Új metabolik teszt : Architect 25 OH D-Vitamin Balaskó Péter - ABBOTT Laboratories Put science on your side.
Az elıadás a célja...... a D-vitamin mérésével kapcsolatos kihívások megmutatása.... az Abbott Diagnostics Architect 25-OH D-vitamin immunoassay bemutatása. 2
Történeti visszatekintés Az elsı ismeretek a D-vitaminról a 17-dik századra vezethetık vissza. A kémiai faktor, mint egy zsír-oldékony anyag jelentıségét az angolkór esetén, már a 1900-as évek elején gyanították. D-vitamin egy Steroid Pro Hormone. Mégis a vitaminok közé sorolják.. A kémiai struktúráját az 1928-ban Nobel Díjas Professor A. Windaus (Göttingen, Németország) fedezte fel a 30-as években. Adolf Otto Reinhold Windaus 1876-1959 3
Totál D-Vitamin: 25-OH D-Vitamin mérése D 2 -ben dús élelem D 2 D 3 PTH 25-OH Vitamin D Reservoir Calcitriol Bone Mineralization Calcium Absorbtion Calcium/phosphorus +/- 4
D-Vitamin hiány A D-vitamin szintje összefüggésbe hozható: immunrendszer aktivitásával tumor prevencióval, rizikó kezeléssel cardiovascularis betegségek megelızésével izületi gyulladással (Osteoarthritis) magzati fejlıdéssel insulin aktivitással és rezisztenciával pszichiátriai zavarokkal mortalitással 5
D-vitamin elégtelenség Kevés napsugárzás, alacsony UV(pl. sarkvidék) klíma, tél, öltözködési stílus bır szín, beltéri életstílus, napozó krém Érzékelési problémák, depresszió, schizophrenia. Immunrendszer válasza influenza, felsı légúti fertızégek, HIV esetén Metabolikus állapotok, betegségek: elhízás májbetegségek vese elégtelenség Korlátozott vagy elégtelen felszívódás: Crohn betegség, cisztikus fibrózis, cöliákia, májbetegségek stb. esetén anti-retrovírus, glukoszteroid stb. gyógyszeres kezelések esetén Okok D-vitamin hiány Emelkedett rizikó magasvérnyomás, cardiovascularis betegségek, 1-es típusú diabetes, sclerosis multiplex, Crohn betegségre. Befolyásol olyan anyagcsere kondíciókat, mint inzulin rezisztencia, magzati fejlıdés Befolyásolója/okozója az osteoporosis-nak, osteoarthritis-nek, osteomalacia-nak, angolkórnak, izomsorvadásnak. Következmény 6
D-vitamin meghatározás Standardizációs problémák A D-vitamin hiány és toxicitás szintje módszerenként, laboratórumonként és study-nként változik. Nincs elérhetı standardizáció a jelenleg használatos módszerekre. Nem összehasonlítható eredményeket adnak a különbözı módszerek. Egyes assay-k csak D3 vitamint mérnek Laboratóriumok D-vitamin eredmények referencia tartományainak szóródása ARUP: 30-80 ng/ml 1 LabCorp and Esoterix: 32-100 ng/ml 2 Mayo Laboratories: 25-80 ng/ml 3 Quest: 20-100 ng/ml 4 Golden standard HPLC/MS. 1. www.aruplab.com/guides/ug/tests/0080379.j sp 2. www.labcorp.com/pdf/lh3_2006.pdf 3. www.mayomedicallaboratories.com/testcatalog/clinical+and+interpretive/83670 4. www.questdiagnostics.com/hcp/topics/endo/ vitamin_d.html 7
Külsı Quality erdmények: CV Pontosság? Független Quality Scheme DEQAS adatai 2008 áprilisától különbözı 25-OH Vitamin D tesztek esetén 8
Architect 25-OH D-vitamin assay Put science on your side.
ARCHITECT 25-OH Vitamin D Assay Format 1-step delayed competitive immunoassay time to first result 36 min 100 tests/h + + +ASD 25-OH Vitamin D with binding protein in sample + Line Diluent (sample chase) Displacement pretreatment Incubation 7 min free 25-OH Vitamin D Anti-Vitamin D (sheep, polyclonal) coated paramagnetic microparticle. ph 4.95 80 mm EDTA Incubation 18 min + 3x WASH + Pre-Trigger Trigger 430 nm Conjugate complex consisting of Antibiotin-Acridinium (mouse, monoclonal) bound to biotinylated Vitamin D Incubation 4 min Vitamin D complex binds to unoccupied binding sites of Anti- Vitamin D 1 st Wash to remove unbound conjugate Light signal measured by the optics is indirectly related to Vitamin D concentration in the sample. 10
Architect 25-OH D-vitamin All data is preliminary research and characterization performance data for in development assay 11
ARCHITECT 25-OH Vitamin D vs LC-MS/MS* 30 ismert szérum minta (ANSA) öszehasonlító vizsgálata ARCHITECT Pre- V&V lot B(i2000sr) - LC-MS/MS. 80 ARCHITECT 25-OH Vit D Pre-V&V lot B [ng/ml] 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 Identity Passing & Bablok (I) fit (1.76 + 1.01x) n: 29* Intercept: 1.76 Slope: 1.01 Pearson: 0.97 *On sample excluded due to LC-MS/MS value below detection limit of LC-MS/MS (< 6.0 ng/ml) LC-MS/MS [ng/ml] *Abbott Data on File:Reference data for Performance Evaluation only. Performance characteristics not been established. Architect 25-OH Vitamin D is in development. 12
ARCHITECT 25-OH Vitamin D Pontosság a 31. napon* Követelmények: <= 10% CV for Total Assay (tartalmazza a mérési sorzatok szórását, a sorozatok közötti ill. napon belüli szórást) alacsony, közepes és magas kontrolokra ill. alacsony, közepes és magas szérum panelekre. -20 Conjugate Control Low Control Med Control High Level 1 Level 2 Level 3 (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) Mean 20,5 40,5 77,5 25,0 46,0 85,9 SD 0,8 1,1 2,0 1,0 1,3 2,9 ARCHITECT TOTAL CV(%) 4,2% 2,9% 2,7% 4,9% 3,3% 3,9% Repeat. CV(%) 2,9% 2,5% 1,7% 3,1% 1,9% 3,1% n 44 40 44 44 44 44 - Kiválló CV a reagens bontása utáni 31. napon * Experiment 770RoH *Abbott Data on File:Reference data for Performance Evaluation only. Performance characteristics not been established. Architect 25-OH Vitamin D is in development. 13
ARCHITECT 25-OH D-vitamin* D-vitamin assay-k kereszt-reaktivitási adatai.* *Abbott Data on File:Reference data for Performance Evaluation only. Performance characteristics not been established. Architect 25-OH Vitamin D is in development. 14
Köszönöm a figyelmet!