Nemzetközi Mérésügyi Szervezet (International Organisation for Legal Metrology) a 22. sz. Nemzetközi Ajánlásában tett közzé (1972). Készülék. (2.9.10.-1. ábra). A gömblombikhoz (A) cseppfogóval ellátott desztillációs feltét (B) csatlakozik, mely leszálló hűtőhöz (C) illeszkedik. A hűtő alsó vége hosszú csőben (D) folytatódik, melyen át a desztillátum a felfogóként használt 100 vagy 250 ml-es mérőlombik aljába vezethető. A mérőlombikot desztillálás közben jeges vízzel telt edényben (E) tartjuk. A gömblombik (A) alá 6 cm átmérőjű kerek nyílással ellátott hőelosztó hálót helyezünk, hogy megakadályozzuk az oldott anyagok elszenesedését. Vizsgálat Meghatározás piknométerrel vagy oszcillációs denzitométerrel. A desztilláló készülék lombikjába 25,0 ml 20±0,1 C-os készítményt juttatunk; ezt 100-150 ml R desztillált vízzel hígítjuk, és kevés horzsakövet szórunk bele. A lombikot összeszereljük a feltéttel és a hűtővel, majd desztillálunk. A szedőként használt 100 ml-es mérőlombikban legalább 90 ml desztillátumot fogunk fel. A desztillátum hőmérsékletét 20±0,1 C-ra állítjuk be, és térfogatát 20±0,1 C-os R desztillált vízzel 100,0 ml-re kiegészítjük. A relatív sűrűséget piknométerrel vagy oszcillációs denzitométerrel 20±0,1 C hőmérsékleten határozzuk meg. A 2.9.10.-1. táblázat harmadik oszlopában feltüntetett értékeket néggyel szorozva kapjuk a készítmény térfogatszázalékban (%V/V) kifejezett etanoltartalmát. Az etanoltartalmat a kapott érték kerekítésével, egy tizedes pontossággal adjuk meg. Meghatározás areométerrel. A desztilláló lombikba 50,0 ml 20±0,1 C-os készítményt juttatunk, 200-300 ml R desztillált vizet adunk hozzá, majd az előzőekben leírtak szerint desztillálunk. A desztillálást addig folytatjuk, míg a felfogó edényként alkalmazott mérőlombikban legalább 180 ml desztillátum gyűlik össze. A desztillátum hőmérsékletét 20±0,1 C-ra állítjuk be, és térfogatát 20±0,1 C-os R desztillált vízzel 250,0 ml-re egészítjük ki. Ezután a desztillátumot olyan mérőhengerbe öntjük, melynek átmérője legalább 6 mm-rel nagyobb az areométer gömbjénél. Ha a térfogat nem elegendő, a minta mennyiségét megkétszerezzük, és a desztillátumot R desztillált vízzel 20±0,1 C-on 500,0 ml-re hígítjuk. A kapott értéket - a meghatározás során alkalmazott hígításnak megfelelően - öttel szorozzuk. A 2.9.10.- 1. táblázat alapján kiszámított etanoltartalmat kerekítéssel, egy tizedes pontossággal adjuk meg.
2.9.10.-1. ábra. Készülék az etanoltartalom meghatározásához (méretek milliméterben) 2.9.10.-1. táblázat. A sűrűség, a relatív sűrűség és az etanoltartalom közti összefüggés ρ 20 (kg.m 3 ) 968,0 968,5 969,0 969,5 970,0 970,5 971,0 971,5 972,0 972,5 973,0 973,5 974,0 974,5 975,0 975,5 976,0 A desztillátum levegőn mért relatív sűrűsége 20 d 20 0,9697 0,9702 0,9707 0,9712 0,9717 0,9722 0,9727 0,9733 0,9738 0,9743 0,9748 0,9753 0,9758 0,9763 0,9768 0,9773 0,9778 Etanoltartalom (%V/V, 20 C) 25,09 24,64 24,19 23,74 23,29 22,83 22,37 21,91 21,45 20,98 20,52 20,05 19,59 19,12 18,66 18,19 17,73
ρ 20 (kg. m 3 ) A desztillátum levegőn mért relatív sűrűsége 20 20 d Etanoltartalom %V/V-ban, 20 C-on 976,0 977,0 977,5 978,0 978,5 979,0 979,5 980,0 980,5 981,0 981,5 982,0 982,5 983,0 983,5 984,0 984,5 985,0 985,5 986,0 986,5 987,0 987,5 988,0 988,5 989,0 989,5 990,0 990,5 991,0 991,5 992,0 992,5 993,0 993,5 994,0 994,5 995,0 995,5 996,0 996,5 997,0 997,5 998,0 0,9783 0,9788 0,9793 0,9798 0,9803 0,9808 0,9813 0,9818 0,9823 0,9828 0,9833 0,9838 0,9843 0,9848 0,9853 0,9858 0,9863 0,9868 0,9873 0,9878 0,9883 0,9888 0,9893 0,9898 0,9903 0,9908 0,9913 0,9918 0,9923 0,9928 0,9933 0,9938 0,9943 0,9948 0,9953 0,9958 0,9963 0,9968 0,9973 0,9978 0,9983 0,9988 0,9993 0,9998 17,25 16,80 16,34 15,88 15,43 14,97 14,52 14,07 13,63 13,18 12,74 12,31 11,87 11,44 11,02 10,60 10,18 9,76 9,35 8,94 8,53 8,13 7,73 7,34 6,95 6,56 6,17 5,79 5,42 5,04 4,67 4,30 3,94 3,58 3,22 2,86 2,51 2,16 1,82 1,47 1,13 0,80 0,46 0,13 "B" MÓDSZER Gőztér gázkromatográfia (2.2.28).
