Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-1 AQUA PURIFICATA Tisztított víz 01/2009:0008 H 2 O M r 18,02 DEFINÍCIÓ A tisztított víz indokolt és engedélyezett esetek kivételével azon gyógyszerek előállítására szánt víz, amelyekkel szemben nem követeljük meg, hogy sterilek és pirogénmentesek legyenek. Letöltetlen, tisztított víz ELŐÁLLÍTÁS A letöltetlen, tisztított víz desztillálással, ioncserélő eljárással, fordított ozmózissal, vagy egyéb alkalmas módszerrel, az illetékes hatóság által meghatározott előírásoknak megfelelő, emberi fogyasztásra szánt vízből állítható elő. A tisztított víz tárolási és széttöltési körülményeit úgy kell kialakítani, hogy a mikroorganizmusok szaporodása, és az anyag minden egyéb szennyeződése kizárt legyen. Mikrobiológiai monitorozás. Az előállítás és az azt követő tárolás során megfelelő intézkedésekkel biztosítani kell a mikroorganizmus-szám kielégítő ellenőrzését és monitorozását. A nemkívánatos folyamatok észlelése érdekében megfelelő figyelmeztető és beavatkozási határértékeket kell megállapítani. Szokásos körülmények között megfelelőnek tekinthető az összes életképes mikroorganizmus-számra (2.6.12) vonatkozó, 100 CFU/ml-es beavatkozási határérték; ezt R2A agar táptalaj felhasználásával, legalább 5 napon át 30 35 C-on történő inkubálással, membránszűréses eljárással (legfeljebb 0,45 μm névleges pórusméretű membránt alkalmazva) kell meghatározni. A minta mennyiségét a várható eredménnyel összhangban kell megválasztani. R2A agar
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-2 élesztő-kivonat proteózpepton kazein-hidrolizátum kazein-hidrolizátum glükóz keményítő dikálium-hidrogén-foszfát 0,3 g vízmentes magnézium-szulfát 0,024 g nátrium-piruvát 0,3 g agar 15,0 g tisztított víz ad 1000 ml A táptalaj ph-ja sterilezés után 7,2 ± 0,2 legyen. A sterilezést autoklávban, 15 percen át 121 C-on végezzük. Az R2A agar mikroorganizmusok növekedését elősegítő hatása Teszt-törzsek készítése. Vagy standardizált, stabil teszt-törzs szuszpenziókat használunk, vagy saját magunk készítünk ilyeneket az 0008-1. táblázatban leírtak szerint. A törzsfenntartás technikáit (seed-lot system) alkalmazzuk, úgy, hogy az eredeti törzstenyészetnek legfeljebb az első öt átoltásából veszünk ki beoltásra szánt, életképes mikroorganizmusokat. Az egyes baktériumtörzseket a 0008-1. táblázatban leírtak szerint külön-külön tenyésztjük. A tesztszuszpenziókat nátrium-klorid pepton tompítóoldattal (ph 7,0) vagy foszfát tompítóoldattal (ph 7,2) készítjük. A szuszpenziókat 2 órán belül, vagy ha 2 8 C-on tároljuk 24 órán belül fel kell használni. Azonkívül, hogy a Bacillus subtilis vegetatív sejtjeiből készített, majd hígított, friss szuszpenziót nyerünk, úgy is eljárhatunk, hogy stabil spóraszuszpenziót készítünk, és a beoltást a spóraszuszpenzió megfelelő térfogatával végezzük. A stabil spóraszuszpenzió 2 8 C-on validált ideig eltartható. A növekedés elősegítése. A felhasználásra kész táptalajok és egyéb akár dehidratált táptalajból, akár az előírt összetevőkből készült táptalajok minden egyes gyártási tételét meg kell vizsgálni. A 0008-1. táblázatban feltüntetett mikroorganizmusok kis mennyiségeivel (legfeljebb 100 CFU) külön-külön
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-3 beoltunk R2A agar lemezeket, amelyeket ezután a táblázatban megadott körülmények között inkubálunk. Standardizált inokulum esetén az észlelt növekedés nem térhet el 2-nél nagyobb faktorral a számított értéktől. Ha az inokulum frissen készült, a mikroorganizmus növekedésének összemérhetőnek kell lennie egy korábban vizsgált és megfelelőnek bizonyult gyártási tételnél észlelt mikroorganizmus-növekedéssel. 0008-1. Táblázat. Az R2A agar mikroorganizmusok növekedését elősegítő hatása Mikroorganizmusok A teszt-törzsek előkészítése A növekedés elősegítése Pseudomonas aeruginosa pl.: ATCC 9027 NCIMB 8626 CIP 82.118 NBRC 13275 Szója-kazein-agar, vagy szójakazein folyékony táptalaj 30-35 C 18-24 h R2A agar 100 CFU 30-35 C 3 nap Bacillus subtilis pl.: ATCC 6633 NCIMB 8054 CIP 52.62 NBRC 3134 Szója-kazein-agar, vagy szójakazein folyékony táptalaj 30-35 C 18-24 h R2A agar 100 CFU 30-35 C 3 nap
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-4 Összes szerves szén, illetve oxidálható anyagok. 0,5 mg/l határérték figyelembevételével elvégezzük az összes szerves szén meghatározását (2.2.44), vagy e helyett az oxidálható anyagokra vonatkozó következő vizsgálatot: 100 ml anyaghoz 10 ml R hígított kénsavat és 0,1 ml 0,02 M kálium-permanganát mérőoldatot elegyítünk. Az oldatnak 5 percig tartó forralás után is halvány rózsaszínűnek kell maradnia. Elektromos vezetés. Az elektromos vezetést off-line vagy in-line módon a következő körülmények között határozzuk meg. KÉSZÜLÉK Konduktometriás cella: alkalmas anyagból, pl. rozsdamentes acélból készült elektródok; cellaállandó: értékét általában a gyártó bizonylattal adja meg, és ezt az értéket bizonylattal ellátott, 1500 μs cm -1 -nél kisebb elektromos vezetésű, referenciaoldattal, vagy bizonylatolt cellaállandójú mérőcellához viszonyítva, megfelelő időközönként ellenőrizni kell. A cellaállandó változatlannak tekinthető, ha a mért érték legfeljebb 2%-kal tér el a bizonylatolt értéktől; ellenkező esetben ismételt kalibrálás szükséges. Konduktométer: pontossága a legalsó tartományban 0,1 μs cm -1 vagy ennél jobb. A rendszer (konduktometriás mérőcella és konduktométer) kalibrálása: egy vagy több, alkalmas, bizonylattal ellátott referenciaoldattal szemben; torzítás: legfeljebb a mért elektromos vezetés 3%-a, plusz 0,1 μs cm -1. A konduktométer kalibrálása: a kalibrálást a konduktometriás mérőcella kikapcsolása után bizonylatolt preciziós ellenállások vagy ezzel egyenértékű eszközök segítségével az összes használatos mérési tartományban elvégezzük. A torzítás legfeljebb a bizonylatolt érték 0,1%-a lehet. Amennyiben olyan in-line konduktometriás cellákkal dolgozunk, amelyeket nem szétszerelni, a rendszert közvetlenül a kalibrálandó cella mellé, a vízáramba helyezett konduktometriás cellával ellátott kalibrált konduktométerrel szemben is kalibrálhatjuk. Hőmérsékletmérés: tűréshatár ±2 C.
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-5 VIZSGÁLAT Az elektromos vezetést hőmérséklet-kompenzálás nélkül, egyidejű hőmérsékletregisztrálással végezzük. Megfelelő validálás után hőmérséklet-kompenzálással is végezhetünk méréseket. A vizsgálandó víz abban az esetben felel meg a követelményeknek, ha a regisztrált hőmérsékleten mért elektromos vezetés nem haladja meg a 0008.-2. táblázatban feltüntetett értéket. 0008.-2. Táblázat. Hőmérséklet és elektromos vezetés Hőmérséklet ( C) 0 10 20 25 30 40 50 60 70 75 80 90 100 Elektromos vezetés μs cm-1 2,4 3,6 4,3 5,1 5,4 6,5 7,1 8,1 9,1 9,7 9,7 9,7 10,2 Azon hőmérsékletekre, amelyek a 0008.-2.-táblázatban nincsenek feltüntetve, a táblázat két szomszédos értékéből interpolálással számoljuk ki a megengedett legnagyobb elektromos vezetést. Nehézfémek. Ha a letöltetlen, tisztított víz megfelel a letöltetlen Injekcióhoz való vízre (0169) előírt "Elektromos vezetés" vizsgálat követelményeinek, az alábbiakban előírt "Nehézfémek" vizsgálatot nem kell elvégezni. SAJÁTSÁGOK Küllem: tiszta és színtelen folyadék.