Belső standard oldat. 1,0 ml R 1-propanolt R vízzel 100,0 ml-re hígítunk. Az oldat 1,0 ml-ét R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Vizsgálati oldat. A vizsgálandó készítmény 1 g etanolnak megfelelő térfogatát R vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Az oldat 1,0 ml-ét R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 2,0 ml-éhez 1,0 ml belső standard oldatot elegyítünk, és az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (a). 5,0 ml R1 etanolt R vízzel 100,0 ml-re hígítunk. Az oldat 25,0 ml-ét R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-ét R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 0,5 ml a) összehasonlító oldatot 1,0 ml belső standard oldattal elegyítünk, és az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). 1,0 ml a) összehasonlító oldatot 1,0 ml belső standard oldattal elegyítünk, és az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (d). 1,5 ml a) összehasonlító oldatot 1,0 ml belső standard oldattal elegyítünk, és az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (e). 1,0 ml R vízmentes metanolt R vízzel 100,0 ml-re hígítunk, és az oldat 1,0 ml-ét R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (f). 1,0 ml belső standard oldatot 2,0 ml a) összehasonlító oldattal és 2,0 ml e) összehasonlító oldattal elegyítünk, és az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: anyaga: kvarcüveg; méretei: l = 30 m, Ø = 0,53 mm; állófázis: R poli[(cianopropil)(fenil)][dimetil]sziloxán (filmvastagság 3 μm); Vivőgáz: R gázkromatográfiás célra szánt hélium. Áramlási sebesség: 1 ml/perc. Mintaáram-elosztási arány: 1:50. A statikus gőztér-gázkromatográfia javasolt körülményei: egyensúlyi hőmérséklet: 85 C; egyensúly beállítás ideje: 20 perc. Hőmérséklet: Idő (perc) Hőmérséklet ( C) Oszlop 0-1,6 1,6-9,9 9,9-13,6 13,6-20 40 40 65 65 175 175 Injektor 200 Detektor 200 Detektálás: lángionizációval. Injektálás: legalább háromszor 1,0-1,0 ml; a vizsgálati oldat, valamint a b), a c), a d) és az f) összehasonlító oldat gőzfázisa. Elúciós sorrend: metanol, etanol, 1-propanol. Relatív retenciók etanolra (retenciós ideje kb. 5,3 perc) vonatkoztatva: metanol kb. 0,8; 1-propanol kb. 1,6. Rendszeralkalmasság: f) összehasonlító oldat:
csúcsfelbontás: legalább 5, a metanol és az etanol között. Kalibrációs görbét szerkesztünk: az abszcisszán a b), a c), a d) és az f) összehasonlító oldat etanolkoncentrációját vesszük fel, az ordinátán pedig az etanol csúcsterülete és a belső standard csúcsterülete közti arány átlagértékét, a megfelelő kromatogramokra vonatkozóan. Kiszámítjuk a vizsgálandó készítmény százalékos etanoltartalmát. "C" MÓDSZER Gázkromatográfia (2.2.28). Belső standard oldat. 1,0 ml R 1-propanolt R vízzel 100,0 ml-re hígítunk. Vizsgálati oldat. A vizsgálandó készítmény 1 g etanolnak megfelelő térfogatát R vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-éhez 1,0 ml belső standard oldatot elegyítünk, és az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (a). 1,0 ml R1 etanolt R vízzel 50,0 ml-re hígítunk. Összehasonlító oldat (b). 1,0 ml R vízmentes metanolt R vízzel 100,0 ml-re hígítunk, és az oldat 1,0 ml-ét R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). 1,0 ml belső standard oldatot 1,0 ml a) összehasonlító oldattal és 2,0 ml b) összehasonlító oldattal elegyítünk; az elegyet R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: anyaga: kvarcüveg; méretei: l = 30 m, Ø = 0,53 mm; állófázis: R poli[(cianopropil)(fenil)][dimetil]sziloxán (filmvastagság 3 μm); Vivőgáz: R gázkromatográfiás célra szánt hélium. Áramlási sebesség: 1 ml/perc. Mintaáram-elosztási arány: 1:50. Hőmérséklet: Idő (perc) Hőmérséklet ( C) Oszlop 0-1,6 1,6-9,9 9,9-13,6 13,6-20 40 40 65 65 175 175 Injektor 200 Detektor 200 Detektálás: lángionizációval. Injektálás: legalább háromszor 1,0-1,0 μl; vizsgálati oldat, valamint c) összehasonlító oldat. Elúciós sorrend: metanol, etanol, 1-propanol. Relatív retenció etanolra (retenciós ideje kb. 5,3 perc) vonatkoztatva: metanol kb. 0,8, 1-propanol kb. 1,6. Rendszeralkalmasság: c) összehasonlító oldat: csúcsfelbontás: legalább 5, a metanol és az etanol között. A százalékos etanoltartalmat (%V/V) a következő összefüggés alapján számoljuk ki:
A1 I A I 2 2 1 p, V ahol A 1 = az etanolnak megfelelő csúcsterület a vizsgálati oldat kromatogramján; A 2 = az etanolnak megfelelő csúcsterület a c) összehasonlító oldat kromatogramján; I 1 = a belső standardnak megfelelő csúcsterület a vizsgálati oldat kromatogramján; I 2 = a belső standardnak megfelelő csúcsterület a c) összehasonlító oldat kromatogramján; V 1 = a vizsgálandó készítmény térfogata a vizsgálati oldatban, milliliterben; P = az R1 etanol százalékos etanoltartalma. 1