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-6 VIZSGÁLATOK Nitrát: legfeljebb 0,2 ppm. Egy 5 ml anyagot tartalmazó, jeges vízbe merített kémcsőbe R kálium-klorid oldatából (100 g/l) 0,4 ml-t, R difenilamin oldatból 0,1 ml-t, R nitrogénmentes tömény kénsavból pedig cseppenként és rázogatás közben 5 ml-t mérünk. Ezután a kémcsövet 50 C-os vízfürdőbe helyezzük. 15 perc elteltével az oldat kék színe nem lehet erősebb, mint az egyidejűleg és azonos módon készített összehasonlító oldaté. Az összehasonlító oldat készítéséhez 4,5 ml R nitrátmentes víz és 0,5 ml R nitrát mértékoldat (2 ppm NO 3 ) elegyét használjuk. Alumínium (2.4.17): legfeljebb 10 ppb. A dializáló oldatok előállítására szánt anyag feleljen meg e vizsgálat követelményének is. Előírt oldat. A vizsgálandó víz 400 ml-éhez 10 ml R acetát tompítóoldatot (ph 6,0) és 100 ml R desztillált vizet elegyítünk. Összehasonlító oldat. 2 ml R alumínium mértékoldatot (2 ppm Al) 10 ml R acetát tompítóoldattal (ph 6,0) és 98 ml R desztillált vízzel elegyítünk. Üres kísérlet. 10 ml R acetát tompítóoldatot (ph 6,0) 100 ml R desztillált vízzel elegyítünk. Nehézfémek (2.4.8/A): legfeljebb 0,1 ppm. Üveg bepárlócsészébe mért, 200 ml anyagot 0,15 ml 0,1 M salétromsav hozzáadása után vízfürdőn 20 ml-re bepárologtatunk. Az így betöményített oldat 12 ml-ét vizsgáljuk. Az összehasonlító oldatot 10 ml R ólom mértékoldattal (1 ppm Pb) készítjük, 0,075 ml 0,1 M salétromsavat adva hozzá. Az üres oldatot 0,075 ml 0,1 M salétromsav hozzáadásával készítjük. Bakteriális endotoxinok (2.6.14): kevesebb, mint 0,25 NE/ml. A dializáló oldatok előállítására szánt anyag abban az esetben, ha a készítmény előállítása során nem alkalmaznak a bakteriális endotoxinok eltávolítására alkalmas eljárást feleljen meg e vizsgálat követelményének is. FELIRAT A feliraton adott esetben fel kell tüntetni, hogy az anyag felhasználható dializáló oldatok készítéséhez. Letöltött, tisztított víz
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-7 A letöltött, tisztított víz letöltetlen, tisztított vízből készül, olyan körülmények között, amelyek a letöltés és a tárolás során biztosítják az előírt mikrobiológiai minőséget. A letöltött, tisztított víz adalékanyagokat nem tartalmazhat. SAJÁTSÁGOK Küllem: tiszta és színtelen folyadék. VIZSGÁLATOK Az anyag feleljen meg a Letöltetlen, tisztított víz -re előírt követelményeknek, az alábbi kiegészítésekkel: Savasság, lúgosság. A boroszilikát-üveglombikban frissen kiforralt, majd lehűtött anyag 10 ml-e 0,05 ml R metilvörös oldattal elegyítve, nem színeződhet vörösre. Az anyag 10 ml-e 0,1 ml R1 brómtimolkék oldattal elegyítve, nem színeződhet kékre. Oxidálható anyagok. 100 ml anyaghoz 10 ml R hígított kénsavat és 0,1 ml 0,02 M kálium-permanganát mérőoldatot elegyítünk. Az oldatnak 5 percig tartó forralás után is halvány rózsaszínűnek kell maradnia. Klorid. 10 ml anyaghoz 1 ml R hígított salétromsavat és 0,2 ml R2 ezüst-nitrát oldatot elegyítünk. Az oldat külleme legalább 15 percig nem változhat. Szulfát. 10 ml anyaghoz 0,1 ml R hígított sósavat és 0,1 ml R1 bárium-klorid oldatot elegyítünk. Az oldat külleme legalább 1 órán át nem változhat. Ammónium: legfeljebb 0,2 ppm. 20 ml anyaghoz 1 ml R lúgos kálium-[tetrajodo-merkurát(ii)] oldatot elegyítünk. 5 perc elteltével az oldatot felülnézetben, a kémcső függőleges tengelyének irányában vizsgáljuk. Az oldat színe nem lehet erősebb, mint a következő összehasonlító oldaté, amelyet egyidejűleg készítünk: 4 ml R ammónium mértékoldat (1 ppm NH 4 ) és 16 ml R ammóniamentes víz elegyéhez 1 ml R lúgos kálium-[tetrajodo-merkurát(ii)] oldatot elegyítünk. Kalcium és magnézium. 100 ml anyaghoz 2 ml R ammónium-klorid tompítóoldatot (ph 10,0), 50 mg R eriokrómfekete-t porhígítást és 0,5 ml 0,01 M nátrium-edetát mérőoldatot elegyítünk. Az oldat tiszta kékre színeződjék.
Aqua purificata Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-8 Bepárlási maradék: legfeljebb 0,001%. A vizsgálathoz 100 ml anyagot vízfürdőn szárazra párologtatunk, majd szárítószekrényben, 100 105 C-on szárítunk. A maradék tömege legfeljebb 1 mg lehet. Mikrobiológiai szennyezés. TAMC: összes életképes mikroorganizmus-szám (2.6.12) legfeljebb 10 2 CFU/ml. Szója-kazein-agar táptalajt alkalmazunk. FELIRAT A feliraton adott esetben fel kell tüntetni, hogy az anyag felhasználható dializáló oldatok készítéséhez.